白细胞介素-17肝内表达与慢性乙型肝炎病毒感染所致肝纤维化的相关性

目的 探讨IL-17肝内表达与慢性HBV感染所致肝纤维化的相关性.方法 免疫组织化学法测定30例慢性HBV携带者、55例慢性乙型肝炎患者、20例乙型肝炎肝硬化患者肝组织内不同炎症程度分级和肝纤维化分期中IL-17的表达,ELISA法测定血清IL-17及肝纤维化指标HA、LN、PCⅢ、ⅣC的水平.组间差异性检验采用Kruskal-Wallis检验和Mann-Whitney检验,相关性分析采用Spearman分析.结果 肝组织IL-17表达水平在肝硬化组高于慢性乙型肝炎组(x2=25.3982,P=0.004),在慢性乙型肝炎组高于慢性HBV携带组(x2=11.5056,P=0.001);不同炎症程度及纤维化分级与IL-17表达强度呈正相关(r=0.718、0.693,均P＜0.01);肝组织IL-17主要集中于汇管区,其表达强度与血清HA、LN、PCⅢ、ⅣC呈正相关(r=0.793、0.834、0.722、0.883,均P＜0.01).结论 IL-17的肝内表达与肝内炎症程度分级及肝纤维化程度密切相关.     

白细胞介素-17肝内表达与慢性乙型肝炎病毒感染所致肝纤维化的相关性

Objective To explore the relationship between intrahepatic expression of interleukin-17 (IL-17) and liver fibrosis in patients with chronic hepatitis B virus infection. Methods IL-17 expressions in livers with different inflammation activity grades and hepatic fibrosis stages from patients with chronic hepatitis B virus carriers (n= 30), chronic hepatitis B (CHB, n = 55), liver cirrhosis (LC, n=20) were measured by immunohistochemistry. Serum IL-17 and liver fibrosis indices of haluronic acid (HA), laminin (LN), type Ⅲ procollagen (PC Ⅲ ) and type Ⅳ collagen ( Ⅳ C) were determined by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). The differences between groups were compared by Kruskal-Wallis test, and the Mann-Whitney test, and the correlation analysis was done by Spearman test. Results Intrahepatic IL-17 expression in LC group was significantly higher than CHB group (x2 =25. 3982, P=0. 004), and that in CHB group was higher than chronic hepatitis B virus carriers group (x2 = 11. 5056, P= 0. 001). The inflammation activity grade and hepatic fibrosis stage were both positively correlated with IL-17 expression (r= 0.718, 0. 693, respectively; both P＜0.01). IL-17 mainly located in portal area and the expression was positively correlated with serum levels of HA, LN, PCⅢ and ⅣC (r=0. 793, 0. 834, 0. 722, 0. 883, respectively; all P＜0.01).Conclusion Intrahepatic IL-17 expression is closely correlated with liver inflammation activity grade and hepatic fibrosis stage.     

白细胞介素-17肝内表达与慢性乙型肝炎病毒感染所致肝纤维化的相关性

Objective To explore the relationship between intrahepatic expression of interleukin-17 (IL-17) and liver fibrosis in patients with chronic hepatitis B virus infection. Methods IL-17 expressions in livers with different inflammation activity grades and hepatic fibrosis stages from patients with chronic hepatitis B virus carriers (n= 30), chronic hepatitis B (CHB, n = 55), liver cirrhosis (LC, n=20) were measured by immunohistochemistry. Serum IL-17 and liver fibrosis indices of haluronic acid (HA), laminin (LN), type Ⅲ procollagen (PC Ⅲ ) and type Ⅳ collagen ( Ⅳ C) were determined by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). The differences between groups were compared by Kruskal-Wallis test, and the Mann-Whitney test, and the correlation analysis was done by Spearman test. Results Intrahepatic IL-17 expression in LC group was significantly higher than CHB group (x2 =25. 3982, P=0. 004), and that in CHB group was higher than chronic hepatitis B virus carriers group (x2 = 11. 5056, P= 0. 001). The inflammation activity grade and hepatic fibrosis stage were both positively correlated with IL-17 expression (r= 0.718, 0. 693, respectively; both P＜0.01). IL-17 mainly located in portal area and the expression was positively correlated with serum levels of HA, LN, PCⅢ and ⅣC (r=0. 793, 0. 834, 0. 722, 0. 883, respectively; all P＜0.01).Conclusion Intrahepatic IL-17 expression is closely correlated with liver inflammation activity grade and hepatic fibrosis stage.     

