苯扎贝特对牛主动脉内皮细胞一氧化氮合酶基因表达的影响及其机制的研究

目的研究过氧化物酶体增生物激活受体α(peroxisomeproliferator-activatedreceptoralpha,PPARα)的配体苯扎贝特对原代牛主动脉内皮细胞(bovineaortaendothelialcells,BAEC)一氧化氮合酶(endothelialnitricoxidesynthase,eNOS)基因表达的影响并探讨其机制。方法分离和培养牛主动脉内皮细胞,采用Northern印迹法、Western印迹法检测苯扎贝特对BAECeNOSmRNA和蛋白质表达的影响,采用定量PCR的方法及NO试剂盒检测苯扎贝特对eNOSmRNA半衰期及NO产生的影响;继而采用Western印迹法,给予不同的信号转导通路抑制剂研究苯扎贝特影响eNOS表达所通过的信号转导途径,此外,构建了由人eNOS启动子驱动的荧光报告基因,研究苯扎贝特对eNOS启动子活性的影响。结果苯扎贝特以浓度(50~200μmol/L)依赖的方式明显上调BAEC细胞eNOS的mRNA和蛋白质表达(P<0.05),并促进一氧化氮(nitricoxide,NO)的生成[对照组(14.97±1.29)μmol/L,苯扎贝特不同浓度组(25.12±1.25)μmol/L,(30.12±1.85)μmol/L,(33.47±1.22)μmol/L],增强eNOS-ser-1179位点的磷酸化表达(P<0.05),但是对eNOS-thr-497位点的磷酸化表达几乎没有抑制作用,定量PCR证实苯扎贝特增加eNOSmRNA的半衰期(从3.1~6.1h),进一步的研究显示苯扎贝特以浓度依赖的方式增加人eNOS启动子驱动的荧光报告基因的荧光活性(相对的荧光活性在100μmol/L和200μmol/L组分别为4429.43±391.41,6187.5±307.53,对照组为3361.81±316.85),增加磷酸化丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinase,MAPK)的蛋白质表达(P<0.05及P<0.01),而PPARα、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)和MAPK抑制剂可明显逆转苯扎贝特对eNOS表达的上调作用(P<0.01)。结论苯扎贝特通过上调eNOS的蛋白质表达、促进eNOS的磷酸化、增强eNOS的转录及eNOSmRNA的稳定性,从而促进NO的生成,其效应的发挥既通过依赖于PPARα的方式,也可以经MAPK和PI3K信号通路介导的不依赖于PPARα的“非基因效应”,揭示了PPARα的配基苯扎贝特的降脂外作用包括抗动脉粥样硬化和抗高血压的可能作用机制。     

苯扎贝特对脐静脉内皮细胞基质金属蛋白酶-9表达的影响及机制

目的观察苯扎贝特对氧化型低密度脂蛋白所诱导的人脐静脉内皮细胞基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的影响及是否与血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达相关。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,逆转录聚合酶链反应检测MMP-9和血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1 mRNA的表达。结果与对照组（0．151±0．004、0．562±0．021）比较,氧化型低密度脂蛋白组LOX-1 mRNA（0．943±0．003）、MMP-9 mRNA（1．020±0．039）表达均明显增加（P〈0．05）;与氧化型低密度脂蛋白组比较,苯扎贝特组和多聚肌甘酸（血凝素氧化型低密度脂蛋白受体1阻滞剂）组血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1 mRNA（0．258±0．002、0．463±0．007）、MMP-9 mRNA（0．894±0．041、0．872±0．046）表达均减少（P〈0．05）;与苯扎贝特组比较,苯扎贝特组加多聚肌甘酸组血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1 mRNA（0．144±0．003）、MMP-9 mRNA（0．541±0．030）表达均明显减少（P〈0．05）。结论血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1可能参与苯扎贝特下调内皮细胞MMP-9基因的表达。     

