温阳活血方对5/6肾切除大鼠肾组织TGF-β1表达的影响

目的:探讨温阳活血方对慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)大鼠肾脏中转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达的影响。方法:选用120只SD雄性大鼠,通过5/6肾切除建立慢性肾衰竭大鼠模型。随机分为5组:(1)假手术组:予生理盐水10ml·kg-1·d-1灌胃;(2)模型组:予生理盐水10ml·kg-1·d-1灌胃;(3)中药组:予温阳活血方30g·kg-1·d-1灌胃;(4)西药组:科素亚33.3ml·kg-1·d-1灌胃;(5)中西药联合组:予温阳活血方+科素亚灌胃。分别在给药后4、8、12周,每组随机选取8只大鼠处死,检测肾功能指标和24h尿蛋白,用免疫组化法检测肾脏TGF-β1表达水平。Western印迹检测给药12周后TGF-β1蛋白在肾组织中的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血BUN、Scr、24h尿蛋白定量明显均明显升高(P<0.01,P<0.05);三个治疗组血BUN、Scr、24h尿蛋白定量明显低于模型组(P<0.01)。免疫组化显示,治疗组均能显著减少TGF-β1在肾脏中的表达(P<0.01)。结论:温阳活血方可能是通过降低慢性肾衰竭大鼠的Scr、BUN和尿蛋白水平,抑制肾脏TGF-β1表达,从而延缓肾衰竭进展。     

消瘀泄浊饮对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织TGF-β_1表达的影响

目的：通过研究消瘀泄浊饮及其化裁方痰瘀同治方对单侧输尿管（UUO）大鼠肾间质TGF-β1表达的影响,探讨其抗肾间质纤维化的可能机制。方法：实验采用UUO大鼠模型,将40只SD大鼠随机分为5组：假手术组、模型组、洛汀新治疗组、消瘀泄浊饮组、痰瘀同治组。药物治疗14天后测定大鼠血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）水平;肾组织HE染色观察病理改变;采用免疫组织化学方法检测肾组织TGF-β1的表达;RT-PCR检测肾组织TGF-β1mRNA的表达;Western-blot检测肾组织TGF-β1蛋白表达。结果：与假手术组比较,模型组大鼠Scr、BUN、TGF-β1表达显著升高,差异有统计学意义（P〈0.01,P〈0.05）;消瘀泄浊饮、痰瘀同治方能够明显降低实验大鼠血清肌酐、尿素氮水平,能降低肾组织中TGF-β1表达,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.01,P〈0.05）,形态学观察也显示其肾脏损害轻于模型组。从实验数据来看,痰瘀同治方治疗组有优于消瘀泄浊饮治疗组的趋势。结论：消瘀泄浊饮、痰瘀同治方能通过下调TGF-β1的表达,从而延缓肾间质纤维化的进展。痰瘀同治方的作用可能优于消瘀泄浊饮。     

糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1及MMP-9表达的影响

目的：研究糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1、MMP-2、MMP-9及Ⅳ型胶原表达的影响,探讨糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护机制。方法：50只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、蒙诺组（0．833mg／kg）、糖肾方大剂量组（2．67g／kg）、糖肾方小剂量组（1．33g／kg）,每组10只,利用单侧肾切除加腹腔注射链脲佐菌素造成糖尿病肾病大鼠模型,连续给药20周。动态检测血糖和尿蛋白／肌酐水平;取肾组织进行病理组织学观察并对肾小球硬化和肾小管间质纤维化程度进行评分;RT-PCR方法检测TGF-β1、MMP-2及MMP-9 mRNA表达,免疫组化方法检测肾组织TGF-β1及Ⅳ型胶原表达。结果：大剂量糖肾方能显著降低糖尿病肾病大鼠尿蛋白／肌酐（P〈0．05）,降低肾小球硬化指数（P〈0．01）和肾小管间质纤维化指数（P〈0．01）,减少TGF-β1mRNA与蛋白表达（P〈0．05）,增加MMP-9mRNA表达（P〈0．05）,减少Ⅳ型胶原蛋白表达（P〈0．05）。结论：糖肾方可减轻实验大鼠肾小球硬化和肾小管间质纤维化,其作用机制可能与抑制TGF-β1表达和提高MMP-9mRNA水平有关。     

