麦门冬汤体内抑瘤效应的免疫机制探讨

目的从免疫学角度探讨麦门冬汤抗肿瘤作用的机制。方法用小鼠膀胱癌细胞建立小鼠移植瘤模型,给予不同剂量的麦门冬汤灌胃,检测其抑瘤率,以免疫学方法检测小鼠治疗后的细胞免疫功能的改变(MΦ、NK、IL-2、TNF-α、T淋巴细胞转化率),并以流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+)。结果麦门冬汤能抑制肿瘤生长,其主要机制是增强小鼠的细胞免疫功能,提高患者免疫监视功能,使机体产生有效的抗肿瘤免疫应答,及时杀伤和清除肿瘤细胞。结论麦门冬汤具有显著的抑瘤作用,其作用机制主要为提高机体的细胞免疫功能,提高患者免疫监视功能,使机体产生有效的抗肿瘤免疫应答,及时杀伤和清除肿瘤细胞。     

HIV的抗原表位研究的国内外进展

人类获得性免疫缺陷病毒（HIV）感染后，会刺激人体产生特异性免疫应答反应。其中，以中和抗体为代表的体液免疫应答和以CD8^＋的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）及CD4^＋的辅助性T淋巴细胞（HTL）为介导的细胞免疫应答，对控制HIV在体内的复制有重要作用。在上述免疫应答的过程中，病原体自身所携带的抗原表位是刺激机体产生免疫应答的必备条件。同时，抗原表位的变化也是HIV病毒逃逸机体免疫监视的重要机制之一。本文试就HIV抗原表位的国内外的研究状况做一综述。     

小鼠肝癌细胞(H22)源外泌体的体内抗肝癌作用研究

目的在荷瘤动物模型观察小鼠肝癌细胞（H22）来源的外泌体（exosomes）激发宿主抗肝癌免疫应答的效应。方法用自行分离纯化的小鼠肝癌细胞H22源外泌体免疫小鼠,然后给小鼠皮下注射H22肿瘤细胞,观察肿瘤的生长状况。用MTT法检测小鼠脾细胞增殖情况和细胞毒活性;用免疫组织化学法检测肿瘤组织中CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞浸润情况。结果该外泌体使肿瘤出现时间延迟,肿瘤生长缓慢,小鼠生存率提高。促进脾淋巴细胞增殖并增强其细胞毒活性,促进CD4^＋和CD^8＋T细胞活化。结论小鼠肝癌细胞（H22）源外泌体能诱导抗肿瘤应答,有效地诱导特异性的杀伤肿瘤细胞活性,有针对亲本细胞的免疫保护作用。     

榄香烯抗肝癌作用的实验研究

目的研究榄香烯对小鼠移植性肝癌(H22)的抗肿瘤作用及其机制。方法建立小鼠移植性肿瘤模型(H22肝癌),腹腔注射不同剂量的榄香烯,观察其抗肿瘤作用(抑瘤率),以免疫学方法检测小鼠治疗后的细胞免疫功能的改变(IL2、T淋巴细胞转化能力),并通过免疫组化的方法检测肿瘤组织癌基因(p53和Bcl-2)的表达。结果榄香烯具有明显的抑瘤作用,抑瘤作用的主要机制是增强小鼠的细胞免疫功能,促进肿瘤细胞凋亡和调节癌基因的表达。结论榄香烯具有显著的抑瘤作用,其作用机制是通过提高荷瘤小鼠机体免疫功能和诱导肿瘤细胞凋亡两条途径来抑制肿瘤的生长。     

胃癌患者外周血CD25／4、CD28／8的表达研究

机体发生肿瘤时免疫系统能产生抗肿瘤免疫应答,其中细胞免疫在抗肿瘤免疫应答中发挥着重要作用。本文采用流式细胞术对胃癌患者外周血T淋巴细胞CD4、CD25、CD8和CD28的表达进行了检测,探讨胃癌患者围手术期免疫功能变化及其与肿瘤生物学行为的关系,进一步探讨T淋巴细胞在抗肿瘤方面的意义。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的研究进展

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞是目前免疫学领域研究的热点，对于维持机体免疫耐受和免疫应答稳态具有非常重要的作用。本文就近年在其产生、作用机制及与疾病关系等方面的研究进展进行综述。     

