急性白血病患儿脑脊液PCR扩增HCMV－DNA的研究

应用多聚酶链式反应（ＰＣＲ）扩增和洋地黄探针杂交的方法，对５３例急性白血病（ＡＬ）患儿脑脊液（ＣＳＦ）样本进行了检测。经过ＰＣＲ扩增，可见明显的人巨细胞病毒ＤＮＡ（ＨＣＭＶ－ＤＮＡ）４００ｂｐ扩增带；经洋地黄探针特异性杂交鉴定，ＡＬ患儿ＣＳＦ标本ＰＣＲ扩增产物的ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性检出率为８３．０２％。本实验为ＡＬ病人ＣＳＦ的ＨＣＭＶ检测提供了一个简便方法。     

急性白血病患儿脑脊液PCR扩增HCMV—DNA的研究

应用多聚酶链式反应（ＰＣＲ）扩增和洋地黄深针杂交的方法，对５３例急性白血病（ＡＬ）患儿脑脊液（ＣＳＦ）样本进行了检测，经过ＰＣＲ扩增，可见明显的人巨细胞病毒ＤＮＡ（ＨＣＭＶ－ＤＮＡ）４００ｂｐ扩增带，经洋地黄探针特异性杂交鉴定，ＡＬ患儿ＣＳＦ标本ＰＣＲ扩增产生的ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性检出率为８３．０２％。本实验为ＡＬ病人ＣＳＦ的ＨＣＭＶ检测提供了一个简便方法。     

泉州地区肝炎患者TT病毒感染状况调查

ＴＴ病毒(ＴＴＶ)是新近发现的一种被认为可能与肝炎有关的新型病毒。为了解闽南地区ＴＴＶ感染情况,我们采用ＰＣＲ技术对泉州地区43例肝炎患者血清ＴＴＶＤＮＡ进行检测。43例为1998年1～4月住院的肝炎患者,男34例,女9例,年龄22～70岁。临床类型:急性肝炎11例,慢性肝炎21例,重型肝炎4例;肝炎肝硬化5例,洒精性肝炎2例。收集血清标本47份,采用ＥＬＩＳＡ法检测抗ＨＡＶＩｇＭ、ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ、抗ＨＢｃＨＢｃＩｇＭ(以上为上海荣盛公司试剂)、抗ＨＣＶ(华美公司)、ＨＤＡｇ、抗ＨＤＶＩｇＭ(河南瑞安公司)、抗…     

巨细胞病毒在胃部疾病中的检测及意义

经口腔和咽部引起感染有：疱疹病毒、ＥＢ病毒、巨细胞病毒。本文介绍应用ＰＣＲＤＮＡ扩增技术检测１２４例胃部病变组织的单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）、ＥＢ病毒和巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）。其中炎症５６例，本院胃镜室取材，无菌取胃粘膜组织，均浆器均浆后，做ＤＮＡ扩增。癌症６８例，取自本院病理科石蜡包埋标本。取１０μｍ厚的石蜡组织３～５片经常规脱蜡，水化，消化后取上清置－２０℃备用。试剂购自华美生物技术有限公司。美国ＰＥ公司４８０型ＤＮＡ扩增仪按说明书进行操作。　　结果表明：在１２４例胃部病变中ＨＳＶ及ＥＢ病毒均…     

HBV血清免疫学标志和PHSAR与HBV DNA关系的研究

随ＰＣＲ技术的推广应用 ,以ＨＢＶＤＮＡ作为判断ＨＢＶ感染、病毒的复制状态、传染性及监测抗病毒疗效的一个重要标志 ,越来越受到人们的重视。本研究应用ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ ,对 1484例ＨＢＶ感染者的ＨＢＶＤＮＡ和人血清白蛋白受体 (ＰＨＳＡＲ)进行了检测 ,旨在探讨ＨＢＶ血清免疫学标志物 (ＨＢＶ Ｍ )常见模式、ＨＢＶＤＮＡ和ＰＨＳＡＲ三者之间的相互关系及其临床检测的意义。1　材料和方法1.1　材料　ＨＢＶ血清免疫学标志物 (ＨＢＶ Ｍ )阳性血清标本 1484份 ,来自 1996 0 9～ 2 0 0 0 0 7本院门诊和住院乙肝患者 ,其中男性 1…     

应用PCR法检测新生儿肝炎综合征患者HCMV－DNA

应用ＰＣＲ法检测新生儿肝炎综合征患者ＨＣＭＶ－ＤＮＡ长春市儿童医院应用ＰＣＲ检测３０例临床诊断为新生儿肝炎综合征（ＮＨＳ）患者和１４例正常新生儿尿中人巨细胞病毒ＤＮＡ（ＨＣＭＶ－ＤＮＡ）。结果阳性率分别为６６．７％和１４．２９％，两者差异显著。ＨＣＭ...     

