呼吸道合胞病毒疫苗的研究和临床应用

简介呼吸道合胞病毒（RSV）的生物学特点和疫苗研究的进展。已经和正在研制的RSV疫苗包括：（1）福尔马林灭活RSV疫苗；（2）活病毒疫苗，是通过冷传代和温度敏感传代获得的RSV减毒活疫苗，其免疫反应与自然感染相似，感染野生型RSV不加剧病情，能被动获得RSV中和抗体产生保护性免疫反应，是目前正在婴幼儿中试用观察的疫苗；（3）cDNA疫苗，是从RSV cDNA克隆中回收具有感染性重组RSV的活病毒疫苗，在下呼吸道高度减活，可显著提高对野生型－RSV感染的免疫力，安全性好，可构建含有RSV A、B组的G基因cDNA2价疫苗；（4）载体疫苗，RSV F、G嵌合疫苗由表达含有RSV F和G蛋白的杆状病毒纯化获得；（5）亚单位疫苗，对下呼吸道感染具有保护作用，中和抗体滴度高；（6）合成肽类疫苗等。     

哮喘儿童呼吸道合胞病毒感染后血清抗F和抗G蛋白特异性IgG抗体？…

目的 探讨血清抗呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）抗Ｆ和抗Ｇ蛋白ＩｇＧ抗体水平与哮喘儿童ＲＳＶ感染及感染后病情轻重的关系。方法 以ＲＳＶ（Ｌｏｎｇ株）及表达ＲＳＶ Ｆ和Ｇ蛋白的重组痘苗病毒为抗原，采用酶联免疫吸附试验，检测了６６例６岁以下哮喘患儿ＲＳＶ流行期间双份血清中抗ＲＳＶ Ｆ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体水平。结果 （１）本组哮喘患儿ＲＳＶ感染率为３５％；（２）ＲＳＶ感染组哮喘患儿血清抗Ｆ和Ｇ蛋白ＩｇＧ抗体     

合胞病毒感染后血清中抗F和G蛋白特异性IgG抗体反应

为深入了解婴幼儿呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）感染后特异性保护抗体的反应，探明ＲＳＶ感染后血清保护性抗体的类型及其相互关系；以表达呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）Ｆ和Ｇ蛋白的重组痘苗病毒为抗原，用间接免疫荧光法检测３３例ＲＳＶ感染后婴幼儿双份血清中抗ＲＳＶ的Ｆ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体反应。结果表明，１岁以内婴幼儿ＲＳＶ感染后，血清中Ｆ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体有不同程度的升高，但Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体反应明显低于Ｆ蛋白；１岁以后，机体对ＲＳＶ感染的抗Ｆ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体反应较１岁以前明显增强。说明婴幼儿ＲＳＶ感染后，机体抗ＲＳＶ的Ｆ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体反应受年龄因素的影响，尤其以Ｇ蛋白更为显著。     

哮喘儿童呼吸道合胞病毒感染后血清抗F和抗G蛋白特异性IgG抗体的变化

目的探讨血清抗呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）抗Ｆ和抗Ｇ蛋白ＩｇＧ抗体水平与哮喘儿童ＲＳＶ感染及感染后病情轻重的关系。方法以ＲＳＶ（Ｌｏｎｇ株）及表达ＲＳＶＦ和Ｇ蛋白的重组痘苗病毒为抗原，采用酶联免疫吸附试验，检测了６６例６岁以下哮喘患儿ＲＳＶ流行期间双份血清中抗ＲＳＶＦ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体水平。结果（１）本组哮喘患儿ＲＳＶ感染率为３５％；（２）ＲＳＶ感染组哮喘患儿血清抗Ｆ和Ｇ蛋白ＩｇＧ抗体滴度明显低于非ＲＳＶ感染组；（３）ＲＳＶ感染后哮喘中～重度发作组血清抗Ｆ蛋白ＩｇＧ抗体滴度明显低于轻度发作组；（４）哮喘患儿ＲＳＶ感染后恢复期较急性期血清抗Ｆ和Ｇ蛋白抗体滴度均有明显升高，其升高程度在不同年龄组及两种蛋白间差异均无显著意义。结论血清抗Ｆ和抗Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体对哮喘患儿ＲＳＶ感染有一定保护作用；ＲＳＶ感染后抗Ｆ和抗Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体滴度的高低亦反映哮喘急性发作的轻重程度     

