藏药余甘子鞣质部位主要药效成分在人工胃肠液中的稳定性研究

摘 要：目的：研究余甘子鞣质部位主要药效成分在人工模拟胃、肠液中的稳定性,为余甘子体内代谢研究提供依据。方法：采用人工模拟胃液、肠液,体外温孵,HPLC-UV法测定余甘子鞣质部位中主要药效成分的含量变化情况;分别考察余甘子鞣质部位主要药效成分在人工胃肠液中的稳定性。结果：余甘子鞣质部位中主要药效成分没食子酸、柯里拉京、鞣花酸在人工胃液中比较稳定,含量变化不明显,降解剩余量在100%左右波动,半衰期大于90h;在人工肠液中不稳定,含量先增加后减少,降解剩余量在100-300%之间波动,半衰期大于10h。结论：余甘子鞣质部位主要药效成分在人工胃液中比较稳定,各成分含量变化不明显;余甘子鞣质部位主要药效成分在人工肠液中不稳定,主要成分含量先增加后减少,推测大分子可水解鞣质可以转化成小分子成分,但是随着时间延长所有成分均在降解。     

黄芪甲苷的生物样品稳定性考察及在大鼠体外肠菌中代谢转化研究

为明确黄芪甲苷(AST)在生物样品中的稳定性和在大鼠体外肠菌代谢转化产物及代谢途径。本实验采用体外的方法对AST在人工胃液、人工肠液及大鼠肝匀浆中的稳定性以及大鼠离体肠道菌群中的代谢产物进行探讨。采用HPLC法测定AST在生物样本中的含量,计算AST在生物样本中的剩余百分率。采用TLC,HPLC和LC-MS/MS相结合的分析手段,鉴定代谢产物。结果发现,AST在人工胃液、人工肠液及肝脏中均较稳定,不易代谢;AST肠道菌群的代谢是通过脱糖基逐级进行的。首先,失去3位木糖基转化成次生代谢产物环黄芪醇-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(CMG)。然后,失去6位葡萄糖基得到极性更小的皂苷元环黄芪醇(CAG)。研究结果表明AST在体内主要在肠道代谢,发生糖基水解作用。即肠道菌群的水解作用是AST代谢的主要原因。     

大鼠肠道酶和菌群对人参皂苷Rg1的代谢转化研究

目的:考察大鼠肠道酶和菌群对人参皂苷Rg1(GRg1)的代谢转化作用。方法:研究100 mg.L-1的GRg1溶液在37℃人工胃液(pH 1.0)和人工肠液(pH 6.8)中的稳定性;考察大鼠ig GRg1后粪便和尿液中的GRg1代谢状况。结果:GRg1在人工胃液中2 h内100%降解;在人工肠液pH中4 h相对稳定(RSD<1.5%);GRg1被大鼠肠道内酶和菌群代谢。结论:为提高生物利用度,GRg1应选择非口服途径给药。     

淫羊藿苷在人工胃肠液中稳定性与降解动力学研究

目的:考察淫羊藿苷在人工胃肠液中稳定性与降解动力学,为其制剂开发及药理作用阐明提供参考。方法:采用HPLC法,测定淫羊藿苷在4种不同介质液中不同时刻峰面积,绘制时间-剩余含量曲线和降解曲线,计算各自平均剩余百分率与降解动力学参数。结果:淫羊藿苷在未加胰酶的人工肠液中稳定性最好,而在人工肠液中稳定性最差,且两者降解速度差异性大;淫羊藿苷在人工胃液与未加胃酶的人工胃液中稳定性和降解速率差异性小。淫羊藿苷在人工胃液、未加胃酶的人工胃液和未加胰酶的人工肠液中按一级动力学降解,而在人工肠液中的降解不符合一级动力学反应。结论:胰酶对淫羊藿苷的稳定性与降解速率产生显著影响,制剂研究时必须考虑肠液对淫羊藿苷的降解作用。     