雌激素受体介导Genistein对内皮型一氧化氮合酶表达的诱导作用

目的 研究雌激素受体介导的基因组效应在Genistein促进内皮型一氧化氮合酶表达过程中的作用.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,在氧化型低密度脂蛋白(100 mg/L)干预内皮细胞的基础上,经雌激素受体拮抗剂ICI182780(1 μmol/L)或经基因转录阻断剂放线菌素D(5 mg/L)作用30 min后,再加入Genistein(100 nmol/L)作用24 h,实时定量PCR检测内皮型一氧化氮合酶mRNA表达,Western Blotting检测内皮型一氧化氮合酶蛋白的表达.结果 与空白对照组相比,氧化型低密度脂蛋白(100 mg/L)明显下调内皮型一氧化氮合酶 mRNA和蛋白表达(P<0.05);Genistein明显上调内皮型一氧化氮合酶 mRNA和蛋白表达(P<0.05),而且Genistein对内皮型一氧化氮合酶的诱导作用被雌激素受体拮抗剂ICI182780和基因转录阻断剂放线菌素D明显抑制(P<0.05 ).结论 Genistein促进内皮型一氧化氮合酶的表达与雌激素受体介导的基因组效应密切相关.     

氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞细胞黏附分子-1及一氧化氮表达的影响

一氧化氮 (NO)作为一种作用广泛的信息分子 ,具有抑制血小板和单核巨噬细胞的黏附 ,内皮细胞和平滑肌细胞增殖的作用 ,与动脉粥样硬化 (AS)关系密切。已有众多实验表明白细胞和T淋巴细胞黏附到内皮细胞表面 ,接着迁移到内皮下层是AS最早的细胞事件之一 ,在这个过程中细胞间黏附分子 1(ICAM 1)起了很重要的作用。我们于2 0 0 1年 11月至 2 0 0 2年 6月采用脐静脉内皮细胞为实验 ,用氧化修饰低密度脂蛋白 (ox LDL)作用于该细胞 ,了解其对NO、一氧化氮合酶 (NOS)及ICAM 1表达的影响及ox LDL致AS的可能机制。　　一、材料与方法　…     

内皮型一氧化氮合酶基因突变与心血管疾病

内皮衍生的一氧化氮（NO）具有重要的生理功能，它由内皮型一氧化氮合酶（eNOS)合成。NO和动脉粥样硬化的形成和血压的调节有关。NO还可能参与冠状动脉痉挛的发生。本文就eNOS基因的突变与心血管疾病的关系进行综述。     

Genistein对内皮细胞内皮型一氧化氮合酶和核因子κB表达的影响

目的探讨植物雌激素Genistein对氧化型低密度脂蛋白干预的内皮细胞内皮型一氧化氮合酶和核因子κB表达的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,在氧化型低密度脂蛋白(100mg/L)干预内皮细胞的基础上,不同浓度的Genistein(10、50和100nmol/L)孵育,MTT法观察Genistein对细胞活力的影响,实时定量逆转录聚合酶链反应检测内皮型一氧化氮合酶mRNA的表达,Western blotting检测内皮型一氧化氮合酶和核因子κB蛋白的表达。结果与空白对照组相比,氧化型低密度脂蛋白(100mg/L)明显抑制细胞活力,下调内皮型一氧化氮合酶mRNA和蛋白表达,上调核因子κB蛋白表达(P0.05);Genistein明显增高细胞活力,上调内皮型一氧化氮合酶mRNA和蛋白表达,抑制核因子κB蛋白表达(P0.05),且呈浓度依赖性(P0.05)。结论 Genistein能够促进内皮型一氧化氮合酶的表达,抑制核因子κB的表达。     

血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1在人脐静脉内皮细胞表达CD40中的作用

目的研究氧化低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞表达CD40中血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1的作用。方法在氧化低密度脂蛋白作用人脐静脉内皮细胞前预先用血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1阻断剂角叉(菜)胶(κ-carrageenan)和多聚肌苷酸(PIA)作用1h,应用亲合组织化学技术检测血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1的表达,流式细胞技术检测细胞表面CD40的表达。结果预先加入血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1阻断剂PIA和角叉(菜)胶的CD40的表达低于氧化低密度脂蛋白组(P<0.05)。结论在人脐静脉内皮细胞的炎症反应中,氧化低密度脂蛋白通过血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1途径激活了CD40的表达。     

