牙本质涎磷蛋白、Ⅰ型胶原蛋白在vps4b基因 敲除鼠磨牙牙胚发育中的时空表达

目的 研究vps4b基因突变对牙齿发育相关蛋白——牙本质涎磷蛋白（DSPP）和Ⅰ型胶原蛋白（COL-Ⅰ）表达的影响。方法 取胚胎E13.5 d、E14.5 d、E16.5 d的胎鼠头部及出生后P2.5 d、P7 d的幼鼠下颌骨组织,石蜡包埋后获取第一磨牙牙胚组织切片,采用免疫组织化学染色法检测野生型小鼠和vps4b基因敲除小鼠牙胚中DSPP、COL-Ⅰ的表达。结果 野生鼠蕾状期和帽状期DSPP、COL-Ⅰ均未表达;钟状期DSPP在内釉上皮和牙乳头中有表达,COL-Ⅰ表达于牙乳头和牙囊;分泌期和矿化期DSPP、COL-Ⅰ在成釉细胞、成牙本质细胞、牙囊内均有表达,COL-Ⅰ在牙乳头内亦可见表达。小鼠vps4b基因敲除后,DSPP在钟状期牙乳头和分泌期牙乳头及牙囊内未见表达,COL-Ⅰ在钟状期及矿化期表达部位与野生型小鼠一致,分泌期在牙乳头的表达发生改变。结论 vps4b基因在牙胚发育中发挥重要作用;DSPP、COL-Ⅰ的表达可能受vps4b基因的调控,并与vps4b共同调节牙齿牙本质的发育。     

牙本质涎磷蛋白在小鼠牙齿发育中的表达

目的：通过检测牙胚发育不同阶段牙本质涎磷蛋白（ｄｅｎｔｉｎ ｓｉａｌｏｐｈｏｐｒｏｔｉｅｎ,ＤＳＰＰ）的表达情况,探讨其在牙齿发育过程中的作用。方法：采用免疫组织化学染色技术,上鼠牙齿发育各阶段标本中ＤＳＰＰ的表达。结果：ＤＳＰＰ的蛋白表达始于钟状中期,在内釉细胞和正在极化的成牙本质细胞中表达,牙体组织形成开始,则转至成牙本质细胞下至牙冠硬组织完全形成。此阶段在成釉细胞有反复表达。牙齿萌发时,该蛋     

牙本质涎磷蛋白在小鼠牙胚表达的原位杂交研究

目的 :探讨牙本质涎磷蛋白 (dentinsialophosphoprotein ,DSPP)mRNA在牙齿发育过程中的作用。方法 :采用原位杂交技术 ,观测小鼠牙齿发育各阶段标本中DSPPmRNA的表达。结果 :DSPP在成牙本质细胞的表达始于钟状中期 ,并贯穿以后的各个时期 ;此阶段 ,它还在前成釉细胞及成釉细胞中具有一过性表达。结论 :DSPP在牙胚发育过程中的表达具有时空特异性 ;它可能在牙齿的形成中具有重要作用     

牙本质涎蛋白在牙齿发育、牙本质疾病中的表达和作用

牙本质基质是由胶原和非胶原蛋白组成,其中非胶原蛋白又包含了一组牙本质特异性蛋白,它们在牙胚发育,矿化过程中起重要作用.该文就牙本质特异性蛋白中的牙本质涎蛋白在牙齿发育和牙本质疾病中的表达和作用作一综述.     

Vps4b基因敲除鼠上皮根鞘中细胞角蛋白14和增殖细胞核抗原的表达

目的 研究Vps4b基因突变对上皮根鞘(HERS)中细胞角蛋白14(CK14)和增殖细胞核抗原(PC-NA)表达的影响.方法 取出生后(P)5、9、11、15、19 d的小鼠的双侧下颌组织,石蜡包埋后获得下颌第一磨牙组织切片,通过免疫组织化学方法比较CK14和PCNA在正常小鼠与Vps4b基因敲除小鼠HERS中的表达情...     

