全反式维甲酸对A549细胞株增殖和Caspase-3蛋白表达的影响

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对A549肺腺癌细胞增殖和凋亡相关蛋白Caspase-3表达的影响.方法:①取对数生长期的人肺腺癌细胞株A549细胞,消化后于96孔板上按1×10-5 mol/L,1×10-6 mol/L,1×10-7 mol/L 3组ATRA药物浓度组和空白对照组培养,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察ATRA作用2 d,4 d,6 d对A549细胞增殖的影响.②用Hoechest33258荧光染色观察1×10-5 moL/LATRA培养24 h后A549细胞胞核形态变化.③利用免疫印迹法(Western blot)检测经1×10-7 mol/L,1×10-6 mol/L,1×10-5 mol/L ATRA作用12 h,24 h后A549细胞中Caspase-3蛋白表达的变化.结果:ATRA处理组与空白对照组相比细胞的增殖活性明显受到抑制(P＜0.05);经1×10-5 mol/L ATRA处理后的细胞呈典型的凋亡核固缩表现,胞核呈致密浓染的颗粒状或块状荧光.ATRA处理组的Caspase-3蛋白表达与空白对照组相比明显增高.结论:ATRA可抑制人肺癌细胞株A549的增殖,并通过上调Caspase-3蛋白表达诱导细胞的凋亡.     

N-(3-三氟甲基苯基)维甲酰胺对人肺腺癌A549细胞分化和骨桥蛋白表达的影响

目的 分析新合成的全反式维甲酸(ATRA)衍生物N-(3-三氟甲基苯基)维甲酰胺(NTFMP)对人肺腺癌细胞株A549体外增殖、分化及骨桥蛋白表达的影响.方法 以人肺腺癌细胞株A549为研究对象,分别给予不同浓度的ATRA及NTFMP进行干预,应用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法测定A549细胞的增殖情况;酶动力学法检测...     

全反式维甲酸联合维生素D3提高肺腺癌化疗敏感性的作用

目的：探讨全反式维甲酸（all-trans-retinoic acid，ATRA）联合维生素D3（VD3）提高肺癌化疗敏感性的作用。方法：应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色、免疫组织化学、流式细胞仪、逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）等方法观察ATRA联合VD3对人肺腺癌A549细胞株生长、化疗敏感性、细胞周期及Fas／FasL、Bcl-2和多药耐药相关蛋白（MRP）、肺耐药相关蛋白（LRP）表达水平的影响。结果：1μmol／L的ATRA、VD3可提高肺腺癌A549细胞对低、中浓度顺铂的化疗敏感性，但对高浓度顺铂化疗敏感性的改变不明显。对A549细胞的生长有抑制作用，且使A549细胞阻滞于G1期，促进细胞凋亡，增强Fas、减弱Bcl-2的表达；低浓度的ATRA、VD3作用不明显；1μmol／L的ATRA、VD3可抑制肺腺癌A549细胞MRP、LRP的表达。结论：ATRA、VD3可通过多种途径提高肺腺癌细胞化疗的敏感性，两药合用有协同作用。     

诱导分化药物对肺癌细胞肿瘤相关基因的影响

目的 通过观察诱导分化浓度的全反式维甲酸、亚硒酸钠、三氧化二砷对肺腺癌细胞A549的肿瘤相关基因的影响,探讨诱导分化药物对肺癌细胞的作用机制.方法 体外培养肺癌A549细胞,设全反式维甲酸、亚硒酸钠和三氧化二砷处理组及对照组,药物处理24 h后以Westem Blot和Rt-PCR检测基因caspase3、p21、RARα、bcl-2、cyclinD3和nm23的表达.结果 caspase3、RARα和nm23在亚硒酸钠、三氧化二砷组中表达上调;p21在全反式维甲酸、三氧化二砷组中表达上调.bcl-2和cyclinD3在3个处理组中表达下调.结论 全反式维甲酸、亚硒酸钠和三氧化二砷能引起A549肿瘤相关基因表达的改变,诱导分化药物对肺癌的作用机制表现为增殖抑制、促进凋亡、周期阻滞、转移抑制、诱导分化敏感度增加等多方面的改变.     

