Th17细胞与CD4~+CD25~+调节性T细胞在儿童过敏性紫癜发病机制中的作用

目的 探讨Th17细胞与CD4+CD25+调节性T细胞在儿童过敏性紫癜(HSP)免疫发病机制中的作用.方法 过敏性紫癜急性期患儿48例,采用流式细胞术检测外周血CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)的比例,采用荧光定量PCR(real-time PCR)检测CD4+ T细胞IL-17A、IL-17F、转录因子ROR-γt、Foxp3及细胞因子IL-6、TGF-β等mRNA表达;同期40例同龄健康儿童作为对照.结果 过敏性紫癜急性期患儿CD4+T细胞高表达IL-17A及IL-17F(P<0.01).Th17细胞转录因子ROR-γt及前炎症细胞因子IL-6 mRNA表达明显增高(P<0.01).CD4+CD25+调节性T细胞比例明显低于正常对照组(P<0.01),其转录因子Foxp3表达亦明显降低(P<0.01).结论 Th17等促炎性T细胞高表达和CD4+CD25+调节性T细胞数量减少导致的免疫抑制效应不足,是导致过敏性紫癜免疫失衡的重要原因,IL-6高表达与此密切相关.     

紫癜性肾炎患儿CD4+CD25+调节性T细胞和淋巴细胞亚群变化的意义

目的 探讨紫癜性肾炎(HSPN)患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞百分比和淋巴细胞亚群的变化和意义.方法 初诊初治的HSPN患儿35例于治疗前抽取清晨空腹静脉血2 mL,加入乙二胺四乙酸(EDTA)钾盐抗凝,采用流式细胞仪(FCM)检测其外周血CD4+CD25+调节性T细胞百分比及淋巴细胞亚群数量,并分析CD4+CD25+调节性T细胞与24 h尿微量清蛋白(24 h UMA)的关系.同时随机选取同期本院35例健康体检儿童外周血标本作为对照组.结果 HSPN患儿外周血CD4+CD25+T细胞及CD4+CD25+/CD4+均低于健康对照组(Pa＜0.01);CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD4+/CD8+、CD3-CD(16+56)+均低于健康对照组(Pa＜0.05);而CD19+CD23+则高于健康对照组(P＜0.05).CD4+CD25+调节性T细胞百分比与24 h UMA呈显著负相关(r=-0.61 P＜0.01). 结论 外周血淋巴细胞亚群的变化可能参与HSPN的发病过程,而CD4+CD25+调节性T细胞百分比可作为监测HSPN患儿病情及预后治疗的指标之一.     

自身免疫性疾病患儿CD4+CD25+调节性T细胞的变化

目的 通过检测外周血CD4+CD25+ 调节性T淋巴细胞(Treg),了解自身免疫病患儿Treg细胞的变化,以期更好的为临床诊断和治疗提供依据.方法 收集2007年11月-2008年6月本院风湿免疫科诊断为自身免疫性疾病患儿93例.本院同期门诊体检健康儿童35例作为健康对照.对发病人数在前3位的类风湿性关节炎(JRA,22例)、SLE(12例)和过敏性紫癜(HSP,12例)分别与健康对照组进行比较.采用流式细胞术检测2组儿童外周血CD4+CD25+ T淋巴细胞和CD4+ T淋巴细胞,计算CD4+CD25+ Treg细胞占CD4+ T淋巴细胞百分数.应用SPSS 11.5统计软件对数据进行独立样本t检验.结果 1.自身免疫性疾病患儿组CD4+CD25+ Treg细胞/CD4+ T淋巴细胞、CD4+CD25+T淋巴细胞分别为(21.85±11.68)%、(6.14±3.21)%,健康对照组为(12.83±3.61)%、(3.68±1.02)%,2组比较前者显著高于后者(Pa<0.05).2.JRA患儿CD4+CD25+ Treg细胞/CD4+ T淋巴细胞、CD4+CD25+T淋巴细胞分别为(19.49±8.60)%、(6.22±3.11)%,SLE患儿为(31.04±17.38)%、(7.38±4.09)%,HSP患儿为(19.0±9.33)%、(5.80±2.44)%,均显著高于健康对照组(Pa<0.05).结论 自身免疫性疾病患儿CD4+CD25+ Treg细胞显著升高,其可能参与了自身免疫性疾病的病理过程.     

