聚合酶链反应对单-抗HBc阳性的飞行员血清HBV-DNA的检测

用聚合酶链反应对单-抗HBc阳性的飞行员血清HBV携带情况进行了调查，首先用ELISA法对189份血清检测了HBSAg、抗HBs和抗HBc。HBsAg阳性率为4．76％（9／189），抗HBs17．99％（34／189），抗HBc24．87％（47／189），聚合酶链反应检测单-抗HBc阳性血19份，抗HBs阳性／抗HBc阳性血20份。HBV－DNA阳性率分别为31．58％（6／19）和5％（1／20），结果提示单-抗HBC阳性飞行员中存在低水平的HBV携带者；在招飞体检仅检测血清HBSAg，不能除外低水平的HBV感染者。     

抗—HBe和HBV—DNA阳性慢性乙型肝炎26例临床分析

近年来，随着乙型肝炎病毒（HBV）分子生物学研究的进展，尤其是HBV前C基因突变株的发现，对慢性HBV感染中e系统的临床意义有了进一步的认识。目前趋向于将慢性乙型肝炎分为两大型[1]：乙型肝炎e抗原（HBeAg）阳性慢性肝炎和乙型肝炎e抗体（抗-HBe）阳性慢性肝炎（异型慢性乙型肝炎acypicalchronichepatitisB）。本文就抗-HBe和DNA阳性慢性乙型肝炎26例临床分析如下。1临床资料1．1性别与年龄男性25例，女性1例，年龄23～48岁，平均29．8岁。1．2临床症状与体征乏力和食欲不振26例，关节痛5例，低热2例，蜘蛛痣24例，肝掌18例，肝…     

慢性乙型肝炎患者血清HBV全长序列分析及复制力评价

目的 分析乙型肝炎患者HBV全长基因组序列并对其复制力进行评价.方法 从慢性乙型肝炎患者血清中提取HBV病毒DNA,PCR扩增HBV全长基因组,克隆到pGEM-Teasy载体中,每个样品挑选5～10个克隆测序,分析基因型以及全长基因组耐药相关的突变位点,并对个别位点进行定点突变.将克隆到pGEM-Teasy载体中的全长HBV基因组经BspQ Ⅰ/Sca Ⅰ双酶切后,转染入肝癌细胞系HepG2、Huh7.转染3d后榆测上清HmAg表达量及细胞内HBV复制中间体核心颗粒DNA载量,分析全长HBV基因组的复制力(1.0倍HBV复制模型).结果 从2份慢性乙型肝炎患者血清中成功获得5条HBV全长克隆,来自同一份血清的克隆核苷酸,其一致性为98%～100%,提示HBV存在准种特性.测序结果 表明5条HBV全长基因均为C型.通过定点突变又获得3个全长克隆.经序列分析发现,HBV反转录酶区存在A181V/S、L229M、V84M、M204I氨基酸位点的突变,前C/C区存在T1753C、A1762T、G1764A和G1896A核苷酸位点的突变.复制力分析提示上述位点突变后病毒复制力均有不同程度下降,L229M还可以进一步降低A181V突变株的复制力.结论 自行建立的无载体1.0倍HBV复制模型可在细胞内分泌抗原蛋白以及装配子代病毒,完成生活周期,这为下一步分析HBV的耐药表型打下了基础.此外,还可指导临床制定更加合理的抗病毒策略,筛选针对已出现或将来可能出现的耐药突变的新型抗病毒药物.     

定量PCR检测慢性肝病患者血清HBV-DNA的临床意义

我们采用外标法结合计算机辅助视频设备对２３０例慢性肝病患者进行了血清ＨＢＶＤＮＡ定量分析及乙型肝炎病毒标志物（ＨＢＶＭ）的检测,以探讨ＨＢＶＤＮＡ与ＢＨＶＭ的相互关系及临床意义。１　材料和方法１１　一般资料　２３０份血清标本均来自１９９８０２～１９９８１１本院住院病人。其中男１７０例,女６０例。年龄９～７１岁,平均３８２岁。诊断符合１９９５年北京第五次全国传染病寄生虫病学术会议讨论修订的病毒性肝炎的防治方案。血清于４０℃下保存备检。１２　主要试剂和仪器　ＨＢＶＭ试剂为上海科华实业…     