PCR法检测EB病毒BNLF1基因

目前已建立分子杂交和ＰＣＲ检测ＥｐｓｔｅｉｎＢａｒｒ病毒（ＥＢＶ）ＤＮＡ的方法。近年来研究发现ＥＢＶ致癌作用与ＬＭＰ１蛋白的表达密切相关〔１〕。为此,我们针对ＥＢＶ表达ＬＭＰ１蛋白的ＢＮＬＦ１基因片段建立ＰＣＲ检测方法。１　材料与方法１１　标准病毒和对照病毒　含有ＥＢＶ的Ｒａｊｉ细胞系和带有ＰＧＥＭＩＢＮＬＦ１的菌种有美国国立卫生研究院（ＮＩＨ）Ｊａｃｋｓｏｎ博士赠送。ＨＣＭＶＡＤ１６９、ＨＳＶⅠ、ＶＺＶ购自于上海第二医科大学。１２　主要试剂与仪器　限制性内切酶ＳｔｙＩ,Ｍａｒｋｅｒ购…     

肝炎患者外周血单个核细胞IL-18 mRNA和蛋白水平与HBV感染的关系

检测了慢性乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞(ＰＢＭＣ )ＩＬ 18基因及蛋白表达水平 ,以探讨ＩＬ 18在乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ )感染中的作用。1　材料与方法1 1　病例　慢性乙型肝炎 30例 ,排除合并感染其他病毒性肝炎 ,近 6月无应用影响免疫功能的药物。所有病例均检测血清ＨＢＶＤＮＡ水平 (斑点杂交法 )。1 2　方法　分别以逆转录 聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ )技术 ,流式细胞术检测ＩＬ 18基因的转录及表达水平。方法见文献[1]。ＰＢＭＣ内ＨＢＶＤＮＡ检测 ,抽提细胞内ＤＮＡ后采用ＰＣＲ法扩增。所得实验结果采用ＳＰＳＳ 8 0软件进…     

PCR技术和血清抗体检测妊娠期巨细胞病毒感染价值的比较

将ＰＣＲ技术检测孕妇血白细胞中ＨＣＭＶ－ＤＮＡ和ＥＬＩＳＡ检测孕妇血清中ＨＣＭＶ特生ＩｇＭ和ＩｇＧ进行对比研究。结果：ＤＮＡＰＣＲ阳性率为４２．００％，与ＩｇＭ阳性率２５．５８％比较，Ｐ〈０．０５，与ＩｇＧ阳性率６２．７９％比较，Ｐ〈０．０１，说明ＤＮＡＰＣＲ较ＩｇＭ检测敏感，但不如ＩｇＧ。结论：ＤＮＡＰＣＲ更适用于论断先天性ＨＣＭＶ感染和一部分检测不出ＩｇＭ的ＣＭＶ复发感染者，对妊娠期ＣＭＶ感染     

丙型肝炎病毒C蛋白片段的表达及免疫反应性

我们用聚合酶链反应技术,将长度为201ｂｐ、402ｂｐ及591ｂｐ的丙型肝炎病毒(ＨＣＶ)核心抗原编码区ｃＤＮＡ片段在ｐＵＣ19ＵＫＨＣＶＣＯＲＥ中扩增,在内套引物两端分别引入ＢａｍＨⅠ和ＥｃｏＲⅠ酶切位点,ＰＣＲ产物经1%琼脂糖凝胶电泳分离后,用ＱＩＡｐｒｅＳｐｉｎ?..     

人巨细胞病毒感染致血小板减少性紫癜病因研究

血小板减少性紫癜 (ＩＴＰ)是临床上常见的一类出血性疾病 ,其中部分患者常发生于病毒感染后。目前发现人类巨细胞病毒 (ＨＣＭＶ)、人细小病毒Ｂ19、风疹病毒等感染后均有可能引起血小板减少。ＨＣＭＶ感染相关性ＩＴＰ的发病机理目前尚未完全定论。我们检测了合并有ＨＣＭＶ感染的ＩＴＰ患者的巨核系祖细胞内的ＨＣＭＶ晚期抗原ｍＲＮＡ ,以探讨ＨＣＭＶ感染相关性ＩＴＰ可能的发病机制。对ＩＴＰ患者抗凝外周血和非抗凝外周血分别进行ＰＣＲ检测ＨＣＭＶ ＤＮＡ和ＥＬＩＳＡ检测ＣＭＶ ＩｇＭ。选择ＨＣＭＶ及ＣＭＶＩｇＭ均阳性的病例共…     