CD4+CD25+调节性T细胞及其在重症肌无力中的研究进展

CD4 CD25 调节性T细胞是一个具有独特免疫调节功能的T细胞亚群,主要通过细胞接触和细胞因子机制抑制自身反应性T细胞活化与增殖,在自身免疫性疾病中发挥着重要作用。重症肌无力(MG)患者胸腺中存在大量激活的自身反应性CD4 T细胞是MG发生重要原因。本文对CD4 CD25 调节性T细胞产生、发育、效应机制及其在MG发病中作用作一综述。     

糖皮质激素对哮喘小鼠CD4+CD25+调节性T细胞的作用

目的：建立哮喘小鼠动物模型并给予吸入糖皮质激素治疗,通过分析CD4+CD25+调节性T细胞及相关细胞因子在哮喘发病中的变化情况,以及观察糖皮质激素治疗对该细胞的影响和干预作用,探讨哮喘发作的新的免疫机制。方法：分别制备哮喘组（OVA）,哮喘吸入激素治疗组（OVA/GC）及对照组（NS）动物模型。所有小鼠于末次激发后24 h,取右肺中叶标本作病理切片,观察炎症改变;同时收集外周抗凝血及肺组织细胞悬液,通过流式细胞仪及酶联免疫吸附试验（ELISA）测定CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+ T细胞的百分比和血浆中IL-10和TGF-β1水平。结果：①哮喘小鼠外周血及肺组织细胞悬液中CD4+CD25+调节性T细胞百分率明显降低（P<0.01）,吸入糖皮质激素治疗后CD4+CD25+调节性T细胞百分率明显升高（P<0.01）。②IL-10在哮喘组较对照组明显降低（P<0.01）,糖皮质激素治疗组IL-10明显升高（P<0.01）。③TGF-β1在哮喘小鼠较对照组明显降低（P<0.01）,吸入糖皮质激素治疗后TGF-β1有所升高,但差异无显著性。结论： ①哮喘小鼠CD4+CD25+调节性T细胞和IL-10,TGF-β1数量和分泌水平降低,尤其是肺部CD4+CD25+调节性T细胞不能有效聚集,导致全身和局部对炎症反应的抑制作用减弱,可能是导致哮喘发生的原因之一。②糖皮质激素可通过增加CD4+CD25+调节性T细胞及IL-10数量和分泌水平,增强其免疫抑制功能而发挥治疗作用。③外周血和肺部CD4+CD25+调节性T细胞百分率变化具有一致性,监测外周血CD4+CD25+调节性T细胞变化情况可以了解肺部变化趋势。     

调节性T细胞/Th17细胞失衡在血液系统疾病发病中的作用

国内外研究证实,CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞(CD4+ CD25+ Foxp3+ regulatoryTcells,简称Treg细胞)/Th17细胞失衡与多种血液病的发病密切相关.肿瘤性血液病如白血病、淋巴瘤存在Treg细胞水平上调Th17水平下调,可能与Treg诱导免疫抑制增强、Th17介导抗肿瘤免疫缺陷相关;而非肿瘤性血液病如再生障碍性贫血、过敏性紫癜、免疫性血小板减少性紫癜等存在Treg水平下调、Th17水平上调,可能与Th17介导过度免疫损伤、Treg介导免疫抑制功能不足有关.提示Treg细胞/Th17细胞比率升高可能对肿瘤性血液病的发生起促进作用,其比率降低则可能对非肿瘤性血液病的发生起促进作用.     

sCD40L、CD4~+CD45RA~+T细胞及CD4~+CD45RO~+T细胞在儿童ITP中的作用

目的探讨协同刺激分子可溶性CD40配体(sCD40L)及CD4+T辅助细胞CD45RA和CD45RO亚群在儿童特发性血小板减少性紫癜中的变化。方法用ELISA法检测25例ITP患儿血浆sCD40L水平;用微量全血流式细胞术法检测ITP患儿外周血CD4+T辅助细胞CD45RA和CD45RO的表达率;并对sCD40L与血小板计数进行相关分析。结果ITP患儿血浆sCD40L浓度明显升高,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);CITP组血浆sCD40L浓度升高更为明显,与AITP组或对照组比较差异均有显著性(P<0.05)。ITP患儿CD4+CD45RA+T细胞表达率下降,CD4+CD45RO+T细胞表达率升高,差异均有显著性意义(P<0.05),而AITP和CITP之间差异无显著性(P>0.05)。血浆sCD40L与外周血小板计数无相关性(r=-0.047,P>0.05)。结论CD40L高表达导致的CD40L/CD40信号传导通路异常可能参与ITP发病;ITP患儿存在Th细胞亚群偏移,表现为Th1细胞减少,Th2细胞增多。     