呼吸道合胞病毒免疫球蛋白治疗儿童骨髓移植后下呼吸道感染

呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）感染是骨髓移植（ＢＭＴ）后常见的并发症之一．据报道ＢＭＴ患者并发ＲＳＶ下呼吸道感染,若未经抗病毒治疗病死率接近１００％,而应用利巴韦林（ｒｉｂａｒｉｒｉｎ）治疗者病死率高达５０％－７０％．报道静注呼吸道合胞病毒免疫球蛋白（ＲＳＶ－ＩＧＹＶ）治疗儿童ＢＭＴ合并ＲＳＶ感染的疗效． 病例和方法ＲＳＶ－ＩＧＩＶ是一种含有高浓度ＲＳＶ中和抗体（抗体滴度＞１９２００ＭＵ／ｍｌ）的ＩｇＧ免疫球蛋白．１９９１年６月至１９９６年２月,１１例ＢＭＴ合并ＲＳＶ感染患儿接受了ＲＳＶ－ＩＧＩＶ治疗…     

婴儿合胞病毒下呼吸道感染的免疫机制研究

ＲＳＶ感染中能产生中和性抗体的抗原是Ｆ和Ｇ糖蛋白，但中和抗体对机体无明显的保护作用。推测细胞免疫有更为重要的作用。巨噬细胞（Ｍψ）感染ＲＳＶ后，产生白细胞介素１（ＩＬ－１）抑制物，同时病毒基因的干扰使Ｍψ抗原提呈功能受损，结果辅助性Ｔ细胞（ＴＨ）不被激活，故不能产生白细胞介素２（ＩＬ－２）和γ干扰素（ＩＦＮ－γ）。而产生白细胞介素４（ＩＬ－４）的细胞克隆不受抑制，ＩＬ－４分泌增多。ＩＬ－４能特异性     

婴儿合胞病毒下呼吸道感染的免疫机制研究

ＲＳＶ感染中能产生中和性抗体的抗原是Ｆ和Ｇ糖蛋白，但中和抗体时机体无明显的保护作用。推测细胞免疫有更为重要的作用，巨噬细胞（Ｍ）感染ＲＳＶ后，产生白细胞介素１（ＩＬ－１）抑制物，同时病毒基因的干扰使（Ｍ）抗原提呈功能受损，结果辅助性Ｔ细胞（Ｔ＿Ｈ）不被激活，故不能产生白细胞介素２（ＩＬ－２）和γ干扰素（ＩＦＮ－γ）．而产生白细胞介素４（ＩＬ－４）的细胞克隆不受抑制，ＩＬ－４分泌增多。ＩＬ－４能特异性诱导Ｂ细胞合成ＩｇＥ，从而引起毛细支气管炎的发生。但其确切机制目前仍不清楚。     

逆转录聚合酶链反应快速检测呼吸道合胞病毒

为探索一种快速、可靠的呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）的检测方法，对逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测ＲＳＶ进行研究。结果：ＲＴ－ＰＣＲ方法可检出病毒量为１０ＴＣＩＤ５０／ｍｌ（ＴＣＩＤ５０为半数组织培养感染量）；用于扩增Ｆ蛋白基因的引物经计算机基因库检测与其他病毒无同源性，实验同步扩增其他常见呼吸道感染病毒均无阳性扩增带；实验过程６小时内完成。在ＲＳＶ好发季节对５３例拟诊为病毒性急性下呼吸道感染婴儿咽拭子进行检测，ＲＳＶ阳性２８例（５２．８％）。提示ＲＴ－ＰＣＲ方法检测ＲＳＶ具有快速、敏感性高、特异性好等特点，适合于临床应用。     