同型半胱氨酸对血管内皮细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1 mRNA表达及氧化型低密度脂蛋白摄取的影响

为了研究同型半胱氨酸对血管内皮细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1mRNA表达及对氧化型低密度脂蛋白摄取的影响，分别在培养的人脐静脉内皮细胞中加入不同浓度的同型半胱氨酸孵育48h后，利用逆转录-聚合酶链反应检测血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1mRNA表达的改变；采用放射配基法检测细胞对氧化型低密度脂蛋白的摄取。结果发现，随着同型半胱氨酸浓度的增加。提示同型半胱氨酸能促进脐静脉血管内皮细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1mRNA的表达和对氧化型低密度脂蛋白的摄取，此效应可能与同型半胱氨酸致动脉粥样硬化作用有关。     

西格列汀对人主动脉内皮细胞内皮素1及一氧化氮合酶的影响及其机制

目的探讨在高糖培养环境下西格列汀对人主动脉内皮细胞(HAEC)内皮素1及一氧化氮合酶的影响及其可能机制。方法高糖环境下(25 mmol/L葡萄糖)培养人主动脉内皮细胞,并分别给予0、5、10及20μmol/L西格列汀干预,检测HAEC内皮型一氧化氮合酶(e NOS)、内皮素1(ET-1)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)以及核因子κB p65(NF-κB p65)的mRNA和蛋白表达水平;应用肿瘤坏死因子α(TNF-α)处理西格列汀干预后的HAEC,观察e NOS、ET-1、i NOS、NF-κB p65的mRNA和蛋白表达水平的变化。结果与普通培养环境(7 mmol/L葡萄糖)相比,高糖环境下HAEC的e NOS mRNA和蛋白表达降低,ET-1、i NOS mRNA和蛋白表达及p-NF-κB p65蛋白表达增高(P0.05)。与0μmol/L组相比,20μmol/L西格列汀组HAEC的e NOS mRNA、蛋白表达上调,ET-1、i NOS mRNA和蛋白表达以及p-NF-κB p65蛋白表达下调(P0.05)。与单独使用西格列汀组相比,TNF-α联合西格列汀组HAEC的e NOS mRNA和蛋白表达下调,ET-1、i NOS mRNA和蛋白表达及p-NF-κB p65蛋白表达上调(P0.05)。结论西格列汀在转录和翻译水平上增加e NOS表达、降低ET-1、i NOS的表达,该作用通过其抑制p-NF-κB p65表达而实现。提示西格列汀可能改善内皮功能,从而预防糖尿病动脉粥样硬化的形成。     

17β-雌二醇对人脐静脉内皮细胞内皮型一氧化氮合酶和一氧化氮的影响

背景门静脉高压时门静脉系统血管内皮广泛受损,除压力增高、血流冲击等因素外,体液因子的变化也是重要损伤因素之一.目的研究雌激素对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和一氧化氮(NO)的影响,探讨其在门静脉高压血管内皮病变中的意义.方法以不同浓度17β-雌二醇和雌激素受体拮抗剂他莫昔芬单独或联合作用于体外培养的HUVEC,检测eNOS活性和NO含量变化.结果与对照组相比,1×10-9～1×10-7 mol/L 17β-雌二醇均可增加HUVEC eNOS活性,提高NO含量;1×10-8～1×10-6 mol/L他莫昔芬对HUVEC eNOS活性和NO含量均无明显影响;1×10-7 mol/L 17β-雌二醇对经1×10-6 mol/L他莫昔芬预处理的HUVEC eNOS活性和NO含量无明显影响.结论17β-雌二醇可显著增加HUVEC eNOS活性,提高NO含量,他莫昔芬则可阻断其作用.门静脉高压血管内皮病变的形成与雌激素的作用有一定关系.     