维甲酸联合低浓度化疗药物对肺腺癌A549细胞的作用

 目的：观察全反式维甲酸和低于临床用药浓度不同剂量的化疗药物吉西他滨、顺铂等及两者联合处理A549人肺腺癌细胞株,以了解不同药物、不同剂量及不同作用时间对A549细胞增殖、细胞周期的影响。方法：用MTT法测定不同药物组相对于对照组的A549细胞增殖抑制率,并用流式细胞学方法检测各药物组及对照组的细胞周期分布。结果：维甲酸联合应用低浓度的顺铂和吉西他滨可显著抑制A549细胞的增殖,随着化疗药物的浓度的增加,抑制率也一并增加,并在达到同样增殖抑制率的效果下降低顺铂和吉西他滨的药物浓度。结论：维甲酸与低浓度化疗药物联合应用有希望显著减少药物的剂量,降低化疗药物的毒性,增强疗效。     

平阳霉素胸膜固定术中PAI-1、t-PA和TGF-β_1的意义

目的观察4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯(ATPR)对人肺腺癌细胞A549和鳞癌细胞L78生长抑制、分化的影响。方法将两株细胞分为ATPR组、空白对照组及全反式维甲酸(ATRA)组。前组分别以0.01、0.1、1、5、10μmol/L的ATPR与肺腺癌细胞A549和鳞癌细胞L78作用24、48、72、96 h。运用MTT法检测细胞吸光度并计算细胞的生长抑制率,流式细胞仪检测细胞周期。0.1、1、5μmol/L的ATPR与肺腺癌细胞A549和鳞癌细胞L78作用72 h,苏木精-伊红(HE)染色观察肺癌细胞形态变化。1μmol/L的ATPR作用肺癌细胞72 h后,RT-PCR法检测细胞核维甲酸α受体(RARα)、表皮生长因子受体(EGFR)表达的变化。结果 ATPR具有抑制A549、L78细胞生长的作用,生长抑制率有剂量和时间依赖关系。流式细胞仪分析结果显示A549、L78细胞被阻滞于G0-G1期。A549、L78细胞在ATPR的作用下,发生了细胞胞体变小、分裂状态的细胞数减少等形态学变化。通过对肺癌细胞的RT-PCR法检测,均发现EGFR和RARα的特异性条带。空白对照组L78细胞高表达EGFR;A549细胞...     

维甲酸对甲状腺鳞癌细胞株SW579细胞增殖的影响

目的 观察全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)对甲状腺鳞癌细胞株SW579诱导分化作用中细胞增殖的影响.方法 以终浓度为10-7、5×10-7、10-6、5×10-6、10-5 mol/L的全反式维甲酸作用SW579细胞株,在倒置显微镜下观察细胞生长情况及形态变化;采用MTT比色法测定细胞存活率;流式细胞仪检测细胞周期.结果 全反式维甲酸能使细胞趋向良性分化,抑制了肿瘤细胞增殖,使细胞滞留在S期.结论 全反式维甲酸对甲状腺鳞癌细胞株SW579有剂量依赖性的增殖抑制作用,并且在低浓度时(10-7、5×10-7、10-6 mol/L)可能对细胞具有诱导分化作用.     

全反式维甲酸及其衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯对A549细胞增殖和OPN表达的影响

目的 研究全反式维甲酸(ATRA)及其新型衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯(ATPR)对人肺腺癌细胞株A549增殖和骨桥蛋白(OPN)表达的影响及其相关性.方法 以A549细胞株为研究对象,分别予以不同浓度的ATRA及ATPR进行干预,应用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法测定A549细胞的增殖情况;Western...     

三氧化二砷与维甲酸联合作用在NB4,MR2细胞系中的体外研究

目的：观察三氧化二砷(As2O3)和全反式维甲酸(ATRA)联合作用对NB4，MR2不同亚型急性早幼粒白血病细胞株，诱导分化、增殖、凋亡的影响。方法:以NB4，MR2为体外模型，利用细胞生长曲线、台盼蓝拒染法、MTT法、NBT、细胞形态Wrigh‘s-Gimesa染色，观察细胞增殖、分化、凋亡的相互作用。结果：NB4细胞株：0．5μmol/L As2O3与10^-6mol/L ATRA对细胞增殖、分化、凋亡呈现拮抗，而0．5μmol/L As2O3与(10^-7--10^-8mol/L)ATRA呈现协同；MR2细胞株：0．5μmol/L As2O3与10^-6mol/L ATRA对细胞增殖、分化、凋亡呈现协同。结论：As2O3与全反式维甲酸协同效应呈现不同细胞、剂量的特异性，MR2细胞株协同效应明显强于NB4细胞株。     

宣威肺腺癌xwlc-05和肺腺癌A549细胞株体外培养细胞活力的比较研究

目的比较宣威肺腺癌xwlc-05和肺腺癌A549细胞株体外培养细胞活力.方法体外培养宣威肺腺癌xwlc-05和肺腺癌A549细胞株,观察细胞形态变化.取传代培养后1 d、3 d、5 d 3个时间点分别计数细胞,MTT检测3时间点细胞活力变化,并进行统计学分析比较.结果宣威肺腺癌xwlc-05细胞株和肺腺癌A549细胞株各时间点比较,培养1 d、3 d、5 d组的细胞数量逐渐增加,差异有统计学意义（P〈0.05）;同时,宣威肺腺癌xwlc-05细胞株和肺腺癌A549细胞株3 d组细胞活力较1 d组增加,而5 d组的细胞活力较3 d组下降,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论不同肺腺癌细胞株体外增殖和细胞活力不完全一致.     