HBeAg阴性慢性乙型肝炎获得HBsAg清除与血清白细胞介素17水平的关系

目的探讨聚乙二醇干扰素(PEG-IFN)治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎(CHB)发生HBsAg清除与血清白细胞介素(IL)17水平的关系。方法选择2012年1月-2015年1月于北京佑安医院就诊的HBeAg阴性CHB患者13例,经PEG-IFN治疗24周,其中6例获得HBsAg清除(R组),7例未获得HBsAg清除(NR组)。用Luminex技术检测患者基线、治疗12周和24周血清IL-17水平。同时检测10例健康人和6例急性乙型肝炎(AHB)患者发病时的血清IL-17水平。计量资料两组间比较采用t检验,多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验;计数资料组间比较采用χ~2检验。结果 AHB组基线血清IL-17水平最高,其次是CHB组,健康对照组最低,3组间比较差异有统计学意义(P0.05)。CHB患者经PEG-IFN治疗24周后,IL-17水平较基线明显下降(P=0.044)。R组基线血清IL-17水平高于NR组,而且在PEG-IFN治疗后明显下降;而NR组IL-17升高或降低不明显。结论 PEG-IFN治疗HBeAg阴性CHB患者,IL-17基线高水平和治疗过程中明显降低可能有利于HBsAg清除。     

慢性乙型肝炎肝纤维化辨证分型与肝纤维化病理及血清学指标的相关性研究

目的:探讨慢性乙型肝炎(CHB)肝纤维化证型分布与血清肝纤维化指标及肝纤维化病理分期的相关性.方法:对确诊的171例CHB肝纤维化患者进行辨证分型,并观察肝纤维化病理分期、肝纤维化4项与辨证分型的关系.结果:肝郁脾虚型主要见于在肝纤维化早期(S1),瘀血阻络型主要见于肝纤维化中晚期(S3～S4),两者比较,各病理期的分布有显著性差异(P＜0.01);脾肾阳虚型、瘀血阻络型HA含量显著高于肝郁脾虚型,差异有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01);瘀血阻络型HA含量高于肝肾阴虚型和湿热中阻型,差异有显著性意义(P＜0.05);瘀血阻络组LN和Ⅳ-C含量明显高于肝郁脾虚型,差异有显著性意义(P＜0.05);各证型患者血清PCⅢ含量差异无显著性意义(P＞0.05).结论:CHB肝纤维化不同病理阶段,证型分布发生相应变化,并与肝纤维化指标具有显著相关性.     

白细胞介素-2基因多态性与慢性乙型肝炎的相关性

目的 探讨白细胞介素-2(IL-2)基因多态性与慢性乙型肝炎的相关性,以及对HBVDNA水平的影响.方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析和DNA测序的方法检测155例慢性乙型肝炎患者和170名健康对照者的IL-2基因-385T/G、+114T/G单核苷酸多态性位点基因型,血清HBV DNA测定采用荧光定量PCR技术.结果 IL-2基因+114T/G多态性在慢性乙型肝炎组和正常人群中的频率分布差异无统计学意义.IL-2基因-385T/G多态性在两组人群中的频率分布差异有统计学意义,X2=7.377,P<0.05.等位基因频率的相对风险分析发现,G等位基因携带者患慢性乙型肝炎的风险是T等位基因的1.490倍(OR=1.490,95%CI:1.085-2.046);进一步比较慢性乙型肝炎患者IL一2基因多态性与HBV DNA复制的关系,发现高水平HBVDNA(≥1×10<'3>拷贝/ml)组-385G等位基因携带者分布频率明显高于低水平HBV DNA组(<1×10<'3>拷贝/ml),X2=6.051,P=0.014,差异有统计学意义.结论 IL-2基因-385T/G多态性可能与HBV具有相关性,其中G等位基因可能是慢性乙型肝炎的遗传易感基因,携带G等位基因的个体可能更利于HBV DNA的复制.     

