鲍曼不动杆菌对多黏菌素类抗菌药物耐药现状及机制研究进展

多黏菌素类抗菌药物是多重耐药鲍曼不动杆菌的最后防线，但随着临床对多黏菌素类药物使用增多，鲍曼不动杆菌对其耐药的报道也陆续出现，相关耐药机制的研究成为热点。本文对近年来国内外鲍曼不动杆菌对多黏菌素类耐药报道以及耐药机制研究进行综述，以期对临床合理应用多黏菌素类抗菌药物、保持其抗菌活性提供参考。     

耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌的分子流行病学研究

目的：了解某医院临床分离耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌的菌株同源性及其耐药情况。方法收集2013年1月－2014年12月,某院临床分离到的48株耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌,采用 K －B 法进行药敏试验,肠杆菌科基因间重复序列聚合酶链反应（ERIC －PCR）试验研究上述菌株的基因同源性和科室分布。结果48株耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌用 ERIC －PCR 方法可分为三个基因型,A 型2株,B 型43株,C 型3株,其中 B 型为主要的流行株,主要来自于重症监护病房、呼吸科和神经外科。结论耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌的多重耐药性严重,该医院内存在耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌的克隆流行,以 ICU 最为严重,应采取有效措施防止和延缓其院内交叉感染的发生和耐药性的进一步增高。     

血流感染的耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的分子机制及临床研究

目的 探讨血流感染的耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)耐药机制,分析菌株同源性及患者的临床特征,为CRAB的感染控制提供实验依据。方法 采用Bact/Alert 3D全自动血培养系统进行血培养,细菌鉴定和药敏使用Vitek-2 Compact全自动微生物分析系统。对2010年6月-2016年5月临床血流感染患者分离到的27株碳青霉烯类药物(亚胺培南和/或美罗培南MIC≥16μg/mL)耐药的CRAB复苏菌株,重新采用Vitek-MS质谱分析仪鉴定,采用改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,PCR法检测B类酶基因(blaNDM、blaIMP和blaVIM)和D类酶基因(blaOXA-23、blaOXA-24、blaOXA-51和blaOXA-58)并测序比对。采用MALDI-TOF分析菌株同源性,并分析患者的临床资料及感染相关信息。结果 血流感染的CRAB绝大多数对常用抗生素耐药。27株CRAB改良Hodge试验均阳性。所有CRAB均未检测到B类酶基因(blaNDM、blaIMP和blaVIM);25株CRAB同时检测到blaOXA-23和blaOXA-51;另2株CRAB则为blaOXA-58阳性。采用Vitek-MS进行同源性分析,细菌分成3大簇(Ⅰ型13株、Ⅱ型12株、Ⅲ型2株)。85.2%(25/27)患者来自重症监护病房或专科的监护病床,原发感染灶以肺部炎症最常见(11例)。所有的患者在血培养出CRAB前的30d内均有抗菌药物使用史,使用频率较高的抗菌药物有：碳青霉烯类、氟喹诺酮类、头霉素类。15例CRAB血流感染患者死亡。结论 厦门地区的CRAB以D类产碳青霉烯酶OXA-23和OXA-51最为多见。CRAB血流感染的原发感染多为肺部炎症。     

院内多重耐药鲍曼不动杆菌分子流行病学特征研究

目的 探讨某三级医院4年间多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)的分子流行病学特征。方法 对2013-2016年4年间某院临床筛选出的51株MDRAB用PCR法检测碳青霉烯酶基因, 多位点序列分型(MLST)鉴定菌株之间的亲缘关系。结果 51株MDRAB 100%都携带blaOXA-51型碳青霉烯酶基因，94.12%携带blaOXA-23型碳青霉烯酶基因。MLST分析发现有3种已报道的STs，依次为ST191(52.94%)、ST208(31.37%)和ST136(15.69%)，它们都属于克隆复合体CC92。其中4年间ST208在医院内持续性的播散，ST191和ST136在不同时间段间断性的播散。结论 该院各时间段分离的MDRAB都发生过相同ST克隆株的暴发流行，警示医院应加强预防院内感染暴发。     

Molecular epidemiology and mechanisms of rifampicin resistance in Acinetobacter baumannii isolates from Italy

