莫诺苷对缺血再灌注大鼠皮层TIMP表达的影响

目的研究莫诺苷对缺血再灌注7 d大鼠皮层中金属基质蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP)表达的影响。方法 25只雄性SD大鼠采用改良Zealonga线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,术后随机分为模型组、莫诺苷小剂量组、中剂量组、大剂量组,每组5只。造模3 h后按30、90、270 mg/kg剂量每天一次灌胃莫诺苷。免疫印迹法(Western Blotting)和免疫荧光染色法(Immunofluorencent staining)分析莫诺苷对脑缺血再灌注7 d大鼠患侧皮层TIMP表达的影响。结果脑缺血再灌注7 d后,与假手术组相比,模型组TIMP蛋白表达显著升高(P0.01);同模型组相比,莫诺苷中剂量组(90 mg/kg)和大剂量组(270 mg/kg)TIMP蛋白表达均明显升高(P0.05;P0.01)。结论莫诺苷可以上调TIMP在大脑皮层内的表达,有助于脑卒中后血脑屏障的保护及修复。     

莫诺苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤神经功能的影响

目的观察中药山茱萸的有效成分莫诺苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经功能的影响。方法Wistar雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、莫诺苷小剂量组(30 mg/kg)、莫诺苷中剂量组(90 mg/kg)、莫诺苷大剂量组(270 mg/kg)、维生素E(VE)(35 mg/kg),采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,缺血30 min后再灌注3 d,应用Zea Longa法、爬网格、平行木、吊绳、Ludmila Belayev 12分评分法,观察莫诺苷对神经功能缺损的改善作用。结果与模型组比较,莫诺苷给药组(小、中、大剂量)Zea Longa法评分均差异极显著(P0.01);与模型组比较,莫诺苷给药组(小、中、大剂量)吊绳法评分均差异极显著(P0.01);Ludmila Belayev 12分评分法评分与模型组比较,莫诺苷大剂量组差异极显著(P0.001),中剂量组差异极显著(P0.01)。结论莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠有改善行为学评分的作用。     

莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠Wnt7a和APC表达的影响

目的观察莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠Wnt7a和APC表达的影响。方法用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO)。将50只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组,模型组,莫诺苷小、中、大剂量组(30 mg/kg、90mg/kg、270 mg/kg)。利用蛋白免疫印迹法检测Wnt7a和APC表达变化。结果造模7 d,模型组大鼠皮层Wnt7a的表达比假手术组显著升高,APC表达显著下降;与模型组相比,莫诺苷大剂量组Wnt7a表达明显升高;莫诺苷小、中、大剂量组APC的表达显著降低。结论莫诺苷可以促进缺血性脑损伤后Wnt7a表达,抑制APC表达,从而激活Wnt信号通路。     

莫诺苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及可能机制

目的 通过观察莫诺苷对大鼠缺血再灌注损伤(MIRI)心肌组织中凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达及心肌梗死面积百分比、心肌组织形态、心肌酶谱的影响,探讨莫诺苷是否可以发挥心肌保护作用并研究可能的相关机制。 方法 健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组、缺血再灌注组、莫诺苷[90 mg/(kg·d)]组。以左冠状动脉前降支穿线结扎法制备SD大鼠心肌缺血模型,30 min后放松结扎线制备再灌注模型。分别测定各组大鼠血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平、左心室心肌梗死面积百分比、制备心肌组织切片及采用PCR技术测定Bcl-2和Bax基因的表达情况。 结果 与假手术组相比,缺血再灌注组和莫诺苷组大鼠血清CK-MB值显著增高(P<0.01)、心肌梗死面积百分比显著增高(P<0.01)、组织结构病理损伤加剧、Bcl-2、Bax表达增强(P<0.01)。与缺血再灌注组相比,莫诺苷组大鼠CK-MB值显著下降(P<0.01),梗死面积百分比显著减小(P<0.05),组织病理损伤减轻及Bax表达降低(P<0.05),Bcl-2表达增高(P<0.01)。 结论 莫诺苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用,其作用机制可能与莫诺苷通过上调缺血再灌注心肌组织中Bcl-2基因、下调Bax基因表达而抑制细胞凋亡有关。      

莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马CyclinD1及Cdk6的影响

目的: 观察莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠细胞周期蛋白的影响。方法: 用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。将15只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组,模型组,莫诺苷低、中、高剂量组(30mg·kg-1、90 mg·kg-1、270 mg·kg-1)。利用免疫组化方法检测大鼠患侧海马CyclinD1、Cdk6表达。结果: 与假手术组相比,模型组CyclinD1及Cdk6表达显著增加;但给予莫诺苷治疗后,与模型组相比,莫诺苷中、高剂量能显著降低大鼠CyclinD1及Cdk6的表达。结论: 莫诺苷能通过降低脑缺血再灌注后CyclinD1及Cdk6的表达而发挥神经保护作用。     

