侧脑室注射苯并[a]芘对大鼠脑组织病理学改变和学习记忆的影响

目的研究侧脑室注射苯并(a)芘(B[a]P)对大鼠学习记忆的影响及脑组织病理学的变化。方法分别以0.9%氯化钠注射液、5.0mmol/L B[a]P、10.0mmol/L B[a]P无菌溶液10μL给大鼠侧脑室注射染毒,于染毒结束8d后用Morris水迷宫、跳台和避暗试验等测定大鼠的学习记忆能力。处死后用苏木精-伊红(HE)染色观察大脑皮质和海马CA1区病理组织学的变化。结果染B[a]P组大鼠跳台、避暗实验潜伏期和空间探索试验中目标象限停滞时间较对照组显著缩短(P<0.05),错误次数显著增多(P<0.05),且有剂量反应关系,表明B[a]P可导致大鼠神经行为发生改变,学习记忆障碍。随着染B[a]P剂量增加,大鼠皮质和海马CA1区细胞连接松解,排列逐渐零乱,有环状带出现,细胞数目减少,细胞核、胞体变小。表明随着染B[a]P剂量的增加,大鼠皮质和海马CA1区神经细胞形态结构改变越明显。结论 B[a]P可致大鼠学习记忆发生障碍,且随染B[a]P剂量增加对大鼠造成的损伤越大,可为B[a]P神经毒性的研究提供良好的实验基础。     

慢性苯并[a]芘暴露对P53表达及大鼠神经细胞凋亡的影响

<正>苯并[a]芘(benzo[a]pyrene,B[a]P)作为一种重要的环境和职业性污染物,主要来源于煤和石油等矿物质燃料的不完全燃烧。B[a]P是由一个苯环和一个芘分子结合而成的多环芳烃类化合物,具有脂溶性,它的化学性质决定了B[a]P及其代谢产物可以通过血脑屏障并对脑组织产生损伤[1]。人群流行病学调查和动物实验均提示B[a]P暴露可以导致以学习记忆损伤为主要表现的神经退行性表现,并伴随有DNA     

苯并[a]芘和铅对小鼠的联合神经毒性及脑组织的影响

目的研究苯并[a]芘(benzo[a]pyrene BaP)、铅单独与联合作用对小鼠的神经毒性及小鼠脑组织热应激蛋白(HSPs)HSP 70、HSP 90β表达的影响。方法将80只昆明种小鼠随机分为10组，每组8只，既：空白对照组、溶剂对照组、低浓度铅染毒组、高浓度铅染毒组、低剂量BaP染毒组、高剂量BaP染毒组、低浓度铅 低剂量BaP染毒组、低浓度铅 高剂量BaP染毒组、高浓度铅 低剂量BaP联合染毒组和高浓度铅 高剂量BaP联合染毒组。低、高剂量BaP染毒分别为0．5和5mg／kg BaP的植物油溶剂每周4次腹腔注射，溶剂对照组用植物油作平行处理。低、高剂量的铅染毒分别为5．4和54mg／L醋酸铅饮水染毒。实验中观察动物一般情况及神经系统损伤表现，实验8周后取各组小鼠脑组织，称重并计算脑组织脏器系数。制作脑组织混合匀浆，western blot法检测HSP70、HSP90β水平。结果BaP与铅联合染毒可使小鼠脑组织脏器系数降低；HSP900β相对表达值与脑组织脏器系数量负相关。结论BaP与铅联合作用可明显损伤脑组织；HSP90β对上述损害起标志作用。     

铝和苯并[a]芘联合染毒对神经细胞凋亡的影响

目的通过研究铝和苯并[a]芘联合染毒对大鼠神经元细胞凋亡的影响,探索两种毒物共同作用下致神经细胞凋亡的联合类型。方法采用新生的SD大鼠进行原代神经元细胞培养,培养5 d后,选取生长良好的同批次细胞,分为对照组(DMSO+S9+maltol)、染苯并[a]芘组(10μmol/L B[a]P)、染铝组(50μmol/L Al(mal)3)和联合作用组(50μmol/L Al(mal)3+10μmol/L B[a]P)4组,继续培养72 h后电子显微镜观察不同实验组神经细胞凋亡形态学变化,AO-EB荧光染色法观察神经元细胞凋亡,流式细胞仪Annexin V-PI双染法定量检测神经元凋亡率的变化。结果透射电子显微镜和荧光倒置显微镜下观察,可以看到染苯并[a]芘组、染铝组神经元细胞出现核膜皱缩,胞质致密,核染色质边集等细胞凋亡的经典形态学变化;联合作用组出现了细胞核裂解甚至凋亡小体。细胞凋亡率测定结果显示,与对照组相比,染苯并[a]芘组早期凋亡率、晚期凋亡率、总凋亡率差异均无统计学意义(P0.05);染铝组,早期凋亡率、晚期凋亡率差异无统计学意义(P0.05),总凋亡率差异有统计学意义(P0.05);联合作用组各指标差异均有统计学意义(P0.05)。结论铝和苯并[a]芘联合染毒对神经细胞凋亡具有联合作用,作用类型为协同作用。     