体外抗原激活的CD4+T淋巴细胞以TGF-β1非依赖的途径抑制NK细胞的杀伤功能

目的初步探讨体外抗原激活的CD4^＋T淋巴细胞对NK细胞杀伤毒性的影响及其机制。方法免疫磁珠方法获得BALB/c小鼠CD4^＋T淋巴细胞和NK细胞,异种皮肤抗原刺激CD4^＋T淋巴细胞后,与NK细胞共培养,并加入TGF-β1抗体后,分别应用51Cr标记的YAC-1检测24、48、72、96h NK细胞的杀伤毒性。结果异种皮肤抗原激活的CD4^＋T淋巴细胞能够持续抑制NK细胞杀伤毒性,在检测的时相点内,其抑制率分别为：39%、37.5%、26.3%和15.9%,加入TGF-β1抗体后,抑制率无明显变化。结论体外用抗原激活的的CD4^＋T淋巴细胞能够持续显著抑制NK细胞杀伤毒性,而且这种作用是TGF-β1非依赖的。     

旋毛虫新生幼虫抗原免疫小鼠免疫功能的动态观察

【目的】探讨旋毛虫新生幼虫抗原诱导小鼠产生的保护性免疫机制。【方法】采用免疫组化法分别检测旋毛虫新生幼虫抗原免疫后7、14、28、42d小鼠外周血CD4^＋和CD8^＋ T淋巴细胞的百分率,并同时用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定外周血PBMC培养上清中IL-4和IFN-γ水平。【结果】与对照组相比,旋毛虫新生幼虫抗原免疫组小鼠外周血CD4^＋、CD8^＋ T淋巴细胞的百分率均增高,IL-4和IFN-γ水平亦升高,直至免疫后42d;而CD4^＋／CD8^＋ T细胞比值与对照组相比无显著性差异（P〉0.05）。【结论】旋毛虫新生幼虫抗原能诱导机体产生有效的体液免疫和细胞免疫,有希望成为预防旋毛虫病有前途的候选疫苗。     

CD4+T淋巴细胞亚群研究进展

在免疫应答期间．外周血T淋巴细胞发育为功能不同的亚群．并通过分泌特殊的细胞因子．影响细胞免疫,调节体液免疫应答。T淋巴细胞按表型不同可分为CD4^＋和CD8^＋两大亚群．它们多数表达T细胞受体．但识别的抗原和所受的主要组织相容性复合体（major histoconapatibility complex, MHC）的限制性不同。现将近年来关于CD4^＋T淋巴细胞亚群的研究进展综述如下。     

T淋巴细胞亚群异常与特发性血小板减少性紫癜的关系

目的 通过检测T淋巴细胞亚群及其凋亡，初步探讨T淋巴细胞亚群异常在特发性减少性紫癜（ITP）发病机制中的作用。方法 采用流式细胞术对ITP患者及正常对照组的外周血淋巴细胞亚群进行检测；DNA琼脂糖凝胶电泳检测T淋巴细胞的凋亡。结栗ITP患者CD3^＋、CD4^＋和CD4^＋CD25^＋T细胞比例均显著低于正常对照组（P〈0．05或P〈0．01），而CD8^＋T细胞和CD4^＋T细胞表面Fas表达均较正常组增加（P〈0．01）；T淋巴细胞凋亡敏感性增加。结论 ITP患者外周血T淋巴细胞亚群异常，T细胞免疫调控亚群（CD4^＋CD25^＋）凋亡增多，对自身反应性T细胞亚群免疫下调作用降低，破坏自身免疫耐受，在ITP的发病中起重要作用。     

负载自体肿瘤抗原的树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞在乳腺癌的临床研究

目的：探讨负载自身肿瘤裂解物的树突状细胞（DC）与细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）共培养后，对CIK体外肿瘤细胞杀伤活性的影响，进一步观察负载自身肿瘤裂解物的DC联合CIK治疗乳腺癌患者的临床免疫学疗效、毒副反应。方法：选择20例乳腺癌患者，分离外周血单个核细胞，其中贴壁细胞经GM—CSF和IL-4诱导产生DC，并负载自体肿瘤细胞裂解物；悬浮细胞经IFN-γ、IL-2、抗CD3单抗、IL-1α体外诱导产生CIK细胞。将负载抗原的DC与CIK共培养，观察CIK在体外对自身肿瘤细胞和乳腺癌细胞株SKBR-3的杀伤活性。此外，20例患者在切除原发病灶后，接受Ag—DC＋CIK细胞的过继免疫治疗，观察临床免疫疗效。结果：①CIK细胞培养后可见CD3^＋、CD8^＋和CD3^＋CD56^＋细胞较培养前显著增加；②将负载自身肿瘤抗原的DC与CIK共培养后，CIK的体外特异性和非特异性杀瘤活性明显提高；③细胞治疗后患者外周淋巴细胞Ag—NORs的IS值明显增高；CD3^＋、CD8^＋、CD56^＋升高；PBMC对自身肿瘤细胞的杀伤活性增强（P〈0．05）；④除一过性发热、畏寒外未见其它不良反应。结论：负载自体肿瘤细胞裂解物的DC疫苗联合CIK细胞在体外能明显增强对乳腺癌细胞的杀伤作用，亦能增强乳腺癌患者的细胞免疫功能，取得较理想的临床免疫疗效。     