红景天苷对全脑缺血再灌注大鼠皮层nNOS及核酸的影响

【目的】探讨红景天苷(salidroside)对全脑缺血再灌注(cerebral ischemic reperfusion,CIR)大鼠大脑皮层一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)及核酸表达的影响。【方法】用改良的Pulsinelli 4-血管阻断(4-VO)法,复制大鼠急性全脑缺血(30 min)再灌注(60 min)损伤模型。尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶(NADPHd)组化染色法检测神经元型一氧化氮合酶(nNOS),吖啶橙(AO)染色观察DNA、RNA的变化。【结果】CIR模型组大鼠脑内nNOS表达增加,DNA和RNA荧光强度(反映DNA和RNA含量)明显减弱。灌胃给予红景天苷后可抑制CIR大鼠大脑皮层nNOS的表达,DNA和RNA荧光强度增强。【结论】红景天苷可抑制CIR导致的大鼠大脑皮层nNOS的表达,对DNA和RNA有保护作用。     

电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠血清血管性血友病因子的影响

目的:探讨电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠血清血管性血友病因子(vWF)的影响。方法:采用大脑中动脉线栓法制备中脑动脉闭塞(MCAO)缺血再灌注模型,应用免疫浊度法观察脑缺血再灌注不同时相及电针对大鼠血清vWF影响。结果:脑缺血再灌注后,血清vWF随时相增高(模型组与正常组、假手术组比较P<0.01);电针可显著降低血清vWF的表达(电针组与模型组比较P<0.01)。结论:早期针刺治疗可能通过下调血清vWF而对脑缺血再灌注损伤产生保护作用。     

二苯乙烯苷对脑缺血再灌注大鼠神经生长因子表达及神经细胞凋亡的影响

目的探讨二苯乙烯苷 (TSG) 对缺血再灌注大鼠的神经保护作用及分子机制。方法线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,再灌注后 6 h、24 h、48 h、7 d 观察动物神经行为学变化并评分,采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法 (TUNEL) 检测神经细胞凋亡;免疫组化法检测神经生长因子 (NGF) 蛋白表达。结果神经功能评分显示模型组各时间点均有明显的神经功能缺损症状,除 6 h 时间点外,两个剂量 TSG 治疗组其余各时间点神经功能评分明显低于模型组,差异显著 (P＜0.05);与模型组相比,除 7 d 时间点外,两个剂量 TSG 组其余各时间点凋亡细胞数均减少,差异非常显著 (P＜0.01);与模型组相比,两个剂量 TSG 组各时间点 NGF 表达均升高,差异非常显著 (P＜0.01)。结论TSG 能够增加脑缺血再灌注大鼠缺血周边区 NGF 蛋白表达,拮抗神经细胞凋亡,改善神经功能。     

红景天苷对脑缺血再灌注大鼠行为及脑梗塞范围的影响

目的观察红景天苷（Sal）对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响。方法采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,再灌注同时各给药组腹腔注射相应的药物Sal和Nim,对大鼠进行神经功能评分,观察脑梗塞范围并测定脑含水量。结果模型组大鼠脑缺血2h再灌注24h后神经功能评分2．13&#177;0．31,Sal大、中剂量组神经功能评分显著升高（均P〈O．01）。模型组脑梗塞范围达（29．7&#177;6．3）％,脑含水量为（86．55&#177;0．45）％,Sal大、中剂量组脑梗塞范围显著缩小（P〈0．01,P〈0．05）,脑含水量显著减少（P〈0．01,P〈0．05）。结论红景天苷对局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用。     

金丝桃苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的防护作用

目的:探讨金丝桃苷(hyperin,Hyp)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的防护作用。方法:60只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、金丝桃苷高(50mg·kg-1·d-1)、中(25mg·kg-1·d-1)、低(12.5mg·kg-1·d-1)剂量组、银杏叶胶囊对照组。给药组术前连续灌胃5d,于末次给药30min后行手术,采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血模型,缺血2h再灌注24h后进行神经病学评分;氯化三苯四氮唑(triphenyltetrazoliumchloride,TTC)染色检测脑组织梗死面积;干湿法测脑含水量。结果:模型组神经病学评分、脑组织梗死面积、脑含水量与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.01);Hyp高、中剂量组与模型组比较脑梗死范围明显缩小(P<0.05或P<0.01),脑含水量及神经病学评分明显降低(P<0.01或P<0.01)。结论:Hyp能够明显减轻局灶性脑缺血再灌注大鼠的脑水肿程度,减少脑组织的梗死范围。Hyp对脑缺血再灌损伤有显著防护作用。     

