应用PCR、BA－ELISA早期诊断结核性胸膜炎的临床意义

应用ＰＣＲ检测６４例胸水中结核菌基因组ＤＮＡ，并与ＢＡ－ＥＬＩＳＡ检测胸水中抗ＰＰＤ抗体及细菌学检查相比较。结果：三种方法的敏感性和特异性分别为５６．０％、１００％；６４．０％、８６．７％、１１．０％和１００％。若以ＰＣＲ、ＢＡ－ＥＬＩＳＡ任一阳性作为判断标准则敏感性明显提高至８９．０％。认为，ＰＣＲ与ＢＡ－ＥＬＩＳＡ诊断结核性胸膜炎具有较高的敏感性，但前者更具早期和特异性并对疾病的疗效和预后有判断意义。     

聚合酶链反应诊断结核性腹膜炎的评价

目的评价聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法对结核性腹膜炎的诊断价值。方法用ＰＣＲ技术检测３０例结核腹水中结核分支杆菌ＤＮＡ，并与腹水涂片抗酸染色及酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测腹水中抗ＰＰＤ抗体进行比较。结果ＰＣＲ的阳性率为６０％，特异性９４．４％；ＥＬＩＳＡ法阳性率６３．３％，特异性７２．２％；涂片镜检均为阴性。结论ＰＣＲ在诊断结核性腹膜炎具有较高的敏感性和特异性，优于ＥＬＩＳＡ法及涂片镜检，如与ＥＬＩＳＡ技术结合可进一步提高检测的敏感性和特异性。     

三种快速检测结核分支杆菌方法的评价

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术、单克隆抗体（ＭｃＡｂ）ＴＢ１５－Ｃ＿３经酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）及抗酸染色等３种方法，对１０种抗酸杆菌及２种非分支杆菌进行检测。ＰＣＲ仅对结核分支杆菌复合体扩增出２４５ｂｐ特异性条带，ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ检测除人型结核分支杆菌外，还与ＢＣＧ、鸟型及瘰疬分支杆菌反应阳性，抗酸染色则所有分支杆菌均呈阳性。用ＰＣＲ、ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ及抗酸染色检测了１２４份临床标本，ＰＣＲ的检出率高于抗酸染色涂片的阳性率（Ｐ＜０．０５），ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ检测阳性率明显高于抗酸染色涂片和ＰＣＲ的阳性率（Ｐ＜０．０１）。认为三种方法在使用中各自有其优点，不可偏废。     

ABC－ELISA法检测脑脊液抗PPD－IgG及其临床意义

用ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法检测５５例结脑和３７例非结脑患者脑脊液抗ＰＰＤ－ＩｇＧ并与ＥＬＩＳＡ法比较。结果两法阳性率分别为９６．４％和８３．６％，ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法的敏感性高于ＥＬＩＳＡ法，Ｐ＜０．０５，而两法特异性均为９７．３％。同时检测结脑患者脑脊液和血清抗ＰＰＤ－ＩｇＧ，脑脊液阳性率为９６．４％高于血清阳性率为８５．５％，Ｐ＜０．０５。结果表明本法可为结脑诊断的一种辅助方法。     

ABC—ELISA法检测脑脊液抗PPD—IgG及其临床意义

用ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法检测５５例结脑和３７例非结脑患者脑脊液抗ＰＰＤ－ＩｇＧ并与ＥＬＩＳＡ法比较。结果两法阳性率分别为９６．４％和８３．６％，ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法的敏感性高于ＥＬＩＳＡ法，Ｐ＜０．０５，而两法特异性均为９７．３％。同时检测结脑患者脑脊液和血清抗ＰＰＤ－ＩｇＧ，脑脊液阳性率为９６．４％高于血清阳性率为８５．５。结果表明本法可为结脑诊断的一种辅助方法。     

胸水中抗PPD—IgG分泌细胞测定的临床意义

用酶联免疫斑点技术（ＥＬＩＳＰＯＴ）测定胸水中抗ＰＰＤ－ＩｇＧ抗体分泌细胞以研究其对结核性胸膜炎的诊断价值，结果表明其敏感性为９０％，特异性为１００％。同时测定胸水中腺苷脱氨酶（ＡＤＡ）活性及抗ＰＰＤ－ＩｇＧ抗体（ＥＬＩＳＡ法）水平，其敏感性，特异性分别为７５％，７９％，４５％及８６％。并将ＥＬＩＳＰＯＴ与其他两种方法比较，实验提示前者对结核性胸膜炎的诊断价值较后二者有一定的优越性。     