HBV DNA疫苗诱导健康及HBV转基因小鼠细胞免疫应答

采用HBVCTL表位多肽体外刺激或冲击免疫效 (E)、靶(T)细胞 ,以观察DNA疫苗诱导健康及HBV转基因 (Tg)小鼠细胞免疫效果。结果发现 ,DNA疫苗能有效诱导健康BALB/c小鼠CTL活性 ,活性强弱与E/T比值及其上清液中IFN γ分泌水平有一定关系。HBsAg表位多肽(pp2 0 )体外刺激DNA疫苗免疫组效应细胞 ,培养上清IL 1 2释放水平 (2 1 1 3± 39 8pg/ml)明显较对照组 (86 7±2 7 1 pg/ml)高(P <0 0 5 ,t=4 4 82 )。DNA疫苗免疫HBVTg小鼠诱导CTL活性 (1 2 7%± 6 7% )较蛋白疫苗免疫对照组(1 7%±3 2 % )高(P <0 0 1 ,t=3 6 2 9) ;其效应细胞体外受 pp2 0刺激后分泌IL 1 2水平 (4 0 0± 30 1pg/ml)明显高于同期空载体免疫对照组 (3 8±3 0 pg/ml,P <0 0 5 ,t=2 376 )。采用在体电脉冲法DNA疫苗接种的 5只HBVTg小鼠中 ,于 4周时有 2只血清HBsAg阴转 ,并于 8周时出现抗 HBs阳性 ,而对照组中无一例血清HBsAg发生变化。表明HBVDNA疫苗能有效诱导健康及HBVTg小鼠细胞免疫应答 ,提示其通过增强细胞免疫功能作为抗HBV免疫治疗的可行性     

半乳糖修饰的反义硫代寡核苷酸的肝细胞导向及抗乙型肝炎病毒活性研究

人工合成两种半乳糖多聚赖氨酸导向配体，与荧光素标记的互补于ＨＢＶｍＲＮＡ多聚腺苷酸信号部分的２１－聚反义硫代脱氧核苷酸（ＡＳＯＤＮ）电性结合，与２．２．１５细胞共同孵育，４０ｍｉｎ后配体组对ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ的抑制率为４１％～４７％和２８％～３１％，单纯ＡＳＯＤＮ组为１１％和５％；３ｄ后配体组为８８％～８９％和７１％～７４％，单纯组为６４％和５３％。经流式细胞分析，配体组使２．２．１５细胞荧光染色率达７５．３％和８３．８％；单纯组为２４．３％。结果表明，两种人工配体均具有良好的导向ＡＳＯＤＮ入肝细胞的功能，且可以明显提高ＡＳＯＤＮ抗ＨＢＶ的活性。     

HBeAg阴性慢性乙型肝炎肝组织病理与血清标志物的相关性分析

目的了解HBeAg阴性慢性乙型肝炎(CHB)患者肝组织病理和临床血清学指标的关系。方法对187例HBeAg阴性CHB患者进行肝组织病理炎症活动度分级和纤维化分期与同期血清HBV DNA水平、血生化指标进行相关性分析。结果 187例HBeAg阴性CHB患者肝组织病理炎症活动度分级与血清HBV DNA水平相关(χ2=30.26,P<0.01);肝组织纤维化程度分期与血清HBV DNA水平无明显相关性(χ2=10.94,P>0.05)。血清TBIL、ALT、AST、GGT水平与肝组织炎症活动度呈正相关,ALB、PTA与之呈负相关。结论 HBeAg阴性CHB患者病毒复制活跃和血清TBIL、ALT、AST、GGT能反映肝组织炎症活动。     

HBv—M血清学标本23 621份HBsAg／HBsAb双阳性结果的临床意义

乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒（HBV）引起的肝脏炎性损害，是我国当前发病率较高的一种传染病，而且很容易发展为慢性。HBV—M血清学检测是目前广泛应用于临床的首选检测手段和诊疗依据，但近年来在检测过程中经常会出现HBsAg／HBsAb双阳性的模式，给临床的诊治和解释工作带来困扰。     

儿童慢性乙型肝炎患者树突细胞亚群的检测及其临床意义

目的 观察儿童慢性乙型肝炎患者外周血和肝内树突细胞(DC)及其亚群的特征,分析它们与乙型肝炎病毒(HBV)清除的关系.方法 选择10例免疫耐受患儿(免疫耐受组)、20例免疫激活患儿(免疫激活组)和14名健康儿童(健康组),利用流式细胞技术检测外周血髓样树突细胞(mDC)和浆样树突细胞(pDC)的百分比,分别用poly Ⅰ:C和CpG ODN2216刺激外周血单个核细胞,检测mDC产生白介素12(IL-12)和pDC产生干扰素α(IFN-α)的能力;利用免疫组化技术检测肝内mDC和pDC的数量.结果 免疫激活组mDC和pDC的百分比(分别为0.39%±0.17%和0.22%±0.13%)明显低于免疫耐受组(0.52%±0.21%和0.28%±0.10%)、健康组(0.47%±0.20%和0.36%±0.19%),差异有显著性(P＜0.05).患儿DC数量与血清ALT呈明显负相关,与HBV DNA病毒载量无明显相关性.免疫激活组CpG刺激产生IFN-α的量(464.8±381.8pg/ml)明显低于免疫耐受组(822.3±327.2pg/ml)和健康组(866.0 ± 311.1pg/ml,P＜0.05),而免疫耐受组与健康组之间无显著性差异(P＞0.05).DC在poly Ⅰ:C刺激下产生IL-12的能力三组无明显差异.同时还发现免疫激活患儿肝内的mDC和pDC数量均明显增加.结论 儿童慢性乙型肝炎患者外周DC数量的下降可能与局部的免疫反应有关.     

