子宫内膜异位症中在位和异位内膜自然杀伤细胞的分布及数量变化

目的：探讨子宫内膜异位症（内异症）患者异位、在位内膜组织中自然杀伤（NK）细胞的数量变化及其在内异症发生；发展中可能的作用。方法：采用CD57单克隆抗体，应用免疫组织化学标记内异症患者的在位和异位子宫内膜组织中NK细胞，观察其分布特点并计数其密度，并与正常妇女子宫内膜的对照研究。结果：CD57阳性的NK细胞存在于内异症组和正常对照组的增殖期与分泌期子宫内膜组织中，内异症患者在位、异位内膜之间及与正常对照组子宫内膜中NK细胞的数量均无统计学差异（P＞0．05），但内异症组的异位内膜NK细胞密度有增多的趋势。结论：（1）内异症患者的子宫在位内膜和异位内膜的NK细胞的数量无明显变化。（2）内异症患者异位内膜中的NK细胞的功能可能受抑制，致使共不能清除异位的内膜。     

子宫内膜异位症基质金属蛋白酶及其抑制剂与性激素受体的含量变化

<正>子宫内膜异位症(内异症,Endometriosis,EMs)发病机理有多种学说,随着分子生物学研究的进展发现性激素和性激素受体在内异症的发生发展中可能起着重要作用,内异症是激素依赖性疾病,细胞外基质的降解与重建是异位内膜侵袭     

子宫内膜异位症在位内膜MUC1与TNFR-I表达的关系

目的检测子宫内膜异位症(EMs)患者在位内膜黏蛋白1(MUC1)和肿瘤坏死因子受体I(TNFR-I)的表达,探讨血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)含量的调控机制及与EMs性不孕的内在联系。方法采集28例EMs患者(EMs组)及26例输卵管因素不孕患者(对照组)的在位子宫内膜,采用IHC方法检测内膜MUC1的表达,Western blot法检测TNFR-I的表达;用ELISA法检测血清TNF-α水平。结果 EMs在位内膜MUC1在不同月经周期的表达差异不明显,其在分泌中期的表达量较对照组明显减少。EMs组血清TNF-α含量显著高于对照组;而TNFR-I表达则低于对照组。结论 EMs在位内膜MUC1表达的改变,可能是EMs性不孕的原因之一;TNF-α缺乏促进在位内膜MUC1表达的作用可能与TNFR-I的低表达有关。     

IL-18在子宫内膜异位症中临床研究

目的 研究子宫内膜异位症患者子宫在位内膜和异位内膜的IL-18表达,探讨IL-18在内异症发病机制中的意义.方法 用免疫组织化学方法检测正常人子宫内膜和内异症患者的子宫在位内膜与异位内膜的IL-18表达.结果 IL-18的免疫组化结果均有表达,主要表达于子宫的上皮细胞,基质细胞也有表达,但是较弱.IL-18对照组子宫内膜标本阳性的灰度值高于内异症子宫在位内膜组而内异症异位灶组织阳性的灰度值最低,和对照组以及内异症在位内膜组相比差异均有统计学意义(P<0.05).结论 IL-18在内异症患者在位和异位内膜的异常表达,可能是影响内异症形成和发展的重要因素之一.     

沙利度胺对子宫内膜异位症的内膜间质细胞体外表达VEGF的影响

目的:观察沙利度胺(ThD)对子宫内膜异位症病人内膜间质细胞的增殖及其血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:刮取子宫内膜异位症病人的子宫内膜组织,经体外分离、培养,用波形蛋白单抗进行免疫组化染色鉴定,应用四唑盐(MTS)分析肿瘤坏死因子α(TNF-α)和ThD对间质细胞生长的影响,以实时荧光定量PCR、Western Blot和定量ELISA分析在存在外源TNF-α的情况下,不同浓度ThD对间质细胞表达VEGF的影响。结果:TNF-α能促进子宫内膜间质细胞的增殖和分泌VEGF,而ThD能剂量依赖性抑制内膜间质细胞的增殖,并逆转TNF-α对VEGF的上调作用。结论:ThD可抑制体外培养的子宫内膜异位症内膜间质细胞的增殖及其VEGF的表达和分泌,提示ThD对于治疗子宫内膜异位症可能具有一定的作用。     

磷酸化STAT3和Bcl-2在子宫内膜异位症的表达及相互关系

目的检测子宫内膜异位症(EMs)患者的在位内膜、异位内膜中磷酸化信号传导和转录激活因子3(P-STAT3)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白的表达情况,分析两者的相关性。方法应用免疫组化SP法检测40例内异症的在位内膜、异位内膜和40例正常子宫内膜中P-STAT3和Bcl-2的表达情况。结果 P-STAT3和Bcl-2在内异症的在位内膜和异位内膜中的表达强度高于正常子宫内膜(P<0.05)。P-STAT3和Bcl-2在异位内膜中的表达强度高于在位内膜(P<0.05)。P-STAT3与Bcl-2的表达强度在内异症在位内膜、异位内膜的增殖期和分泌期均呈正相关。结论 STAT3和Bcl-2在子宫内膜异位症的发病中可能发挥重要作用。     