急性白血病患儿CD4~+CD25~+调节性T细胞和NK细胞免疫作用探讨

目的观察外周血CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)及自然杀伤细胞(na-ture killer cell,NK)在白血病患儿及非白血病患儿的不同,了解白血病患儿的免疫状态,探讨CD4+CD25+Treg细胞及NK细胞在小儿急性白血病肿瘤免疫中的意义。方法以流式细胞术检测急性白血病初诊患儿及非白血病患儿各30例的外周血CD4+CD25+Treg细胞、NK细胞的数量及比例。结果外周血CD4+CD25+CD127-细胞占CD4+T细胞的比例白血病组为(11.45±1.41)%,显著高于对照组为(6.98±1.09)%(P<0.05)。而NK细胞数量白血病组为(5.13±2.97)%,显著低于对照组为(15.06±3.91)%(P<0.05)。结论 (1)急性白血病患儿外周血CD4+CD25+Treg细胞数量升高,NK细胞数量降低,表明急性白血病患儿NK细胞免疫功能处于抑制状态。CD4+CD25+Treg细胞可能在白血病的发生、发展中起一定作用。(2)通过检测CD4+CD25+CD127-T细胞可较好的反映CD4+CD25+Treg细胞的比例,简便可行、重复性好、检测结果准确、可靠。     

FOXP3+CD4+CD25+调节性T细胞及其在重症肌无力中的研究进展

CD4+ CD25+调节性T细胞(CD4+ CD25+Tr)是具有免疫调节作用的T细胞,其主要功能是抑制自身反应性T细胞的活化和增殖,参与自身免疫调节,维持自身免疫耐受,在重症肌无力等自身免疫疾病中发挥重要作用.叉头状转录因子(FOXP3)是Fox家族重要成员之一,特异性表达于CD4+ CD25+Tr,在CD4+ CD25+ Tr的发育和功能维持方面起关键作用.重症肌无力患者中FOXP3的表达明显减少,FOXP3可能与重症肌无力的发病密切相关,因此FOXP3的研究可能为重症肌无力的治疗开辟新途径.     

原发性肾病综合征患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞及CD19+CD23+细胞水平的变化及其意义

目的通过观察原发性肾病综合征(PNS)患儿外周血淋巴细胞亚群,尤其是CD4+CD25+调节性T细胞及CD19+CD23+细胞水平的变化,探讨其免疫发病机制。方法采用双标法用流式细胞仪检测25例初发PNS患儿(PNS组)外周血T淋巴细胞亚群(CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+CD25+)、B淋巴细胞亚群(CD3-CD19+、CD19+CD23+)及自然杀伤细胞(CD3-CD16+56+)水平,同时选取同期19例健康儿童作为健康对照组。数据采用SPSS 15.0软件进行统计学分析。结果 PNS组患儿外周血中CD3+、CD3+CD8+、CD4+CD25+、CD19+CD23+淋巴细胞均显著高于健康对照组(Pa<0.05),而自然杀伤细胞则较健康对照组显著降低(P<0.05);PNS组CD3+CD4+、CD4+/CD8+、CD3-CD19+淋巴细胞与健康对照组比较差异无统计学意义。结论体内淋巴细胞亚群的紊乱参与了PNS的发病过程,其中CD4+CD25+调节性T细胞及CD19+CD23+细胞的变化为PNS的免疫治疗目标提供了理论依据。     