b-FGF与慢性乙型肝炎肝纤维化相关性研究

目的 观察b-FGF(碱性成纤维细胞生长因子)在慢性乙型肝炎患者不同肝纤维化分期(S)的免疫组化表达和定位情况,及其与肝纤维化的相关性.方法 选取进行肝组织活检的慢性乙型肝炎患者111例,对肝组织进行HE、Masson三色、网状纤维染色,进行病理肝纤维化分期(S0-S4)诊断.免疫组织化学法测定肝组织中b-FGF在不同病理分期的表达及定位特点,各组间进行统计分析.结果 b-FGF在肝纤维化不同发展阶段,其表达逐渐增高,差异有高度显著性(P<0.01),与肝纤维化分期有显著正相关(r=0.953,P<0.01).结论 肝组织中b-FGF的表达在慢性乙肝肝纤维化发生发展过程中发挥重要作用.     

慢性乙型肝炎患者肝纤维化程度与肝功能指标关系分析

目的 探讨慢性乙型肝炎肝纤维化程度与血清HBV DNA水平及肝功能的关系.方法 采用肝脏活体组织检查确定肝组织炎症活动度及纤维化程度,同时检测血清HBV DNA水平及肝功能.结果 肝组织病理的肝纤维化分级与炎症活动分期有关,肝脏炎症程度与纤维化程度呈正相关,P=0.000,rs=0.657.肝脏炎症分期与HBV DNA...     

肝苏颗粒治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床研究

目的：观察肝苏颗粒治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的疗效。方法：选择慢性乙型肝炎肝纤维化患者160例,随机分为两组,对照组（78例）采用常规保肝治疗,治疗组（82例）在常规治疗的基础上加用肝苏颗粒,观察治疗后两组患者临床症状、体征、肝功能以及肝纤维化相关指标如PGA指数、肝纤3项（HA、LN、CⅣ）和肝血流动力学变化。结果：两组均能明显改善患者临床症状,但以治疗组为优（P〈0.01）;治疗组患者ALT、AST、γ-GT、TBil和肝纤3项、PGA指数均明显降低,且显著优于对照组（P〈0.01或0.05）;同时彩色多谱勒显示治疗组患者门、脾静脉内径、血流量值皆明显下降（P〈0.01）。结论：肝苏颗粒能较好地改善慢性乙型肝炎肝纤维化患者临床症状,具有降酶、退黄、促进肝功能恢复作用,且对阻断及逆转肝纤维化进程有一定疗效。     

Th17细胞相关因子在慢性乙型肝炎肝组织中的表达

背景:Th17细胞是一类不同于Th1和Th2细胞的辅助性T细胞亚群,在慢性炎症和免疫相关疾病中发挥重要作用。目的:研究Th17细胞及其相关因子在慢性乙型肝炎(CHB)发病机制中的作用。方法:以实时PCR检测CHB患者和对照组肝组织中诱导Th17细胞分化的核转录因子RORγt以及细胞因子白细胞介素-17(IL-17)、IL-21、IL-23、IL-1β、IL-6的mRNA表达情况,以免疫组化染色检测CHB患者肝组织中IL-17蛋白表达并分析其与肝脏炎症和纤维化程度的相关性。结果:CHB患者肝组织中 RORγt、IL-17、IL-21、IL-23、IL-1β、IL-6 mRNA表达水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);IL-17蛋白表达阳性细胞数与肝脏炎症分级(r_s=0.801,P0.05)和纤维化分期(r_s=0.797,P0.05)呈正相关。结论:CHB患者肝组织中存在Th17细胞相关因子过表达,IL-17蛋白表达阳性细胞数与肝脏炎症和纤维化程度相关,提示Th17细胞在CHB的免疫发病机制中可能起重要作用。     