氧化型低密度脂蛋白和维生素E对人脐静脉内皮细胞产生一氧化氮及合酶的影响

为研究氧化型低密度脂蛋白和维生素Ｅ对人脐静脉内皮细胞产生一氧化氮及合酶的影响,应用一氧化氮及一氧化氮合酶试剂盒测定培养的人脐静脉内皮细胞一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性。结果发现,氧化型低密度脂蛋白能显著抑制培养的内皮细胞一氧化氮的产生,从对照组的１２６±２４ｍｍｏｌ／ｇ下降为４１±８ｍｍｏｌ／ｇ;并能明显降低一氧化氮合酶的活性,具有浓度和时间效应。抗氧化剂维生素Ｅ显著增加氧化型低密度脂蛋白刺激内皮细胞产生一氧化氮含量以及一氧化氮合酶活性。提示氧化型低密度脂蛋白可以通过抑制内皮细胞一氧化氮合酶的活性而抑制其产生一氧化氮。维生素Ｅ通过增加一氧化氮合酶活性而增加内皮细胞产生一氧化氮。     

辛伐他汀抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体的表达

目的观察辛伐他汀抑制氧化型低密度脂蛋白诱导人脐静脉内皮细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体表达的作用。方法培养人脐静脉内皮细胞株ECV304,随机分组:对照组、低密度脂蛋白(25 mg/L)组、氧化型低密度脂蛋白(255、0和100 mg/L)组和氧化型低密度脂蛋白(50 mg/L) 辛伐他汀(1和10μmol/L)组,通过逆转录聚合酶链反应和Western blot蛋白印迹分析检测血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体mRNA和蛋白的表达,并在相差显微镜下观察细胞形态变化。结果氧化型低密度脂蛋白上调血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体表达(P<0.01),并呈浓度依赖性(P<0.05)。辛伐他汀明显抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体表达(P<0.05),且高浓度组较低浓度组的抑制作用更强(P<0.05)。结论氧化型低密度脂蛋白可能通过血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体导致内皮功能障碍,辛伐他汀抑制氧化型低密度脂蛋白诱导血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体的表达是其非调脂抗动脉粥样硬化机制之一。     

5脂氧合酶激活蛋白介导人脐静脉内皮细胞氧化损伤

目的探讨5脂氧合酶激活蛋白在人脐静脉内皮细胞氧化损伤中的机制。方法体外分离、培养人脐静脉内皮细胞,分别用10、50、100和200mg/L氧化型低密度脂蛋白处理细胞24h,采用酶联免疫吸附法检测细胞上清液白三烯C4水平,MTT法检测细胞活力,以及实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞5脂氧合酶激活蛋白mRNA及蛋白表达的变化。结果100mg/L和200mg/L氧化型低密度脂蛋白作用人脐静脉内皮细胞24h细胞活力显著下降(P<0.01),白三烯C4分泌显著增加(P<0.01),回归分析显示白三烯C4释放量与氧化型低密度脂蛋白浓度显著相关(r=0.953,P<0.01)。PCR和Western blot分析发现,5脂氧合酶激活蛋白mRNA表达和蛋白表达均显著增强(P<0.01和P<0.05)。结论氧化型低密度脂蛋白促进人脐静脉内皮细胞分泌白三烯C4,导致人脐静脉内皮细胞氧化损伤可能与5脂氧合酶激活蛋白异常表达有关。     