桑色素对地塞米松大鼠体内药代动力学影响的研究

目的评估桑色素(Morin)是否会影响地塞米松(DEX)在大鼠体内的药代动力学行为。方法 24只Wistar大鼠雌雄各半,随机分为两组,DEX组和Morin与DEX联用组,两组分别灌胃给予纯水和Morin水悬液2周,在第15天两组均单次灌胃给予DEX,按设定时间点取血后,采用HPLC法测定大鼠血浆中DEX浓度。结果 DEX在0.025～10μg·ml~(-1)范围内线性关系良好,回归方程Y=0.2915X+0.0147(r=0.9993),检测限为0.025μg·ml~(-1)。相比DEX组,DEX与Morin联用后雌雄大鼠的DEX药代动力学参数无显著变化。然而无论是否合用Morin,大鼠DEX药代动力学参数均显示出性别差异。雌性Cl值明显小于雄性大鼠,而AUC_(0-∞)、AUC_(0-t)、MRT等参数明显大于雄性大鼠。结论 Morin对大鼠体内DEX药代动力学无显著影响;然而不论单用DEX或Morin与DEX联用,DEX药代动力学参数在雌雄大鼠间显示出显著的性别差异。     

哈巴俄苷在大鼠胃肠道内容物中的稳定性及其入血成分分析

目的:研究哈巴俄苷在生物样品中的稳定性及其大鼠灌胃后的入血成分。方法:利用HPLC测定哈巴俄苷的含量,流动相0.03%磷酸水溶液-乙腈梯度洗脱,检测波长210 nm,计算其在各样品中的剩余率,研究哈巴俄苷在人工胃液、人工肠液、大鼠胃肠内容物及相应p H溶液中的稳定性;利用LC-MS检测大鼠灌胃给药后的血液样品,对哈巴俄苷的入血成分进行定性研究。结果:哈巴俄苷在人工肠液、大鼠小肠内容物、大鼠大肠内容物中较稳定,降解率10%;在稀酸液、人工胃液、大鼠胃内容物中哈巴俄苷可发生降解,但降解率15%;大鼠灌胃给予哈巴俄苷后的血液样品中检测到了哈巴俄苷、哈巴苷、肉桂酸。结论:哈巴俄苷在人工胃肠液、大鼠胃肠道内容物及相应p H溶液中较稳定,少部分在酸性环境可分解成肉桂酸及哈巴苷苷元的脱水产物;哈巴俄苷大鼠灌胃给药后主要以原型入血,在体内可代谢为肉桂酸及哈巴苷。     

白术、茯苓多糖的体外胃肠道代谢研究

目的:考察白术、茯苓多糖在胃肠道环境中的代谢情况.方法:白术、茯苓多糖分别与人工胃液、肠液和肠道菌共孵育,采用3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)测定多糖的含量变化,考察白术、茯苓多糖在人工胃肠道环境中的代谢以及与肠道菌共孵育的变化.结果:白术、茯苓多糖在人工胃肠道环境中没有明显代谢,而与肠道菌的共孵育过程中则产生显著代谢.结论:白术、茯苓多糖在胃肠道中的代谢主要是在肠道中进行,肠道菌在此过程中发挥着重要作用.     

异佛司可林在人肝微粒体与人工胃肠液中的代谢与降解

目的研究异佛司可林在人肝微粒体及人工胃肠液中的代谢与降解动力学。方法将异佛司可林与人肝微粒体、人工胃液、人工肠液进行体外共孵育,采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定人肝微粒体孵育体系中异佛司可林的剩余浓度,高效液相色谱-紫外检测(HPLC-UV)法测定人工胃液、人工肠液中异佛司可林的剩余浓度。结果异佛司可林在人肝微粒体的t1/2为(34.90±3.42)min,CLint为(16.71±1.64)m L/(kg·min);在人工胃液和人工肠液中的t1/2分别为(46.97±6.46)h和(91.67±8.26)h。结论异佛司可林在人肝微粒体中代谢显著,在人工胃液和肠液中较稳定。     

