活化蛋白C经胞外信号调节激酶途径抑制肿瘤坏死因子-α介导的炎症反应

目的观察活化蛋白C(APC)能否经胞外信号调节激酶(ERK)途径抑制肿瘤坏死因子-α(TNF-α)介导的炎症反应。方法分离培养并分成3组:正常对照组、TNF-α组、TNF-α+rhAPC组人脐静脉内皮细胞。分别用ELISA法检测细胞上清液中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)、E-选择素(E-selectin)浓度;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)与western bloting技术,检测人脐静脉内皮细胞ERKmRNA、磷酸化ERK蛋白的表达。结果 TNF-α组,细胞上清液中ICAM-1、VCAM-1、E-selectin的浓度较正常对照组显著升高(均P<0.05)。TNF-α+rhAPC组,细胞上清液中ICAM-1、VCAM-1、E-selectin的浓度较TNF-α组显著降低(均P<0.05)。TNF-α组,人脐静脉内皮细胞ERK mRNA、磷酸化蛋白表达水平较正常对照组均显著升高(均P<0.05)。TNF-α+rhAPC组,ERK mRNA、磷酸化蛋白表达水平较TNF-α组均显著降低(均P<0.05)。结论活化蛋白C通过抑制黏附分子的产生来调节TNF-α介导的炎症反应,其作用机制之一可能是通过ERK途径来实现。     

新型冠状病毒非结构蛋白NSP13通过调控IκBα蛋白降解抑制NF-κB信号通路

目的 研究新型冠状病毒非结构蛋白13(NSP13)调控NF-κB信号通路的作用机制。方法 利用GV367-NSP13-FLAG慢病毒感染的方法制备高表达NSP13的A549细胞（A549-NSP13）和A549对照组,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和ELISA检测NF-κB下游细胞因子白细胞介素6(IL-6)和趋化因子5(CCL-5)表达水平;Western印迹法检测NF-κB信号通路P65、磷酸化P65和NF-κB抑制因子α(IκBα)蛋白表达。放线菌酮10 mg·L-1处理细胞0,15,30,45,90和120 min,Western印迹法检测IκBα蛋白半衰期。结果 与A549对照组相比,A549-NSP13细胞检测到FLAG标签蛋白条带,且NSP13 mRNA表达显著上调（P<0.01）,表明A549-NSP13细胞系构建成功。与A549对照组相比,A549-NSP13细胞IL-6 mRNA和蛋白表达水平（P<0.01）及CCL-5 mRNA和蛋白表达水平（P<0.05,P<0.01）均显著降低;磷酸化P65蛋白表达下降（P<0.01）,而...     

核因子-κB的活化及其在急性肺损伤中的作用机制

核转录因子-κB(NF-κB)能与多种基因启动子和增强子特定的κB序列(5′-GGG ACT TTC-3′)结合，参与这些基因特别是机体防御反应有关的即早基因，如细胞因子、粘附分子、炎症介质等的表达和调控，参与机体急性炎症反应的发生与发展，在疾病演进过程中起着重要作用。NF-κB的激活与急性肺损伤(ALI)关系密切，成为近年来研究的热点，调控NF-κB成为治疗ALI一条新的思路和重要的治疗手段。     

DATS通过NF-κB抑制LPS诱导小鼠肺泡巨噬细胞促炎细胞因子表达

目的探讨二烯丙基三硫(DATS)抑制脂多糖(LPS)诱导小鼠肺泡巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-1β表达的信号转导机制。方法体外培养MH-S细胞,用DATS和(或)LPS进行干预。反转录PCR检测细胞中TNF-α、IL-1β mRNA表达,电泳迁移率改变分析(EMSA)检测细胞核因子-κB(NF-κB)活性,Western blot检测细胞磷酸化(p-IκB)及非磷酸化IκB的表达。结果LPS刺激MH-S细胞可导致TNF-α、IL-1β mRNA、p-IκB表达增加及NF-κB活性升高。用DATS(0.1、0.5、2.5、5.0mg.L-1)预处理细胞30min后再给予LPS刺激,可使TNF-α、IL-1β mRNA表达降低,并呈剂量依赖性;升高的NF-κB活性及p-IκB表达均显不同程度的抑制。单独DATS对TNF-α、IL-1β mRNA表达及NF-κB活性无影响。结论DATS可通过抑制IκB磷酸化及NF-κB活化,进而下调LPS诱导小鼠肺泡巨噬细胞TNF-α、IL-1β mRNA表达。     