雌激素对大鼠心肌缺血再灌注损伤过程中心肌HGF表达的影响

目的 观察17β-雌二醇(E_2)在大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)过程中对肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)mRNA的表达影响并探讨其与细胞凋亡的关系.方法 雄性SD大鼠40只,利用随机数字表将其分为缺血再灌注组(即对照组)、17β-雌二醇作用后的缺血再灌注组(即E_2作用组),每组20只.结扎大鼠冠状动脉左前降支20 min,再灌注30 min,造成心肌缺血再灌注损伤模型,观察17β-雌二醇对心肌HGF表达的影响,同时测定心肌细胞的凋亡.结果 心肌缺血20 min及再灌注30 min时,E_2作用组HGF mRNA表达均较对照组相应时点显著增高(P＜0.05).TUNEL法检测E_2作用组再灌注30 min单位面积内心肌细胞凋亡较对照组明显减低(P＜0.05);同时流式细胞仪检测结果显示,E_2作用组亦显著低于对照组(P＜0.05).对照组再灌注30 min及E_2作用组再灌注30 min的HGF mRNA表达变化与相应时间点的心肌细胞凋亡变化成负相关.结论 17β-雌二醇在大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)过程中可提高HGF的表达,来发挥抗凋亡作用.     

EPO对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑红蛋白表达的影响

目的观察促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑红蛋白(Neuroglobin,Ngb)表达的影响。方法选用60只健康雄性SD大鼠为研究对象,制备缺血再灌注损伤模型。采用随机区组设计将大鼠分为非治疗组(N-T组30只)、EPO治疗组(T组30只)。其中治疗组再按EPO不同剂量分为三个亚组(EPO1组、EPO2组、EPO3组)。EPO治疗组缺血再灌注损伤2h后分别注射EPO1000u/Kg,3000u/Kg以及5000u/Kg,24h后所有受试对象均处死取脑。应用免疫组织化学技术检测脑缺血再灌注后Ngb的表达情况。结果EPO治疗组Ngb表达明显高于非治疗组,差异具有统计学意义(t=112.205,P=0.000);EPO治疗组不同亚组之间随着EPO剂量的增大,Ngb的表达呈递增趋势,三组间两两比较差异均有统计学意义(P0.05),且与EPO治疗剂量呈正相关(rs=0.872,P=0.000)。结论大鼠脑缺血再灌注损伤后采用EPO治疗能促进Ngb的表达。     

依达拉奉对脑缺血再灌注损伤大鼠E、L-选择素表达的影响

目的:探讨依达拉奉对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中E-选择素和L-选择素表达的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组、再灌注组、依达拉奉治疗组,线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型。再灌注后24h断头取脑,免疫组织化学和RT-PCR法观察脑组织E-选择素和L-选择素表达的变化。结果:大鼠脑缺血再灌注损伤后,E-选择素和L-选择素表达明显高于假手术组(P<0.05);与再灌注组相比,依达拉奉治疗组E-选择素和L-选择素表达明显下调(P<0.05)。结论:依达拉奉的脑缺血保护作用可能与抑制E-选择素和L-选择素表达有关。     

雌二醇对大鼠脑缺血/再灌注损伤脑组织BDNF表达的影响

目的:观察雌二醇对大鼠脑缺血 /再灌注损伤脑组织脑源性神经营养因子 (BDNF)表达的影响。方法:64只Wistar大鼠随机分为局灶性脑缺血 2h/再灌注 3h、6h、12h、24h(A组)组及雌二醇治疗(100μg/kg) +脑缺血 2h/再灌注 3h、6h、12h、24h组(B组),每个时点 8只。2组采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血 /再灌注损伤模型。采用免疫组织化学法检测各组脑组织中BDNF蛋白的表达。结果:B组缺血再灌注后 3h、6h、12h、24h大脑皮层及纹状体BDNF阳性神经纤维密度较A组相应时点均明显增加 (P均 <0. 01);B组与A组比较,大脑皮层及纹状体BDNF阳性细胞数在再灌注后 6h开始增加, 12h明显增高 (P均 <0. 01), 24h恢复 (P>0. 05)。结论:雌二醇可以使大鼠脑缺血 /再灌注后脑组织内源性BDNF表达增加,而起到脑保护作用。     