桃仁总蛋白对荷瘤鼠T淋巴细胞亚群及细胞凋亡的影响

目的　观察PSP对S180肉瘤小鼠T淋巴细胞亚群及肿瘤细胞凋亡的影响 ,并探讨其免疫调节及抗肿瘤的作用机制。方法　FACSCalibur流式细胞仪检测荷瘤鼠T淋巴细胞亚群及肿瘤细胞凋亡。结果　PSP能调节CD4 /CD8 细胞的比例 ,诱导肿瘤细胞凋亡。结论　PSP可改善机体异常的免疫状态 ,调节免疫系统的失衡 ,并促进肿瘤细胞凋亡     

儿童传染性单核细胞增多症T淋巴细胞亚群的变化及意义

目的通过对儿童传染性单核细胞增多症（IM）外周血T淋巴细胞亚群的检测,探讨其细胞免疫功能变化与疾病的关系。方法采用流式细胞仪对52例IM患儿外周血T淋巴细胞亚群进行检测。结果IM患儿CD3^＋,CD8^＋T淋巴细胞水平明显升高,CD4^＋T淋巴细胞和CD4^＋／CD8^＋水平明显降低,分别与正常对照组比较均有显著性差异。IM患儿急性期CD汀淋巴细胞升高水平与患儿外周血异型淋巴细胞升高的百分率呈显著正相关。IM患儿血清免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）水平与正常对照组比较无显著性差异。结论儿童传染性单核细胞增多症在急性期存在细胞免疫异常情况,EB病毒感染引起机体细胞免疫功能异常是IM发病的关键,在整个疾病过程中T淋巴细胞起着主要作用。     

血透患者细胞免疫功能的变化

目的；探讨血透对患TI林巴细胞免疫功能的影响。方法：观察19例尿 毒症血透患透析前，透析5h,24h,48h,72h后外周血中T淋巴细胞亚群和白细胞，淋巴细胞计数，进行各时点指标与术前比较的方差分析，组间两两比较配对t检验，结果：患透析5h,24h的血白细胞，淋巴细胞显低于血透前水平，透析48h,72h后接近透析前水平，两差异无显性，透析前T淋巴细胞CD3^ ,CD4^ ,CD57^ 水平低于正常对照组，CD8^ 高于正常对照组，CD4^ /CD8^ =0.86,透析48h后CD3^ ,CD4^ ,CD57^ 较透析前明显增高CD4^ /CD8^ =1.26，CD8＋水平在透析前后无显改变，结论：血液透析对机体细胞免疫功能影响是多方面的，一方面由于血透后血浆中尿毒症毒素部分清除使T细胞免疫功能可获暂时性改善，同时由于血液透析过程对白细胞趋化，聚集和粘附作用的影响，外周血白细胞数量下降致使机体的免疫就答作用降低，应当重视对血透患免疫机能调节。     

供者淋巴细胞输注对H22肝癌荷瘤小鼠免疫功能及瘤体生长的影响

目的 探讨供者淋巴细胞输注（donor lymphocyte infusion，DLI）及其联合化疗（氟尿嘧啶，5-Fu）对H22肝癌荷瘤小鼠免疫功能及瘤体生长的影响。方法 荷瘤昆明（KM）小鼠随机分4组：荷瘤对照组（A组）、5-Fu组（B组）、DLI组（C组）、联合组（D组）。检测各组小鼠外周血T淋巴细胞亚群和IL-2水平的变化及NK细胞的活性，计算瘤体生长抑制率。结果 C、D两组小鼠外周血CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋、IL-2水平及NK细胞活性明显高于A、B两组（P〈0.05）。B、C、D各组抑瘤率分别为61．3％、34，7％、89．5％。结论 供者淋巴细胞输注与化疗联合使用可以抑制实体瘤的生长，提高H22肝癌荷瘤小鼠的免疫功能，诱导有效的移植物抗肿瘤效应，是一种潜在可行的实体瘤细胞过继免疫治疗方法。     