在模拟人工胃肠道环境中博落回主要生物碱类成分的稳定性特征分析

目的:为解释博落回中4个生物碱(原阿片碱、别隐品碱、血根碱、白屈菜红碱)生物利用低的原因,对这四个生物碱在模拟人工胃肠道环境下的稳定性进行考察。方法:采用HPLC测定博落回中4个生物碱在不同p H缓冲液、人工胃液(p H=1.3)和人工肠液(p H=6.8)中的稳定性。结果:原阿片碱和别隐品碱在酸性、中性、碱性、人工胃液及人工肠液环境下8 h回收率为97.16%~101.89%;血根碱在p H=6.8磷酸盐缓冲液、水、p H=7.8~8.0磷酸盐缓冲液及人工肠液中8 h回收率为48.81%~60.53%;白屈菜红碱在p H=5.8磷酸盐缓冲液、p H=6.8磷酸盐缓冲液、水及人工肠液中8 h的回收率为81.21%~93.48%;在p H=7.8~8.0磷酸盐缓冲液中8 h回收率为57.43%。结论:原阿片碱和别隐品碱的稳定性不受p H的影响,血根碱和白屈菜红碱随p H升高稳定性降低,博落回中4个生物碱在模拟人工胃肠道环境中的稳定性结果与其在不同p H环境中一致,为阐明博落回散在体内的药代动力学特点提供科学依据。     

白藜芦醇Labrasol/P407混合胶束稳定性及大鼠体内药动学研究北大核心

目的:以白藜芦醇为对照,探讨白藜芦醇-Labrasol/P407混合胶束在大鼠体内的药动学。方法:透析法考察混合胶束在人工胃液和人工肠液的稀释稳定性;大鼠灌胃给药后,采用UPLC-Q-Orbitrap HRMS方法测定大鼠血浆中白藜芦醇和白藜芦醇-3-葡萄糖醛酸苷的浓度,采用DAS 2.0软件计算药动学参数。结果:混合胶束在人工胃液和人工肠液的稀释稳定性良好。与白藜芦醇混悬剂相比,白藜芦醇-Labrasol/P407混合胶束中白藜芦醇在大鼠体内C_(max)(1389.9±373.2 ng/mL)是混悬剂(188.9±58.9 ng/mL)的7.4倍,相对生物利用度是混悬剂的9.6倍;白藜芦醇-3-葡萄糖醛酸苷的达峰浓度(C_(max))分别为(3060.7±787.4)ng/mL和(1298.1±523.2)ng/mL,血药浓度-时间曲线下面积(AUC_(0~24))分别为(14294.9±6085.1)ng·h/mL和(6061.5±874.4)ng·h/mL,分别下降57.59%和57.60%,具有显著性差异(P<0.05)。结论:将白藜芦醇制成混合胶束后可显著提高白藜芦醇的血药浓度和相对生物利用度。     

丹参素在大鼠体内代谢产物的鉴定分析

应用UHPLC-LTQ-Orbitrap技术对丹参素在大鼠血浆和尿液中的代谢产物进行鉴定。SD大鼠灌胃给药丹参素CMC-Na混悬液后,收集其血浆和尿液,应用固相萃取法进行样品前处理。采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱。在电喷雾负离子模式下采集生物样品的质谱数据。根据精确相对分子质量以及多级质谱裂解信息,结合对照品及文献报道结果比对,最终鉴定了丹参素以及21个丹参素Ⅰ相和Ⅱ相代谢产物,同时分析了丹参素主要的体内代谢反应,如脱水、甲基化、葡萄糖醛酸化、硫酸酯化、去羟基化以及相关的复合反应等。该文应用高分辨液质联用技术快速阐明了丹参素在大鼠体内的代谢产物,为今后药效物质基础和作用机制研究奠定了基础。     

绵马贯众中流感病毒H_5N_1神经氨酸酶抑制剂的筛选

目的:筛选绵马贯众中流感病毒H_5N_1神经氨酸酶(NA,neuraminidase)抑制剂。方法:将绵马贯众中已分离得到的99个化合物建立配体库,从Protein Data Bank(PDB)中下载NA(H_5N_1)的X-ray晶体三维结构文件,采用AutoDock Vina软件筛选出与NA有较好结合作用的化合物,并通过神经氨酸酶抑制实验验证筛选出的化合物对NA的作用。结果:通过分子对接筛选出5个与NA有较好结合的化合物,神经氨酸酶抑制实验结果表明候选化合物中Dryocrassin ABBA对NA的抑制作用最强,IC₅₀为(18.59±4.53)μmol/L。结论:绵马贯众中化合物Dryocrassin ABBA具有较好的抗H_5N_1流感病毒神经氨酸酶的作用。     