苯并[a]芘损害神经元DNA的细胞学研究

目的研究苯并[a]芘（BaP）染毒对体外培养大鼠小脑粒细胞胞核DNA的损伤。方法取8日龄SD大鼠小脑粒细胞进行培养，并分（1）空白对照组；（2）溶剂对照组（等量DMSO平行处理）；（3）低浓度BaP染毒组（BaP 5μmol／L＋S9-mix）；（4）中浓度BaP染毒组（BaP 15 μtmol／L＋S9-mix）；（5）高浓度BaP染毒组（BaP 45 μmol／L＋S9-mix）。染毒90min，胰酶消化法收集标本。苔盼蓝染色法检测细胞存活率；SCGE法检测大鼠小脑粒细胞胞核DNA的损伤程度；TUNEL法检测大鼠小脑粒细胞胞核DNA的损伤率，并对细胞存活率与DNA损伤率进行相关分析。结果（1）染毒组与对照组以及各染毒组之间大鼠小脑粒细胞存活率差异均有显著性（P〈0．05～P〈0．0001）；（2）染毒组与对照组以及各染毒组之间大鼠小脑粒细胞胞核DNA损伤率差异均有非常显著性（P〈0．05～P〈0．0001）；（3）细胞存活率与DNA损伤率负相关（r=-0．9402，P〈0．01）；（4）高剂量染毒组与对照组之间大鼠小脑粒细胞胞核DNA损伤程度差异有显著性（P〈0．05）。结论BaP染毒可引起大鼠小脑粒细胞胞核DNA损伤，损伤程度随染毒剂量增加而加强。胞核DNA损伤是BaP引起体外神经元死亡的原因之一。     

苯并（a）芘对雄性小鼠生殖细胞的影响

目的 研究不同剂量的苯并（a）芘对小鼠睾丸细胞酶活力及其对生殖细胞DNA的影响。     

孕期暴露苯并[a]芘对子代大鼠认知功能和脑源性神经营养因子的影响

目的探讨大鼠孕期暴露苯并[a]芘(B[a]P)对子代认知功能和脑源性神经营养因子(BDNF)的影响。方法选取清洁级SD雌鼠40只,随机分为5组,每组8只,分别为空白组、橄榄油组(溶剂组)、低剂量组(25 mg/kg)、中剂量组(50 mg/kg)、高剂量组(100 mg/kg)。孕期第17天起用B[a]P腹腔注射染毒,每天1次,连续3 d。子鼠出生第1,4,7,14,33天断头处死,每组取6只处死并取大脑皮质,第33天处死前眼眶采血,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测子鼠血浆及大脑皮质中BDNF蛋白表达。采用实时聚合酶链反应(q PCR)检测大脑皮质BDNF m RNA的相对表达量。子鼠出生28 d起进行Morris水迷宫试验,检测子鼠空间学习记忆能力。结果定位导航实验中,与空白对照组相比,前3 d 25、50、100 mg/kg组的逃避潜伏期降低(P<0.05),后2 d 100mg/kg组逃避潜伏期明显降低(P<0.01);与橄榄油组对比,100 mg/kg组的逃避潜伏期降低(P<0.05)。空间探索实验显示,与空白对照组对比,100 mg/kg组的穿越平台数和目标象限停留时间明显降低(P<0.05),与溶剂组对比,25、50、100 mg/kg组,穿越平台数和目标象限停留时间明显降低(P<0.05)。ELISA和q PCR实验结果显示:与空白对照组和橄榄油组对比,B[a]P染毒组的大脑皮质BDNF蛋白和BDNF基因的表达水平下降(P<0.05),50、100mg/kg组与空白对照组、低剂量组相比,子鼠血浆中BDNF蛋白水平下降(P<0.05),B[a]P 25、50、100 mg/kg组与溶剂对照组相比,子鼠血浆中BDNF蛋白水平明显下降(P<0.05)。结论孕期B[a]P暴露可导致子鼠学习记忆功能降低,这可能与BDNF表达下降有关,血浆BDNF可作为B[a]P暴露的标记物。     

