Ku80表达抑制联合热疗对前列腺癌细胞放射敏感性影响的研究

目的探讨抑制PC3细胞中Ku80表达水平并结合热疗对前列腺癌细胞的辐射敏感性的影响。方法构建调节Ku80表达的siRNA载体,筛选转染后的PC3-Ku80（Ku80组）、PC3-p-actin（Vector组）、PC3-Ku80-siRNA（RNAi组）、PC3-pactin-siRNA（Scramble组）等4种稳定细胞株。在不同的条件下分别用7射线照射后行AnnexinV-FIC双染色及DAPI、TUNNEL染色检测细胞周期与凋亡情况,另取一组PC3一Ku80一siRNA细胞经42℃水浴30min,转37℃细胞培养12h再行射线照射,通过细胞周期与凋亡检测等了解不同组问放射效果的差异。结果Westernblot和RT-PCR分析表明转染后可明显调节PC3细胞中Ku80的表达,稳定转染的对数生长期细胞经7射线照射,细胞周期与凋亡检测结果显示随着Ku80表达的降低,细胞对放射治疗更趋敏感,5组细胞随7射线照射剂量的增加,细胞存活率下降,其中RNAi组的细胞存活率均低于对照组和Ku8q组,5组比较差异有统计学意义（F-0．953,P％0．001）。PC3-Ku80-siRNA细胞经热休克处理后再行射线照射,其存活率明显低于未经热休克处理的细胞株。结论抑制前列腺癌细胞中Ku80蛋白表达水平,结合热休克,可明显提高肿瘤组织对放射治疗的敏感性,这可能是一个较为理想的综合治疗前列腺癌的方法。     

Ku70蛋白在前列腺癌中表达的临床研究

目的探讨Ku70蛋白表达与前列腺癌Gleason评分及前列腺特异抗原（prostate specific antigen,PSA）的关系。方法采用HE染色观察组织学形态,免疫组化SP法检测前列腺癌组织中Ku70蛋白表达,按前列腺癌Gleason评分和血清PSA值分组,比较各组间Ku70蛋白表达水平。结果 58例前列腺癌标本中Ku70蛋白均呈阳性表达,其表达强度与前列腺癌Gleason评分和血清PSA呈明显负相关。结论 Ku70蛋白表达水平能帮助判断前列腺癌预后及评价治疗效果,可用于临床指导个体化治疗。     

RNA干扰DNA修复蛋白Ku80对乳腺癌基因HER2表达的影响

目的 构建特异性沉默Ku80基因的真核表达栽体,检测其对乳腺癌基因HER2表达的影响.方法 设计2条表达短发夹RNA的互补DNA序列,分别克隆至真核表达载体pGCsi-U6/Neo/DsRed构建shRNA-Ku80,转化大肠埃希菌DH5α菌株扩增后,提取质粒测序分析,以相同的方法构建并鉴定Ku80基因的真核表达载体pEGFP-N1-Ku80;将2种shRNA-Ku80分别与pEGFP-N1-Ku80共转染HEK293细胞株,通过流式细胞仪检测荧光强度筛选高效敲减靶点,并在基因和蛋白水平观察抑制Ku80对乳腺癌基因HER2表达的影响.结果 成功构建Ku80特异性shRNA表达载体,shR-NA-Ku80对靶点Ku80敲减效率达到59.50％,抑制Ku80表达使乳腺癌基因HER2在基因和蛋白水平明显降低.结论 成功构建shRNA-Ku80载体,在体外可有效抑制Ku80的表达,使癌基因HER2的表达明显下调,提示Ku80有望成为乳腺癌治疗的基因靶点.     