合胞病毒感染儿童淋巴细胞多种表面标记及细胞因子的初步研究

呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）感染发病机理的研究一直受到重视，研究者发现ＲＳＶ感染患儿存在着一系列免疫功能紊乱。本文用ＡＰＡＡＰ技术对ＲＳＶ感染患儿淋巴细胞ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２３、ＣＤ２５、ＣＤ５７、ＩＦＮｒ、ＨＬＡ－ＡＢＣ、ＨＬＡ－ＤＰ和ＨＬＡ－ＤＲ等表面标记进行检测，并用ＥＬＩＳＡ技术检测血浆中白细胞介素２（ＩＬ－２）、可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）和呼吸道合胞病毒特异性ＩｇＥ（Ｒ     

快速诊断单纯疱疹病毒脑炎

目的探讨快速诊断单纯疱疹病毒脑炎（ＨＳＥ），比较不同病毒学试验的诊断价值。方法用聚合酶链反应技术检测１７７例急性脑炎患儿的脑脊液（ＣＳＦ）标本中单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）特异性ＤＮＡ；用酶联免疫吸附方法检测ＣＳＦ和血清标本中ＨＳＶ特异性ＩｇＭ和ＩｇＧ抗体。结果ＣＳＦ中ＨＳＶ特异性ＤＮＡ、ＩｇＭ和ＩｇＧ抗体阳性率分别为１．７％（３／１７７）、１０％（１／１００）和４７０％（４７／１００），血清ＨＳＶＩｇＭ、ＩｇＧ抗体阳性率分别为１２．５％（６／４８）、７２．９％（５１／７０）（因为标本量不足或缺如，未能对全部病例进行抗体检测）；３例患儿确诊为ＨＳＥ。结论用套式ＰＣＲ检测ＣＳＦ诊断ＨＳＥ较敏感、特异。     

细胞因子与呼吸道合胞病毒感染

呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）是引起婴幼儿毛细支气管炎和肺炎的最常见病原体，越来越多的研究表明ＲＳＶ感染的发病机制与机体异常的免疫病理有关。ＲＳＶ感染后细胞因子的变化，如：ＩＬ－１抑制物的产生，ＩＬ－２活性降低，ＩＬ－２Ｒ表达障碍，ＩＦＮγ减少和ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＴＮＦα的活性增强，在ＲＳＶ感染的免疫保护和免疫病理中起重要作用。     

下呼吸道感染患儿外周血单个核细胞呼吸道合胞病毒感染的研究

为探讨呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）对外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）的感染情况及感染后细胞免疫的变化，采用免疫组化法对１８例ＲＳＶ性急性下呼吸道感染患儿ＰＢＭＣ内ＲＳＶ及其Ａ、Ｂ亚型抗原进行了检测；采用ＡＰＡＡＰ法、ＭＴＴ比色法和ＥＬＩＳＡ法对Ｔ细胞亚群及Ｔ细胞表面白细胞介素２受体表达、ＰＢＭＣ培养上清液白细胞介素２（ＩＬ－２）活性和可溶性ＩＬ－２受体水平进行了测定。结果显示：１８例ＲＳＶ感染患儿中７例ＰＢＭＣ内可检测到ＲＳＶ抗原；１１例ＲＳＶＡ亚型感染者５例ＰＢＭＣ内均为ＲＳＶＡ亚型阳性，７例ＲＳＶＢ型感染者２例Ｂ亚型阳性；７例恢复期和１０例对照组患儿均为阴性；发病３天以内ＰＢＭＣ中ＲＳＶ抗原阳性者多于３天以后（Ｐ＜０．０５）。ＲＳＶ感染组ＰＢＭＣ内ＲＳＶ抗原阳性者，ＣＤ４细胞比率和ＩＬ－２水平均低于阴性者（ｔ＝２．３８，２．４０，Ｐ值均＜０．０５）。提示：ＲＳＶ性急性下呼吸道感染患儿ＰＢＭＣ可被ＲＳＶ感染，可能由此加重免疫活性细胞损害，导致细胞免疫功能紊乱。     

