大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因型研究

目的：分析临床大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中超广谱β-内酰胺酶的基因型分布以及产ESBLs细菌中头孢菌素酶的存在情况。方法：质粒接合实验分析耐药性转移，根据超广谱β-内酰胺酶和头孢菌素酶各种已知基因序列设计引物，进行聚合酶链反应分析，确定超广谱β-内酰胺酶的基因型分布以及头孢菌素酶基因。结果：80.4％的菌株质粒接合实验成功，66％的菌株为TEM基因型，14％的菌株为SHV基因型，10％的菌株为CTX-M型。2株菌同时存在AmpC酶。TEM阳性的大肠埃希菌RAPD带型呈多样性。结论：临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性可以发生转移，ESBLs以TEM基因型为主，部分菌株为SHV、CTX-M型。同一菌株内可以产生2种不同基因型的超广谱β-内酰胺酶。产ESBL菌株不是以细菌克隆播散为主。     

儿童产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药性及基因型研究

目的 了解笔者医院儿童产β内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因分型,为临床合理使用抗生素提供依据。方法 收集2017年7月~2018年7月从笔者医院常规分离的临床痰液、尿液、血液等各标本进行培养,对肺炎克雷伯菌进行ESBLs筛选及确证。对确证110株产超广谱β-内酰胺酶临床菌株进行19种抗生素的药敏试验,观察产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药性。分析了产生肺炎克雷伯菌的ESBL质粒谱,并对产生肺炎克雷伯菌的ESBL携带的ESBL抗性基因进行了扩增和PCR分型。结果 产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯杆菌表现为多重耐药性,对头孢唑啉、头孢唑啉、头孢噻嗪、头孢噻嗪等头孢菌素具有较高的耐药性,耐药率为77.2%～86.0%。酶抑制复合制剂的耐药率为31.8%～80.0%,对亚胺培南耐药率为0。耐药基因型检出率中,SHV型占4.5%,CTX-M-9型占32.7%,TEM型占41.8%,CTX-M-1型占42.7%。另有41株(37.3%)检测到两种或两种以上耐药基因型,其中以CTX-M-1型与TEM型或CTX-M9型为主。结论 超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的产生引起对多种抗生素具有多重耐药性,临床应重视其检测和药敏试验。亚胺培南等碳青霉烯类抗生素目前仍是治疗产广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌感染最有效的药物。     

肺炎克雷伯杆菌40株超广谱β内酰胺酶基因的分型

目的：分析肺炎克雷伯杆菌临床分离株中超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的主要基因型。方法：用表型确证试验检出产ESBL。的肺炎克雷伯杆菌40株，分别用TEM、SHV和CTX-M通用引物对这些耐药株进行聚合酶链反应(PCR)扩增。结果：PCR扩增结果显示，TEM、SHV和CTX-M的阳性率分别为30％、60％和45％。结论：SHV和CTX．M型是南京医科大学第一附属医院产ESBLs菌株的主要基因型。     

下呼吸道产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌的耐药性基因型分析

目的:观察下呼吸道产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrumβ-lactamases,ESBLs)肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌耐药菌株耐药基因分型,并探讨耐药菌株的流行状况及发生耐药的机制。方法:按常规方法进行细菌分离、培养和菌种鉴定。采用微量液体稀释与K-B法,分别对常用抗生素和头孢哌酮/舒巴坦的耐药性进行检测。采用纸片法确证产超广谱β-内酰胺酶菌株,并应用PCR技术进一步扩增TEM型、SHV型β-内酰胺酶的基因型。结果:产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对AMP、AMP/SB、PIP、CF、CFZ、CRM、CPD、CAX、CAZ、CTX、CPE和AZT的耐药率高达90%以上。产ESBLs肺炎克雷伯菌中产TEM型、SHV型、TEM和SHV型β-内酰胺酶基因的百分率分别为26.92%、30.76%、7.69%,大肠埃希菌百分率分别为46.15%、5.12%、10.25%。结论:产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对多种不同种类抗生素耐药,且具有多重耐药的特点。产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌携带TEM或SHV型β-内酰胺酶基因,其中肺炎克雷伯菌以产SHV型β-内酰胺酶为主,大肠埃希菌则以产TEM型β-内酰胺酶为主。     