硒蛋白P在直肠癌中的表达及临床意义

目的应用免疫组织化学染色的方法检测硒蛋白P在直肠癌组织中的表达,以探讨其与直肠癌发生的关系及临床意义。方法收集山西大医院2013年6月至2014年5月间行手术治疗并经病理证实的60例直肠癌组织、40例直肠腺瘤组织、40例正常直肠组织,应用SABC法检测上述组织中硒蛋白P的表达情况,结果依据阳性细胞百分率和染色强度进行评价,三组间样本率的比较采用无序行×列表?2检验(α=0.05),两组间样本率的比较采用独立样本?2检验(α=0.016 7),硒蛋白的表达与直肠癌临床病理参数的关系采用四格表?2检验(α=0.05)进行分析。结果硒蛋白P在正常直肠组织、直肠腺瘤组织、直肠癌组织中的表达阳性率分别为82.5%(33/40)、70.0%(28/40)、45.0%(27/60),组间差异有统计学意义(?2=15.680,P<0.001),癌组织与正常组织、腺瘤组织间差异显著(?2=14.063,P<0.001;?2=6.061,P=0.015);硒蛋白的表达与肿瘤大小、是否浸润浆膜有关(P<0.05),与性别、年龄、淋巴结有无转移、肿瘤细胞分化程度、TNM分期无关(P>0.05)。结论硒蛋白在直肠癌中低表达,对直肠癌的发生发展具有重要作用,有望为直肠癌的治疗提供新思路。     

IGFBP6在结直肠癌组织中的表达及其意义

摘要：目的：探讨胰岛素样生长因子结合蛋白6（IGFBP6）在结直肠癌（CRC）组织中的表达水平及其在CRC中的临床意义。 方法：实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CRC患者癌组织及其相应癌旁组织中IGFBP6 mRNA的表达水平;免疫组织化学法（IHC）检测CRC患者癌组织及癌旁组织石蜡切片中IGFBP6蛋白的表达;分析其与CRC患者临床病理参数及预后关系。 结果：CRC患者癌组织中IGFBP6 mRNA表达水平（0.26±0.39）低于癌旁组织（1.22±0.75）,差异有统计学意义（t=8.288,P＜0.01）;CRC患者癌组织中IGFBP6蛋白阳性率（38.1%）低于癌旁组织(61.9%),且与TNM分期相关（P均＜0.01）。生存曲线分析显示,IGFBP6低表达的CRC患者生存时间明显缩短。 结论：低表达的IGFBP6可作为CRC诊断及预后判断潜在的生物学标志物。     

结直肠癌组织中锌指蛋白139(ZNF139)的表达及临床意义研究

目的 探究锌指蛋白139(zinc finger protein 139,ZNF139)在结直肠癌(colorectal cancer)组织中的表达及与临床病理参数及预后的关系。方法 选取2012年5月～2014年6月就诊于恩施土家族苗族自治州中心医院行手术治疗的67例结直肠癌患者的临床病理资料及癌组织、癌旁组织和正常黏膜组织进行研究。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法染色检测ZNF139 mRNA及蛋白在结直肠癌组织中的表达情况,分析其与结直肠癌患者临床病理因素的关系;采用K-M生存曲线分析ZNF139表达对预后的影响;采用COX回归模型分析影响结直肠癌患者预后的风险因素。结果 结直肠癌病灶组织中ZNF139 mRNA(0.651±0.130)表达水平明显高于癌旁组织(0.217±0.070)和正常组织(0.201±0.052),差异有统计学意义(t=24.060, 24.947,均P=0.001)。结直肠癌组织中ZNF139蛋白阳性率(52.24%)明显高于癌旁组织(28.36%)和正常黏膜组织(19.40%),差异均有统计学意义(χ²     

中低位局部晚期直肠癌术前放化疗的前瞻性随机对照研究

目的探讨术前放化疗对中低位局部晚期直肠癌的治疗效果及临床价值。方法对我院2005年6月至2006年6月间收治的45例中低位局部晚期患者进行随机分组治疗。A组单纯手术治疗,B组术前放化疗及手术治疗。分析两组的总有效率,放化疗治疗组的毒副作用;比较两组间手术切除率、保肛率、复发率、生存率。结果 A组15例行单纯手术治疗组总有效率为33.3%,B组30例患者进行同步放化疗治疗的总有效率为70.0%,两组之间差异有统计学意义(P<0.05)。两组之间手术切除率、保肛率、复发率差异有统计学意义(P<0.05)。A组和B组治疗后3年生存率分别为76.7%和46.7%(7/15),两组间预后生存差异有统计学意义(P<0.05)。结论术前放化疗有利于提高局部晚期中低位直肠癌手术切除率、保肛率,降低直肠癌复发率并延长患者的总生存期。     