脂肪间充质干细胞及非甲基化胞嘧啶鸟嘌呤核苷酸对食物过敏幼鼠外周血中CD4~+CD25~+Treg的影响

目的观察脂肪间充质干细胞(ADSC)、非甲基化胞嘧啶鸟嘌呤核苷酸(CpG-ODN)对食物过敏幼鼠外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞(CD4~+CD25~+Treg)的表达水平及免疫干预作用。方法将40只BALB/c雌性小鼠随机分为对照组、过敏组、ADSC治疗组(ADSC组)和非甲基化CpG-ODN治疗组(CpG-ODN组),每组10只;通过卵清蛋白(OVA)腹腔注射基础致敏和灌胃激发致敏建立小鼠食物过敏模型;对照组给予等量生理盐水替代;ADSC组在激发致敏前后两个时间点分别给予腹腔注射ADSC(1×10~6个/只);CpG-ODN组在每次灌胃激发前1 h给予腹腔注射非甲基化CpG-ODN(40μg/只)溶液。模型成功建立后对各组小鼠进行过敏症状评分;酶联免疫吸附法检测各组小鼠血清中OVA-IgE水平;流式细胞仪检测小鼠外周血中CD4~+CD25~+Treg水平;取各组小鼠空肠行苏木精-伊红染色,进行病理分析。结果过敏组过敏症状评分及血清中OVA-IgE水平均高于对照组(P0.05),ADSC组、CpG-ODN组过敏症状评分及血清中OVAIg E水平比较差异均无统计学意义(P0.05),但均低于过敏组,高于对照组(P0.01)。过敏组外周血中CD4~+CD25~+Treg水平低于对照组(P0.05),ADSC组、CpG-ODN组外周血中CD4~+CD25~+Treg水平均高于过敏组(P0.05),且与对照组比较及两组间比较差异均无统计学意义(P0.05)。病理结果显示过敏组空肠黏膜层绒毛结构破坏、水肿,大量的嗜酸性粒细胞及淋巴细胞浸润;ADSC组和CpG-ODN组空肠黏膜层绒毛结构部分破坏、无明显水肿,有少量嗜酸性粒细胞及淋巴细胞浸润。结论 ADSC和非甲基化CpG-ODN干预对食物过敏均有一定的治疗效果;均可提高食物过敏幼鼠体内CD4~+CD25~+Treg水平,同时降低OVA-IgE的表达水平,与诱导免疫耐受有一定的关联作用,且两种干预效果相当,但具体作用机制仍需要进一步探究。     

CD4+CD25+调节性T细胞在支气管哮喘中的研究进展

近年来,关于CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在支气管哮喘发病中作用的研究有相当大的进展,支气管哮喘的发病机制已不能单纯用Th1/Th2平衡理论来解释,CD4^＋CD25^＋调节性T细胞越来越受到重视,它通过细胞接触和分泌细胞因子发挥免疫抑制功能,维持自身免疫平衡,控制支气管哮喘的发展,Foxp3、IL-6等在其功能调控中发挥重要作用。支气管哮喘中,有关CD4^＋CD25^＋调节性T细胞作用机制及数量变化的观点不一,糖皮质激素通过增强CD4^＋CD25^＋调节性T细胞功能发挥治疗作用。     

CD4+CD25high+CD127low调节性T 细胞在毛细支气管炎患儿外周血中的表达改变及其临床意义

目的：探讨CD4+CD25high+CD127low调节性T 细胞（regulatory T cell, Treg）在毛细支气管炎患儿外周血中的数量变化及其临床意义。方法：随机选取31例2岁以下毛细支气管炎患儿作为毛细支气管炎组,同期住院的同年龄段支气管肺炎患儿25例和患有疝气、肾结石等非感染性疾病患儿25例分别作为支气管肺炎组和对照组,采用流式细胞术检测3组患儿外周血中CD4+CD25high+CD127lowTreg 占CD4+T 细胞百分比。结果：毛细支气管炎组患儿外周血中CD4+CD25high+CD127lowTreg 占总CD4+T 细胞的8.0%±2.1%,低于支气管肺炎组（9.6%±2.6%）及对照组（11.3%±2.9%）,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：毛细支气管炎患儿外周血CD4+CD25high+CD127lowTreg水平可能是一个较好的反映毛细支气管炎患儿免疫功能状态的参考指标,其在外周血中数量下降提示Treg细胞可能参与毛细支气管炎的发生发展。     