NF-κB通过TRPM7通道蛋白调控心脏纤维化的机制研究

探索NF-κB和TRPM7之间的相互关系,及其在心脏纤维化过程中的具体调控机制。本研究从细胞和动物层面分别构建了纤维化模型(TGF-β处理MEF细胞、ISO处理小鼠),并利用siRNA干扰和黄芪甲苷靶向抑制TRPM7,通过RT-qPCR和Western Blot分别检测纤维化因子(MMP9和α-SMA)以及TRPM7在mRNA和蛋白水平的表达。同时采用ELISA法测定细胞上清、小鼠和心衰患者血清中的NF-κB的浓度。进一步采用生物信息学方法分析TRPM7启动子区域转录调控信息,预测该区域与NF-κB信号通路的相关性。无论在细胞还是动物模型中,与对照组相比,纤维化组TRPM7的表达显著增加(P<0.05),NF-κB的浓度也显著升高(P<0.05),当TRPM7的表达被抑制后,心脏纤维化程度得到明显的缓解。生物信息学分析表明NF-κB的主要组分NF-κB p65可能通过与TRPM7启动子特定区域结合从而调节TRPM7的表达,最终起到调控心脏纤维化的作用。TRPM7通道蛋白在心脏纤维化过程中发挥着关键作用,NF-κB的上调与纤维化因子的激活关系密切,NF-κB可能是TRPM7通...     

红霉素抑制人工关节磨屑诱导的外周血单核细胞NF-κB的活化

目的 探索红霉素(EM)对人工关节磨屑诱导的外周血单核细胞抑制性κB(IκBa)降解、核因子κB(NFκB)活化的影响.方法 采集30例人体外周血,分离单核细胞(MO),每例标本分成6组,A组:仅MO;B组:M0 超高分子聚乙烯微粒(UHMWPE);C组:MO UHMWPE 帕米磷酸钠(10μg/ml);D组:MO UHMWPE EM(5μg/ml);E组:MO UHMWPE EM(10μg/ml);F组:MO UHMWPE EM(25μg/ml).培养48 h后,采用Western印迹法检测IκBa蛋白降解情况,电泳迁移率分析检测NF-κB活性的变化.结果 A、C、D、E、F组NF-κB出活性明显低于B组(P<0.01),同时与A、C、D、E、F组相比较,B组IκBa蛋白降解明显增强.结论 EM能有效地抑制由于UHMWPE刺激MO所致的IκBa降解和NF-κB活化.EM的效果与帕米磷酸钠相似,能防治人工关节置换术后由微粒诱导的NF-κB活化引发的骨溶解,有望成为将来防治人工关节无菌性松动的一种很有潜力的药物.     

NF-κB在急性脊髓损伤中的研究现状及前景

核转录因子-κB是一种重要的转录因子,在急性脊髓损伤(Acute spinal cord injury,ASCI)后早期即可高表达,在ASCI后所出现的炎性反应、免疫应答、局部缺血再灌注、游离钙释放、过氧化基团异常变化及细胞凋亡等起着重要作用.同时,NF-κB又具有神经保护作用.因此,如何有效抑制NF-κB的损伤作用,充分发挥其保护作用,在治疗ASCI中具有重要意义.     