提高慢性乙型肝炎防治水平--解读《慢性乙型肝炎防治指南》

在中华医学会肝病学分会和感染病学分会联合组织安排下,历经一年半时间,中国《慢性乙型肝炎防治指南》于2005年12月10日正式公布。中国《慢性乙型肝炎防治指南》（下称《指南》）具有严谨的科学性、广泛的群众性、确切的实用性,体现了预防为主的原则,对于规范和指导我国慢性乙型肝炎的防治工作具有十分重要的意义。为了宣传普及《指南》,中华医学会肝病学分会和感染病学分会决定在2006年组织有关专家去全国25个城市宣讲《指南》。     

慢性乙型肝炎患者自然杀伤细胞代谢活性研究进展

慢性乙型肝炎(CHB)是一世界性公共卫生问题.乙型肝炎病毒(HBV)持续性感染的关键是病毒复制环节中形成的闭合环状DNA,现有治疗措施难以将其彻底清除.研究表明,自然杀伤细胞(NK)在HBV慢性持续性感染过程中的表型和功能变化不同于急性感染,提示NK细胞的功能可能与机体能否清除HBV有关.NK细胞作为重要的天然免疫细胞,其发育、分化和活化依赖于代谢活性,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)是一类与细胞代谢活性高度相关的丝氨酸/苏氨酸激酶,其磷酸化水平决定着NK细胞的代谢活性和功能.本文从HBV的慢性持续性感染、NK细胞的表型和功能、NK细胞发育分化与mTOR的关系等方面进行综述.     

乙肝患者肝移植前后血清病毒指标的变化及意义分析

目的 观察乙肝患者肝移植术后血清5项指标及HBV DNA含量的变化并分析其临床意义.方法 选择2006年10月-2007年3月在解放军第302医院施行肝移植术且术前采用拉米夫定治疗的35例乙肝患者为研究对象,采用ELISA法测定手术前、后血清5项指标,采用荧光FCR法测定血清HBV DNA含量变化.选择拉米夫定治疗前HBV DNA高于10 000U/ml的45例乙肝患者作为对照,测定用药前和用药2周后血清乙肝5项指标和HBV DNA.结果 35例肝移植患者中移植后第2天,除1例术前、术后乙肝5项和HBV DNA无明显变化外,其余34例肝移植患者的血清HBsAg和HBV DNA全部转阴,HBsAb全部转阳.其中11例大三阳患者的HBeAg全部转阴,6例发生从HBeAg到HBeAb的血清学转换,但移植前后血清HBeAb均无变化.45例拉米夫定对照患者均未发生HBsAg阴转和HBsAb阳转的现象,11例患者血清HBV DNA含量下降到500U/ml以下,29例血清HBV DNA含量下降,但持续高于1 000u/ml,5例患者的HBV DNA无明显变化.在34例大三阳患者中,有29例患者HBeAg转阴但未发生HBeAb阳转现象.结论 肝移植术外加抗病毒和免疫学的综合治疗方案,可使97%的乙肝患者彻底清除血清HBV DNA,并发生HBsAg、HbeAg的血清转换.     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的临床观察

目的评价拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的临床特点及停药后肝炎复发情况。方法观察122例慢性乙型肝炎患者应用拉米夫定治疗停药6个月以上的临床表现。结果免疫耐受期的9例患者中0例显效,4例有效,5例无效,停药6个月内4例有效患者均出现复发。非免疫耐受期患者中显效13例（13／113,11．50％）,有效90例（90／113,79．65％）,无效10例（10／113,8．85％）。治疗期间复发11例（11／113,9．73％）,均为有效病例。停药后6个月内,显效患者中7例（7／13,53．85％）出现病情复发,有效病例中69例（69／79,87．34％）出现复发。突然停药组与逐步停药组患者治疗前ALT水平无显著差别,但停药后半年内最高ALT水平突然停药组明显高于逐步停药组（P〈0．05）,两组患者停药后复发率无明显差异。结论拉米夫定治疗慢性乙型肝炎有效,但复发率较高,建议长期应用以抑制病毒复制。免疫耐受期患者不宜应用拉米夫定治疗。     