全反式维甲酸对慢性阻塞性肺疾患大鼠肺中性粒细胞趋化因子MIP-2分泌的影响

[目的]研究全反式维甲酸对慢性阻塞性肺疾患大鼠肺中性粒细胞功能的影响及机制。[方法]SD大鼠24只,随机分为模型组、维甲酸组和对照组,每组8只。每日熏烟1 h共28 d,在第0天和第14天气管内滴脂多糖（LPS）复制COPD动物模型,维甲酸组经食管灌入维甲酸,模型组不做治疗,正常大鼠为对照组。第28天杀死大鼠,取肺组织用于形态学检查或并制备肺组织匀浆,用ELISA法检测肺组织匀浆中MIP-2的变化,用比色法检测髓过氧化物酶（MPO）的变化。[结果]应用维甲酸的大鼠平均肺泡直径变小,平均肺泡数增多;维甲酸组与模型组肺组织匀浆MIP-2含量分别为（16.62±6.03）pg/mL与（41.43±7.36）pg/mL,肺组织匀浆过氧化物酶髓活性分别为（9.13±2.15）U/g与（12.2±1.72）U/g。[结论]通过抑制MIP-2分泌抑制中性粒细胞功能可能是维甲酸防治慢性阻塞性肺疾患发生的机制之一。     

Effect of all-trans retinoic acid on growth of xenograft tumor and its metastasis in nude mice

Ｒｅｔｉｎｏｉｃａｃｉｄｄｉｓｐｌａｙｓａｗｉｄｅｒａｎｇｅｏｆｂｉｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｎｃｅｌｌｕｌａｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ,ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ,ｖｉｓｉｏｎ,ｉｍｍｕｎｉｔｙａｎｄｍａｌｉｇｎａｎｔｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ,ａｎｄｈａｓｂｅｅｎｓｈｏｗｎｔｏｓｕｐｐｒｅｓｓｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｎｉｍａｌｓ.Ｉｔａｌｓｏｅｘｈｉｂｉｔｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｅｇｒｅｅｓｏｆｅｆｆｉｃａｃｙｉｎｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ…     

三苯氧胺联合全反式维甲酸对大鼠乳腺癌的预防作用

目的 探讨联合应用三苯氧胺及全反式维甲酸对实验性大鼠乳腺癌发生促进期的化学预防作用。方法 利用二甲基苯蒽（DMBA）诱导大鼠乳腺 癌发生,在给药后第8周应用三苯氧胺（TAM）和全反式维甲酸（RA）,在第24周观察大鼠乳肿瘤发生情况及乳腺发育情况。结果 对照组大鼠乳癌发生率为70．58％;TAM组与RA组发生率分别为22．02％和15．79％,明显低于对照组（P＜0．05）;TAM＋RA组无乳腺肿瘤发生（P＜0．01）。组织学及电镜观察发现,TAM组和RA组乳腺上皮均有不同程度增生或典型增生,联合用药组乳腺上皮发育良好。结论 联合应用三苯氧胺和维甲酸,二者在阻止乳发生过程中有显著的协同作用。     

全反式维生素A酸对小鼠囊胚转化生长因子β_1蛋白表达的影响

目的:探讨全反式维生素A酸(ATRA)对体外培养小鼠囊胚转化生长因子β1 (TGF β1 )蛋白表达的作用,并了解其对着床前期胚胎发育的影响作用。方法:获取妊娠3.5 d小鼠囊胚,分别培养在含0,0.1,1,10μmol·L-1的ATRA的M199培养基中24 h,用免疫组织化学SP法,分别检测不同剂量组 ATRA对小鼠囊胚 TGF β1蛋白表达的状况。结果:ATRA可增强小鼠囊胚TGF β1 蛋白表达,表达强度呈现剂量依赖型。结论:ATRA对小鼠胚胎的发育具有细胞毒性作用,TGF β1 在小鼠胚胎发育的调节中发挥了重要的作用。     

Influence of suppressor gene p16 on retinoic acid inducing cancer cell A549 differentiation