孕妇乙型肝炎病毒感染与新生儿乙型肝炎基因疫苗免疫效果关系的 …

目的 探讨孕妇乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染对新生儿乙型肝炎（简称乙肝）基因疫苗免疫接种效果的影响。方法 采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和聚合酶链反应（ＰＣＲ）法对乙肝基因疫苗免疫效果进行了前瞻性研究。结果 在新生儿系列血清中均未检聘书国型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ和血清学感染标志；对照组和感染组新生儿免疫保护率分别为９３％（２８／３０）和８３％（３９／４７）（ｘ＾２＝１．７４，Ｐ〉０．０５），两组     

抗DNA酶B对小儿A组溶血性链球菌感染的诊断价值

目的探索抗ＤＮＡ酶Ｂ测定Ａ组溶血性链球菌（ＧＡＳ）感染血清学方法的诊断价值。方法用抗ＤＮＡ酶Ｂ微量法和自制试剂，测定５４８例ＧＡＳ感染所致疾病的小儿血清抗ＤＮＡ酶Ｂ抗体，同时测定抗链球菌溶血素Ｏ（ＡＳＯ）。结果（１）急性风湿热组（ＡＲＦ）抗ＤＮＡ酶Ｂ阳性率（７２．５％）与ＡＳＯ阳性率（７６．５％）比较，差异无显著意义（Ｐ＞０．０５）；但活动期风湿性心脏病（简称风心病）组病人的抗ＤＮＡ酶Ｂ阳性率（８２．６％）明显超过ＡＳＯ阳性率（５５．４％）（Ｐ＜０．００１）；抗ＤＮＡ酶Ｂ联合ＡＳＯ测定在两组的阳性率均在９０％左右。（２）急性肾小球肾炎（ＡＧＮ）皮损组抗ＤＮＡ酶Ｂ阳性率９２．６％，明显超过ＡＳＯ的５９．２％（Ｐ＜０．０５）。（３）ＡＧＮ上感组抗ＤＮＡ酶Ｂ与ＡＳＯ的阳性率分别为７６．７％和７３．９％（Ｐ＞０．０５）。抗ＤＮＡ酶Ｂ联合ＡＳＯ的阳性率在上感组和皮损组均超过９０％。结论抗ＤＮＡ酶Ｂ在诊断ＡＲＦ和ＡＧＮ方面具有重要的临床价值，特别与ＡＳＯ联合应用价值更大；对活动期风心病和ＧＡＳ皮肤感染致ＡＧＮ的诊断价值明显优于ＡＳＯ。     

RSV PFP-2疫苗在血清反应阳性BPD儿童中的应用

呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）极易侵犯支气管肺发育不良（ＢＰＤ）婴幼儿。研究利用前瞻性研究方法评价纯化融合蛋白（ＰＦＰ２）疫苗在ＢＰＤ高危儿童中应用的安全性、致免疫力及保护效果。对象和方法研究人群选取美国某儿童医院１２个月以上ＢＰＤ儿童２１例，均有ＲＳＶ...     