L型钙离子通道α 1亚基D亚型在发育小鼠磨牙牙胚成牙本质细胞中的表达

目的：研究成牙本质细胞分化不同阶段L型钙离子通道α1亚基D亚型的分布情况。方法：采用兔抗小鼠L型钙离子通道α1D亚基多克隆抗体进行牙胚免疫组织化学染色。结果：在前成牙本质细胞胞体，功能性成牙本质细胞的近矿化端以及成熟成牙本质细胞的胞体和突起上均发现有L型钙离子通道α1亚基D亚型分布，结论：成牙本质细胞可能通过L型钙离子通道α1亚基D亚型转运钙离子参与牙本质矿化过程。     

正畸应力变化下牙龈组织α-SMA、Ⅰ型和Ⅲ型胶原变化及龈沟液MMP-2、TIMP-2的表达

目的: 探讨正畸应力变化下牙龈组织α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型及Ⅲ型胶原变化以及龈沟液基质金属蛋白酶2（MMP-2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP-2）的表达。方法: 选取南昌大学附属口腔医院2018年4月—2019年4月收治的正畸患者74例,随机分为A组（24例,0 g力）、B组（25例,75 g力）、C组（25例,150 g力）3组。于加力0、4周采集患者部分牙龈组织,采用免疫组织化学染色法检测α-SMA、Ⅰ型及Ⅲ型胶原表达水平。在加力后0、2、4周收集龈沟液,采用酶联免疫吸附法检测MMP-2、TIMP-2表达水平。采用Spearman相关性分析不同正畸应力与α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、MMP-2、TIMP-2表达水平的相关性。采用SPSS 19.0软件包对数据进行统计分析。结果: 加力2周及加力4周,3组患者龈沟液MMP-2、TIMP-2表达水平依次升高（P<0.05）;加力4周后,3组患者牙龈组织中α-SMA、Ⅰ型及Ⅲ型胶原水平依次升高（P<0.05）;不同正畸应力与MMP-2、TIMP-2、α-SMA、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原表达水平均呈正相关（P<0.05）。结论: 龈沟液TIMP-2、MMP-2表达水平以及肌成纤维细胞表达与正畸应力变化有关,可能在正畸治疗的牙周组织改建中发挥重要作用。     

低氧诱导因子1α在小鼠下颌第一磨牙萌出过程中的表达及意义

目的:研究小鼠下颌第一磨牙萌出过程中低氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor-1alpha,HIF-1α）的表达,并探讨其表达与牙萌出及破骨细胞活性之间的关系。方法:分离出生后1.5~14.5 d小鼠的下颌骨,连续切片,对每组切片进行苏木精-伊红（H-E）染色、抗酒石酸酸性磷酸酶染色以及免疫组织化学染色。采用SPSS 25.0软件包进行统计学分析。结果:小鼠下颌第一磨牙萌出过程中,其冠方牙槽骨厚度逐渐减小,破骨细胞数量逐渐减少,HIF-1α在萌出过程中的表达逐渐减少。结论:小鼠下颌第一磨牙萌出过程中,HIF-1α表达越少,破骨细胞数量也越少。HIF-1α可能通过影响破骨细胞活性而参与小鼠下颌第一磨牙的萌出。     