黄芪山甲方对UUO模型中肾间质纤维化TGF-β1及FN的影响

目的：探讨黄芪山甲方（HQSJ）对单侧输尿管结扎（UUO）致肾间质纤维化（renal interstitial fibrosis,RIF）大鼠转化生长因子-β1 （TGF-β1）、纤维黏连蛋白（FN）表达的影响.方法：实验采用UUO大鼠模型,将雄性SD大鼠30只随机分成5组：假手术组（Sham）、模型组（UUO）、中药组（UUOA）、西药组（UUOE）、中西药组（UUOAE）.治疗第14天检测血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）,光镜观察肾组织病理改变,免疫组织化学法检测肾组织TGF-β1、FN的表达.结果：经过2周的处理,各组BUN及Scr与Sham组分别比较,明显上升,差异有统计学意义（P＆lt;0.05）.肾组织免疫组化观察：Sham组肾小球、肾小管、肾间质及肾血管内几乎无TGF-β1、FN表达.其他各组14天时大鼠TGF-β1、FN在肾小管、肾间质均有不同程度表达,肾小球分布相对较少,表现为黄褐色颗粒状沉积,尤其在UUO组.UUOAE组、UUOA组、UUOE组表达均较模型组轻.UUOAE组最轻、UUOA组其次、UUOE组最差,与Sham组比较,UUO组及各治疗组大鼠Scr、BUN、TGF-β1、FN表达及肾小管间质损伤评分表达差异均有统计学意义（P＆lt;0.05）.各治疗组与UUO组比较,差异均有统计学意义（P＆lt;0.05）.UUOAE组与UUOE组比较差异有统计学意义（P＆lt;0.05）,UUOA组与UUOE组比较差异有统计学意义（P＆lt;0.05）,UUOAE组与UUOA组比较差异有统计学意义（P＆lt;0.05）.结论：HQSJ可能通过下调肾组织TGF-β1、FN的表达水平,从而抑制RIF的发展,起到一定的肾脏保护作用.     

肾衰2号方抑制残余肾TGF-β1与CTGF mRNA的过度表达

目的：探讨肾衰2号方通过抑制转化生长因子-β1（transforming growth factor beta1,TGF-β1）、结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）mRNA的过度表达而减轻肾脏纤维化的作用机制。方法：制作大鼠5/6肾切除慢性肾衰竭大鼠肾纤维化模型,分别给予肾衰2号方及主要单味药党参、桃仁灌胃,并设科素亚对照组。治疗2个月后用RT-PCR的方法检测CTGF和TGF-β1 mRNA的表达。结果：在5/6肾切除慢性肾衰竭肾纤维化模型组中表现为TGF-β1、CTGF mRNA的过度表达（P〈0.01）,经肾衰2号方治疗后TGF-β1、CTGF mRNA的表达降低（P〈0.01）,科素亚也有一定的作用,而党参、桃仁的作用不明显。结论：肾衰2号方减轻肾纤维化的机制在于抑制细胞因子TGF-β1、CTGF mRNA的过度表达。     

化瘀解毒汤对TGF-β1及MMP1mRNA表达作用的探讨

目的：探讨化瘀解毒汤抑制肾间质纤维化的可能作用机制。方法：采用单侧输尿管梗阻（UUO）法诱导肾间质纤维化动物模型,以免疫组化和原位杂交方法分别检测大鼠肾间质组织ECM成分（Ⅰ、Ⅲ型胶原）、TGF－β1mRNA及MMP1mRNA表达,并作尿α1－MG检测以及相关肾组织学检查。结果：模型组和各治疗组大鼠肾组织Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA的面积比显增加（P＜0．05）,MMP1mRNA面积比显降低（P＜0．05）;各治疗组大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA面积比较模型组减少（P＜0．05）,MMP1mRNA面积比较模型组增加（P＜0．05）;治疗组中以中药预防组鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA面积比最低、MMP1mRNA面积比最高（P＜0．05）。经治疗后肾脏组织病理检查有明显改善。结论：化瘀解毒汤通过下调TGF－β1mRNA表达、上调MMP1mRNA表达、以抑制肾间质ECM的增生和积聚,防止肾间质的纤维。此外还可减轻肾小管病理性损伤。     