产ESBLs分离株耐药基因初步分型

目的了解产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和克雷伯菌的主要基因型分布特点。方法用表型确证试验筛选出临床标本中产ESBLs的大肠埃希菌和克雷伯菌114株。应用PCR方法扩增产酶株的TEM、SHV和CTX-M基因。结果PCR结果显示TEM、SHV和CTX-M基因的总阳性率分别为40.4%、20.7%和83.3%,其中大肠埃希菌分别为48.1%、1.3%和93.5%,肺炎克雷伯菌分别为24.3%、81.1%和62.2%。46.8%的大肠埃希菌和51.4%的肺炎克雷伯菌同时携带多个基因。结论产ESBLs大肠埃希菌的主要基因型为CTX-M,肺炎克雷伯菌主要基因型为SHV。大多数菌株同时携带多个基因。     

肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因型分布

目的阐明广州地区肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因型分布。方法用药敏纸片法对67株耐三代头孢菌素类抗生素的肺炎克雷伯菌进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型筛选,采用PCR检测β-内酰胺酶耐药基因,对部分ESBLs菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)。结果 67株菌中有58株菌ESBLs表型阳性,β-内酰胺酶基因检测显示,44株产CTX-M、43株产SHV(其中10株产超广谱的SHV)、14株产OXA-1群、38株产TEM,7株菌产AmpC。产CTX-M的菌株有20株产CTX-M-1群(包括15株产CTX-M-15)和24株产CTX-M-9群(包括14株产CTXM-14)。PFGE结果显示产ESBLs菌株同源性低。结论广州地区耐三代头孢肺炎克雷伯菌以产CTX-M-1群和CTX-M-9群ESBLs为主。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药基因序列分析

目的研究沈阳地区产超广谱β-内酰胺酶（extended—spectrumβ-lactamases,ESBLs）肺炎克雷伯菌的基因型分布。方法采用聚合酶链反应（PCR）扩增分离31株产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌株的TEM型、SHV型及CTX—M-1型ESBLS基因,1％琼脂糖凝胶电泳,回收DNA片段,测序分析各基因型在耐药的产超光谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌株中的分布。结果TEM-1、SHV-1、CTX—M-1基因扩增阳性率分别为58．0％、90．3％、16．1％。结论分离的ESBLs阳性的肺炎克雷伯菌存在多个耐药基因。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药型与基因分型

目的 分析肺炎克雷伯菌的耐药现状,探讨其耐药型与基因组型间的关系,检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)各基因型的流行状况.方法 用纸片扩散法检测117株肺炎克雷伯菌对20种抗生素的耐药情况.用PFGE实验探讨耐药表型与基因组型间的关系.用PCR扩增所有产酶株的TEM、SHV及CTX-M基因片段,分析ESBL各基因型的流行状况.结果 肺炎克雷伯菌耐药情况严重,产ESBL肺炎克雷伯菌检出率达到43.59%.PFGE将117株肺炎克雷伯菌分为3群,群间相似度为37.30%,没有发现特异的ESBL条带.PCR扩增检出SHV型15株,占29.40%;TEM型39株,占76.50%;CTX-M型9株,占17.60%.同时携带SHV、CTX-M基因者有19株,占37.30%.结论 该院肺炎克雷伯菌的耐药现象严重、多重耐药现象突出,ESBL检出率高.该次实验未发现由同一菌株所致的医院感染,肺炎克雷伯菌的耐药表型与PFGE基因分型结果 可以表现一致,也可以表现为不同.产ESBL肺炎克雷伯菌的基因型以TEM和SHV为主,同一菌株携带多个基因的现象较为普遍.     