氧化型低密度脂蛋白及阿托伐他汀对培养的人脐静脉内皮细胞血管紧张素转化酶2表达的影响

目的探讨氧化型低密度脂蛋白对人血管内皮细胞血管紧张素转化酶2表达的影响及阿托伐他汀的干预作用。方法用正常人新鲜血浆制备氧化型低密度脂蛋白,人脐静脉内皮细胞株复苏、传代后取生长良好3~6代用于实验。分为空白对照组、不同浓度氧化型低密度脂蛋白组(终浓度分别为20、40及80 mg/L)、不同浓度阿托伐他汀组(1、5和10μmol/L)、不同时间组(40 mg/L氧化型低密度脂蛋白和5μmol/L阿托伐他汀分别刺激6、12和24 h及混合刺激组(5μmol/L阿托伐他汀 40 mg/L氧化型低密度脂蛋白刺激24 h)。提取细胞总RNA及蛋白,逆转录聚合酶链反应检测血管紧张素转化酶2 mRNA的表达,免疫印迹法检测血管紧张素转化酶2蛋白的表达。结果氧化型低密度脂蛋白呈剂量和时间依赖性下调血管紧张素转化酶2 mRNA及蛋白的表达。与空白对照组比较,不同浓度氧化型低密度脂蛋白组血管紧张素转化酶2 mRNA的表达分别降低为73%、51%和33%,蛋白的表达降低为81%、50%及32%,不同浓度组间比较差异亦有显著性(P>0.01);氧化型低密度脂蛋白培养6、12和24 h时间组血管紧张素转化酶2 mRNA与对照组比较分别减少为66%、55%和50%,蛋白的表达与对照组比较降低为63%、53%及49%(P>0.01)。不同浓度阿托伐他汀及其培养不同时间组血管紧张素转化酶2 mRNA和蛋白的表达与对照组比较差异无统计学意义。阿托伐他汀能抑制氧化型低密度脂蛋白对血管紧张素转化酶2 mRNA和蛋白表达的下调,mRNA表达增加为1.63倍,蛋白表达增加为1.60倍(P>0.01)。结论氧化型低密度脂蛋白呈剂量和时间依赖性下调血管紧张素转化酶2 mRNA和蛋白的表达,阿托伐他汀能抑制这种作用。     

差异显示法研究氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞基因差异表达

目的：研究血管内皮细胞在致动脉粥样硬化因子作用下，差异表达基因的结构与功能。 方法：氧化低密度脂蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ）诱导培养的人脐静脉内皮细胞，用差异显示－多聚酶链式反应（ＤＤＲＴ－ＰＣＲ）技术，克隆表达水平有明显差异的基因片段，并用Ｎｏｒｔｈｅｎ印迹法证实阳性结果。 结果：发现ＯＸ－ＬＤＬ诱导培养的人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）出现一些上、下调节的基因片段。已知的上调基因包括人的胸腺素（Ｔｈｙｍｏｓｉｎ）β４、细胞间粘附因子（ＩＣＡＭ）－１、ＦＫ５０６结合蛋白、ＥＲｐ７２；下调的基因有细胞色素Ｂ５６１、Ｒｅｓｔｉｎ。用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹证实了ＤＤＲＴ－ＰＣＲ的结果，不同的上、下调节基因表达水平变化在３０％～２００％之间不等。 结论：本研究首次用ＤＤＲＴ－ＰＣＲ的方法证实在体外ＯＸ－ＬＤＬ可诱导ＨＵＶＥＣ许多基因表达水平的变化。细胞中细胞间粘附因子的高表达，进一步说明细胞间粘附因子是参与动脉粥样硬化过程重要的粘附分子。胸腺素β４基因的上调表达与ＯＸ－ＬＤＬ诱导细胞肌动蛋白张力纤维的生成增加有关，可能影响内皮细胞的增殖。     

氧化型低密度脂蛋白下调Rab4表达诱导人脐静脉内皮细胞自噬

目的 探讨Rab4对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞自噬的影响及其作用机制.方法 不同浓度氧化型低密度脂蛋白孵育人脐静脉内皮细胞24h,Western blot检测Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达,逆转录-聚合酶链反应及Western blot检测Rab4 mRNA及蛋白表达.75 mg/L氧化型低密度脂蛋白孵育Rab4基因转染人脐静脉内皮细胞(siRNA或Rab4质粒转染)24 h,Western blot检测Rab4、Beclin-1、LC3蛋白的表达.结果 氧化型低密度脂蛋白孵育人脐静脉内皮细胞24h后,Beclin-1蛋白表达以及LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ比值明显增加,而Rab4 mRNA以及蛋白的表达明显降低(P＜0.05),并呈浓度依赖性.Rab4 siRNA进一步增加氧化型低密度脂蛋白诱导的Beclin-1蛋白表达量以及LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ比值(P＜0.05),而Rab4质粒转染则下调氧化型低密度脂蛋白诱导的Beclin-1蛋白表达以及LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ比值增加(P＜0.05).结论 氧化型低密度脂蛋白通过下调Rab4表达诱导血管内皮细胞自噬.     