Use of rifampicin (RIF) in combination with colistin (COL) has been proposed for the treatment of multidrug-resistant Acinetobacter baumannii infections owing to in vitro synergism. The aim of the present study was to evaluate the molecular epidemiology and mechanisms of RIF resistance in 57 clinical isolates of A. baumannii in two tertiary care hospitals in Naples (Italy) from 2006 to 2010. Amongst the collection, 36 isolates showed high RIF minimum inhibitory concentrations (MICs) (256 mg/L to ≥512 mg/L), 16 showed intermediate MICs (8-16 mg/L) and 5 had low MICs (4 mg/L). Of the 36 isolates with elevated RIF MICs, 35 were assigned to sequence type ST2 and 1 to ST78. Amongst the 57 isolates, 35 carried at least one mutation in rpoB, including H535L in 9 isolates and double mutations D525N and P544L in 7 isolates, whilst 22 showed no rpoB mutations. Treatment with the efflux pump inhibitor phenyl-arginine-β-naphthylamide (PAβN) of resistant isolates with no mutations in rpoB and different RIF MICs reduced the MIC by >10-fold and restored the synergism between RIF and COL in time-kill studies, whilst it had no effect on strains carrying rpoB mutations. In conclusion, the emergence of elevated RIF MICs in A. baumannii isolates from our geographical area was mostly caused by mutations in rpoB; low to intermediate RIF MICs were also caused by altered membrane permeability to the drug. The phenomenon was contributed by the selection of two prevalent clones both assigned to ST2 genotype. These data may have implications for the correct identification of cases with A. baumannii infection that would not benefit from addition of RIF to COL.     

鲍曼不动杆菌连续12年的感染分布及耐药性动态变迁

目的了解本院鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药性变迁情况。方法回顾性分析1999年1月至2010年12月本院临床标本中分离的鲍曼不动杆菌的临床感染特点及其药敏结果;用API鉴定系统及VITEK2系统进行细菌鉴定;用K-B纸片扩散法进行药敏试验;用WHONET5.4软件分析鲍曼不动杆菌的耐药性。结果鲍曼不动杆菌的临床分离率及对临床常用的19种抗菌药物耐药率,总体呈上升趋势;其感染主要发生在重症监护病房(ICU)和呼吸内科;鲍曼不动杆菌的多重耐药和泛耐药也同样主要分布在这2个病区;检出菌株数最多的标本是痰;年龄越大检出率越高。结论鲍曼不动杆菌的耐药形势严峻,其分离率和耐药率呈逐年上升趋势,其多重耐药和泛耐药比例明显增加。     

临床分离鲍曼不动杆菌耐药性及qnr基因检测

目的了解临床分离鲍曼不动杆菌中qnr基因和ESBLs基因的分布及其耐药特征。方法采用PCR法对115株鲍曼不动杆菌进行qnrA、qnrB、qnrS基因筛查,并用PCR法检测qnr阳性菌株SHV、TEM、CTX-M-14及CTX-M-3型ESBLs基因;用琼脂对倍稀释法测定15种抗菌药物对qnr阳性株的MIC值。结果115株鲍曼不动杆菌中,2株(1.74%)细菌检出qnrB基因;qnr阳性菌株同时检出SHV、CTX-M-14、TEM、CTX-M-3型ESBLs基因。1株qnr阳性菌株对4种喹诺酮类耐药,1株对左氧氟沙星及莫西沙星中介,对环丙沙星和洛美沙星耐药;2株阳性菌除对亚胺培南和头孢哌酮/舒巴坦敏感外,对其他的β-内酰胺类抗菌药物均耐药。结论临床分离鲍曼不动杆菌中存在qnrB基因,qnr阳性株同时含有ESBLs基因,且呈多重耐药,临床应加强监测。     