白介素-18对树突状细胞瘤苗的抗肿瘤作用

目的：进一步提高树突状细胞（DC）瘤苗的抗肿瘤作用。方法：以腺病毒为载体转染目的基因至DC，研究DC瘤苗对荷瘤小鼠的免疫治疗作用。分别以乳酸脱氢酶（LDH）释放法、酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞毒性T淋巴细胞（CTL）、自然杀伤细胞（NK）活性和细胞因子的分泌水平。结果：IL-18／gp100-DC瘤苗对荷瘤小鼠具有显著的治疗作用。IL-18／gp100-DC瘤苗治疗后，能明显增强CTL和NK活性，提高IFN-r和IL-2的分泌水平，使体内肿瘤细胞发生明显坏死，瘤体及瘤周有大量炎性细胞浸润。CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞为发挥抗肿瘤作用所必须，NK细胞也起到一定的作用。结论：辅助性T细胞1（Th1）型细胞因子IL-18基因修饰的gp100-DC瘤苗能有效地诱导抗肿瘤免疫反应。     

弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠诱导NALT和GALT黏膜部位的免疫应答

目的观察弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠诱导的鼻相关淋巴组织（NALT）和肠相关淋巴组第（GALT）黏膜部位的免疫应答。探讨弓形虫黏膜疫苗能否在感染起始阶段有效诱导免疫应答。方法将BALB／小鼠随机分为免疫和对照组,免疫组小鼠以弓形虫复合黏膜疫苗20μl／只（20μg STAg＋1μg CT）滴鼻免疫2移（间隔2周）,对照组PBS滴鼻。于末次滴鼻后14d颈椎脱臼处死小鼠,ELISA测定粪便和鼻咽冲洗液IgA抗型水平;计数NALT、NC及PP、IEL淋巴细胞数,免疫细胞化学法检测CD4^＋、CD8^＋T细胞亚群水平。结果免疫匀小鼠粪便IgA和鼻咽冲洗液IgA抗体显著高于对照组（P〈0．05）。NALT内淋巴细胞明显增生（P〈0．05）,其中CD4^＋、CD8^＋T细胞均有增生（P〈0．01）,CD4^＋／CD8^＋比值降低（P〈0．05）。NC中淋巴细胞数明显升高（P〈0．01）,以CD4^＋T细胞水平为主（P〈0．01）。GALT部位PP淋巴细胞增生显著（P〈0．01）,主要以CD4^＋T细胞为主;而IEL以CD8^＋T细胞增生为主（P〈0．01）,CD4^＋／CD8^＋比值降低（P〈0．05）。结论弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB／c小鼠可有效诱导NALT和GALT黏膜部位免疫应答。     

免疫学

人早孕期外周及蜕膜CD4^＋CD25^＋调节性T细胞变化；妊娠17-37周正常和感染胎儿T细胞亚群的变化；雌二醇对小鼠正常淋巴细胞和致敏淋巴细胞活化的调节；卵巢癌6B11抗独特型微抗体诱导抗肿瘤免疫应答的体外实验；原因不明习惯性流产者免疫治疗前后APCA的比较。     

干扰素治疗对乙肝患者细胞免疫功能的影响

乙肝患者存在着不同程度的细胞免疫功能异常，T淋巴细胞亚群的数量比例是反映机体免疫水平的主要标志，笔者研究了慢性乙型肝炎中乙肝病毒e抗原（HBeAg）阳性及HBeAg阴性患者外周血中CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞特点及干扰素治疗对其绝对值的影响，报道如下。     

短小棒状杆菌纯化物对小鼠骨髓瘤细胞的作用

目的初步探求短小棒状杆菌(CP)纯化物是否具有抗肿瘤作用及其免疫机理。方法短小棒状杆菌纯化物(酶解法)及短小棒状杆菌分别注入负瘤小鼠。氚标记胸腺嘧啶掺入法(3H-TdR)测小鼠脾淋巴细胞转化试验;流式细胞仪对T淋巴细胞亚群进行检测;mRNA表达法检测细胞因子TNF和INF-γ的活性。结果短小棒状杆菌纯化物(酶解法)及CP均可抑制肿瘤细胞生长。免疫功能显示,CP和酶解法纯化的CP都能刺激机体T淋巴细胞的转化(P<0.05)、CD3+、CD4+、CD8+数值显著增加及细胞因子的表达增强(P<0.05),且酶解法纯化的CP还能刺激机体CD8+值显著增加(P<0.05)。结论酶解法纯化短小棒状杆菌不仅抑制骨髓瘤细胞生长,并能显著的激活巨噬细胞系统,刺激机体的细胞免疫功能。