分泌型卷曲相关蛋白1及β-连环蛋白在慢性牙周炎患者牙龈组织中的表达

目的 检测分泌型卷曲相关蛋白1（SFRP1）及β-连环蛋白（β-catenin）在慢性牙周炎（CP）患者牙龈组织中的表达及相关性,探讨经典Wnt/β-catenin信号通路在牙周炎发生发展中的作用。方法 选取CP患者28例（CP组）,其中中度CP16例,重度CP12例,健康对照者12例（正常组）,收集牙龈组织并记录探诊深度、出血指数及临床附着丧失水平。采用免疫组织化学技术检测SFRP1及β-catenin的表达,双评分法评价阳性染色强度,SPSS 19.0软件进行统计分析。结果 正常组SFRP1及β-catenin的着色强度积分值分别为2.16±0.65、1.12±0.51,CP组为3.57±0.45、2.36±0.49,其中中度CP组为3.61±0.40、2.30±0.44,重度CP组为3.52±0.52、2.45±0.55。CP组中SFRP1及β-catenin的表达较正常组升高,差异有统计学意义（P<0.01）。进一步比较,正常组与中度、重度CP组间差异均有统计学意义（P<0.01）,但中度与重度CP组间差异无统计学意义（P>0.05）。SFRP1与β-catenin着色强度的相关系数r=0.657（P<0.01）。两者的表达均与牙周临床指数相关,其中SFRP1与探诊深度的相关性最明显（r=0.723,P<0.01）;β-catenin与出血指数的相关性最强（r=0.697,P<0.01）。结论 SFRP1及β-catenin在CP患者牙龈组织中的表达升高且与牙周破坏相关,两者的异常表达可能促进牙周炎的发生发展。     

小鼠牙胚发育过程中PHEX基因的时空表达模式研究

目的:研究PHEX在Balb/c小鼠牙胚发育过程中的时空表达模式,探讨其在牙齿发育过程中的作用.方法:采用免疫组织化学方法检测小鼠牙胚发育各时期中PHEX蛋白的表达.结果:PHEX在蕾状期无表达;帽状期的内、外釉上皮细胞和牙囊细胞中,PHEX有零星的弱阳性表达;钟状早期,PHEX主要表达在内釉上皮细胞和牙囊细胞,外釉上皮层、中间层细胞和靠近基底膜的牙乳头细胞中也有少量表达.钟状晚期,PHEX在成釉细胞和成牙本质细胞中的表达随着牙胚的发育而增强.釉结中成釉细胞的阳性表达程度比其他部位的成釉细胞更强.颈环处的内釉上皮细胞有PHEX的表达,而邻近的牙乳头细胞和外釉上皮细胞中无表达.结论:PHEX在牙胚的发育中有特定的时空表达模式,提示其参与了牙胚的形成发生和矿化.     

人牙本质涎蛋白在人牙胚发育过程中的表达和意义

目的：探讨人牙本质涎蛋白(human dentin sialoprotein，hDSP)在人牙胚发育过程中的表达和意义。方法：用免疫组化方法检测人牙本质涎蛋白在人牙胚不同发育阶段中的表达。结果：hDSP在蕾状期、帽状期釉上皮以及钟状早期内釉上皮有弱阳性表达，钟状中期正在分泌基质的成牙本质细胞、牙本质小管有强阳性表达，钟状晚期，牙本质小管仍有强阳性表达，而成牙本质细胞转为弱阳性表达。前成釉细胞、成釉细胞有一过性表达。前期牙本质始终无阳性表达。牙胚周围骨组织、软骨组织和口腔软组织无阳性表达。结论：提示hDSP可能参与了牙本质的形成。另外前期牙本质阴性表达，表明hDSP蛋白由成牙本质细胞分泌后，可能通过成牙本质细胞突起穿过前期牙本质分泌至矿化前沿，参与牙本质的形成。     

BSP、OPN在小鼠牙胚发育中的表达

目的:探讨骨涎蛋白(Bone sialoprotein,BSP)、骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)在Balb/c小鼠牙胚发育各期的时空分布特点及两者在牙齿矿化过程中的作用。方法:采用免疫组化法观察Balb/c小鼠出生前后牙胚及颌骨中BSP、OPN的表达与分布。结果:BSP、OPN在牙胚发育中的时空分布模式存在差异。OPN在蕾状期的表达弱于BSP,两者在成釉器早期的发育中作用微弱;在帽状期、钟状期及牙体硬组织(牙冠、牙根)分泌形成期,OPN的表达范围及强度高于BSP,尤其在牙体硬组织形成期,OPN在牙胚各类细胞及骨组织中均呈强阳性表达。结论:BSP、OPN参与牙胚的发育及牙体硬组织的矿化成熟,在牙齿发育中发挥关键作用。     