子宫内膜异位症患者腹腔液中IFN-γ和IL-4水平的关系

目的:探讨子宫内膜异位症(内异症)患者腹腔液中Th细胞分泌γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素(IL)-4水平与内异症发病的关系。方法:选取经手术后病理证实为内异症的24例患者为内异症组;以子宫肌瘤或卵巢良性肿瘤患者24例为对照组。分别分离、培养2组腹腔液的Th细胞,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其培养的上清液中IFN-γ和IL-4水平,并计算IFN-γ/IL-4的比值。结果:内异症组腹腔液Th细胞培养上清液IFN-γ的水平低于对照组(P<0.01);而IL-4的水平高于对照组(P<0.05)。内异症组IFN-γ/IL-4的比值低于对照组(P<0.01)。结论:内异症患者腹腔液Th细胞培养上清液中IFN-γ/IL-4比值的变化揭示Th1/Th2的失衡状态,可导致异位内膜逃避免疫监视,造成异位内膜种植。     

Bcl2相互作用蛋白 3在子宫内膜组织中的表达及其在子宫内膜异位症发病中的意义

目的探究 Bcl2相互作用蛋白 3(BCL2 Interacting Protein 3,BNIP3)表达变化与正常子宫内膜周期的关系及在子宫内膜异位症( EMs)发病中的意义。方法从 GEO数据库获得 GSE51981、GSE6364、GSE4888、GSE25628的基因表达谱,通过生物信息学手段比较正常子宫内膜周期组增殖期到分泌期基因表达变化,分析基因富集情况以及 BNIP3在正常子宫内膜月经周期中的表达变化;比较数据集中正常子宫内膜周期组人群与内异症病人差异趋势表达基因以及各样本中 BNIP3的表达,总结其在 EMs发病中的意义;取 23例Ⅲ?Ⅳ EMs病人正位及异位子宫内膜组织,以及 25例因子宫肌瘤行子宫切除术病人的子宫内膜组织作为正常对照,通过实时荧光定量 qRT?PCR及蛋白质印迹法( Western Blot)检测 BNIP3在各组织中的表达,验证 BNIP3表达变化同 EMs发病的关系。结果 GSE4888、GSE6364、GSE51981数据集中, BNIP3在增殖期与分泌期相对表达量分别为 100.22±16.54、332.80±32.29,487.68±100.09、1425.83±157.47,8.36±0.69、9.82±0.71,均差异有统计学意义( P＜0.0001); GSE25628数据集中, BNIP3在正常子宫内膜组织、 EMs病人正位、 EMs病人异位子宫内膜组织中的表达量分别为( 10.11± 0.72)、(9.19±0.56)、(8.52±0.57)三组间对比差异有统计学意义;临床样本中,正常内膜组织、 EMs正位内膜组织、 EMs异位内膜组织中 BNIP3的 mRNA表达别为 1.15±0.57、0.56±0.19、0.36±0.08,三组间对比差异有统计学意义; BNIP3蛋白在正常子量分,宫内膜组织、 EMs正位内膜组织、 EMs异位内膜组织中的表达水平分别为 1.00±0.41、0.58±0.20、0.38±0.12,三组间对比均差异有统计学意义。结论 BNIP3在子宫内膜组织中的表达降低与 EMs的发生具有相关性。     

生存素与半胱氨酸天冬氨酸酶在子宫内膜异位症的表达及发病机制研究

目的研究生存素（Survivin）和半胱氨酸天冬氨酸酶（Caspase-3）蛋白在子宫内膜异位症（endo-metriosis,简称内异症）发生发展中的作用。方法 2007年10月—2009年1月在郑州市第一人民医院,以内异症患者的异位内膜及在位内膜各36例以及正常子宫内膜30例为研究对象,采用免疫组化法检测Survivin及Caspase-3蛋白在各组中的表达,并分析Survivin和Caspase-3蛋白在各组中免疫组化染色的平均灰度值。结果①Survivin在内异症患者异位内膜及在位内膜的灰度值均高于正常对照组子宫内膜（P〈0.05）,其中异位内膜组的灰度值最高（P〈0.05）。②Caspase-3在内异症患者的在位内膜及异位内膜的灰度值均低于正常对照组子宫内膜（P〈0.05）,其中异位内膜组的灰度值最低（P〈0.05）。③内异症在位内膜及异位内膜中,Sur-vivin与Caspase-3的表达均呈负相关（P〈0.05）。结论子宫内膜异位症中Survivin的高表达可能抑制Caspase的活化,使子宫内膜细胞的凋亡与增殖平衡发生紊乱,两者共同参与了内异症的发生发展。     