苯并[a]芘暴露引起小鼠脑内β淀粉样蛋白相关分泌酶及降解酶表达变化

目的探讨苯并[a]芘(benzo[a]pyrene, BaP)暴露后小鼠脑组织中β淀粉样蛋白(βamyloid, Aβ)生成相关分泌酶及降解酶的表达变化。方法 30只C57BL/6小鼠随机分为对照组和低、高剂量BaP染毒组,经腹腔注射分别给予溶剂玉米油和1.0和5.0 mg/kg·bw的BaP,1次/d,连续60 d。采用实时定量PCR法检测淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)、Aβ分泌酶和降解酶mRNA的表达;通过Western blot观察Aβ蛋白、Aβ分泌酶和降解酶的蛋白表达。本研究中涉及的Aβ分泌酶包括两个β分泌酶(β位点分泌酶1和2,Bace1/2)和γ分泌酶的4个亚基(Psen1、Nct、Aph1a和Pen2);Aβ降解酶包括胰岛素降解酶(IDE)和脑啡肽酶(NEP)。结果高剂量BaP染毒后APP的mRNA和Aβ蛋白水平明显增加,分别为对照组的1.61倍(P0.01)和1.33倍(P0.01)。Aβ分泌酶中的Bace1、Bace2和Nct的mRNA表达量明显上升,与对照组相比,低、高剂量组Bace1为1.57倍(P0.01)和1.50倍(P0.01);Bace2为1.39倍(P0.05)和2.32倍(P0.01);Nct为1.97倍(P0.05)和2.77倍(P0.01),两剂量组间差异有统计学意义(P0.05)。BaP暴露后Bace1和Psen1的蛋白表达都呈增加趋势,在BaP低、高剂量组中Bace1蛋白表达上调到对照组的1.82倍(P0.05)和2.09倍(P0.01);Psen1在低、高剂量BaP暴露后的表达量是对照组的1.64倍(P0.05)和1.24倍(P0.01)。Aβ降解酶IDE的mRNA和蛋白水平均没有明显变化;NEP的mRNA表达呈剂量依赖性的下降趋势,低和高剂量组中的表达量分别为对照组的57%(P0.01)和29%(P0.01),其蛋白水平也明显下调,低和高剂量组下降到对照组的43%(P0.01)和25%(P0.01),且两组间差异有统计学意义(P0.01)。结论 BaP暴露后小鼠脑内的Aβ及其分泌酶表达增加,同时Aβ降解酶表达水平下调,提示BaP暴露可能会干扰Aβ的生成和降解,从而可能对相关疾病如阿尔茨海默症的发生起促进作用。     

铝和苯并[a]芘联合染毒对神经细胞凋亡的影响北大核心CSCD

目的通过研究铝和苯并[a]芘联合染毒对大鼠神经元细胞凋亡的影响,探索两种毒物共同作用下致神经细胞凋亡的联合类型。方法采用新生的SD大鼠进行原代神经元细胞培养,培养5 d后,选取生长良好的同批次细胞,分为对照组(DMSO+S9+maltol)、染苯并[a]芘组(10μmol/L B[a]P)、染铝组(50μmol/L Al(mal)3)和联合作用组(50μmol/L Al(mal)3+10μmol/L B[a]P)4组,继续培养72 h后电子显微镜观察不同实验组神经细胞凋亡形态学变化,AO-EB荧光染色法观察神经元细胞凋亡,流式细胞仪Annexin V-PI双染法定量检测神经元凋亡率的变化。结果透射电子显微镜和荧光倒置显微镜下观察,可以看到染苯并[a]芘组、染铝组神经元细胞出现核膜皱缩,胞质致密,核染色质边集等细胞凋亡的经典形态学变化;联合作用组出现了细胞核裂解甚至凋亡小体。细胞凋亡率测定结果显示,与对照组相比,染苯并[a]芘组早期凋亡率、晚期凋亡率、总凋亡率差异均无统计学意义(P>0.05);染铝组,早期凋亡率、晚期凋亡率差异无统计学意义(P>0.05),总凋亡率差异有统计学意义(P<0.05);联合作用组各指标差异均有统计学意义(P<0.05)。结论铝和苯并[a]芘联合染毒对神经细胞凋亡具有联合作用,作用类型为协同作用。     

吸入苯暴露对小鼠中枢神经系统兴奋性及学习记忆能力的影响

本文采用GJ—8502型之光道小鼠活动计数仪及ZTC1型条件反射测试仪研究苯吸入暴露对小鼠中枢神经系统兴奋性及学习记忆能力的影响,苯暴露浓度分别为38.6、12.7、3.2和0 mg/m~3(实测值)。结果发现:连续30天苯吸入暴露,38.6mg/m~3的苯使小鼠中枢神经系统抑制,学习记忆能力     