Both Atorvastatin and Probucol Can Down-regulate BMP-2 Expression Induced by Oxidized Low Density Lipoprotein in Human Umbilical Vein Cells

Objectives Bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) plays an key role both in vascular development and pathophysiological processes. However, the mechanisms of oxidized low density lipoprotein (ox-LDL) and combinated with atorvastatin or probucol on BMP-2 expression are entirely unknown in human umbilical vein cells. Methods The HUVECs were treated by ox-LDL and combinated with atorvastatin, probucol. The expression of BMP-2, NF-κB65, PPARγ mRNA was examined by RT-PCR analysis and ELISA method. The MDA and SOD were detected by routine methods. Results Ox-LDL can induced BMP-2 mNRA expression, associated with NF-κB65 mNRA expression activation. Both atorvastatin and probucol can suppress BMP-2 and NF-κB65 expression induced by oxLDL and upregulate the expression of PPARγ. Furthermore, the increase of supernatant MDA levels and decrease of supernatant SOD levels resulted from oxLDL treatment can be reversed by probucol or atorvastatin. Conclusions OxLDL-induced BMP-2 mNRA expression can be suppressed by atorvastatin and probucol, which may be accomplished by activating NF-κB65 expression and upregulating the expression of PPARγ. Our findings also indicate that that BMP-2 mNRA expression includes the activation of reactive oxygen species.     

氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞功能及膜表面超微结构的影响

目的 观察人脐静脉内皮细胞在发生脂质过氧化过程中细胞功能及超微结构改变的规律和特点.方法 用100 mg/L氧化型低密度脂蛋白诱导人脐静脉内皮细胞作为实验组,以与氧化型低密度脂蛋白等体积的PBS替代作为对照组,两组均连续培养0、4、8及16 h;用MTT比色法测定并比较各组细胞的增殖状态,用硝酸还原法测定各组细胞上清液中一氧化氮含量,用原子力显微镜对比观察各组贴壁人脐静脉内皮细胞表面的超微结构.结果 随着氧化型低密度脂蛋白诱导时间的延长,实验组人脐静脉内皮细胞的增殖和功能明显减低,细胞表面隆起逐渐增大,分布越来越不规则,并伴随有凹陷或空洞出现;对照组随着培养时间的延长细胞表面结构变化不大.实验组0、4、8及16 h粗糙度分别为13.666±2.196 nm、15.904±2.203 nm、17.688±2.076 nm及21.609±1.867 nm,亚组间两两相比均存在显著性差异(P＜0.05);而对照组0、4、8及16 h粗糙度分别为13.627±2.218 nm、13.659±2.183 nm、13.665±2.175 nm及13.974±2.478 nm,亚组间两两相比无显著性差异(P＞0.05);与对照组相比,实验组细胞培养4 h后膜表面粗糙度存在显著性差异(P＜0.05).结论 内皮细胞在发生脂质过氧化过程中功能逐渐减退,且表面超微结构在较早期就发生了改变,并随时间推移呈现动态变化.     

氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞TET2表达及自噬的影响

目的 观察氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞自噬的影响及其调节机制.方法 氧化型低密度脂蛋白孵育人脐静脉内皮细胞24 h,RT-PCR检测TET2 mRNA表达,Western blot检测TET2以及自噬标记物Beclin 1、LC3的表达.TET2 siRNA转染人脐静脉内皮细胞,Western blot检测Beclin 1、LC3的表达.结果 人脐静脉内皮细胞经不同浓度氧化型低密度脂蛋白孵育24h后,浓度依赖性地下调TET2 mRNA以及蛋白的表达(P＜0.05),并且下调Beclin 1表达以及LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ的比值.TET2 siRNA转染人脐静脉内皮细胞后,Beclin 1表达以及LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ的比值明显降低.结论 氧化型低密度脂蛋白促进人脐静脉内皮细胞自噬,可能与下调TET2表达相关.