柴芩肾安方对IgA肾病大鼠肾组织TGF-β1和Smad 7的影响

目的：探讨柴芩肾安方对IgAN大鼠肾组织TGF-β1和Smad 7表达的影响。方法：采用灌服并定时静脉注射BSA复合感染SEB的方法制成大鼠IgAN模型,并用柴芩肾安方治疗,以氯沙坦为对照。第15周末,观察肾组织形态学变化和免疫复合物的沉积情况;采用免疫组化和RT—PCR的方法,分别检测肾组织TGF—β1和Smad 7蛋白及其mRNA的表达。结果：与正常组相比,模型组大鼠肾小球系膜细胞和系膜基质轻度增生,伴见弥漫的IgA和少量IgG沉积;TGF—β1和Smad 7蛋白及其mRNA表达均明显升高（P〈0．01）。柴芩肾安方治疗后上述指标均明显减轻（P〈0．01）,且作用效果与氯沙坦类似。结论：抑制肾组织TGF—β1和Smad 7蛋白及其mRNA的表达,可能是柴芩肾安方延缓IgAN肾脏病变进展的机制之一。     

杜仲对UUO模型大鼠肾纤维化TGF-β1／Smad信号通路的影响

目的：研究杜仲对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾组织转化生长因子-β1（TGF-β1）、Smad2、Smad7表达的影响。方法：将32只大鼠随机分为4组,每组8只,即假手术组、模型组、厄贝沙坦组和杜仲组。厄贝沙坦组给予厄贝沙坦10mg·kg^-1·d^-1、杜仲组给予杜仲6g·kg^-1·d^-1治疗,均术前2d开始给药。术后2周处死大鼠,收集血清测定尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）,光镜下观察Masson和HE染色肾间质的病理改变,并应用免疫组织化学方法检测肾组织TGF-β1和Smad2、Smad7蛋白的表达。结果：模型组与两治疗纽大鼠血清Scr、BUN上升,与假手术组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;模型组、杜仲组、厄贝沙坦组肾间质纤维化程度均较假手术组明显增高（P〈0．05）;模型组TGF-β1、Smad2的表达增加,与假手术组相比差异有统计学意义（P〈0．01）;杜仲组与模型组相比,TGF-β1、Smad2的表达下降,而Smad7的表达增高,差异有统计学意义（P〈0．05）;杜仲组与厄贝沙坦组各指标比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论：杜仲能通过下调TGF-β1、Smad2的表达及增加Smad7的表达而抑制单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化,机制与杜仲可以部分调节TGF-β1／Smad信号转导通路有关,其改善肾纤维化作用与厄贝沙坦无明显差异。     

肾毒宁冲剂对慢性肾衰竭大鼠肾组织TGF-β1和CTGF的影响

目的：观察肾毒宁冲剂对5/6肾切除慢性肾衰竭（CRF）大鼠肾组织转化生长因子-β1（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）的影响。方法：取雄性SD大鼠,通过Platt法5/6肾切除制作CRF模型,术后2周行大鼠断尾采血,测定血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）值,根据Scr随机分为模型组、尿毒清组及肾毒宁组,并设正常组和假手术组。饲养或治疗8周后处死大鼠,测定血Scr、BUN、Hb、RBC,用Real-time PCR法测定肾组织内TGF-β1及CTGF的表达。结果：肾毒宁组血Scr、BUN、Hb、RBC与模型组相比有统计学差异（P〈0.01）。肾毒宁冲剂对肾组织内TGF-β1、CTGF表达有较强的抑制作用（P〈0.05和P〈0.01）,尿毒清冲剂作用次之,肾毒宁组与尿毒清组间无统计学差异。结论：肾毒宁冲剂通过抑制肾组织TGF-β1、CTGF的表达,降低血清Scr、BUN含量,从而起到延缓CRF肾功能的恶化,改善肾脏纤维化的作用。     