职业接触苯并[a]芘对焦炉工人胆碱能系统及淋巴细胞凋亡率的影响

<正>苯并[a]芘具有明确的致癌性,近年来研究表明其具有神经毒性。Mendola等[1]研究发现环境污染物(包括苯并[a]芘)引起神经发育、认知和行为功能下降。焦化生产过程产生大量逸散物和煤焦油,其主要成分是多环芳烃类混合物(PAHs),PAHs与焦炉工肺癌之间存在因果关系,在PAHs职业暴露等级评定中以苯并[a]芘当量浓度来精确描述PAHs的接触特性。因此,检测作业环境中苯并[a]芘浓度可以代表焦炉作业环境中多环芳烃类混合物的外暴露程度。     

ALCAM基因敲除对苯并[a]芘恶性转化细胞THBEc1转录组的影响

目的 检测活化白细胞黏附分子(ALCAM)基因敲除后苯并[a]芘(BaP)恶性转化细胞THBEc1转录组的改变,探究ALCAM在BaP致癌中的作用,为进一步阐明BaP致癌机制提供线索.方法 选择两株ALCAM基因纯合敲除THBEc1细胞THBEc1-△ALCAM-c5和THBEc1-△ALCAM-c7及一株敲除对照细胞...     

苯并（a）芘对小鼠脾淋巴细胞钙稳态的影响

苯并（ａ）芘对小鼠脾淋巴细胞钙稳态的影响张海洲，张铣，薛彬苯并（ａ）芘（ＢａＰ）是广泛存在于环境中的污染物，不但具有致癌活性［１］，而且是一种免疫抑制剂。实验表明，无论是在体内还是在体外，Ｂａｐ对小鼠脾淋巴细胞的体液免疫功能和细胞免疫功能都有明显的抑...     

苯并[a]芘通过CXCL12/CXCR4轴影响早孕小鼠子宫内膜炎症反应CSCD

目的探讨CXCL12/CXCR4轴在苯并[a]芘(Benzo[a]pyrene,B[a]P)影响早孕小鼠胚胎着床过程中的作用及其机制。方法将8周龄昆明小鼠每晚按雌雄2∶1比例合笼,次晨将查得阴栓者记为孕第1天(D1),并随机分为对照组和B[a]P组。B[a]P组孕鼠每日晨称重后以0.1 ml/10 g动物体重灌胃给予0.2 mg/(kg·d)B[a]P,对照组则灌胃等体积玉米油。体外分离小鼠原代子宫内膜基质细胞,将其分为对照组、B[a]P组和rhCXCL12+BaP联合处理组。ELISA法检测小鼠血清CXCL12水平;qRT-PCR、Western blot和免疫组化法检测CXCL12、CXCR4的表达;qRT-PCR和Western blot检测炎症因子IL-1β、IL-10、NLRP3和TNF-α的表达;Western blot检测着床相关因子MUC1、MMP9和HOXa10的表达情况。结果与对照组相比,B[a]P暴露明显降低孕早期小鼠血清中CXCL12含量,同时下调小鼠子宫组织及基质细胞内CXCL12和CXCR4的表达,抑制炎症反应的发生,影响着床相关因子表达。上调小鼠原代子宫内膜基质细胞内CXCL12表达,可缓解B[a]P所导致的炎症抑制和着床相关因子表达异常。结论B[a]P可能通过下调CXCL12/CXCR4表达,抑制炎症反应,影响孕早期小鼠胚胎植入过程。     

小鼠苯并(a)芘的急性免疫毒性

<正> 苯并(a)芘(B(a)P),是煤焦油、煤烟及其它燃料不完全燃烧的产物,不仅污染了人类的生产、生活环境,给人类健康带来严重危害,而且具有致癌作用。关于B(a)P ip的免疫毒性,国内外未见报道。本文观察了B(a)P对小鼠体液免疫、细胞免疫及巨噬细胞功能的影响。 材料与方法 LACA佰♀健康小鼠,8～10周龄,体重22～25g,由北京医科大学实验动物部提供。实验分200,100,50 mg/kg三组,同时设溶剂对照组,染毒途径为一次ip。B(a)P,Sigma和Fluka公司生产。溶于玉米油或橄榄油,在磁力搅拌器上避光搅拌4～6h,使     

短期服用盐酸氟西汀对昆明小鼠焦虑样行为的影响

目的:盐酸氟西汀是当前一线抗抑郁药物,但是长期服用有副作用.本研究意在探讨短期服用盐酸氟西汀对小鼠焦虑样行为的影响.方法:将昆明小鼠分为实验组(灌胃Flu,20mg/kg)和对照组(灌胃CMC溶液),连续灌胃7d.后用开放场实验和十字高架迷宫实验对小鼠进行测试.结果:实验组小鼠进入开放场中心次数和中心运动距离均少于对照组.进入十字高架开放臂和开放臂停留时间也少于对照组.结论:短期服用盐酸氟西汀加重昆明小鼠焦虑样行为.     