2015—2017年某综合医院鲍曼不动杆菌耐药性监测

目的对某综合医院2015—2017年鲍曼不动杆菌分布及耐药性变化趋势进行分析,为临床合理用药提供参考依据。方法收集某医院2015—2017年临床标本中所分离的鲍曼不动杆菌,对不同时间段、不同病区来源鲍曼不动杆菌的耐药情况进行统计分析。结果共分离出鲍曼不动杆菌232株,分离率从2015年10.4%上升到2017年13.0%。标本来源以痰液最多,占76.3%;儿科、ICU、神经外科及呼吸内科是感染的高发病区。不同时间段分离鲍曼不动杆菌对抗菌药物耐药性具有一定波动,2016年的耐药性最低,2017年的耐药率最高。2017年鲍曼不动杆菌对头孢曲松、头孢他啶、氨苄西林/舒巴坦、头孢吡肟、亚胺培南的耐药率较2015年有增高趋势;左氧氟沙星、环丙沙星、妥布霉素和庆大霉素的耐药率保持稳定;复方磺胺甲噁唑的耐药率呈现下降趋势。来源于ICU病区鲍曼不动杆菌对抗菌药物的耐药性最为严重,神经外科及呼吸科病区耐药性次之,儿科病区耐药性最低。结论三年间该医院鲍曼不动杆菌分离率逐年增加,鲍曼不动杆菌对部分抗菌药物耐药性呈上升趋势,不同病区分离鲍曼不动杆菌对抗菌药物的耐药性具有差异,临床应及时进行细菌培养,根据病原菌...     

ICU痰标本分离鲍曼氏不动杆菌的药敏分析

目的通过对重症监护室（ICU）送检的痰标本中分离培养出的鲍曼氏不动杆菌的药敏结果进行分析，指导临床用药。方法对2007年1月至2008年12月间从ICU送检的痰标本分离培养出112株鲍曼氏不动杆菌的药敏结果进行分析。结果ICU病区的鲍曼氏不动杆菌的耐药性很高，它的耐药性比同期全院感染的鲍曼氏不动杆菌明显增高。从ICU痰标本分离出的鲍曼氏不动杆菌比较敏感的抗生素是美洛配能（85．7％）和亚胺培南（83．9％），比较耐药是复方新诺明（91．3％）。结论鲍曼氏不动杆菌是ICU痰标本中分离率最高的一种细菌，它的耐药性较为严重，应引起重视。     

鲍曼不动杆菌的临床调查

目的　了解鲍曼不动杆菌在医院的分布 ,动态观察其耐药性发展情况 ,为临床合理应用抗生素提供依据。方法　用法国生物梅里埃公司的API及VITEK2鉴定系统对临床分离菌株进行鉴定 ,用K- B纸片扩散法进行药敏试验 ,用WHONET5软件对药敏结果进行统计学分析。结果　鲍曼不动杆菌对所监测的 11种抗生素均有不同程度的耐药 ,动态观察其耐药率有逐渐增高的趋势 ,尤以 2 0 0 3年增高最为明显 ,重症监护室 (ICU)的耐药率明显高于非ICU。结论　多重耐药的鲍曼不动杆菌感染在临床上呈上升趋势 ,尤其在ICU ,使临床医生对鲍曼不动杆菌感染的治疗越来越棘手 ,因此对鲍曼不动杆菌进行规范的连续的耐药监测 ,及时发现耐药菌株 ,对临床调整治疗方案、预防医院感染的发生是十分重要的。     

鲍氏不动杆菌耐药基因的定位研究

目的分析鲍氏不动杆菌的质粒谱和耐药谱,找出它们的耐药基因位点。方法K-B法检测35株鲍氏不动杆菌对21种抗生素的药敏情况,采用经典的碱裂解法和SDS裂解法抽提质粒,高温高浓度SDS双重处理交替培养法和SDS法消除质粒。结果35株鲍氏不动杆菌对常用的抗生素大多耐药,它们具有5种质粒谱,其中大多数为型。质粒消除后仅有7株菌对若干种抗生素敏感性得到恢复,其余无变化。结论本地区的鲍氏不动杆菌的耐药基因大多不在质粒上。     

Interspecies DNA acquisition by a naturally competent Acinetobacter baumannii strain

The human pathogen Acinetobacter baumannii possesses high genetic plasticity and frequently acquires antimicrobial resistance genes. Here we investigated the role of natural transformation in these processes. Genomic DNA from different sources, including from carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae strains, was mixed with A. baumannii A118 cells. Selected transformants were analysed by whole-genome sequencing. In addition, bioinformatics analyses and in silico gene flow prediction were also performed to support the experimental results. Transformant strains included some that became resistant to carbapenems or changed their antimicrobial susceptibility profile. Foreign DNA acquisition was confirmed by whole-genome analysis. The acquired DNA most frequently identified corresponded to mobile genetic elements, antimicrobial resistance genes and operons involved in metabolism. Bioinformatics analyses and in silico gene flow prediction showed continued exchange of genetic material between A. baumannii and K. pneumoniae when they share the same habitat. Natural transformation plays an important role in the plasticity of A. baumannii and concomitantly in the emergence of multidrug-resistant strains.     