从炎性反应角度探讨清热解毒药的作用机制

清热解毒药主要用于治疗痈肿疮毒、咽喉肿痛、丹毒、痄腮、痢疾等热毒所致疾病。炎症是具有血管系统的活体组织对损伤因子的防御反应。近年来大量基础和临床研究表明清热解毒药对炎症反应具有较好的治疗作用。该研究通过检索近5年文献,对金银花、山银花、忍冬藤、连翘、黄连、栀子、穿心莲、蒲公英、玄参、白头翁、仙鹤草等11味中药的抗炎机制进行分析,发现清热解毒药主要是通过NF-κB,MAPK,JAK-STAT 3条信号通路发挥抗炎作用,且作用环节相似。并且,针对目前该领域存在的问题,提出了未来可能的发展方向,为今后清热解毒药的基础研究和临床应用提供可靠的理论依据。     

《中医药单用/联合抗生素治疗常见感染性疾病临床实践指南·脓毒症》临床应用评价与修订意见

调查我国临床医生对《中医药单用/联合抗生素治疗常见感染性疾病临床实践指南·脓毒症》的临床应用情况,以促进该《指南》的后续修订和进一步推广。应用评价调查问卷和适用评价调查问卷均采用记名问卷方法,向我国使用过该《指南》的临床医师各投放500份;采用Excel 2016建立数据库,进行描述性统计分析。应用性评价调查问卷和适用性评价调查问卷各回收211份。该调查得出结论:在现有推荐方案评价较好的基础上,针对整体内容、整体结构上再做调整;对推荐方案的方剂选择、临床证据进行更新;对《指南》应用过程中的阻碍因素提出改善措施,同时为了更好更明确地推广,应加强医患教育,提高指南质量,增大宣传力度,为《指南》的实施推广策略提供依据。     

《中医药单用/联合抗生素治疗单纯性下尿路感染临床实践指南》临床应用评价研究

该研究采取调查问卷的方式,调查来自不同级别医院的1 000名有治疗单纯性下尿路感染经验的临床医生,主要针对《中医药单用/联合抗生素治疗单纯性下尿路感染临床实践指南》(以下简称《指南》)临床适用性和应用性进行评价。研究过程严格执行全程三级质量控制,数据真实、可信。调查结果显示:绝大多数医生认为《指南》临床适应性好,《指南》中推荐的药物可及性和价格适中,中医药治疗单纯性下尿路感染具有明显的特色和优势,可以减少抗生素的用量,缩短抗生素应用的疗程。在建议板块中,临床医生希望增加用药指导、希望及时更新《指南》,另外还有希望增加治疗方法和手段者、加强宣传推广者、加强循证方法使用等。在应用性评价中,绝大多数临床医生认为《指南》定义、中西医鉴别诊断描述准确,治疗基本原则及中医药治疗方法选择恰当,中药处方、中成药临床应用效果好。部分临床医生建议细化淋证证候分型。部分医生认为《指南》中推荐方药疗效一般,在其他疗法的推荐中,部分医生对于熏洗操作方法存疑,针对中医特色疗法中药熏洗和针灸治疗单纯性下尿路感染的操作规范及流程待完善。     

酸枣仁中化学成分的UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS快速分析

基于UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS技术对酸枣仁中化学成分进行定性分析。采用Waters Acquity UPLC BEH-C18色谱柱(2. 1 mm×50 mm,1. 7μm),以乙腈(A)-0. 1%甲酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱,体积流量0. 3 m L·min^-1;在电喷雾负离子模式下采集数据。将母离子列表(parent ion list,PIL)-MS2和高能碰撞(high energy collision dissociation,HCD)技术,用于酸枣仁中三萜皂苷成分的鉴别。结合质谱数据和文献数据,共鉴定、推断出24个化合物,4个未知化合物;其中包括21个黄酮类化合物,5个皂苷类化合物,2个三萜类化合物。采用UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS技术,为酸枣仁中化学成分的定性分析及质量控制提供了一种高效、快速的分析方法,为今后进一步阐明其药效物质基础及资源开发利用提供了数据基础。     