Objective To investigate the role of suppressor gene p16 in the process of differential regulation of retinoic acid (RA) on the A549 lung cancer cells.Methods Tumor suppressor gene p16 was transferred into A549 cells and the cells were treated with all-trans retinoic acid (ATR) at the dosage of 5×10-6 mol/L for 4 d. After that, the proliferation and differentiation of A549 cells were examined by growth curve and cytometry analysis, the change of lung lineage-specific marker MUC1 was tested by immunohistochemical staining. Meanwhile, Western blot was used to observe the change of p16 protein expression in A549 cells treated with ATRA.Results ATRA could obviously inhibit the growth and induce the differentiation of A549 Cells that were transferred with p16 gene. There were more cells arrested in G1/G0 phase and the expression of MUG1 was markedly down-regulated than in control cells. The expression of p16 protein was up-regulated in A549 cells treated with ATRA.Conclusion Suppressor gene p16 could enhance the effects of RA and proliferated suppression and differential induction of A549 cells.     

全反式维甲酸诱导A549细胞凋亡机制的初步探讨

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及机制。方法MTT法观察ATRA对肺癌细胞株A549的生长抑制作用,流式细胞仪观察ATRA诱导A549细胞凋亡作用和对细胞周期的影响,Western Blot分析凋亡相关蛋白表达。结果ATRA抑制A549的增殖呈剂量依赖性;ATRA可诱导A549细胞凋亡,凋亡过程伴随caspase-3、caspase-9表达增加,而Bcl-2、Bcl-Xs/LP的表达无明显变化。结论ATRA可明显抑制A549细胞的增殖,可通过上调caspase-9、caspase-3的表达促进A549细胞凋亡。     

ATRA对体外培养子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的研究

目的探讨全反式维甲酸对体外培养子宫肌瘤细胞中COLⅠ、FN表达的影响以及对细胞增殖和凋亡的作用,为子宫肌瘤药物治疗提供新的实验依据。方法体外培养子宫肌瘤细胞,不同浓度全反式维甲酸作用后,应用MTT法检测细胞增殖活性,半定量RT-PCR检测COLⅠ、FN水平变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果低浓度（10-8mol/L）全反式维甲酸可降调肌瘤细胞中COLⅠ、FN表达,抑制肌瘤细胞的增殖及促进肌瘤细胞的凋亡（P〈0.05）;且随着药物浓度的递增,COLⅠ、FN表达逐渐降低（P〈0.05）,抑制肌瘤细胞增殖活性及促进肌瘤细胞凋亡率逐渐增强。结论全反式维甲酸以浓度依赖性方式,从核酸水平检测降调肌瘤细胞中COLⅠ、FN的表达,抑制体外培养肌瘤细胞的增殖且促进其凋亡。     

柔红霉素、地塞米松、全反式维甲酸对白血病细胞系CYP3A5基因转录及活性的调控

目的 探讨化疗药对白血病细胞系CYP3A5基因转录及活性的调控。方法 采用RT-PCR、高压液相色谱法(HPLC)检测药物干预后白血病细胞系CYP3A5基因的转录及活性。结果 K562／A02细胞经柔红霉素作用后CYP3A5转录增强，HL-60／ADR细胞则经诱导后出现CYP3A5转录。Jurkat细胞经地塞米松作用24h后出现微弱的CYP3A5转录，48h后转录明显增强。NB4细胞经全反式维甲酸作用24～96h均诱导出现CYP3A5转录。K562细胞的CYP3A5活性显著高于HL-60、NB4和Jurkat细胞。柔红霉素作用24h后K562细胞的CYP3A5活性增高，48h后活性显著增高；而NB4和Jurkat细胞在柔红霉素作用24h后CYP3A5活性无改变。地塞米松作用Jurkat细胞、全反式维甲酸作用NB4细胞均能诱导CYP3A5活性显著增高，并呈时间依赖性。结论 柔红霉素、地塞米松、全反式维甲酸的应用可诱导某些白血病细胞株CYP3A5基因的转录及活性。     

序贯疗法治疗急性早幼粒细胞白血病的临床观察

目的:探讨序贯疗法治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)的长期疗效.方法:对39例初诊和3例复诊病人给予三氧化二砷(As2O3)诱导治疗,完全缓解(CR)后给予联合化疗和维甲酸交替治疗.结果:39例初诊病人中完成诱导分化治疗35例,均获得CR,有效率90%.3例复诊者经As2O3治疗后获CR,总有效率91%.4例复发者经As2O3治疗再获CR.总CR率达91%.经序贯疗法治疗后,全部病例均无病生存.结论:As2O3诱导治疗APL缓解率高,序贯疗法治疗APL患者CR期长,副作用轻.