124株肺炎克雷伯菌耐药性分析和产ESBLs株耐药基因分型研究

目的 探讨肺炎克雷伯菌耐药性以及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型的流行状况.方法 用K-B法检测肺炎克雷伯菌对24种常用抗生素的耐药情况;用PCR扩增所有产酶株的TEM、SHV及CTX-M基因片段,分析ESBLs各基因型的流行状况.结果 肺炎克雷伯菌除对碳青霉烯类药物敏感外,对其他抗生素耐药严重;产ESBLs肺炎克雷伯菌检出50株,检出率40.32％.ESBLs基因分型结果显示,多株同时携带2种或2种以上基因型,且多为CTX-M型与TEM型或SHV型基因共同存在.结论 常用抗菌药物耐药严重、呈多重耐药.ESBLs检出率较高,产ESBLs肺炎克雷伯菌的基因型以CTX-M为主.     

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因型研究与药敏分析

目的 探讨广州地区部分医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因分布规律.方法 用NCCLS推荐的表型确证试验确定临床标本中产ESBLs肺炎克雷伯菌62株,用Etest测定其最低抑菌浓度(MIC),分别用TEM,SHV,CTX-M-1,CTX-M-2,CTX-M-9组通用引物进行聚合酶链反应(PCR),并对结果进行分析.结果 产ESBLs肺炎克雷伯菌对多种抗生素耐药,对亚胺培南的敏感率最高(98.2%),其次是头孢吡肟(72.7%),头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/三唑巴坦分别为69.6%和63.6%.PCR扩增结果显示TEM,SHV和CTX-M基因的阳性率分别为16.1%,50%和61.3%,21%的菌株同时携带多个基因.结论 广州地区肺炎克雷伯菌对亚胺培南酌敏感率最高,产ESBLs最常见的基因型是CTX-M型,其次是SHV,TEM型.     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌CTX-M基因型和耐药性分析

目的 研究哈尔滨市肺炎克雷伯菌中CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行组别和细菌耐药性特征.方法 收集哈尔滨市4所医院非重复的74株产ESBLs肺炎克雷伯菌,采用CTX-M1、2、8、9组特异性PCR引物检测菌株质粒上相应4组CTX-M基因的存在情况,并用K-B纸片扩散法测定菌株对临床相关的广谱β-内酰胺类抗菌药物的耐药性.结果 产ESBLs肺炎克雷伯菌中25.7%的菌株CTX-M1组PCR扩增阳性,39.2%为CTX-M9组阳性,未检测到CTX-M2组和CTX-M8组的存在.CTX-M阳性株对头孢噻肟、头孢曲松和头孢他啶的耐药率与CTX-M阴性株相比,差异无统计学意义(均P＞0.05).结论 本地区产ESBLs肺炎克雷伯菌中CTX-M型ESBLs以CTX-M1组和CTX-M9组为主,有同时携带两组CTX-M基因菌株的检出;本地区CTX-M型ESBLs在产ESBLs肺炎克雷伯菌对头孢噻肟、头孢曲松和头孢他啶的耐药特征中不起主要作用.     

102株肺炎克雷伯杆菌CTX-M型基因检测

目的:了解泸州地区临床分离的肺炎克雷伯杆菌中CTX型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)发生情况.方法:按美国全国临床检验标准委员会(2005年版)表型确正试验检出产ESBLs肺炎克雷伯杆菌;分别用CTX4组引物对其进行聚台酶链反应(PCR)扩增.结果:表型确正试验检出产ESBLs菌株38株,检出率为37.25%;PCR扩增显示:CTX-M型ESBLs阳性是18株,检出率为47,37%.结论:泸州地区肺炎克雷伯杆菌CTX-M型产生率较高.     

广州地区肺炎克雷伯菌产TEM型及SHV型β-内酰胺酶基因表型的研究

目的对广州地区产β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌TEM型和SHV型基因型及其分子流行病学进行研究。方法对57株产β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌进行blaTEM和blaSHV基因扩增,分别采用变性高效液相色谱技术和测序法对扩增产物进行分析,以明确基因类型。结果57株肺炎克雷伯菌均扩增出blaTEM和blaSHV基因。测序结果表明,TEM-116 ESBL32株,占54．2％;SHV型以SHV-12为主,占33．3％,其次为SHV-11和SHV-2a等,还发现5种新的SHV基因亚型。54株菌株同产TEM和SHV型β-内酰胺酶,占94．7％;其中13．0％同产TEM-116和SHV-12ESBL。结论TEM-116和SHV-12分别是广州地区产β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌TEM型及SHV型耐药质粒主要的基因亚型,blawTEM和blaSHV在肺炎克雷伯菌中同产的比例很高,这提示本地区即将或已经面临肺炎克雷伯菌新耐药机制的抵抗和流行,必须加强对产ESBL肺炎克雷伯菌的分子流行病学监测。     