直肠癌组织中细丝蛋白A的表达及临床意义

直肠癌是我国常见的预后较差的恶性肿瘤之一,尽管肿瘤治疗手段不断改进,但晚期肿瘤复发和淋巴结转移仍较为多见。因此分析直肠癌的生物学特性,探索直肠癌治疗的新途径成为临床关注的问题。近年研究发现细丝蛋白A（filamin A,FLNa）基因在某些肿瘤中表现出的生物学和遗传学特征具有肿瘤抑制基因的特性,     

EFNA3在结直肠癌中的表达及临床意义

目的研究EFNA3在结直肠癌中的表达及关系。方法随机选取湘南学院附属医院84例结直肠病例,分结直肠癌、结直肠良性肿瘤和正常结直肠组织3组,采用免疫组织化学方法分别检测3组中EFNA3的表达情况。结果EFNA3在结直肠癌组中的表达强度为3.6±1.3,相比良性结直肠肿瘤组（5.1±0.6）和正常结直肠组（4.9±1.3）较低（P<0.05）。高分化组EFNA3表达量高于低分化组（4.2±0.4 vs 3.3±1.6,P<0.05);有淋巴结转移组肿瘤组织中EFNA3的表达量低于无淋巴结转移组（3.3±1.7 vs 4.13±0.28,P<0.05);TNM分期Ⅲ+Ⅳ者肿瘤组织中 EFNA3表达量低于Ⅰ+Ⅱ者（3.3±1.7 vs 4.13±0.28,P<0.05)。结论EFNA3随着癌症发生过程的逐渐深入而表达递减,表明可能与结直肠癌的发生过程有关并在其中起到了类似抑癌基因的作用。     

骨肉瘤中survivin蛋白的表达及其与预后的关系

目的:研究骨肉瘤组织中survivin蛋白的表达情况,探讨survivin与骨肉瘤发生发展及其预后的关系。方法:应用免疫组织化学S-P法对46例原发性骨肉瘤组织中survivin蛋白的表达水平进行检测。结果:46例骨肉瘤组织中survivin蛋白表达阳性率为63.0%(29/46),对照组12例骨软骨瘤组织中未见表达;survivin表达与外科Enneking分期有关,而与患者年龄、性别、肿瘤部位、大小、病理分型无关;survivin蛋白表达阳性者术后5年生存率显著低于表达阴性者(P<0.05)。结论:Survivin蛋白在骨肉瘤中高表达,这种特异性表达对促进骨肉瘤细胞恶性增殖具有重要作用,survivin可成为评价骨肉瘤预后的分子指标。     

癌基因C-myc在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨结直肠癌组织中癌基因C-myc在结直肠癌发生、发展中的作用及其与临床病理特征的相关性。方法采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶法(S-P法),检测60例结直肠癌组织、10例癌旁组织及8例正常结直肠黏膜中C-myc蛋白表达。结果结肠癌组织中,C-myc蛋白表达阳性率为76.7%(46/60),显著高于正常及邻近结直肠组织(P<0.01);C-myc的过度表达与结直肠癌肝转移呈正相关关系(r=5.540,P<0.05),与TNM分期无相关性(r=0.013,P>0.05)。结论癌基因C-myc在结直肠癌的发生、发展过程中起重要作用,C-myc蛋白过度表达不能代表结直肠癌的肿瘤状态,不能作为判断病人预后的单独指标。     