鼻咽癌组织中人疱疹病毒6型感染及其临床意义

目的　探讨人疱疹病毒６ 型（ＨＨＶ６） 与鼻咽癌（ＮＰＣ） 发病的关系。方法　采用聚合酶链反应（ＰＣＲ） 和原位杂交同时检测正常鼻咽组织和ＮＰＣ 癌前鼻咽组织以及ＮＰＣ 组织中ＨＨＶ６ 和ＥＢＶＤＮＡ 的存在情况。采用免疫组化检测３６ 例ＮＰＣ 组织的ＥＢＶＬＭＰ１ 蛋白表达。结果　在４２ 例ＮＰＣ组织、２１ 例鼻咽癌前病变组织中,经ＰＣＲ检出ＨＨＶ６ ＤＮＡ,阳性率分别为３０－９％ （１３ 例） 和４－７ ％（１ 例） 。ＥＢＶＤＮＡ为９５－２％ （４０ 例） 和６６－６ ％ （１４ 例）。２７ 例正常鼻咽组织未检出ＨＨＶ６ ＤＮＡ,ＥＢＶＤＮＡ为２５－９％ （７ 例）。经ＩＳＨ,仅在１３ 例ＰＣＲＨＨＶ６ ＤＮＡ阳性的ＮＰＣ组织中检出１１ 例阳性,３６ 例ＮＰＣ组织、１０ 例鼻咽癌前病变组织ＩＳＨＥＢＶＤＮＡ 阳性。ＮＰＣ组织的ＥＢＶＬＭＰ１ 蛋白阳性率为４７－２ ％（１７３６）。结论　鼻咽癌组织中存在ＨＨＶ６ 感染,提示ＨＨＶ６ 感染与ＮＰＣ有关。ＨＨＶ６ 感染与ＥＢ病毒ＬＭＰ１ 蛋白表达上调呈正相关,提示在ＮＰＣ 的发生中ＨＨＶ６ 可能直接参与和（ 或） 通过上调ＥＢＶＬＭＰ１ 的表达而起一定作用     

HGV RNA逆转录套式聚合酶链反应法的优选实验

1995年 ,美国Ｓｉｍｏｎｓ等和Ｌｉｎｎｅｎ等分别从肝炎患者的血清中克隆出庚型肝炎病毒 (ＧＢＶ Ｃ/ＨＧＶ)的基因组 ,并建立了检测血清ＧＢＶ Ｃ/ＨＧＶＲＮＡ的逆转录套式聚合酶链反应 (ＲＴ ｎＰＣＲ)方法。但是 ,该检测方法的灵敏度存在着较大差异。本实验使用Ａ～Ｅ共 5套ＰＣＲ引物 ,基中Ａ、Ｂ、Ｄ为自行设计的ＨＧＶ 5′端非编码区引物 ,目的产物长度分别为36 8ｂｐ ,15 8ｂｐ及 2 2 0ｂｐ ;Ｃ引物为参照文献设计的核心区引物 ,目的产物为30 2ｂｐ ;Ｅ引物为李倬副研究员设计的ＮＳ3区引物 ,目的产物长度为 5 91ｂｐ。采用改良的…     

套式PCR和原位杂交技术检测肝病患者单个核细胞？…

目的 了解慢性乙型肝炎（中度）和原发性肝癌（ＨＢｓＡｇ阳性）患者ＰＢＭＣ内ＴＴＶ ＤＮＡ存在情况。方法 采用套式ＰＣＲ以及原位杂交技术检测外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）内ＴＴＶ ＤＮＡ。结果 套式ＰＣＲＳＷＩＭ２６例慢性乙型肝炎（中度）患者ＰＢＭＣ内ＴＴＶ ＤＮＡ阳性７例。阳性率２６．９％,非常显著高于健康对照（Ｘ＾１２＝１４．３,Ｐ〈０．００１）;２１例原发性肝癌（ＨＢｓＡｇ阳性）虱ＰＢＭＣ内ＴＴ     

白血病患儿巨细胞病毒感染的PCR与抗原检测方法比较

目的 对不同种类标本应用ＰＣＲ检测巨细胞病毒（ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ,ＣＭＶ）ＤＮＡ,并与外周血白细胞ＣＭＶ抗体检测比较,以了解ＰＣＲ方法在诊断白血病患儿活动性ＣＭＶ感染时的意义。方法 实验组为３１例白血病患儿,对照组为３１例免疫功能正常儿童,两组儿童的年龄、性别无差异。应用ＰＣＲ方法检测血清、尿液和脑脊液ＣＭＶ ＤＮＡ,间接免疫荧光方法检测外周血白细胞ＣＭＶ抗原,ＥＬＩＳＡ方法检测血清抗     