子宫内膜异位症患者血清IL-6、IL-8与TNF-α的水平变化

目的 探讨子宫内膜异位症（EMS）患者血清白细胞介索6（IL-6）、白细胞介素8（IL-8）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的水平变化及临床意义.方法 应用酶联免疫吸附法（ELISA）测定50例EMS患者（Ⅰ～Ⅱ期22例、Ⅲ～Ⅳ期28例）手术前后血清IL-6、IL-8与TNF-α的水平,并与35例非子宫内膜异位症（对照组）患者作比较.结果 EMS组患者血清IL-6、IL-8与TNF-α的水平均高于对照组（P＜0.05）;EMS组Ⅲ～Ⅳ期患者血清中IL-6、IL-8与TNF-α水平高于Ⅰ～Ⅱ期患者（P＜0.05）;手术后其水平下降,与术前比较差异有统计学意义（P＜0.05）,术后与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 EMS患者血清中IL-6、IL-8与TNF-α水平明显增高,它们与EMS的发生发展密切相关,检测EM患者IL-6、IL-8与TNF-α水平对病情和预后判断均有重要的临床意义.     

IL-23诱导人外周血单个核细胞增殖及其体外杀伤MUTZ-1细胞的实验研究

目的：观察IL-23诱导人外周血单个核细胞（ PBMNC）增殖及其对骨髓增生异常综合征（ MDS）细胞系MUTZ -1的杀瘤作用。方法采用密度梯度离心法分离获得正常人PBMNC,细胞分4组：阴性对照组（未加IL-23）,3个浓度IL-23组（2、10、50 ng／ml）,体外诱导72 h,并与MUTZ-1共培养。流式细胞术检测不同时间诱导后PBMNC细胞增殖和表型变化。乳酸脱氢酶（ LDH）释放法检测PBMNC对MUTZ-1细胞的杀瘤效果。 Real time-PCR和Western-blot检测PBMNC细胞培养上清液中IFN-γ、TNF-α、TGF-β、颗粒酶A、颗粒酶B、穿孔素mRNA和蛋白表达。结果体外诱导培养1、3、5、7 d时,IL-23诱导能够明显促进PBMNC细胞增殖,呈时间和浓度依赖性,与阴性对照组比较差异有统计学意义（ P ＜0．05）;CD3＋、CD4＋、CD5＋6阳性细胞数明显增加,CD8＋阳性细胞数明显降低,且IL-23作用后的PBMNC均对MUTZ-1细胞产生良好的杀瘤活性;与阴性对照组比较,IL-23作用后PBMNC细胞上清液中IFN-γ、TNF-α、TGF-β、颗粒酶A、颗粒酶B、穿孔素mRNA和蛋白表达明显增加,呈时间和浓度依赖性,差异有统计学意义（ P ＜0．05）。结论 IL-23能够明显促进PBMNC细胞增殖,并通过诱导PBMNC细胞表达IFN-γ、TNF-α、TGF-β、颗粒酶 A、颗粒酶B、穿孔素发挥杀伤MUTZ-1细胞作用。     

子宫内膜异位症的药物治疗进展

子宫内膜异位症 (简称内异症 )为卵巢激素依赖性疾病 :内异症患者的在位和异位子宫内膜细胞存在芳香化酶及其ｍＲＮＡ ,病灶组织局部呈高雌激素状态 ,而且随着血中雌激素消长而萎缩增殖〔1〕;与以往的观点相反 ,近年来有不少学者认为孕激素是内异症的促生长因素〔2〕。因此 ,药物治疗内异症主要通过抑制卵巢功能 ,达到闭经和促使异位内膜萎缩。目前 ,内异症的药物治疗方面有了很大进展 ,本文对此综述如下 :一、促性腺激素释放激素激动剂疗法继丹那唑后 ,内异症药物治疗的热点一直是促性腺激素释放激素激动剂 (ＧｎＲＨ) 〔3〕。ＧｎＲＨ -α…     

慢性阻塞性肺疾病患者肺内细胞凋亡的研究

目的探讨慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者肺内细胞凋亡情况,以其为临床治疗提供治疗靶点。方法收集COPD患者和非COPD患者肺泡灌洗液,进行细胞培养,取上清液测定白介素8（IL-8）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量,测定细胞凋亡率。结果COPD组细胞培养上清液中IL-8和TNF-α含量明显高于对照组（P〈0．05）;COPD组肺泡巨噬细胞的凋亡明显高于对照组（P〈0．05）。结论COPD患者存在着强烈的炎性反应和细胞凋亡情况,可能是患者治疗靶点。     