BRCA1蛋白在卵巢癌组织中的表达及其意义

目的 探讨BRCA1蛋白在卵巢癌组织中的表达及其意义。方法对43例卵巢癌，10例交界性卵巢上皮肿瘤和14例良性卵巢上皮肿瘤，用免疫组织化学方法检测BRCA1蛋白的表达。结果 卵巢癌组织中BRCA1的阳性表达率为39．5％(17／43)，交界性卵巢上皮肿瘤组织中为90％(9／10)，良性卵巢上皮肿瘤组织中为92．8％(13／14)。卵巢癌组织中BRCA1蛋白表达阳性率显低于良性卵巢上皮肿瘤和交界性卵巢肿瘤(P＜0．005)。结论 BRCA1蛋白表达降低在卵巢癌的发病过程中可随具有重要作用。     

卵巢肿瘤中桩蛋白paxillin的表达及其临床意义

目的探讨桩蛋白paxillin在卵巢肿瘤中的表达及其临床意义。方法收集70例卵巢肿瘤标本和30份正常卵巢组织标本,应用组织芯片技术和EnVision免疫组织化学染色法检测标本中paxillin蛋白的表达水平,同时分析paxillin表达水平与临床病理参数之间的关系。结果paxillin蛋白在卵巢肿瘤组织中的阳性表达率明显高于正常卵巢组织（78．6％螂．26．7％,P〈0．01）,其阳性表达率在不同病理分级、临床分期、有无淋巴结转移等临床病理参数间比较差异有统计学意义（P均〈0．05）,但在不同年龄、病理组织学类型间比较差异无统计学意义（P均〉0．05）。结论paxillin蛋白表达异常可能与卵巢肿瘤的发生、发展有关,其表达异常可作为判断预后的参考指标之一。     

人结直肠癌组织中S100P蛋白的表达及临床意义

目的探讨人结直肠癌组织中S100P蛋白的表达情况,并分析其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测60例结直肠癌组织及其癌旁正常肠黏膜组织、20例良性肠病组织中S100P蛋白的表达情况,并结合临床资料进行统计分析。结果 S100P蛋白在良性肠病、癌旁正常肠黏膜及结直肠癌组织中的阳性率分别为5.0%、3.3%和55.0%,后者显著高于前两者,差异均有统计学意义(P<0.01)。有淋巴结转移和发生远处转移(Ⅲ期～Ⅳ期)的结直肠癌组织中S100P蛋白的阳性率分别为73.1%和75.0%,显著高于无淋巴结转移及早期结直肠癌组织(Ⅰ期～Ⅱ期)S100P蛋白的阳性率41.2%和45.0%,差异亦均有统计学意义(P<0.05)。S100P蛋白在中-低分化结直肠癌组织中的阳性率高于高-中分化结直肠癌组织,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 S100P蛋白在人结直肠癌组织中高表达,且与肿瘤TNM分期、淋巴结转移相关。S100P蛋白可能在人结直肠癌的发生发展过程中发挥重要作用。     

大肠癌中Survivin、PTEN、p16的表达及其临床意义

目的:探讨Survivin、PTEN、p16基因在大肠癌中的表达及其临床意义。方法:利用免疫组织化学SP法检测43例结直肠癌和12例正常结直肠粘膜组织中以上3种基因的表达产物。结果:43例结直肠癌组织中Survivin基因表达23例,癌旁正常直结肠组织中无Survivin基因的表达,Survivin的表达与结直肠癌的组织分型、浸润深度、Dukes'分期无明显相关性(P＞0．05),与结肠癌的转移有相关性(P＜0．05)。而PTEN,p16与大肠癌的分化程度、浸润深度、临床分期、淋巴结转移有关(P＜0．05)。结论:Survivin、PTEN、p16的异常表达在大肠癌发生、发展过程中起重要作用,联合检测Survivin、PTEN、p16表达水平有可能作为反映大肠癌进展和预后的生物学指标。     