慢性重型乙型肝炎预后指标分析

目的：探讨慢性重型乙型肝炎血清甲胎蛋白（AFP）、胆碱酯酶（CHE）、凝血酶原活动度（PA）、总胆红素（TBIL）、重型肝炎分期等指标与预后的关系。方法：检测慢性重型乙型肝炎148例入院时AFP、TBIL、CHE、PA的水平,分析其与预后和肝炎分期的关系。结果：本组患者临床治愈好转率31．8％。治愈好转组与无效组入院时AFP、PA水平比较,差异显著（P〈0．05）;重型肝炎早期患者与晚期患者入院时AFP水平比较,差异显著（P〈0．05）。结论：AFP、PA、重型肝炎分期是判断重型乙型肝炎预后的重要及可靠指标,且AFP、PA的信息反应较早,更有助于进行早期判断预后。     

膦甲酸钠(可耐)治疗慢性乙型肝炎及其对HBV-DNA的影响

目的　观察膦甲酸钠治疗慢性乙型肝炎及其对HBV DNA的影响。方法　 46例慢性乙肝患者 ,随机分为治疗组 (给予膦甲酸钠注射液和一般护肝药物 ) 2 4例 ,对照组 (仅给一般护肝药物 ) 2 2例。疗程均为 2 8d。观察膦甲酸钠治疗慢性乙肝疗效以及对血清HBV DNA的影响。结果　治疗组有 10例 (4 1.7% )HBV DNA转阴 ,9例 (3 7.5 % )HBeAg转阴 ;治疗组治疗后HBeAg ,HBV DNA定量转阴率均显著高于对照组(P <0 .0 1) ,而且治疗组治疗后ALT ,HBV DNA定量与对照组治疗后结果比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　膦甲酸钠具有较好的抑制乙肝病毒复制的效果 ,其有可能成为治疗慢性乙肝感染安全而有效的药物。     

乙肝患者血清中HBV-DNA与5项血清标志的相关性分析

乙型肝炎病毒感染诊断主要依赖于血清特异抗愿、抗体和HBV-DNA的检测，我们用放射免疫学(RIA)方法检测乙肝患者血清学指标，同时用聚合酶链反应(PCR)方法检测HBV-DNA，以探讨不同免疫标志的乙肝患者血清中HBV-DNA的检测及结果分析。     

不同肝病病人血清ras－P21蛋白检测及相关性研究

不同肝病病人血清ｒａｓ－Ｐ２１蛋白检测及相关性研究７１００５４西安解放军第３２３医院程新宪，易忠群关键词肝炎，病毒性，人；肝肿瘤；基因；诊断学中国图书资料分类号Ｒ５１２．６２ｒａｓ基因（Ｈ－ｒａｓ、Ｎ－ｒａｓ、Ｋ－ｒａｓ）编码一种高度相似的蛋白质，分...     

乙型肝炎血清前S1抗原与HBV-DNA和HBeAg相关性分析

目的探讨乙型肝炎血清前S1抗原(PreS1Ag)临床应用的价值。方法对365例乙型肝炎患者血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBV血清标志物和PreS1Ag,用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测HBV-DNA。结果 HBV-DNA和PreS1Ag的阳性率在110例HBV大三阳中,分别为86.4%和89.1%;在66例HBV小三阳中,分别为36.4%和40.9%;在37例HBsAg、HBcAb中,分别为32.4%和41.7%;在39例HBeAg、HBcAb阳性中,分别为15.4%和15.4%;在113例HBsAb阳性中,分别为5.3%和8.0%。HBeAg、PreS1Ag阳性率随不同载量HBV-DNA升高而增高,但PreS1Ag比HBeAg增高更明显(P<0.05)。结论 PreS1Ag和HBV-DNA一样都是乙型肝炎病毒复制的敏感指标,虽然PreS1Ag和HBeAg都随HBV-DNA载量增加而升高,但PreS1Ag较HBeAg更能敏感,因此PreS1Ag具有重要的临床应用价值。     

苦参素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎的临床研究

目的探讨苦参素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎（CHB）的临床疗效.方法 178例CHB,随机分为A、B、C 3组.A组用苦参素联合胸腺肽治疗,B组用苦参素、C组用胸腺肽,疗程为3个月.结果治疗3个月后,A组HBeAg及HBV DNA阴转率分别为51.8%、53.6%,B组分别为32.7% 、34.6%,C组分别为21.6% 、21.6% （P〈0.05 or P〈0.01）;A组肝组织TGF-β的表达显著下降,与B、C组比较差异有显著性（P〈0.05）.结论苦参素联合胸腺肽在抑制乙肝病毒、改善肝功能、抗肝纤维化方面优于单用苦参素或胸腺肽.