16S～23SrDNA内转录间隔区序列聚合酶链技术鉴定凝固酶阴性葡萄球菌

目的采用分子生物学技术鉴定凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)。方法用16S-23SrDNA内转录间隔区序列PcR(ITS-PCR)技术，对6株质控菌和171株已通过AutoScan-4微生物分析仪鉴定过的CNS临床分离株进行分型鉴定。结果质控菌株及经APIStaph系统确证的11种CNS得到各自不同的ITS-PCR电泳类型，建立了该技术在本实验室的CNS初级数据库，包括表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌、腐生葡萄球菌、木糖葡萄球菌、华纳葡萄球菌、头部葡萄球菌、孔氏葡萄球菌解脲亚种、松鼠葡萄球菌、耳葡萄球菌和模仿葡萄球菌。只有松鼠葡萄球菌表现了多态性。该ITS-PCR数据库对所研究的临床株的识别率为93．57％(160／171)，准确率达93．75％(150／160)。API Staph系统证明，ITS-PCR法鉴定结果较为准确，AutoScan-4微生物分析仪检测CNS至少有9．36％(16／171)是不确切的。结论ITS-PCR证明是一项有价值，对CNS可选用的简便、快速、可靠，廉价的分子生物学鉴定技术。     

海南省类鼻疽临床分离株核糖体16S-23S内转录间隔区序列多态性分析

目的 研究海南省类鼻疽伯克霍尔德菌核糖体16S-23S内转录间隔区（ITS）序列多态性及基因型特征,了解该省与其他类鼻疽流行区菌株间的遗传背景差异。方法 PCR扩增272株类鼻疽伯克菌的ITS片段并通过毛细管凝胶电泳检测产物长度;通过DNA测序及序列比对确认不同长度ITS的基因型及序列一致性;通过2检验分析不同流行区ITS型别的分布差异。结果 经毛细管凝胶电泳及DNA测序确认,272株类鼻疽伯克菌中发现C、E、CE、G 4种ITS基因型:C型64株（23.53%）,E型144株（52.94%）,CE型56株（20.59%）,G型8株（2.94%）。序列比对证实,海南省类鼻疽伯克菌中各型别（C、E、G）ITS序列高度保守,不同型别ITS的长度变化由其主要变异区的序列差异引起。我国海南省与泰国流行区的ITS型别分布差异有统计学意义（2=8.296,P0.05）,与澳大利亚流行区分布差异无统计学意义（2=5.521,P0.05）。结论 海南省类鼻疽伯克菌临床菌株中存在C、E、CE、G 4种ITS基因型,C、E、CE为优势型别;与泰国、澳大利亚等传统流行区相比,其G型菌株比例较高。     

常见分枝杆菌种内不同株之间16S rRNA基因和16S-23SrRNA ITS序列分析结果的比较

目的 针对常见分枝杆菌不同株对其基因序列进行分析,比较分析结果.方法 利用16S rRNA Gene和16S-23S rRNAITS(转录间隔区序列)分析法分别对97株共7种DSMZ/ATCC引进的常见分枝杆菌进行种内不同株之间基因差异性分析,对比两种分型结果的异同.结果 16S rRNA基因可将13株草分枝杆菌分为3...     

肺结核患者规范化痰标本采集的最佳证据总结

目的 检索、 评价并总结肺结核患者痰标本采集的最佳证据.方法 系统检索BMJ Best Practice、UpTo-Date、WHO官网、加拿大安大略省注册护士协会网站、英国国家卫生与临床优化研究所官网、国际指南协作网、美国感染病学会网、Cochrane Library、CINAHL(EBSCO)、Embase(OVI...     

细菌rDNA分类鉴定的方法学研究

目的 研究细菌rDNA快速鉴定方法.方法 以细菌16S rDNA、16S-23S rDNA基因间隔区（ISR）和常见细菌耐药基因为对象,通过改进标本中细菌DNA提取方法,指纹分析、直接测序与多重聚合酶链反应（PCR）技术,建立快速细菌分子鉴定方法.结果 细菌属种不同表现出独特的16S-23S rDNA ISR指纹,在分析软件指导下进行初步细菌鉴定和亲缘关系研究;16S rDNA和16S-23SrDNA ISR序列可确定细菌种与型;序列分析与生化鉴定一致.多重PCR可解决葡萄球菌16S rDNA与mecA基因、产超广谱β内酰胺酶菌16S rDNA与TEM和SHV基因同步检测.结论 细菌rDNA分类方法,提高了非培养细菌的鉴定能力.     

肺结核病人痰标本中结核分枝杆菌检查结果分析

[目的]评价肺结核病人痰标本中结核分枝杆菌的直接涂片显微镜检和培养检查的临床效果。[方法]采用直接厚涂片萋-尼氏法抗酸染色显微镜检和BACTEC-TB960快速培养系统对1340例肺结核病人痰标本进行检测。[结果]快速培养法检测的阳性率为36.6％，直接涂片镜检的阳性率为24.6％，两种检测法的阳性率有显著性差异（P〈0.01）；两种方法联合检测的阳性率为4l％，高于培养法阳性率（P〈0.05）。痰标本的留取时间对培养法检出率有很大影响，晨痰检出率高于即时痰（P〈0.05）。[结论]提高肺结核病人痰标本中结核分枝杆菌检出率的有效方法是采用直接涂片镜检与培养法联合进行检测，同时应重视痰标本留取时间对检出率的影响。     

肺部感染患者痰培养标本监测的护理研究

目的 探讨提高肺部感染患者痰培养标本合格率的护理管理措施.方法 对就诊和住院的肺部感染患者的痰培养标本的合格率、阳性率、病原体的分布及其耐药情况进行监测,将2007年1月-2008年2月收集的资料作为实验组,将2005年1月-2006年12月收集的资料作为对照组,比较2组监测结果.结果 实验组和对照组痰培养标本合格率、细菌和真菌的分布情况比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 加强对痰培养标本的质控管理,全面提高临床护士对痰培养标本合格率意义的认识及收集痰培养标本的技能,是保证痰培养标本合格率的关键.     