RhoA蛋白在直肠癌患者中的表达水平及临床意义

目的:探讨直肠癌组织中RhoA的表达情况及其临床意义.方法:用免疫组织化学S-P法检测86例直肠癌患者(直肠癌组)和30例正常对照者(正常对照组)RhoA蛋白的表达水平.结果:直肠癌组RhoA阳性率为67.4%,其中强阳性率为24.4%,而正常对照组RhoA均为阴性(P ＜ 0.05);高、中、低分化直肠癌患者RhoA阳性率依次为47.6%、64.9%和85.7%,差异有统计学意义(P ＜ 0.05);Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期直肠癌患者RhoA阳性率依次为54.5%、70.0%、87.5%和94.1%,随着临床分期的增加有升高的趋势(P ＜ 0.05);有淋巴结转移组RhoA阳性率明显高于无转移组(P ＜ 0.05);在不同浸润深度组中,随着浸润加深,RhoA阳性率明显升高(P ＜ 0.05).但在直肠癌不同组织类型中,RhoA 总阳性率差异无统计学意义(P ＞ 0.05).结论:直肠癌组织中RhoA蛋白明显高于正常直肠黏膜,可能作为直肠癌的一个肿瘤标志物指标,其表达水平与肿瘤的分化、转移、恶性程度及转移有关.     

直肠癌术前放疗患者皮肤护理的研究

目的探讨适合直肠癌术前放疗患者围手术期皮肤护理方案,降低骶尾部皮肤破溃的发生率。方法以2002~2003年行术前放疗的30例直肠癌患者为对照组,接受常规皮肤护理;2004~2005年相同条件的42例患者作为实验组,手术后给予电动防压疮气垫床护理。结果实验组患者手术后放疗区域皮肤破溃率低于对照组(χ2=5.164,P=0.023)。结论护士要重视直肠癌术前放疗患者围手术期皮肤状态的评估及护理,手术后使用电动防压疮气垫床可起到预防手术后放疗区域皮肤破溃的作用。     

小窝蛋白-1在骨肉瘤中的表达及其意义

目的 通过检测小窝蛋白-1在人骨肉瘤组织中的表达,探讨小窝蛋白-1在骨肉瘤发生、发展及转移中的作用及其与临床病理相关性.方法 采用免疫组化学方法检测48例骨肉瘤组织标本及24例正常骨组织中小窝蛋白-1的表达水平.并结合临床、病理特征进行分析.结果 48例骨肉瘤组织中有38例小窝蛋白-1呈弱表达或未见表达,而在24例正常的骨组织标本中小窝蛋白-1均有表达且呈强表达,骨肉瘤组织、正常骨组织中小窝蛋白-1的平均吸光度值分别为(0.2292±0.0329)和(0.6428±0.0028),骨肉瘤组织小窝蛋白-1的表达明显低于正常骨组织(t=21.48,P＜0.01),差异具有统计学意义;小窝蛋白-1的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、病理分级等均无相关性(P均＞0.05),而小窝蛋白-1的低表达或不表达与肺转移有关(x2 =11.84,P＜0.05).结论 小窝蛋白-1异常低表达可能参与骨肉瘤侵袭、转移机制,小窝蛋白-1可能成为判断骨肉瘤患者预后新的分子标志物及肿瘤治疗的新靶点.     

肺癌p53蛋白表达及其与淋巴结转移和分期的关系

应用链菌素亲生物素-过氧化物酶免疫组化方法观察了p53蛋白在92例肺癌组织的表达情况。结果p53蛋白在肺癌组织中表达的总阳性率为66．3％，正常细胞中未见表达。肺癌有淋巴结转移组p53蛋白的阳性率（75．5％）高于无淋巴结转移组（55．8％）（P＜0．05），Ⅲ～Ⅳ期肺癌p53蛋白的阳性率（82．9％），高于Ⅰ～Ⅱ期肺癌（56．1％）（P＜0．01）。结果表明，p53蛋白是肺癌较特异的肿瘤标记物，其表达与肺癌淋巴结转移及分期有关。