结核性腹膜炎的实验室诊断

目的评价聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术及酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对结核性腹膜炎的诊断价值。方法用ＰＣＲ结合地高辛标记核酸探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术检测４２例结核性腹水中结核分支杆菌ＤＮＡ，并与常规细菌学检测及ＥＬＩＳＡ对比。引物来自结核分支杆菌特异重复插入序列ＩＳ６１１０。特异性通过杂交及限制性内切酶ＳａｌⅠ酶切证实。同时比较了Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测与凝胶电泳检测的敏感性。结果ＰＣＲ的敏感性为６９％，ＥＬＩＳＡ为７１％，培养为９％，涂片镜检均为阴性。并发现杂交较凝胶电泳检测更敏感。结论ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ法对结核性腹膜炎有较高的诊断价值，但前者更具有特异性。将Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术与ＰＣＲ技术结合，可进一步提高检测的敏感性和特异性。     

胸水中抗PPD－IgG分泌细胞测定的临床意义

用酶联免疫斑点技术（ＥＬＩＳＰＯＴ）测定胸水中抗ＰＰＤ－ＩｇＧ抗体分泌细胞以研究其对结核性胸膜炎的诊断价值，结果表明其敏感性为９０％、特异性为１００％。同时测定胸水中腺苷脱氨酶（ＡＤＡ）活性及抗ＰＰＤ－ＩｇＧ抗体（ＥＬＩＳＡ法）水平，其敏感性、特异性分别为７５％、７９％；４５％及８６％。并将ＥＬＩＳＰＯＴ与其他两种方法比较，实验提示前者对结核性胸膜炎的诊断价值较后二者有一定的优越性。     

乙型肝炎病毒基因组S区编码产物的检测及临床意义

为了进一步明确 ＨＢＶ基因组 Ｓ区编码产物对乙型病毒性肝炎诊断的临床价值，用双抗体夹心 ＥＬＩＳＡ法检测 ９０份乙型病毒性肝炎患者血清标本ＨＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ、Ｐｒｅ－Ｓ１和 Ｐｒｅ－Ｓ２，并与 ＨＢＶＭ及 ＨＢＶＤＮＡ ＰＣＲ进行对比分析。结果以抗 ＨＢｃ、ＨＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ、ＨＢＶＤＮＡ（ＰＣＲ）及 Ｐｒｅ－Ｓ２的阳性检出率为最高，分别为８７．８％、７３．３％、７２．２％和６４．４％，以ＨＢＶＤＮＡ作为ＨＢＶ感染的金标准，无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；其中ＨＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ与 ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｅＡｇ的符合率最高，分别为 ７６．７ ％和 ７４．７ ％；ＭＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ与 ＨＢＶＤＮＡ具有高度相关性。ＨＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ做为早期诊断ＨＢＶ感染及判断是否具有传染性方面，是一项非常重要的血清学指标，Ｐｒｅ－Ｓ２也可作为ＨＢＶ复制活跃的标志之一，用于急慢性肝炎的预后判断．     

布鲁氏菌特异性抗原BSAg—ELISA试验检测病人血清抗体的研究

以布鲁氏菌特异性抗原ＢＳＡｇ进行ＥＬＩＳＡ试验，检查经常规血清学试验确诊的布鲁氏菌病人血清１５５份，全部阳性，阳性率为１００％。检查常规实验室视为疑似布鲁氏菌病人血清８０份，ＥＬＩＳＡ试验阳性２４份，阳性率３０％，检查布鲁氏菌病疫区内健康人血清１００份、ＥＬＩＳＡ试验均为阴性，但有１２份血清ＥＬＩＳＡ滴度达１：１００。因此认为ＢＳＡｇ－ＥＬＩＳＡ试验特异性强，敏感性高，可用于布鲁氏菌病血清学诊断。     

PCR技术检测HBV DNA评价

目的 为评价聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测ＨＢＶ ＤＮＡ较之传统酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）的优越性,评价ＨＢｓＡｇ阴性消化科住院病人携带ＨＢＶ的状态,方法 我们使用ＰＣＲ技术检测了１１９例ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢｓＡｇ阴性的消化科住院病人的ＨＢＶ ＤＮＡ,并与１０３例ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢｓＡｇ阴性传染科住院肝炎病人相比较。结果：５２．１％的消化科住院病人ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｓ、抗－ＨＢｅ、抗－Ｈ     