3株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌临床株耐药机制的研究

目的 研究鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）对碳青霉烯耐药的分子机制。方法 采用琼脂纸片扩散法（KB法）及微量肉汤法筛选出3株对碳青霉烯耐药的鲍曼不动杆菌临床株，PCR扩增blaox-23基因和测序、提取外膜蛋白及进行聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）。结果 3株耐碳青霉烯的鲍曼不动杆菌具有多重耐药性；耐药基因PCR扩增和测序证实3株耐药菌均有blaOX-23 基因；其中1株耐药菌AB173的外膜蛋白电泳条带在28．8ku处出现明显缺失，其余2株耐药菌在该条带处与敏感菌相比较无明显差异。结论 本次试验中对碳青霉烯耐药的鲍曼不动杆菌全部含有blaoxhm基因，其中一株耐药菌还出现了外膜蛋白孔道的缺失可能与其多重耐药性有关。     

鲍曼不动杆菌的临床分离及其耐药性分析

目的 分析鲍曼不动杆菌（Ab）对抗菌药物的耐药性,以指导临床医师合理用药. 方法 应用法国生物-梅里埃ATB Expression型全自动鉴定等系统分析我院2009年1月1日至2010年2月28日住院患者分离出的56株Ab,对其分离率,耐药性进行分析. 结果 总分离率分别为：2009年1～4月1.25%（9/720）;2009年5～10月2.07%（15/726）;2009年11月至2010年2月4.34%（32/738）.其中重症监护室在各病区占的比例较高,百分比为53.6%,该菌在临床各种标本中的分布情况以百分比计其中痰标本高达87.5%. 结论 Ab目前对多黏菌素E无耐药,对亚胺培南、美罗培南敏感,对其他抗菌药物已高度耐药;重视细菌培养、合理使用抗菌药物有利于控制耐药菌的产生.     

鲍曼不动杆菌耐药表型与外排泵基因表达水平的研究

目的 探讨鲍曼不动杆菌临床分离株对常用抗菌药物的耐药性及与外排泵adeA基因表达水平之间的关系.方法 琼脂二倍稀释法检测鲍曼不动杆菌临床分离株对17种常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);PCR法扩增外排泵编码基因adeA:实时荧光定量RT-PCR(Real Time Fluorescent Quantitative RT-PCR)法检测adeA基因的mRNA表达水平.结果 药敏结果显示86株鲍曼不动杆菌对多粘菌素B全部敏感(100%),其次是美罗培南(73.2%)、亚胺培南(70.9%).耐药率最高的是庆大霉素(84.9%),其次为美罗西林(83.7%)和环丙沙星(79.1%).55株菌为多重耐药株(64%),其中5株(5/86)对多粘菌素B外的所有抗菌药物耐药(5.8%).adeA的检出阳性率为84.9%(73/86),Real Time RT-PCR结果显示多重耐药菌株adeA基因的mRNA相对表达量均高于敏感菌株,其中3株相对表达量为敏感菌株平均表达水平的30倍以上.结论 鲍曼不动杆菌临床分离株耐药情况严重,其主动外排系统adeA基因表达增强在多重耐药性形成中起重要作用.     

临床分离鲍曼不动杆菌药物外排泵AbeM的基因克隆及特征

目的 探讨临床分离鲍曼不动杆菌(acinetobacter baumannii,AB)耐药的分子机制.方法 以临床分离AB35、AB36染色体DNA为模板扩增abeM耐药基因;对abeM基因扩增产物进行DNA序列测定及同源性分析,并将转化子进行药敏测试.结果 AB35与AB36均呈多重耐药.abeM基因扩增产物与已报道的aheM基因核苷酸序列同源性分别达99%和98%.AB35的abeM结构基因推导的氨基酸序列发生了3个氨基酸残基变异,AB36的2个氨基酸残基发生了变异;含有AB36的abcM基因的转化子具有更广和更强的耐药图谱.两种转化子的耐药性均能被药物外排泵抑制剂羰基氰氯苯腙(CX2EP)和维拉帕米逆转.结论 AB药物外排蛋白abeM中氨基酸残基Va152、Gin203及Ser256对多重耐药强度具有重要作用,药物外排泵抑制剂可有效抑制AbeM蛋白的耐药活性.     