油酸盐对苯并[A]芘酚葡萄糖醛酸化抑制的作用机理

利用肝脏灌流模型及肝脏微粒体对油酸影响羟基苯并[a]芘葡萄糖醛酸化的机理进行了研究,结果表明,低剂量的油酰辅酶A可非竞争性地抑制大鼠肝微粒体UDP-葡萄醛酰转移酶的活性,使3-羟基苯并芘葡萄糖醛酰化作用受抑制,牛血清白蛋白与Triton X-100可促进油酰辅酶A对转移酶的抑制作用。 600 μmol·L~(-1)的油酸灌流肝脏,可使肝脏中UDPGA,UDPG及ATP分别下降44％,49％及44％,因此高剂量的油酸亦可通过改变辅因子供应而抑制羟基苯并芘的葡萄糖醛酸化过程。 250μmol·L~(-1)的油酸灌流缺乏β-葡萄糖醛酸酶的C_3H/He小鼠肝脏,可使流出液中游离羟基苯并芘增加136％,而与葡萄糖醛酸结合的羟基苯并芘减少了32％,同时肝脏中与葡萄糖醛酸结合的羟基苯并芘减少64％,以油酸灌流具有高β-葡萄糖醛酸酶的DBA/2小鼠肝脏可见同样改变,在肝脏微粒体的实验中亦未见油酰辅酶A对苯并芘-0-葡萄糖醛酸的水解作用有何影响,据此,油酸对羟基苯并芘葡萄醛酸化状态的影响与β-葡萄糖醛酸酶无关。     

低浓度苯暴露对小鼠行为功能及外周血白细胞的影响

苯对人体健康的影响早已被重视,但过去仅注意苯对血液系统的影响。近年来始注意到苯对神经系统的影响。人长期接触低浓度的苯,可引起慢性中毒,对神经系统的影响主要表现有神经衰弱症候群;而慢性苯中毒动物可见萎糜、衰弱、食量减少、体重下降等。关于动物实验观察国内报道很少,国     

胰岛素对AD样小鼠学习记忆的影响及其机制

【摘要】目的 研究胰岛素对阿尔茨海默病（AD）样小鼠学习记忆能力的影响及其机制。方法 将21只小鼠随机分为对照(CON) 组、模型（链脲佐菌素,STZ）组和胰岛素治疗(INS) 组,每组7只,后2组小鼠脑室内注射STZ建立 AD模型,INS组小鼠皮下注射胰岛素持续30 d。Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,Western blotting检测Tau和神经丝（NFs）蛋白的磷酸化水平,荧光染料Fluoro-Jade B（FJB）标记退化神经元。结果 与CON组相比,STZ组小鼠平均逃避潜伏期和路径长度明显增加(P < 0.05)、穿越隐匿平台次数明显减少(P < 0.05),小鼠脑内Tau蛋白在Ser199/ 202、Ser396/404、Thr212和Thr205位点的磷酸化水平以及NFs蛋白的磷酸化增加(P < 0.05),FJB标记的小鼠海马CA1 区平均累积光密度(IOD)较CON组明显增加(P < 0.001);与STZ组相比,INS组小鼠学习记忆改善,逃避潜伏期和路径长度明显减少(P < 0.05)、穿越隐匿平台次数明显增加(P < 0.05),Tau蛋白特异性位点和NFs蛋白的磷酸化作用明显降低(P < 0.05),FJB标记的小鼠海马CA1区平均累积分光密度(IOD)明显减少(P < 0.001)。结论 胰岛素能改善STZ脑室内注射的AD样小鼠学习记忆减退,可能与降低Tau和NFs蛋白的过度磷酸化和神经细胞退行性变有关。     

苯并(a)芘对人支气管上皮细胞端粒长度的影响

目的 体外探讨苯并(a)芘[Benzo(a)pyrene,B(a)P]对人支气管上皮细胞端粒长度的影响.方法 应用人支气管上皮细胞株16HBE,给予不同浓度的B(a)P处理,采用定量PCR方法测定细胞全基因组DNA的相对端粒长度,观察细胞全基因组DNA相对端粒长度的变化情况.以4μg/ml博来霉素(Bleomycin,...