酶联免疫印渍法检测脑囊虫病人循环抗原的研究

用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ检测脑囊虫病人血清中ＣＡｇ，并与ＤＡＢＳ－ＥＬＩＳＡ进行了比较，其阳性率分别为８９．２％和８１．１％。４０例正常人，３０例单纯绦虫病患者及２９例包虫病人血清，用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ检测囊虫ＣＡｇ，除１例包虫病患者呈轻度交叉反应外均为阴性。结果表明本法具有高特异性与敏感性。对５７例接受阿苯达唑治疗的脑囊虫病人，用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ法及ＤＡＢＳ－ＥＬＩＳＡ于治疗后１年内检测血清中ＣＡｇ，累计检出率分别为４３．９％及２２．８％。表明ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ法测ＣＡｇ具有更好的疗效考核价值。     

三种快速检测结核分支杆菌方法的评价

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术、单克隆抗体（ＭｃＡｂ）ＴＢ１５－Ｃ３经酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）及抗酸染色等３种方法，对１０种抗酸杆菌及２种非分支杆菌进行检测。ＰＣＲ仅对结核分杆菌复合体扩增出２４５ｂｐ特异性条带，ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ检测除人型结核分支杆菌外，还与ＢＣＧ、鸟型及瘰疠分支杆菌反应阳性，抗酸染色则所有分支杆菌均呈阳性。用ＰＣＲ、ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ及抗酸染色检测了１２４份监床标本，Ｐ     

酶联免疫印渍法检测脑囊虫病人循环抗原的研究

用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ检测脑囊虫病人血清中ＣＡｇ，并与ＤＡＢＳ－ＥＬＩＳＡ进行了比较，其阳性率分别为８９．２％和８１．１％，４０例正常人，３０例单纯绦虫病患者及２９例包虫病人血清，用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ检测囊虫ＣＡｇ除１例包虫病患者呈轻度交叉反应外均为阴性，结果表明本方法具有高特异性与敏感性，对５７例接受阿苯达唑治疗的脑囊虫病人，用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ及ＤＡＢＳ－ＥＬＩＳＡ于治疗后１年内检测血清中ＣＡｇ     

谷胱甘肽—S—转移酶多克隆抗体免疫金测定法检测日本血？…

目的 探讨谷胱甘肽－Ｓ－转移酶（ｒＳｊ２６ＧＳＴ）多克隆抗体诊断日本血吸虫病的应用价值。方法 以抗ｒＳｊ２６ＧＳＴ多克隆抗体为捕获并检测抗体，并建立双抗体夹心斑点免疫检测技术，用于检测日本血吸虫循环抗原，并以斑点免疫金测定法和ＥＬＩＳＡ检测抗体作对照。结果 ３种方法检测急性血吸虫病的敏感性均为１００％，对慢性血吸虫病的敏感性分别为７６．４％、９８．１％和９６．２％。特异性分别为９５．０％、９８．０     

COMPARATIVE STUDY ON DETECTION OF ANTI-TOXOPLASM A GONDII ANTIBODIES BY USING DOT-ELISA AND DOT-IMMUNOGOLD SILVER STAINING

为比较斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫抗体的敏感性和特异性，本实验以弓形虫速殖子可溶性蛋白抗原为诊断用抗原，同时用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测６５份弓形虫感染者血清、１７６份其他寄生虫感染者血清和７６份对照血清。结果显示，用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫感染者抗体阳性率分别为９８．４６％及９２．３１％，平均抗体滴度分别为１∶３８４及１∶２１８（１∶２０－１∶２５６０）。用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测，有２３份血清抗体滴度高于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，有８份低于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。二种方法所测抗体滴度呈直线正相关关系（ｒ＝０．６０８，Ｐ＜０．０１）。二种方法检测其他寄生虫感染者和对照血清，假阳性率分别为５．９５％及１３．８９％。Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ操作流程和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ相似，但敏感性、特异性均优于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，前者不使用对人体有害的底物，有较好的推广前景。     

结核分支杆菌DNA的单管巢式聚合酶链反应检测

目的探讨单管巢式聚合酶链反应（ＳＮＰＣＲ）检测石蜡包埋组织结核分支杆菌ＤＮＡ的特异性和敏感性。方法应用普通ＰＣＲ（ＧＰＣＲ）、双管巢式ＰＣＲ（ＤＮＰＣＲ）和ＳＮＰＣＲ对结核分支杆菌ＢＣＧ和３０例结核性淋巴结炎石蜡包埋组织进行结核分支杆菌复合群ＩＳ６１１０特异插入序列片段ＤＮＡ检测。结果ＤＮＰＣＲ和ＳＮＰＣＲ检测ＢＣＧＤＮＡ均于１５ｆｇ以上呈现阳性结果，其敏感性明显优于ＧＰＣＲ（４８０ｆｇ）。ＧＰＣＲ、ＤＮＰＣＲ和ＳＮＰＣＲ检测３０例结核性淋巴结炎阳性率分别为４３％、１００％和１００％，抗酸染色阳性率（１０％）与３种ＰＣＲ法相比差异有非常显著意义（均Ｐ＜０．０１）。ＧＰＣＲ阳性率与ＤＮＰＣＲ和ＳＮＰＣＲ相比差异亦具非常显著意义（均Ｐ＜０．０１）。ＳＮＰＣＲ阳性率与ＤＮＰＣＲ相同。结论巢式ＰＣＲ检测淋巴结石蜡包埋组织结核分支杆菌的敏感性显著高于ＧＰＣＲ，其中ＳＮＰＣＲ具有与ＤＮＰＣＲ相同的特异性和敏感性，并具有更大的实用价值。     