鲍曼不动杆菌的耐药性分析

目的了解鲍曼不动杆菌的分布及耐药情况，为临床合理使用抗生素提供依据。方法细菌鉴定采用APIStaph和TH-168鉴定编码管，K—B法进行药敏试验。结果169例鲍曼不动杆菌对10种抗生素的耐药率为：亚胺培南（3％）、头孢哌酮舒巴坦（5％）、氨苄西林舒巴坦（20％）、阿米卡星（35％）、环丙沙星（40％）、头孢他啶（42％）、庆大霉素（52％）、哌拉西林（56％）、头孢哌酮（65％）、氨苄西林（88％）。结论加强对鲍曼不动杆菌的耐药性监测，根据药敏结果结合临床合理使用抗生素。     

鲍曼不动杆菌生物膜与耐药性的研究进展

鲍曼不动杆菌为革兰阴性杆菌,是导致医院感染的常见条件致病菌之一。由于其易产生耐药性及植入性医疗操作的增加,鲍曼不动杆菌生物膜导致的院内感染成为临床医师的极大挑战。因此,了解鲍曼不动杆菌的耐药机制具有重要的意义,分析其生物膜对耐药性的影响及其机制有助于开发新的联合治疗方案。此文从细菌生物膜的角度归纳鲍曼不动杆菌的耐药机制研究进展,讨论鲍曼不动杆菌生物膜的形成过程、调节因素以及对耐药性的影响,概述了亚致死剂量抗生素对鲍曼不动杆菌耐药形成的影响,为针对鲍曼不动杆菌生物膜所致感染制定适宜的治疗方案和防控耐药菌株传播提供参考。     

鲍氏不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药机制的研究进展

鲍氏不动杆菌是一种重要的条件致病菌,其对碳青霉烯类的耐药率有不断上升的趋势.本文从碳青霉烯酶的产生、外膜通透性降低、青霉素结合蛋白改变及主动外排泵等方面就鲍氏不动杆菌对碳青霉烯类耐药机制的研究进展进行综述.     

Molecular characterisation of multiple drug-resistant Acinetobacter baumannii isolates in southern Taiwan

The purpose of this study was to develop a multiplex polymerase chain reaction (mt-PCR) assay for synchronous detection of carbapenem resistance genes and/or pandrug resistance genes in clinical isolates of multidrug-resistant Acinetobacter baumannii (MDR-AB) and to investigate the association between the genetic make-up and a drug-resistant pattern. In total, 213 MDR-AB isolates were collected. All clinical isolates underwent antimicrobial susceptibility testing and were analysed for the presence of oxacillinase genes (bla_OXA-23, bla_OXA-24, bla_OXA-51-like and bla_OXA-58), class A and C β-lactamase genes (bla_TEM-1 and bla_AmpC, respectively), and an integron-associated antibiotic resistance gene (int1) by an in-house-designed mt-PCR assay. Of the 213 isolates, 73.87% harboured both bla_TEM-1 and bla_AmpC and 83.92% carried at least three oxacillinase genes. Moreover, 64.82% of the isolates were significant in that they had two β-lactamase genes and three oxacillinase genes (P < 0.001), indicating the complexity of the genetic make-up of carbapenem-resistant A. baumannii. The bla_OXA-51-like allele was detected in the majority of these A. baumannii isolates (97.49%), whereas bla_OXA-23 was rarely prevalent in these isolates. In multivariate logistic regression, the presence of bla_OXA-23 and bla_TEM-1 had a statistically significant association with imipenem resistance [bla_OXA-23, P = 0.004, odds ratio (OR) = 10.52, 95% confidence interval (CI) 2.12–52.17; bla_TEM-1, P = 0.005, OR = 6.14, 95% CI 1.74–21.62]. These results suggest that detecting bla_OXA-23 and bla_TEM-1 genes could be used to predict imipenem resistance in MDR-AB isolates. A mt-PCR for detecting carbapenem resistance genes and pandrug resistance genes of A. baumannii isolates was developed to provide an assay to quickly screen for potential imipenem-resistant A. baumannii in the clinic.