阿托伐他汀对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质中TGF-β1及TIMP-1表达的影响

目的:研究单侧输尿管梗阻(UUO)后转化生长因子-β1(TGF-β1)、组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的表达变化,从而探讨肾间质纤维化的发生机制及阿托伐他汀的保护作用.方法:将45只大鼠随机分为假手术组、模型组和阿托伐他汀组(简称治疗组).采用UUO模型,在术后5 d 、10 d、15 d每组各取5只处死,留取空腹血清检测血脂浓度和肾功能,左肾组织行HE和Masson染色,动态观察肾脏病理学变化,并用免疫组化方法测定肾组织中TGF-β1、TIMP-1的表达变化.结果:各组大鼠血脂浓度无统计学差异.模型组大鼠肾间质中TGF-β1、TIMP-1的表达随梗阻时间的延长逐渐增多,与假手术组相比有统计学差异 (P<0.001).治疗组与模型组相比,各时间点TGF-β1、TIMP-1的表达下调有统计学差异(P<0.001),且两者之间存在一定的相关性(r=0.37,P< 0.01). 结论:阿托伐他汀可能通过阻断肾组织中TGF-β1的作用和抑制TIMP-1的过度表达而发挥其肾保护作用,这一作用与其降血脂作用无关.     

水飞蓟素对单侧输尿管结扎大鼠肾组织TGF-β1及TSP-1表达的影响

目的 探讨水飞蓟素对肾间质纤维化的影响及其可能机制.方法 将36只雄性SD大鼠随机分为假手术组（C组）、模型组（M组）和水飞蓟素治疗组（S组）,各12只.对M组和S组大鼠建立单侧输尿管结扎（UUO）模型,C组仅分离左侧输尿管,未行结扎.S组大鼠给予水飞蓟素（50 mg/kg）灌胃.每组大鼠于术后第7、21天分别处死6只.观察各组大鼠肾组织病理学表现,采用RT-PCR方法检测各组大鼠肾组织转化生长因子β1（TGF-β1）和血小板反应蛋白1（TSP-1）mRNA表达水平.结果 术后第7天,M组大鼠肾组织出现肾小管明显扩张,偶见肾小管上皮细胞坏死、肾间质水肿、轻度纤维化,并有较多单个核细胞浸润;第21天,肾小管扩张进一步加重,并出现肾小管上皮细胞大量坏死,并可见肾间质大量胶原纤维组织增生,伴大量炎症细胞浸润;S组较M组肾组织损伤减轻,肾小管间质损伤指数降低（P〈 0.05）.术后第7、21天,M组TGF-β1和TSP-1 mRNA表达均较C组升高（P〈0.01）,S组TGF-β1和TSP-1 mRNA表达均较M组降低（P〈0.05）.结论 水飞蓟素可减轻肾组织损害,延缓肾间质纤维化的进展,可能与其抑制肾组织TSP-1及TGF-β1的表达有关.     