阿魏酸钠对哮喘大鼠肺组织核因子-κB、抑制蛋白α和ICAM-1表达的影响

目的观察哮喘大鼠气道炎症、气道反应性及肺组织中核因子-κB(NF-κB)、抑制蛋白α(IκBα)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达,探讨用阿魏酸钠干预后对其的影响及作用机制。方法18只健康雄性SPF级Wistar大鼠随机分为哮喘组(A组),阿魏酸钠干预组(Fe组)和正常对照组(C组),每组6只。A组和Fe组用卵清蛋白(OVA)致敏激发复制哮喘模型,Fe组每次激发前用阿魏酸钠干预,C组用生理盐水作为对照。测定哮喘大鼠的气道高反应性及支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞数量,免疫组化方法观察NF-κB、IκBα和ICAM-1在哮喘大鼠肺组织的表达。结果阿魏酸钠能降低哮喘大鼠的气道高反应,减少气道嗜酸性粒细胞的募集。A组支气管肺组织NF-κB[(38.03±2.89)%]和ICAM-1[(14.59±0.56)%]的蛋白表达显著高于对照C组[分别为(5.26±0.41)%,(1.89±0.26)%],IκBα蛋白的表达[(1.58±0.34)%]低于C组[(15.49±1.32)%],有统计学差异(P<0.01)。Fe组NF-κB[(18.65±2.25)%]和ICAM-1[(6.75±0.61)%]的蛋白表达与A组相比显著降低(P<0.01),IκBα[(5.58±0.27)%]则增高(P<0.01)。哮喘大鼠肺组织NF-κB与ICAM-1蛋白表达呈正相关(r=0.878,P=0.022),与IκBα呈负相关(r=-0.824,P=0.044)。结论阿魏酸钠能够抑制哮喘大鼠肺组织IκBα的降解和NF-κB的激活,进而抑制ICAM-1的表达,最终抑制气道炎症和气道高反应性。     

类固醇对鼻息肉中核因子-κB活化的影响

目的研究糖皮质类固醇激素对鼻息肉中核因子-κB(NF-κB)活化的影响。方法收集2008年2月～2010年9月期间收住本院的准备行鼻息肉切除手术患者的息肉组织标本45例。激素治疗前取鼻腔内的息肉组织作为对照组,布地奈德喷雾剂(BUD)喷鼻,每次2喷,每日2次,治疗7天后行手术切除术,选取切取治疗前钳取组织附近的息肉组织作为治疗组。应用ELISA的方法检测治疗前鼻息肉和使用布地奈德喷鼻剂治疗过后的鼻息肉中的NF-κB的活化情况。结果使用布地奈德喷鼻剂治疗过后的鼻息肉组织匀浆NF-κB活化与治疗前比较明显降低(P<0.05)。结论糖皮质类固醇可抑制鼻息肉组织中NF-κB的活化。     

NF-κB的研究进展

核因子κB(NF-κB)是一种广泛存在于真核细胞内的基因多向性转录因子,属于Rel家族,于1986年首次在小鼠B淋巴细胞的核抽提物中发现,因能与免疫球蛋白κ链基因的     

西瑞香素通过NF-κB途径抑制RANKL诱导的破骨细胞分化

目的:研究西瑞香素作为一种具有抗炎抗氧化作用的中药成分对破骨细胞分化的影响及机制.方法:从BALB/c小鼠骨髓中分离获得骨髓单核细胞,使用GST-rRANKL诱导形成破骨细胞并分为3组:对照组、RANKL诱导组和RANKL+西瑞香素组,采用TRAcP染色评估西瑞香素对破骨细胞成熟与融合的影响,用Western Blot...     

中药调控NF-κB活性的研究进展

核因子-κB (nuclear factor-κB, NF-κB) 是真核细胞内广泛存在的一种转录因子,在免疫、炎症、肿瘤等众多疾病的发生发展中起着重要作用.近年来大量研究发现很多对NF-κB相关疾病具有显著疗效的中药都表现出对NF-κB的活性抑制作用,通过在细胞及分子水平上对中药的作用机理分析表明,中药中确实存在着一些活性成分,能够在细胞或分子水平上调节NF-κB的活性,发挥治疗的作用.因此,提示中药可作为筛选NF-κB活性抑制药物的天然资源库,从中筛选NF-κB活性抑制药物是可行的.本文对具有NF-κB活性抑制作用的中药提取物、单体中药、单味中药和中药复方做了综述.     