肺部感染患者痰培养标本监测的护理研究

目的探讨提高肺部感染患者痰培养标本合格率的护理管理措施。方法对就诊和住院的肺部感染患者的痰培养标本的合格率、阳性率、病原体的分布及其耐药情况进行监测，将2007年1月-2008年2月收集的资料作为实验组，将2005年1月-2006年12月收集的资料作为对照组，比较2组监测结果。结果实验组和对照组痰培养标本合格率、细菌和真菌的分布情况比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论加强对痰培养标本的质控管理，全面提高临床护士对痰培养标本合格率意义的认识及收集痰培养标本的技能，是保证痰培养标本合格率的关键。     

Demonstration of tuberculostearic acid in sputum from patients with pulmonary tuberculosis by selected ion monitoring.

Selected ion monitoring was used to detect tuberculostearic acid (10-methyloctadecanoic acid) in sputum from patients with pulmonary tuberculosis. The specimens were autoclaved, lyophilized, extracted, and methanolysed before being subjected to thin-layer chromatography and injected into the gas chromatograph/mass spectrometer. Tuberculostearic acid could be detected in five of six tuberculous sputum specimens containing acid-fast rods detectable by light microscopy of Ziehl-Neelsen stained smears. After the sputum specimens had been cultured for five days on Löwenstein-Jensen medium, when still no colonies could be observed visually, the presence of tuberculostearic acid was demonstrated in all six cases of tuberculosis. In corresponding analyses of sputum from eight patients with non-tuberculous pneumonia, tuberculostearic acid was not found. This fatty acid, the presence of which was also demonstrated in cultures of various mycobacterial and nocardial species, is characteristic of organisms of the order Actinomycetales. The demonstration of tuberculostearic acid in sputum specimens may constitute a rapid and sensitive way of diagnosing pulmonary tuberculosis.     

Inhaled nitric oxide treatment of patients with pulmonary tuberculosis evidenced by positive sputum smears

Endogenous nitric oxide (NO) has antimycobacterial properties. We tested the hypothesis that exogenous (inhaled) NO can be safely delivered and can accelerate airway disinfection for pulmonary tuberculosis patients treated with standard therapy. Exogenous NO administered at 80 ppm for 72 h can be safely delivered but does not accelerate airway disinfection.     

大面积严重烧伤患者的3种排痰护理

在临床中,大面积严重烧伤后易造成患者机体免疫功能下降,机体对各种微生物(金黄色葡萄球菌、肠道杆菌、铜绿假单胞菌等)的易感性明显增加,呼吸道可成为全身感染的重要途径之一,特别是合并吸人性损伤、气管切开的患者,更加容易造成肺部感染.因此,清理气道内的异物和分泌物是大面积严重烧伤,尤其是吸人性损伤治疗中始终贯穿的重要措施[1].通过3种不同形式的排痰护理方法,对预防大面积严重烧伤的肺部感染发生起到一定的疗效,现报道如下.     

ICU机械通气患者两种吸痰方法的比较

目的探讨机械通气患者有效的吸痰方法。方法将ICU行机械通气的96例患者随机分为观察组和对照组,观察组采用改进吸痰法,对照组采用常规吸痰法。观察吸痰前后心率、血压、潮气量、气道压力、氧分压、血氧饱和度、肺部相关并发症等情况。结果观察组吸痰前后除心率、血压、潮气量外,气道压力、氧分压、血氧饱和度、肺部相关并发症等均差异有显著意义(P<0.05)。结论在对机械通气患者进行吸痰时,使用吸痰→湿化→扩肺→吸痰→扩肺或者吸痰→扩肺的方法,可以提高吸痰效果,减少肺部相关并发症。     

老年细菌性肺炎痰标本的临床应用价值:基于16S Rdna测序方法

目的 采用16S rDNA高通量测序技术,比较不同采集方式获得的老年细菌性肺炎患者呼吸道标本的共有或独有细菌,评估质量合格的呼吸道标本的临床价值.方法 选取该院收治的10例诊断为细菌性肺炎且未经治疗的老年患者作为研究对象,分别采集自然咳痰(SH组)、纤维支气管镜吸痰(XT组)和纤维支气管镜肺泡灌洗液(XC组)标本,采用16 S rDNA高通量测序技术检测并比较3组标本细菌组成的相似性和差异性.结果 3组标本共有菌群959个属,3组标本独有细菌的属比较,差异有统计学意义(P<0.05),但非度量多维尺度分析显示,3组标本在属水平上总体细菌结构差异不明显.结论 16S rDNA高通量测序SH组标本细菌更丰富,但质量合格的3组标本在属水平上总体细菌结构差异不明显,SH组标本仍有一定的临床价值.