肾衰保肾胶囊对肾间质纤维化大鼠TGF—β1及其受体mRNA表达的影响

目的：研究肾衰保肾胶囊对慢性肾衰竭大鼠转化生长因子-β1（TGF-β1）及其受体mRNA表达的影响，探讨该药物抗肾间质纤维化的机制。方法：建立腺嘌呤致大鼠慢性肾衰竭模型，通过免疫组化二步法、半定量RT—PCR分别检测TGF-β1及其受体mRNA的表达水平。结果：肾衰保肾胶囊明显抑制TGF-β1及其受体mRNA的表达，治疗组与模型组比较，有统计学差异（P〈0．01）。结论：肾衰保肾胶囊能抑制肾间质纤维化，其机制可能是通过抑制TGF-β1及其受体mRNA的表达起作用。     

复方鳖甲软肝片对慢性肾衰竭大鼠肾组织TGF-β1表达的影响

目的:探讨复方鳖甲软肝片对慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响.方法:采用5/6肾切除法制作大鼠CRF实验动物模型.将大鼠随机分为7组:正常组、假手术组、模型组、蒙诺组和复方鳖甲软肝片低、中、高剂量组.术后2个月处死大鼠,用肾小球硬化指数(GSI)和肾小管-间质损伤评分来评价各组大鼠肾组织病理改变,并应用免疫组化法检测肾组织TGF-β1的表达.结果:模型组与正常组和假手术组相比,GSI和肾小管-间质损伤评分明显升高(P＜0.05),肾组织TGF-β1表达显著增加(P＜0.05);复方鳖甲软肝片低、中、高剂量组和蒙诺组与模型组相比,GSI和肾小管-间质损伤评分明显降低(P＜0.05),肾组织TGF-β1表达明显减少(P＜0.05);复方鳖甲软肝片低、中、高剂量组、蒙诺组四组间在GSI、肾小管-间质损伤评分和TGF-β1表达方面比较均无统计学差异(P＞0.05).结论:复方鳖甲软肝片能下调CRF大鼠肾组织TGF-β1的过度表达,减轻肾脏病理组织学损伤,这一下调作用可能是该药治疗CRF和抗肾纤维化的机制之一.     

温阳活血方对单侧输尿管梗阻大鼠Smad 7表达的影响

肾纤维化是指在各种致病因子如炎症、损伤、药物及遗传等因素作用下,间质细胞及细胞间质增多,尤其是基质蛋白合成增加,基质降解受抑制造成细胞外基质的大量堆积导致的肾小球硬化和小管间质的纤维化。它是各种肾脏疾病进展至终末期肾衰竭的共同病理表现。近年的研究发现,转化生长因子-β（TGF—β）是肾纤维化的关键因素,Smad蛋白是TGF—β家族信号从受体到核的细胞内转导分子,TGF—β／Smad信号转导通路在肾纤维化的发生发展中起重要作用。有效切断TGF—B的信号转导,是终止和减轻肾纤维化的关键。UUO是国内外公认的研究肾问质纤维化的模型。本试验应用温阳活血中药对UUO模型大鼠进行干预性治疗,并以血管紧张素转化酶抑制剂蒙诺对UUO模型大鼠进行干预性治疗为对照,     

和解聚散方对UUO模型大鼠肾组织NF-κB表达的影响

目的:研究和解聚散方对单侧输尿管结扎(UUO)大鼠的肾组织中核转录因子-κB(NF-κB)表达情况的影响,初步探讨其抗肾间质纤维化的作用机制。方法:采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠模型,将雄性SD大鼠120只随机分为4组:假手术组,模型组,洛丁新组,和解聚散方组,每组30只,从造模后第2天开始灌胃,洛丁新组按1.0mg·kg-1·d-1,和解聚散方组按9.8g·kg-1·d-1,假手术组、模型组灌胃生理盐水3ml/只。分别于造模后7,14,21d取梗阻侧肾脏行HE、Masson染色,观察肾组织病理结构变化;采用免疫组化方法检测肾组织NF-κB的表达。结果:UUO模型组中NF-κB在术后7、14、21d表达均明显高于假手术组(P<0.05),两个治疗组在术后7d表达水平明显低于UUO模型组(P<0.05)。结论:和解聚散方可以通过抑制NF-κB的过度表达,延缓肾间质纤维化的进程。     