中药调控核因子-κB（NF-κB）信号通路治疗银屑病的研究进展

银屑病是一种慢性自身免疫性皮肤病,其核心是免疫反应失调和角质形成细胞增殖异常。核因子-κB（NF-κB）在银屑病中是一种关键的调节信号通路,通过抑制NF-κB信号途径或下游转录因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）或白细胞介素-17（IL-17）/白细胞介素-23（IL-23）成为未来银屑病治疗的一个新方向。中药针对NF-κB信号通路在银屑病治疗中具有疗效确切、手段多样、不良反应小等优势。总结了中药调控丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）/NF-κB、NF-κB/信号传导和转录激活因子3（STAT3）、Toll样受体4（TLR4）/NF-κB信号通路治疗银屑病的研究进展,以期为中药治疗银屑病提供更新策略。     

与A20结合的核因子-κB抑制蛋白1的研究进展

与A20结合的核因子κB抑制蛋白1（A20 binding inhibitor of NF-κB activation,ABIN1）是近年来研究发现的一个新泛素结合蛋白。最初的研究表明,ABIN1通过结合锌指结构蛋白A20在NF-κB信号通路中发挥重要的调节作用。目前发现,ABIN1在过表达的条件下能抑制肿瘤坏死因子、白细胞介素1、脂多糖、表皮生长因子等诱导的NF-κB的活性,从而发挥抗炎和免疫调节作用。因此,以ABIN1为新靶点调节NF-κB活性的研究日益受到关注。本文就ABIN1蛋白结构、功能及其研究进展做一综述。     

核因子κB的分子生物学特性及其在炎症反应中的作用

核因子κB是一类重要的转录调控因子,它在炎症与免疫反应中发挥重要作用.一般情况下,核因子κB与其蛋白抑制物IκB结合成非活性状态存在于细胞浆中.被刺激物激活后,核因子κB转入核内,诱导基因转录,并且通过反馈环路导致炎症过程的放大和持续.因此,抑制核因子κB的活性,在炎症的治疗中具有显著的应用价值.     

Sandwich ELISA法测定NF-κB

目的　建立一种操作简便、安全的核因子 κB(NF κB)活性检测方法。方法　采用夹心酶联免疫吸附测试法(SandwichELISA) ,酶标仪 ,验证NF κB活化的抑制剂反义白介素 1受体相关激酶 2 (IRAK 2 )寡核苷酸和N α Tosyl L lysinechloromethylketone(TLCK)对NF κB活性的抑制作用。结果　SandwichELISA测定结果表明 ,与对照组相比 ,用不同浓度反义IRAK 2寡核苷酸 (1,2 ,3,4μg )或TLCK(1,10 ,10 0 μmol·L-1)处理细胞后 ,NF κB活化受到不同程度的抑制 ,表现为吸光度值下降的幅度不同。结论　Sand wichELISA法可用于NF κB活性检测。     

NF-κB在炎症相关癌症中的双重作用

目前,癌症是全球第二大死亡人数最多的疾病。炎症反应是一个复杂的生理学过程,涉及到生物体中细胞以及分子层面的广泛变化。在组织修复,伤口愈合以及抵御外来病原体入侵的过程中,有序的炎症反应是机体免疫系统产生的正常防御反应,保证机体的健康。但当这种急性炎症持续较长时间且得不到有效控制时,就易发展成慢性炎症,从而促进许多疾病的发生,包括风湿性关节炎,心血管疾病,阿尔茨海默症和癌症等。越来越多的证据表明,炎症反应失调在癌症中起到关键作用,长期使用非甾体类抗炎药(Non-steroidal anti-inflammatory drugs,NSAIDs)可以降低多种癌症的发病率。文章重点综述了核因子-κB(Nuclear factor-kappa B,NF-κB)在炎癌中的复杂作用,包括NF-κB对炎症反应具有的正向和负向调节作用,以及它如何影响肿瘤的发生和发展。深度解析NF-κB在炎-癌转化中的作用对于现代肿瘤生物学来说是一个重要挑战。     