结核杆菌－DNA和肿瘤相关抗原对良、恶性腹水的鉴别价值

我们应用放射免疫法（ＲＩＡ）和聚合酶链反应（ＰＣＲ）法对１０６例良、恶性腹水（良性组３５例、结核组３５例、恶性组３６例）进行了结核杆菌ＤＮＡ（ＴＢ－ＤＮＡ）和肿瘤相关抗原（ＴＡＡ）的癌胚抗原（ＣＥＡ）、糖链抗原（ＣＡ１９－９、ＣＡ５０）的测定。结果：（１）ＴＡＡ三项指标：恶性组显著高于良性组和结核组（Ｐ＜０．０１）。单项ＣＥＡ、ＣＡ１９－９和ＣＡ５０对恶性腹水的敏感性分别为５８％、７０％、６９％，特异性均为１００％；联合三项检测诊断恶性腹水的敏感性为９６％，特异性为１００％；（２）ＴＢ－ＤＮＡ：对结核性腹水的敏感性、特异性分别为９７．１４％、９５．７５％     

聚合酶链反应－冷单链构象多态性快速检测结核分支杆菌rpoB基因突变

目的评估ｒｐｏＢ基因突变检测在结核分支杆菌利福平耐药性测定中的应用价值。方法采用聚合酶链反应－冷单链构象多态性（ＰＣＲ－冷ＳＳＣＰ）方法对８７株结核分支杆菌临床分离株及有药敏结果的２２份相应肺结核患者痰标本进行分析。结果ＰＣＲ扩增ｒｐｏＢ基因的敏感性为１００ｐｇＤＮＡ及５０００个菌体，属于分支杆菌特异。所有分离菌的ｒｐｏＢ基因ＰＣＲ扩增均为阳性。采用套式ＰＣＲ可使扩增敏感性提高１００倍。与传统药敏试验方法相比，ＰＣＲ－冷ＳＳＣＰ对８７株结核分支杆菌临床分离菌利福平耐药性的检测敏感性和特异性分别为８９．６％及１００％。２２份涂阳培阳痰标本中套式ＰＣＲ扩增阳性的６份均为高度利福平耐药，其ＳＳＣＰ结果也与相应分离株的药物敏感性试验相符。结论ＰＣＲ－冷ＳＳＣＰ检测结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变快速、简便、易行，适用于结核分支杆菌分离株利福平耐药性的快速测定。如进一步提高引物增特异性及敏感性，该技术可望用于临床标本直接检测     

抗rSjCTPI单克隆抗体检测血吸虫循环抗原的研究

为探讨抗重组血吸虫磷酸丙糖异构酶（ｒＳｊＣＴＰＩ）的单克隆抗体检测血吸虫循环酶抗原在血吸虫病免疫诊断和疗效考核中的价值。制备日本血吸虫ｒＳｊＣＴＰＩ表达蛋白,以此重组蛋白免疫小鼠,筛选出高效价的抗ｒＳｊＣＴＰＩ单抗,建立以纯化的抗血吸虫可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ）的多克隆抗体（ＩｇＧ）为捕捉系统,以酶标的抗ｒＳｊＣＴＰＩ单抗为检测系统的酶联免疫吸附试验（Ｐ－Ｍ－ＥＬＩＳＡ）法检测血吸虫病人等血清。并对该法的敏感性、特异性、交叉反应以及疗效考核与常规的ＳＥＡ－ＥＬＩＳＡ比较。结果获得了一株抗ｒＳｊＣＴＰＩ的单克隆抗体,其抗体同型为ＩｇＧ１。Ｐ－Ｍ－ＥＬＩＳＡ检浊急性、慢性血吸虫病人、健康人以及华枝睾吸虫病人、肺吸虫病人血清的阳性率分别为１００％、９１．７％、０、０和０。而ＳＥＡ－ＥＬＴＳＡ为１００％、９８．３％、６．