人牙胚发育过程中Smad3的表达变化及其意义

目的：观察转化生长因子β（TGF-β）特异的细胞内信号转导分子Smad3在人牙胚发育过程中的时空表达,探讨Smad3对牙胚发育的作用。方法：运用免疫组化方法观察Smad3在人牙胚发育各期的表达分布和表达变化情况。结果：Smad3在牙胚发育各期均有表达,但表达模式不尽相同,总的趋势是随着成釉细胞和成牙本质细胞的分化成熟而逐渐增强。结论：观察到Smad3在人牙胚发育不同时期的表达及其表达变化,提示Smad3可能在TGF-β调节成釉细胞和成牙本质细胞分化的信号转导过程中发挥一定的作用。     

尼古丁对体外培养鼠磨牙牙胚发育的影响

目的:探讨尼古丁对体外鼠磨牙牙胚发育的影响.方法:采用RPMI-1640半固态培养基,在培养基中加入不同浓度的尼古丁,将15d胎龄的胎鼠的下颌第一磨牙牙胚分别置于各浓度组RPMI-1640半固态培养基表面培养4、8d,每48h更换培养基一次.结果:实验组与对照组相比较,主要表现在实验组发育中的牙胚体积缩小,成牙本质样细胞的分化程度不足、数量和速度均低于对照组,前期牙本质样基质形成减少或不能形成,并且呈时间、浓度依赖性.结论:尼古丁对体外培养胎鼠牙胚的形态、细胞的增殖和分化有抑制作用.     

Bone morphogenetic protein 4 is involved in cusp formation in molar tooth germ of mice

In order to clarify the role of BMP4 in the development of the tooth crown, we employed the antisense technique on molar tooth germs removed from the mandibles of embryonic 13.5-d-old mice. In the tooth germ explants incubated for 14 d with antisense oligodeoxynucleotide (AS-ODN) against Bmp4 (a) cusps were not formed, whereas dentin matrix was secreted in the whole region of the crown, (b) inner enamel epithelial (IEE) cells remained in the undifferentiated state in the occlusal region of the crown, though they differentiated in the proximal region (lateral surface region of tooth crown), and (c) insufficient growth of the dental papilla was observed. A 5-bromo-2'-deoxyuridine (BrdU) uptake experiment showed that, although a site-specific proliferation of IEE cells occurred in the occlusal region in the control explants, it was not found in the AS-ODN-treated explants. In the proximal region, however, the proliferation of IEE cells was detected evenly in all explants treated with or without AS-ODNs. These results suggest that AS-ODN against Bmp4 inhibited the differentiation and the site-specific proliferation of IEE cells in the occlusal region of molar tooth germs, resulting in the suppression of cusp formation. Our data thus suggest that BMP4 is involved in cusp formation and differentiation of ameloblasts in the occlusal region of molars.     

Smad1在人牙胚发育过程中的表达变化

观察骨形成蛋白特异的细胞内信号转导分子Ｓｍａｄ１在人牙胚发育过程中的表达变化,探讨Ｓｍａｄ１在牙齿发育过程中的作用,方法制备人牙发育各期标本,免疫组化方法观察Ｓｍａｄ１在人牙胚发育过程中的表达情况。结果：Ｓｍａｄ１在牙胚发育的不同时期均见不同的时表达模式。     

牙胚中上游刺激因子部分序列的cDNA克隆

目的：克隆牙胚中上游刺激因子（upstream stimulatory factor,USF)基因编码区特异片段。方法：从生后5d balb/c鼠牙胚中抽提总RNA，用随机引物逆转录合成cDNA，然后 用PCR方法借助特异性引物以cDNA中扩增小鼠USF1基因片段（289bp），电泳检测、回收目的片段，将所得的基因片段连接至Teasy质粒载体，并转化到大肠杆菌DH5α后挑选阳性克隆，扩大培养，提取重组质粒DNA，酶切分析和核苷酸序列分析鉴定阳性克隆。结果：酶切图谱显示质粒重组，克隆成功，序列分析结果与国外报道一致。结论：在牙胚中克隆到USF1基因片段。