芦丁通过抑制 NF-κB信号通路缓解大鼠结肠炎的研究

目的探讨芦丁对右旋葡聚糖硫酸钠( DSS)诱导的大鼠溃疡性结肠炎( UC)的缓解作用以及对核因子 κB(NF-κB)信号通路的影响。方法 2020年 4—5月建立右旋葡聚糖硫酸钠( DSS)诱导的 UC模型。将大鼠分为对照组、模型组和芦丁组( 20、 40、80 mg/kg)。观察各组大鼠的疾病活动指数( DAI),比色法检测结肠组织髓过氧化物酶( MPO)活性, Elisa法检测大鼠结肠组织中的肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)和白细胞介素 -6(IL-6)水平,并采用蛋白质印迹法( western blotting)测定各组大鼠结肠组织的人磷酸化 IκB激酶 -α(p-IκBα)、 IκB激酶 -α(IκBα)以及核 p65蛋白表达。结果芦丁高、中、低剂量组的 DAI评分［(1.09±0.39)、(1.38±0.38)、(1.97±0.46)分］、 MPO活性［( 0.74±0.04)、(0.75±0.08)、(0.98±0.06)U/g］、 TNF-α水平［( 3.16±0.52)、(3.75±0.72)、(4.26±0.87)μg/L］和 IL-6水平［( 3.72±0.65)、(4.28±0.72)、(5.12±0.93)μg/L］均显著性低于模型组的( 2.98±0.57)分、(1.26±0.07)U/g、(5.19±0.93)μg/L、(6.54±0.85)μg/L(P<0.05)。机制研究显示芦丁可以有效下调 DSS诱导大鼠结肠组织的 p-IκBα和核 p65的水平的提高(P<0.05)。结论芦丁通过下调 NF-κB信号通路缓解右旋葡聚糖硫酸钠诱导的大鼠溃疡性结肠炎。     

丹参抑制牵张诱导的心肌细胞NF-κB激活的观察

目的:探讨丹参改善高血压及慢性心力衰竭等心血管疾病的药理机制.方法:用牵张刺激离体培养心肌细胞,造成心肌超负荷,并通过免疫组织化学方法观察丹参对牵张诱导的心肌细胞NF-κB激活的影响.结果:牵张心肌细胞10小时后,NF-κB被激活;丹参抑制牵张诱导的心肌细胞NF-κB的激活.结论:研究结果提示丹参通过抑制NF-κB信号传递系统的激活,引起细胞内有关分子表达调控机制改变,从而发挥其药理作用.     

罗格列酮对急性胰腺炎模型大鼠NF-κB与TNF-α表达的影响

目的 观察罗格列酮对大鼠急性胰腺炎（AP）的疗效和对核因子-κB（NF-κB）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响。方法 大鼠胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备AP模型,治疗组在造模前30 min股静脉注射罗格列酮6 mg&;#8226;kg^-1。观察胰腺组织病理学改变并评分,检测血清淀粉酶（AMY）和组织髓过氧化物酶（MPO）水平;免疫组化检测NF κB表达变化,逆转录聚合酶链反应（RT PCR）检测TNF-α mRNA的表达。结果 罗格列酮治疗组胰腺病理变化评分低于模型组,血清AMY和组织MPO水平亦低于模型组,NF-κB和TNF-α mRNA表达较模型组减弱（均P＜0.01）。结论 罗格列酮可缓解AP大鼠胰腺的损伤,其机制与抑制胰腺NF-κB和TNF-α表达有关。