基于近红外技术的西洋参质量评价及产地鉴别

目的:建立西洋参中水分及人参皂苷类成分近红外含量预测模型,并采用近红外光谱对西洋参样品进行产地鉴别及规格辨识。方法:以122批西洋参样品为研究对象,采集其近红外原始光谱图,经蒙特卡洛交叉验证法剔除异常样本,采用MSC+导数+Norris Derivative平滑处理等方法对原始图谱进行光谱预处理,运用偏最小二乘法,建立西洋参样品中水分、中国药典指标成分及6种人参皂苷总量的近红外定量模型;同时,基于近红外全光谱信息,采用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)法,建立西洋参不同产地和规格的辨识模型。结果:水分、中国药典指标成分及6种人参皂苷总量模型预测集的相关系数R^2pre分别为0.9757、0.9526、0.9386,预测均方根误差RMSEP分别为0.248、0.159、0.198,NIRS验证集预测值与实测值无显著性差异;OPLS-DA模型可有效辨别不同规格和产地的西洋参样品。结论:本实验所建立的近红外光谱法可实现对西洋参样品中水分和人参皂苷含量的定量分析,以及对样品产地和规格的良好区分,测定结果准确、可靠、预测精度好,可用来快速准确地评价西洋参样品的质量。     

从“方体相应”角度论血瘀体质的中医治疗及养生调护

血瘀体质对于众多疾病的发生具有倾向性,依据"方-体相应"的理论对血瘀体质人群早干预早治疗,可将血瘀体质相关疾病的防治关口前移,为血瘀体质相关疾病的防治提供新的思路。中医辨治血瘀体质常见有虚瘀体质、痰瘀体质和气滞血瘀体质三种类型,可分别用当归活血散、双合汤和川归汤调治。中医血瘀体质养生调护则包括饮食调养、运动调节和情志调节。     

中医骨伤科旋提手法规范化操作传承模式初探

目的通过对不同传承模式效果的比较筛选中医骨伤科手法传承模式。方法 27名手法传承人随机分为视频教学、师承和仪器培训组各9名,每组传承人接受相应传承模式学习颈椎旋提手法规范化操作2周后分别进行仪器和专家考核,其中仪器考核指标包括预牵引力、提扳力、最大作用力、提扳时间、旋转幅度、俯仰幅度合格次数及合格率,专家考核指标包括颈椎定位、颈椎固定、预牵引、提扳力度、提扳方向、提扳技巧合格次数及合格率。结果仪器考核中仪器培训组、视频教学组、师承组总平均合格率分别为82.22%、67.84%、69.91%,专家考核中仪器培训组、视频教学组和师承组总平均合格率分别为91.11%、66.96%和83.80%。全部考核后总合格次数分别为视频教学组(5.89±2.54)次,师承组(4.44±2.18)次,仪器培训组(3.11±1.69)次。各组合格次数比较差异具有统计学意义(P<0.05),仪器培训组合格次数明显少于视频教学组(P<0.05),视频教学组与师承组、师承组与仪器培训组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论仪器培训传承模式在旋提手法治疗颈椎病手法考核时合格率较高,其传承效果优于视频教学和师承模式。     

基于中医传承辅助系统的肝硬化腹水敷脐用药规律分析

中药敷脐治疗肝硬化腹水是一种简便有效的特色疗法。该文借助中医传承辅助系统分析中药敷脐治疗肝硬化腹水的组方用药规律。通过检索中国知网、维普数据库、万方数据库近20年来中药敷脐治疗肝硬化腹水的文献为数据源,筛选并建立方剂数据库,运用频数统计、关联规则(Apriori法、复杂系统熵聚类)等进行数据挖掘,对核心药物及其归经、性味、组方规律、核心组合等进行分析研究。共筛选出治疗肝硬化腹水的敷脐方剂92首,涉及中药109种,分析出14个使用频次10及10以上的药物、19个常用药对,挖掘出12个核心药物组合。使用高频药物为甘遂、冰片、牵牛子、大黄、麝香、大戟、芒硝、肉桂、芫花、商陆等;归经以肺、脾、肾三经为主;药性以寒性药为主,药味以辛味药为主;常用药对为牵牛子-甘遂,冰片-甘遂,甘遂-大戟,甘遂-麝香,大黄-甘遂,甘遂-芫花,冰片-牵牛子,冰片-牵牛子-甘遂,甘遂-槟榔等;组方规律多以攻下逐水类药物为主,配伍通窍类、行气类、温阳类等药物。