清远地区产ESBLs肺炎克雷伯菌药敏分析与基因研究

目的：了解清远地区产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型分布。方法：按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的表型确证试验确定临床标本中产ESBLs肺炎克雷伯菌224株,用Etest测定其最低抑菌浓度（MIC）,分别用TEM、SHV、CTX-M通用引物进行聚合酶链反应（PCR）,并对结果进行分析。结果： 清远地区产ESBLs肺炎克雷伯菌对多种抗生素耐药,对美罗培南的敏感率最高（88.9%）,其次是亚胺培南（83.9%）,哌拉西林/他唑巴坦和阿米卡星的敏感率分别为72.8%和70.2%。PCR扩增结果显示TEM、SHV和CTX-M基因的阳性率分别为45%、51.7%和76.3%,15.1%的菌株同时携带多个基因。结论：清远地区产ESBLs肺炎克雷伯菌对美罗培南的敏感率最高;最常见的基因型是CTX-M,其次为SHV、TEM。     

产ESBLs与AmpC大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的基因型分析

目的 了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)与AmoC酶大肠埃希菌(escherichia coli,ECO)和肺炎克雷伯菌(klebsiella pneumoniae,KPN)的基因型特征.方法 用表型确证试验从临床分离的74株ECO和KPN中筛选出16株产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamases,ESBLs)、4株产AmpC酶及25株产ESBLs AmpC菌株.应用多重聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR),扩增菌株的TEM,SHV和CTX-M-G1型超广谱β-内酰胺酶基因和DHA-1,ACT-1型AmpC酶基因,并对PCR产物经凝胶电泳后进行初步的分析.结果 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌携带TEM,SHV,CTX-M-G1,DHA-1和ACT-1基因的检出率分别为54.2%,50.0%,62.5%,57.1%,35.7%;29.4%,52.9%,41.2%,66.7%,46.7%.相当一部分菌株同时携带2种或2种以上的基因型.结论 产ESBLs与AmpC酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为多重耐药菌株,存在多种耐药基因.应采取积极的措施防止产酶菌株的流行.     

呼吸道产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌肺炎克雷伯氏菌感染及耐药变迁

目的:调查本院近年来呼吸道感染产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌与肺炎克雷伯氏菌的感染情况,以期临床医生在治疗这类病人中有参考价值.方法:对临床送检的痰液、咽拭子、气管分泌物等进行培养,并对大肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌做产超广谱β-内酰胺酶菌鉴定及统计,并同时做抗生素抗菌分析.结果:2000年呼吸道中的大肠杆菌及肺炎克雷伯氏菌有182株,其中产超广谱β-内酰胺酶菌29株,产超广谱β-内酰胺酶菌检出率15.9%.2001年的大肠杆菌及肺炎克雷伯氏菌共有213株,其中产超广谱β-内酰胺酶菌共有55株,产超广谱β-内酰胺酶菌检出率25.8%.2002年有265株,产超广谱β-内酰胺酶菌共有100株,产超广谱β-内酰胺酶菌检出率37.7%.统计显示,产超广谱β-内酰胺酶菌对多种抗生素均产生较高耐药性,并有明显的逐年增高现象.统计显示,产超广谱β-内酰胺酶菌对亚胺培南及特治星耐药率在5%及8%以内.对于非产超广谱β-内酰胺酶菌其抗生素的耐药性明显较产超广谱β-内酰胺酶菌低.结论:对呼吸道感染大肠杆菌及肺炎克雷伯氏菌的病人,应警惕其产超广谱β-内酰胺酶菌的存在,产超广谱β-内酰胺酶菌感染的病人,其菌耐药性高,抗生素耐药性广泛,治疗时应参照抗菌谱治疗.亚胺培南及特治星对其耐药性较低,是治疗较为理想的药物.对于非产超广谱β-内酰胺酶菌感染病人,抗生素耐药性也有逐年增高的现象.     