特发性血小板减少性紫癜患儿巨细胞病毒感染的初步研究

为探讨特发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）与人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）活动性感染的关系，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了４４例临床确诊为特发性血小板减少性紫癜患儿外周血白细胞中ＨＣＭＶ－ＤＮＡ，同时作病毒分离及ＨＣＭＶ－ＩｇＧ、ＩｇＭ测定。结果表明：ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性者１４例，阳性率为３２％；而病毒分离阳性者８例，阳性率为１８％；ＨＣＭＶ－ＩｇＧ、ＩｇＭ阳性率分别为３９％和２３％。提示：（１）部分ＩＴＰ患儿发病时有ＨＣＭＶ活动性感染；（２）ＰＣＲ技术特异、敏感、快速，对ＩＴＰ患儿的ＨＣＭＶ活动性感染的早期快速诊断有重要作用。     

宫内感染HBV婴儿接种乙肝疫苗免疫失败的机理和预后研究

为了解宫内受乙型肝炎（简称乙肝）病毒（ＨＢＶ）感染婴儿接种乙肝疫苗导致免疫失败的机理和预后，用植物血凝素（ＰＨＡ）作淋巴细胞增殖试验，用ＨＢＶ前Ｓ２多肽特异性扩增ＨＢＶＤＮＡＳ区基因并分析其变异情况。对４９７名携带ＨＢＶ母亲所生新生儿单纯接种乙肝疫苗，并对携带ＨＢＶ母亲产前注射免疫球蛋白（ＨＢＩＧ）（妇产组）；对携带ＨＢＶ产前不注射ＨＢＩＧ母亲所生４９０名新生儿生后注射ＨＢＩＧ加乙肝疫苗（中山组）。两组均随访４～６年。结果显示，妇产组ＨＢＶ的宫内感染率为１４．３％，中山组ＨＢＶ的宫内感染率为５．７％；淋巴细胞增殖试验显示宫内感染ＨＢＶ后其细胞免疫功能不足，Ｔ淋巴细胞对ＨＢＶ的特异性刺激源处于免疫耐受状态。孕妇产前多次注射ＨＢＩＧ能有效减少ＨＢＶ的宫内感染；在受宫内ＨＢＶ感染的儿童中存在着乙肝病毒变异，感染变异病毒是接种乙肝疫苗免疫失败的重要原因，并易发展为慢性乙型肝炎     

静滴丙种球蛋白治疗毛细支气管炎的免疫检测和临床研究

本文报道７２例确为ＲＳＶ所致毛细支气管炎患儿，分对照组４３例，治疗组２９例；后者以ＩＶＩＧ２００－３００ｍｇ／ｋｇ／次静滴２次后，血清ＩｇＧ，ＩｇＧ亚类，ＳＶ－ＳＩｇＧ水平上升，Ｔ不禁 巴细胞及其亚群也有变化，临床症状改善，显效率８７．２５％明显优于对照组，未见不良副反应。本文证实ＩｇＧ及ＩｇＧ亚类水平低下，Ｔ细胞功能紊乱，易发生ＲＳＶ感染；ＲＳＶ－ＳＩｇＧ可直接来活病毒，减少ＲＳＶ－ＳＩｇＥ产生     

细胞因子与呼吸道合胞病毒感染

呼吸道合肥病毒是引起婴幼儿毛细支气管炎和肺炎的最常见病原体，越来越多的研究表明，ＲＳＶ感染的发病机制与机体异常的免疫病理有关。ＲＳＶ感染后细胞因子的变化；如：ＩＬ－１抑制物的产生，ＩＬ－２活性降低，ＩＬ－２Ｒ表达障碍。ＩＦＮγ减少和ＩＬ－４，ＩＬ－５，ＩＬ－６，ＩＬ－８，ＴＮＦα的活性弱强，在ＲＳＶ感染的免疫保护和免疫病理中起重要作用。     

静脉注射人血丙种球蛋白对呼吸道合胞病毒的中和活性测定

静脉注射人血丙种球蛋白对呼吸道合胞病毒的中和活性测定浙江省人民医院儿科（３１００１４）陶明方，周馥英浙江医科大学微生物学教研室项哨呼吸道台胞病毒（ＲＳＶ）是婴幼儿下呼吸道感染的主要病原之一。因其流行广泛，特别是低龄婴儿感染后常发生严重的毛细支气管炎和...