肾母细胞瘤患儿外周血调节性T细胞和自然杀伤T细胞的表达研究

目的 研究肾母细胞瘤患儿外周血CD4+CD25+CD127low 调节性T细胞（Treg）和CD3+CD16+CD56+自然杀伤T细胞（NKT）的表达变化,初步探讨发生改变的原因及其临床意义。方法 选取2015年11月至2016年7月就诊的21例肾母细胞瘤患儿作为病例组,21例于本院体检的同年龄段健康儿童为健康对照组,采用流式细胞术检测两组儿童外周血中 CD4+CD25+CD127low T细胞占CD4+T细胞百分比和CD3+CD16+CD56+T细胞占CD3+T细胞百分比,分别代表Treg水平和NKT水平。结果 病例组肾母细胞瘤患儿外周血Treg水平低于健康对照组（P < 0.05）;病例组肾母细胞瘤患儿外周血NKT水平高于健康对照组（P < 0.05）。结论 Treg和NKT水平变化与肾母细胞瘤的发生与发展有关,Treg和NKT水平可能是反映肾母细胞瘤患儿免疫功能状态的较好指标。     

哮喘患儿外周血中CD4~+LAP~+调节性T细胞比例及功能变化研究

目的测定哮喘患儿外周血中CD4+LAP+调节性T细胞(CD4+LAP+Treg细胞)比例和功能的改变,探讨CD4+LAP+Treg细胞在哮喘发病中的作用。方法选取2014年3月至2015年9月确诊为哮喘的患儿75例为研究对象,依据病情将哮喘患儿分为哮喘急性期组(n=40)和哮喘缓解期组(n=35);另选取行健康体检儿童30例为健康对照组。采用流式细胞仪检测各组儿童外周血CD4+LAP+Treg细胞百分比;采用3H-脱氧胸腺嘧啶苷法检测各组CD4+LAP+Treg细胞的免疫抑制情况。结果哮喘急性期组患儿体内CD4+LAP+Treg比例(2.0%±1.0%)较缓解期组(4.1%±2.4%)及健康对照组(4.6%±3.0%)均降低(P0.05);哮喘急性期组患儿体内CD4+LAP+Treg细胞免疫抑制率(21%±4%)较缓解期组(55%±9%)及健康对照组(62%±11%)均降低(P0.05)。结论哮喘患儿外周血中CD4+LAP+Treg数量降低和抑制功能减弱可能参与了哮喘的急性发病过程。     

CD44分子在血细胞的表达及对T淋巴细胞增殖的影响

为了进一步探讨粘附分子CD44在血细胞的分布特点及与免疫功能的关系，利用荧光双染色一流式细胞仪技术检测各种血细胞的CD44分子的表达，利用^3H-TdR掺入法检测T细胞的DNA合成。结果显示：除血小板CD44分子的表达为阴性、胸腺细胞为弱阳性外，其他所有血细胞CD44分子的表达(包括红细胞、中性粒细胞、单核细胞、干细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞)均为阳性。单独抗CD3抗体可明显增强T细胞的DNA合成；但协同抗CD44抗体后，T细胞的DNA合成被明显抑制。单独抗CD44抗体对IL-2激活的T细胞DNA合成无明显影响；但协同抗CD2抗体后，可明显增强抗CD2抗体对IL-2激活的T细胞DNA合成的抑制。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞及其转录因子FoxP3在儿童过敏性紫癜发病机制中的作用

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)及其转录因子FoxP3在儿童过敏性紫癜(HSP)发病机制中的作用。方法研究对象为我院儿科2009年2月-2010年2月收治的急性期HSP患儿46例(HSP组)以及健康对照儿童30例(对照组)。采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法检测外周血单个核细胞FoxP3 mRNA的表达。运用流式细胞术检测外周血中CD4+CD25+Treg的表达。结果 HSP组患儿外周血单个核细胞FoxP3 mRNA相对表达水平(32.17±23.04)低于对照组(147.91±99.15)(P<0.01)。CD4+CD25+Treg占淋巴细胞比例HSP组[(5.34±2.51)%]低于对照组[(7.85±1.97)%],两组比较差异有显著性(P﹤0.01)。CD4+CD25+Treg与FoxP3 mRNA的表达呈正相关(r=0.502,P=0.01)。结论 HSP患儿急性期存在CD4+CD25+Treg的表达降低,其特异性的转录因子FoxP3 mRNA表达下调。Treg的减少以及由此引发的免疫抑制效应不足,可能是HSP急性期免疫失衡的重要原因之一。