乙型肝炎肝硬化患者外周血IL-35和IL-17的表达及意义

目的观察慢性HBV感染者外周血IL-35和IL-17的表达和临床指标的相关性。方法采集30例慢性乙型肝炎（CHB）患者、79例乙型肝炎肝硬化（LC）患者、14例慢性乙型重型肝炎（CSHB）患者、20例健康对照者的外周血,ELISA法测定外周血IL-35、IL-6、IL-17的浓度,分离制备外周血单个核细胞（PBMC）,实时定量PCR检测PBMC中EBI3、FOXP3、IL-17 mRNA的表达,Western印迹观察PBMC中EBI3、FOXP3、IL-17蛋白表达情况。所有病例及健康对照均进行肝功能检测。结果 LC、CHB和CSHB患者中EBI3、IL-17、FOXP3 mRNA表达水平均显著高于健康对照组,差异有统计学意义（P〈0.01或0.05）;LC组Child-Pugh不同分级患者之间EBI3、IL-17、FOXP3 mRNA表达水平差异明显,EBI3、FOXP3 mRNA随着肝硬化Child-Pugh分级的加重而表达下调;IL-17 mRNA随着肝硬化Child-Pugh分级的加重而上调;蛋白表达和血清浓度的变化趋势与mRNA一致。血清IL-17浓度水平与Alb呈负相关,IL-17浓度水平与TBil、ALT和Child-Pugh分级呈正相关,差异有统计学意义（P〈0.01）,IL-35浓度水平与Alb、Child-Pugh分级负相关,与ALT、TBil无相关性。结论 IL-35和IL-17可能是影响乙型肝炎肝硬化发病的重要因素之一。     

Th17细胞在慢性乙型肝炎及其重症化中的变化

目的 探讨Th17细胞在慢性乙型肝炎(CHB)及其重症化中的变化.方法 收集CHB患者32例(CHB组)、HBV相关慢加急性肝功能衰竭(ACLF)患者44例(ACLF组)及健康对照者20名(健康对照组).应用流式细胞术检测外周血Th17细胞频率,实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞( PBMC)中IL-17 mRNA表达,免疫组织化学检测肝组织内IL-17+细胞表达,ELISA检测血清IL-17水平,并动态观察不同预后ACLF患者血清IL-17水平变化趋势.正态分布数据采用方差分析,非正态数据采用Kruskal-Wallis H检验或U检验.结果 CHB、ACLF和健康对照组外周血PBMC中Th17细胞频率分别为(1.47±0.60)％、(3.20±1.08)％和(0.86±0.43)％;IL-17mRNA分别为4.32±1.77、18.32±8.21和1.00;肝组织内IL-17+细胞分别为(10.6±4.8)、(21.1±6.6)和(0.5±0.2)/高倍视野;血清IL-17分别为(15.88±6.51)、(35.03±11.54)和(10.04±4.06)ng/L(均P＜0.05).中晚期ACLF患者外周血Th17细胞频率和血清IL-17水平均高于早期ACLF患者(均P＜o.01).ACLF患者外周血Th17细胞频率与国际标准化比值(r=0.44.P＜0.01)和终末期肝病模型评分(r=0.44,P＜0.01)均呈正相关,丽CHB患者外周血Th17细胞频率与ALT水平呈正相关(r=0.51,P＜0.01).另外,ACLF存活患者血清IL-17基线水平低于死亡患者,且经内科治疗后逐渐下降,而死亡患者逐渐升高.结论 Th17细胞与其分泌的细胞因子IL-17可能促进了CHB肝脏损伤及其HBV相关ACLF的发生和发展,并且其水平越高可能预示患者短期预后越差.     