高血糖对大鼠脑缺血再灌注损伤脑梗死体积和ICAM-1表达及白细胞浸润的影响

目的：研究观察高血糖条件下脑缺血再灌注后细胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)表达及白细胞浸润情况，探索高血糖对脑缺血再灌注影响的可能机制。方法：雄性SD大鼠采用缺血前30分钟腹腔注射葡萄糖建立高血糖模型，用Longa——Zea氏线栓法复制脑缺血再灌注模型。采用2％红四氮唑(TTC)染色测量梗死体积；免疫组织化学法和HE染色观察不同再灌注时间点ICAM-1阳性表达及白细胞浸润计数。比较相同再灌注时间点高血糖组和正常血糖组ICAM—1表达和白细胞浸润计数。结果：(1)相同再灌注时间点高血糖组梗死体积明显大于正常血糖组。(2)相同再灌注时间点高血糖组ICAM-1表达及白细胞浸润计数明显高于正常血糖组。(3)高血糖组ICAM-1表达及白细胞浸润计数高峰提前。(4)ICAM-1表达与白细胞浸润呈现明显相关性。结论：ICAM-1介导白细胞和内皮细胞粘附及向脑缺血区浸润过程，ICAM-1表达及白细胞浸润参与了高血糖加重脑缺血再灌注损害过程。     

蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠脑缺血再灌注模型的影响

目的观察蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型的影响。方法将150只健康雄性大鼠随机分为6组,通过线栓法建立大鼠大脑中动脉（MCA）局灶性脑缺血再灌注模型,对照组按成人用量的10倍给药每天一次,动物经给药10次,观察蛭龙活血通瘀胶囊对脑缺血大鼠的行为状态、脑组织形态学和胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）蛋白表达的作用。结果蛭龙活血通瘀胶囊能明显改善大鼠脑缺血后的行为状态,缩小缺血范围,降低缺血程度,使病变的脑组织得到明显地改善,减少缺血区神经元的死亡,有明显的保护作用。     

扶芳藤提取物预防给药对大鼠急性脑缺血再灌注后c-fos表达的影响

目的探讨扶芳藤提取物预防给药对大鼠急性脑缺血再灌注后大脑c-fos表达的影响。方法Longa法制作急性脑缺血再灌注损伤模型,用免疫组化法检测脑组织缺血再灌注2、6、12、24 h的c-fos表达水平。结果扶芳藤提取物能降低再灌注2、6、12、24 h后大鼠脑组织中c-fos的表达(P<0.05)。结论扶芳藤提取物对大鼠急性脑缺血再灌注损伤的保护作用机制可能与下调缺血脑组织中c-fos表达有关。     

白介素10抑制大鼠脑缺血再灌注E、L-选择素表达的研究

目的 探讨白介素10(IL-10)对大鼠脑缺血再灌注后E-选择素及L-选择素表达的抑制作用.方法 72只成年雄性SD大鼠随机均分为假手术组,脑缺st/再灌注组,溶剂对照组和IL-10干预组.IL-10干预组经侧脑室注射IL-10(1μg溶解于5μl 5 mol/L NaP),对照组经侧脑室注射溶剂(5μl 5 mol/L NaP).免疫组织化学法、RT-PCR法和Western印迹法检测E-选择素及L-选择素的表达变化.结果 脑缺血再灌注组E-选择素及L-选择素表达明显高于假手术组(P<0.05).IL-10干预组E-选择素及L-选择素阳性血管(18.8±1.9,15.8±2.4)明显少于溶剂对照组(24.7±2.4,20.9±3.3)(P<0.05).IL-10干预组E-选择素及L-选择素基因表达(0.431±0.029,0.318±0.048)明显低于溶剂对照组(0.497±0.019,0.433±0.087)(P<0.05).IL-10干预组E-选择素及L-选择素蛋白表达(0.349±0.037,0.296±0.035)明显低于溶剂对照组(0.421±0.043,0.348±0.044)(P<0.05).结论 IL-10可抑制大鼠脑缺血再灌注后E-选择素及L-选择素的表达.     

肝细胞生长因子在心肌缺血-再灌注损伤中的表达改变及意义

[目的]通过对缺血再灌注心肌细胞内肝细胞生长因子(HGF)mRNA及心肌细胞内MDA和SOD检测,揭示缺血再灌注过程中HGF mRNA表达上调的可能机制及作用。[方法]雄性SD大鼠40只,随机分为假手术组及实验组,每组20只,建立缺血再灌注损伤的模型。对比两组间心肌HGF mRNA、MDA及SOD的含量。[结果]大鼠心电图显示冠脉结扎后ST段明显抬高,打开结扎线后ST段回落,表明心肌缺血再灌注有效。与假手术组SOD(95.311±3.472)U/mL、MDA(18.842±1.166)μmol/g相比,再灌注组心肌细胞SOD活性明显降低(61.257±1.242)U/mL,P<0.01;MDA含量增高至(36.396±0.653)μmol/g,二者相比差异具有显著性意义(P<0.01);心肌HGF mRNA表达,再灌注组与假手术组分别为0.72074±0.00067和0.53668±0.00103,差异有显著性意义(P<0.01)。缺血再灌注过程中,心肌HFG mRNA变化与SOD变化成正相关,与MDA呈负相关。[结论]自由基的损伤性刺激可能是再灌注损伤过程中引起心肌HGF mRNA表达上调的原因之一。