巨细胞病毒宫内感染的诊断及对胎儿的影响

采用地高辛探针斑点杂交技术和聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，对５１例人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）血清学抗体ＩｇＭ阳性孕妇的羊水、脐血和产后两周内的新生儿尿液，进行ＨＣＭＶＤＮＡ检测。同时与酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测脐血、羊水中ＨＣＭＶ－ＩｇＭ的结果相比较。结果，地高辛探针斑点杂交检测ＨＣＭＶ－ＤＮＡ的阳性率分别为：羊水２１．５７％，脐血３３．３３％，新生儿尿液２７．４５％。ＰＣＲ检测ＨＣＭＶ－ＤＮＡ的阳性率分别为：羊水２９．４１％，脐血４３．１４％，新生儿尿液３Ｓ，２９％。羊水ＨＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率为１１．７６％，脐血ＨＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率为２３．５３％。脐血ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性的新生儿平均出生体重明显低于脐血ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阴性的新生儿，而脐血ＨＤＷ－ＤＮＡ阳性的新生儿肝功能异常、血小板减少以及低Ａｐｇａｒ评分的发生率明显高于脐血ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阴性的新生儿。结果表明：采用ＥＲ技术检测羊水、脐血或产后两周内新生儿尿液ＨＣＭＶＤＮＡ有助于ＨＣＭＶ官内感染的早期诊断，便于临床早期干预，ＨＣＭＶ官内感染严重影响胎儿的生长发育，可造成胎儿肝功能异常、血小板减少和新生儿窒息的发生。     

原发性肝癌患者HBV血清学标志与HBV DNA的关系探讨

已有报道 ,乙型肝炎病毒 (ｈｅｐａｔｉｔｉｓＢｖｉｒｕｓ ,ＨＢＶ)与原发性肝癌 (ｐｒｉｍａｒｙｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ ,ＰＨＣ)密切相关 ,但多局限于对ＨＢＶ血清学标志物的单方面研究 ,我们采用ＥＬＩＳＡ和ＰＣＲ法 ,同时对ＨＢＶ标志物和ＨＢＶＤＮＡ进行了检测 ,以探讨二者之间的关系 ,为ＰＨＣ的临床诊断及治疗提供实验依据。1　对象和方法1.1　研究对象　ＰＨＣ患者 6 37例 ,均为本院 1994～ 2 0 0 0年期间的住院患者 ,其中男 5 5 9例 ,女 78例 ,年龄 2 0～ 87岁 ,平均 5 1岁。全部患者均按《中国常见恶…     

石家庄地区新生儿尿巨细胞病毒感染的临床分析

采用聚合的酶链反应（ＰＣＲ）检测１０５例出生后３日内新生儿尿中巨细胞病毒,同时应用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测脐血特异性ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体。结果,新生儿尿液ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性者３３例,阳性率３１．４％,脐血ＩｇＧ抗体阳性率１００％,ＩｇＭ挤体阳性率１．９％。结果表明ＰＣＲ技术检测新生儿尿液ＨＣＭＶ－ＤＮＡ有利于ＨＣＭＶ先天性感染的早期诊断,早预防、早阻断。有利于更好地实行计划生育,有利于优生     

用聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA

我们采用聚合酶链反应(ＰＣＲ)技术检测乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒(ＨＢＶ)ＤＮＡ,并用酶标法检测ＨＢＶＭ,从乙型肝炎临床分型和实验室ＨＢＶＭ分组两个角度时行回顾性比较与分析。1　材料和方法1.1　病例选择　168例乙型肝炎病例均来自嘉兴市第二医院和协作单位住院病人,全部检测过ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢＶＭ,男106例,女62例;年龄4～71岁,平均35.4岁。其中急性乙型肝炎26例,慢性乙型肝炎72例,重型肝炎9例,淤胆型肝炎24例,肝炎后肝硬化37例。诊断标准依据1995年北京第五次全国传染病寄生虫病学术会议修订的病毒性肝炎诊断标准。1.2　试剂和…     

致瘤性人类疱疹病毒(HHV)的研究进展

ＤＮＡ肿瘤病毒疱疹病毒科中包括多种病毒 ,除已知的ＨＳＶ - 1、ＨＳＶ - 2、ＨＣＭＶ、ＶＺＶ、和ＥＢＶ等外 ,近年来还发现和分离了ＨＨＶ - 6、ＨＨＶ - 7和ＨＨＶ - 8等疱疹病毒。研究表明 ,上述病毒中除外ＶＺＶ和ＨＨＶ- 7,均与人类肿瘤发生有病因学联系。Ｓａｌａｈｕｄｄｉｎ等 ( 1 984)从艾滋病合并淋巴细胞增生症患者分离出一种新的病毒 ,称为人类嗜Ｂ淋巴细胞病毒 (ＨＢＬＶ) ,后经研究证明其颗粒大小、基因组结构与疱疹病毒相似 ,但其抗原性与其它疱疹病毒不同 ,而改称为ＨＨＶ - 6型病毒 ,属于β疱疹病毒亚科内 ,为双链ＤＮＡ…