慢性乙型肝炎和肝硬化患者血清TLR4、TGF-β1和IL-17水平及其临床意义*

目的 分析慢性乙型肝炎（CHB）和乙型肝炎肝硬化患者血清Toll样受体4（TLR4）、转化生长因子-β1（TGF-β1）和白细胞介素-17（IL-17）水平变化及其临床意义。方法 2015年6月~2017年4月本院收治的112例CHB、52例乙型肝炎肝硬化患者和选择的33例健康人,采用ELISA法检验血清IL-17、TLR4、TGF-β1水平,常规进行肝活检。结果 慢性乙型肝炎、肝硬化和健康人血清IL-17水平分别为（264.42±32.53） pg/ml、（271.54±33.71） pg/ml和（64.18±5.52） ng/ml,血清TLR4水平分别为（5.81±0.83） pg/ml、（37.41±6.05） pg/ml和（1.07±0.13）ng/ml,血清TGF-β1水平分别为（3.67±0.42） pg/ml、（7.82±1.07） pg/ml和（1.61±0.07） ng/ml,差异明显（P<0.05）;19例Child-Pugh B级血清IL-17、TLR4和TGF-β1水平分别为（231.38±28.67） pg/ml、（18.61±2.87） pg/ml和（5.76±0.52） ng/ml,16例C级患者分别为（301.72±32.72） pg/ml、（39.47±6.82） pg/ml和（9.42±1.27） ng/ml,均明显高于17例Child-Pugh A级患者【分别为（204.53±26.57） pg/ml、（4.72±0.71） pg/ml和（3.18±0.34） ng/ml,P<0.05】;肝活检组织学检查发现S0 8例、S1 42例、S2 43例、S3 19例、S4 52例,血清IL-17、TLR4、TGF-β1水平随着肝组织纤维化分期严重而升高。结论 乙型肝炎肝硬化患者血清TLR4、TGF-β1和IL-17水平升高,对诊断和指导治疗可能有帮助。     

从组织病理学角度探讨慢性乙型肝炎肝纤维化的发生

目的 探讨窦内皮细胞在肝纤维化发生中的作用,以及肝脏微循环障碍、肝窦毛细血管化与肝纤维化发生的关系. 方法对56例慢性乙型肝炎患者进行肝活组织枪查,将肝组织分成两部分,分别通过HE染色进行光学显微镜观察,以及常规制作电子显微镜标本在透射电子显微镜下进行超微结构观察.结果 56例慢性乙型肝炎患者中,轻度39例,中度10例,重度7例.慢性乙型肝炎患者肝星状细胞的形态类似成纤维细胞,周围有胶原纤维形成.窦内皮细胞与肝星状细胞间有电子致密物沉积.其中53例窦内皮细胞窗孔有不同程度的减少,减小,20例见窦内皮细胞下有连续或不连续的膜样物质形成,15例狄氏腔内有胶原纤维沉积.15例肝功能正常患者有的肝窦腔内有红细胞聚集,严重者有微血栓形成. 结论窦内皮细胞通过与肝星状细胞作用,从而参与肝纤维化的发生.肝脏微循环障碍、肝窦毛细血管化是肝纤维化的早期重要病理改变.     