产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌基因型研究

目的：了解泸州地区临床分离产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型的流行特征。方法：用聚合酶链反应法（PCR）对ESBLs菌株进行扩增,产物行琼脂糖凝胶电泳,紫外灯下观察结果,明确ESBLs基因型。结果：97株产ESBLs菌株中基因分布数据为TEM基因型15株（15.5%）,SHV基因型17株（17.5%）,非TEM、非SHV基因型占67.0%。结论：本地区产ESBLs肺炎克雷伯菌基因型部分为TEM型和SHV型,较大部分为其他型ESBLs。     

呼吸道产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌肺炎克雷伯氏菌感染及耐药变迁

目的 :调查本院近年来呼吸道感染产超广谱 β-内酰胺酶大肠杆菌与肺炎克雷伯氏菌的感染情况 ,以期临床医生在治疗这类病人中有参考价值。方法 :对临床送检的痰液、咽拭子、气管分泌物等进行培养 ,并对大肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌做产超广谱 β-内酰胺酶菌鉴定及统计 ,并同时做抗生素抗菌分析。结果 :2 0 0 0年呼吸道中的大肠杆菌及肺炎克雷伯氏菌有 182株 ,其中产超广谱β-内酰胺酶菌 2 9株 ,产超广谱β-内酰胺酶菌检出率 15 .9%。 2 0 0 1年的大肠杆菌及肺炎克雷伯氏菌共有 2 13株 ,其中产超广谱 β-内酰胺酶菌共有 5 5株 ,产超广谱 β-内酰胺酶菌检出率 2 5 .8%。2 0 0 2年有 2 6 5株 ,产超广谱β-内酰胺酶菌共有 10 0株 ,产超广谱β-内酰胺酶菌检出率 37.7%。统计显示 ,产超广谱β-内酰胺酶菌对多种抗生素均产生较高耐药性 ,并有明显的逐年增高现象。统计显示 ,产超广谱 β-内酰胺酶菌对亚胺培南及特治星耐药率在 5 %及 8%以内。对于非产超广谱 β-内酰胺酶菌其抗生素的耐药性明显较产超广谱 β-内酰胺酶菌低。结论 :对呼吸道感染大肠杆菌及肺炎克雷伯氏菌的病人 ,应警惕其产超广谱 β-内酰胺酶菌的存在 ,产超广谱 β-内酰胺酶菌感染的病人 ,其菌耐药性高 ,抗生素耐药性广泛 ,治疗时应参照抗菌谱治疗。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药谱和基因分型

目的 研究临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamases,ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药谱及基因型分布情况. 方法 采用纸片扩散法对肺炎克雷伯菌进行抗菌药物的敏感性实验,并用PCR对ESBLs进行基因型分析.结果 50株产ESBLs的肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率为100%;除对头孢吡肟耐药率为22.0%外,对其他抗菌药物耐药率均>50%,其中对头孢噻肟、头孢他啶和头孢曲松的耐药率分别为84.0%、68.0%和66.0%;基因型分析显示有37株携带CTX-M基因,34株携带TEM基因,21株携带SHV基因. 结论 产ESBLs的肺炎克雷伯菌耐药严重,且以CTX-M基因型多见.     

肺炎克雷伯杆菌的分离鉴定及超广谱β－内酰胺酶的检测

目的存肺炎克雷伯杆菌进行分离鉴定的基础上，探讨该菌产生超广谱β-内酰胺酶的情况，为临床合理用药提供依据。方法用肠杆菌科细菌生化编码鉴定管对分离后103株肺炎克雷们杆菌进行鉴定，采用头孢噻肟和头孢嚷肟／棒酸、头孢他啶和头孢他啶／棒酸检测超广谱β-内酰胺酶。结果在103株肺炎克雷伯杆菌中，26株检测出超广谱β-内酰胺酶，检出率达25．2％。结论该地区产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯杆菌分离率较高。