肾清饮对肾间质纤维化大鼠Ⅰ型胶原及TGF—β1表达的影响

目的：探讨中药复方肾清饮（SQY）对实验性大鼠肾间质纤维化的影响及其机制。方法：40只雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、模型组、SQY预防组、SQY治疗组和苯那普利组,每组8只。适应性饲养1周后,除正常对照组外其余均采用腺嘌呤灌胃法建立大鼠肾间质纤维化动物模型,6周后采血分离血浆测定内皮素-1（ET-1）含量,处死大鼠,分离肾脏,应用HE及Masson染色,观察肾脏组织病理学改变,免疫组化方法检测肾组织Ⅰ型胶原（ColⅠ）和转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达。结果：肾清饮及苯那普利各组可减轻肾小管-间质损害及纤维化程度;免疫组化半定量分析显示各治疗组肾脏ColⅠ、TGF-β1的表达量和血浆ET-1含量均少于模型组（P〈0．05）。结论：肾清饮有防治肾间质纤维化的作用,其机制可能是通过减少肾组织ColⅠ的沉积、减少血浆ET-1含量和降低肾组织TGF-β1表达而发挥作用。     

冬虫夏草对5／6肾切除大鼠肾脏TGF-β1的影响

目的观察冬虫夏草对肾小球硬化大鼠转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响，并探讨其作用机制。方法将36只正常Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和冬虫夏草组。模型组和冬虫夏草组行5／6肾切除术制备进行性肾小球硬化模型。冬虫夏草组每天给予冬虫夏草（2．5g·kg^-1·d^-1）水提液灌胃，模型组和正常对照组每天给予等量的自来水灌胃。末次术后4周各组分别处死大鼠6只，术后9周处死剩余6只。测定血生化指标和尿蛋白排泄量，检测大鼠肾组织中TGF-β1 mRNA、TGF-β1的表达。结果①模型组术后4周24h尿蛋白定量增高，血浆白蛋白降低，胆固醇与低密度脂蛋白增高，TGF-β1及其mRNA的表达均增高。与模型组相比，冬虫夏草组尿蛋白排泄减少，血胆固醇降低，低密度脂蛋白降低，TGF-β1 mRNA的表达明显减少，TGF-β1的表达减弱。②术后9周，模型组肾脏病变进一步加重，血肌酐升高。与之相比，冬虫夏草组尿蛋白排泄减少、血白蛋白增高；血胆固醇降低、低密度脂蛋白降低、血肌酐降低；TGF-β1 mRNA的表达明显减少、TGF-β1的表达减弱。结论随着大鼠肾小球硬化程度的加重，TGF-β1的表达增加；冬虫夏草干预治疗后，TGF-β1的表达明显下调，提示TGF-β1参与了肾小球硬化的进展，冬虫夏草可以延缓肾小球的硬化。     

血清转化生长因子-β_1与肾间质损害相关研究

目的：探讨血清转化生长因子-β1（TGF-β1）与肾间质、肾小管损害间的关系。方法：对156例肾病患者行肾穿刺活检、血清TGF-β1检测,参照Katafuchi标准进行肾间质浸润、纤维化评分及肾小管萎缩评分,分析肾间质、肾小管评分与血清TGF-β1关系。结果：（1）肾间质浸润评分≥0.5组血清TGF-β1、肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）显著高于0分组,肾间质浸润评分与血清TGF-β1显著相关,相关系数0.296,P〈0.01。（2）肾间质纤维化评分≥0.5组血清TGF-β1、Scr、BUN显著高于0分组,肾间质纤维化评分与血清TGF-β1显著相关,相关系数0.248,P〈0.01。（3）经Logistic回归分析,肾间质纤维化评分是影响血清TGF-β1水平的相关因子。结论：血清TGF-β1与肾间质浸润和纤维化相关,是评估肾间质浸润和纤维化的指标。     

益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β和MCP-1表达的影响

炎症是糖尿病肾病（diabeticn ephropathy，DN）发生的重要环节，转化生长因子-β（TGF-β）和单核细胞趋化因子（MCP-1）表达增高是导致单核细胞和巨噬细胞浸润肾组织的两个重要因素。益肾胶囊系纯中药制剂，