慢性乙型肝炎组织学肝硬化的预测及预测模型的建立

目的 了解慢性乙型肝炎患者中组织学肝硬化的分布情况;应用非创伤的指标建立组织学肝硬化的预测模型.方法 选择我院慢性乙型肝炎患者275例,分成模型组206例和验证组69例,均接受肝活组织检查.根据肝脏病理结果计算S0-S3组、S4(早期肝硬化)组、活动性肝硬化组的构成比.选择包括年龄、性别、病程、血常规、血清生物化学、HBV标志物、国际标准化比值(INR)、凝血酶原活动度、纤维蛋白原定量、病毒载量、血清纤维化四项、脾脏肋间厚度以及相关指数:年龄-血小板指数、AST-血小板比值指数.脾脏-血小板比值指数、年龄-脾脏-血小板比值指数(ASPRI),进行单因素和多因素Logistic回归分析,构建组织学肝硬化的预测模型,并在验证组中检验模型的诊断价值.结果 275例临床诊断慢性乙型肝炎肝活组织检查的患者中,S0～S3组193例(70.2%),S4组42例(15.3%),活动性肝硬化组40例(14.5%).单因素分析显示非肝硬化组与肝硬化组之间差异有统计学意义的指标较多,共23项;多因素Logistic回归分析筛选出判断≥S4的预测因子INR、γ-谷氨酰转肽酶、ASPRI、HBeAg,建立肝硬化预测模型.应用受试者工作特征曲线(ROC)分析显示,本模型判断≥S4的ROC曲线下面积0.871,诊断界值是0.458,敏感性84.4%,特异性75.7%,准确度79.7%;判断活动性肝硬化的ROC曲线下面积是0.753,诊断界值是0.526,敏感性81.8%,特异性62.9%,准确度67.4%.将预测模型应用于验证组,该组与模型组的ROE曲线下面积差异无统计学意义,模型在两组的诊断价值相近.结论 INR、γ-谷氨酰转肽酶、ASPRI、HBeAg与早期肝硬化和活动性肝硬化有密切关系;由此4项预测因子建立的组织学肝硬化预测模型可以用于预测早期肝硬化和活动性肝硬化.     

慢性乙型肝炎患者肝细胞内乙型肝炎核心抗原阳性的临床意义

目的探讨CHB患者肝组织HBcAg阳性的意义。方法对200例CHB患者应用荧光聚合酶链反应（FQ-PCR）法精确定量检测血清HBV DNA含量。患者均检测血清中HBeAg含量,同时进行肝活组织检查,应用免疫组织化学技术检测HBcAg情况,并进行相关性分析。结果按测定血清HBV DNA水平,分为A组（＜3 log10拷贝/ml）20例,B组（≥3 log10拷贝/ml-＜5 log10拷贝/ml）13例,C组（≥5 log10拷贝/ml～＜6 log10拷贝/ml）24例,D组（≥6 log10拷贝/ml～＜8 log10拷贝/ml）116例,E组（≥8 log10拷贝/ml）27例。肝组织HBcAg阳性者175例,占87．5％,A组HBcAg阳性率55．0％（11/20）,B组53．8％（7/13）,C组75．0％（18/24）,D组96．6％（112/116）,E组100．0％（27/27）,HBcAg阳性率与血清HBV DNA水平之间呈显著正相关（r=0．80,P＜0．01）。血清HBV DNA水平高低与HBeAg阳性率之间呈显著正相关（r=0．47,P＜0．01）。其中20例HBV DNA阴性者中（A组）,HBeAg阳性者5例（25％）,HBcAg阳性者11例（55％）；15例HBV DNA阴性且HBeAg阴性者中有7例HBcAg阳性,占46．7％。结论CHB患者肝组织HBcAg阳性能更可靠地反映肝细胞内HBV复制状态。检测肝组织内HBcAg对CHB患者疗效评价和对治疗反应性的预测更具有临床意义。     

慢性乙型肝炎患者肝组织病理研究

目的:探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者临床表现和病理诊断的相关性.方法:收集30例CHB患者的临床资料,分析临床表现与病理诊断的相关性.结果:肝组织的炎症和纤维化程度的相关性显著(r=0.659,P＜0.01),白蛋白/球蛋白比值(A/G)与肝脏炎症和纤维化分级显著负相关(r=-0.368,P＜0.05;r=-0.401,P＜0.05).年龄、性别及其他化验指标如ALT、AST、TP、ALB、GLO、TBil、PLT、PT、PTA、门静脉宽度、脾脏厚度等与肝组织炎症和纤维化分级无显著相关性(P＞0.05).结论:慢性乙型肝炎肝脏炎症和纤维化的严重程度密切相关,仅根据肝功能判断轻中度的CHB患者的肝脏炎症及纤维化程度有相当的局限性.