人参皂苷Rg3对子宫内膜异位症组织中ID-1和NRP-1基因表达的影响

目的探讨人参皂苷Rg3对子宫内膜异位症(EMs)组织中ID-1和NRP-1基因表达的影响。方法采用SuperArray功能分类基因芯片检测的方法筛选EMs血管生成相关基因,并用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法进行验证。结果促血管生成的ID-1和NRP-1基因在异位子宫内膜细胞中表达明显高于在位子宫内膜细胞及正常子宫内膜细胞(P<0.05);经人参皂苷Rg3作用后ID-1和NRP1基因在异位子宫内膜细胞中表达明显低于在位子宫内膜细胞及正常子宫内膜细胞(P<0.05)。结论人参皂苷Rg3有抑制子宫内膜异位细胞中ID-1和NRP1基因表达的作用,ID-1和NRP1基因可能在EMs血管生成中发挥重要作用。     

子宫内膜异位症不孕患者血清中IL-17、IL-6及TNF-α检测的意义

目的探讨子宫内膜异位症不孕患者术前、术后血清IL-17、IL-6和TNF-α含量的变化及意义。方法采用酶联免疫吸附法检测子宫内膜异位症不孕患者手术前后血清IL-17及IL-6的含量;放射免疫分析(RIA)法检测血清TNF-α的水平,并与子宫内膜异位症非不孕患者及健康对照组作比较。结果手术前子宫内膜异位症不孕患者血清中IL-17、IL-6和TNF-α水平均明显高于对照组(P<0.01),并高于子宫内膜异位症非不孕组(P<0.05)。手术后三者浓度明显降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-17、IL-6和TNF-α可能在子宫内膜异位症的发生、发展中起重要的作用,并与子宫内膜异位症不孕密切相关。联合检测子宫内膜异位症患者血清IL-17、IL-6和TNF-α对早期辅助诊断、疗效观察及预后判断均有重要的临床意义。     

子宫内膜异位症不孕患者血清中IL-17、IL-6及TNF-α检测的意

目的 探讨子宫内膜异位症不孕患者术前、术后血清IL-17、IL-6和TNF-α含量的变化及意义.方法 采用酶联免疫吸附法检测子宫内膜异位症不孕患者手术前后血清IL-17及IL-6的含量;放射免疫分析(RIA)法检测血清TNF-α的水平,并与子宫内膜异位症非不孕患者及健康对照组作比较.结果 手术前子宫内膜异位症不孕患者血清中IL-17、IL-6和TNF-α水平均明显高于对照组(P<0.01),并高于子宫内膜异位症非不孕组(P<0.05).手术后三者浓度明显降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 IL-17、IL-6和TNF-α可能在子宫内膜异位症的发生,发展中起重要的作用,并与子宫内膜异位症不孕密切相关.联合检测子宫内膜异位症患者血清IL-17,IL-6和TNF-α对早期辅助诊断,疗效观察及预后判断均有重要的临床意叉.     

PEDF与VEGF在子宫内膜异位症发生发展中的作用

目的:探讨色素上皮衍生因子(Pigment epithelium derived factor,PEDF)与血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在子宫内膜异位症(内异症)患者子宫在位内膜,异位内膜及正常对照组内膜组织中的表达,并探讨二者在内异症患者的新生血管生成过程中的作用。方法:采用免疫组织化法检测34例内异症患者异位内膜,及在位内膜组织中PEDF与VEGF表达的蛋白含量,并与对照组进行比较。结果:研究组在位及异位子宫内膜组织均有PEDF和VEGF的蛋白表达,PEDF的蛋白表达异位内膜高于在位内膜,高于同期对照组正常内膜。VEGF的蛋白表达异位内膜低于在位内膜,对照组正常内膜低于在位内膜,差异有统计学意义(P<0.05)。PEDF在对照组分泌期内膜表达低于增生期,而对照组分泌期内膜VEGF的表达高于增生期,二者均呈现出周期性变化。但研究组在位内膜,异位内膜PEDF及VEGF的表达失去了周期性变化,差异无统计学意义。结论:内异症患者PEDF在异位内膜的表达比在位宫内膜及对照组正常子宫内膜高,VEGF在位内膜的表达比异位内膜及对照组正常子宫内膜高。根据r-AFS分期法,PEDF在III、IV期患者在异位内膜的表达比I、II高,VEGF表达高低与r-AFS分期无明显关系。二者在EMT患者的在位内膜,异位内膜上的表达,可能参与内异症异位病灶的形成,而且二者与内异症患者的新生血管生成可能有关。     

阿尔泰金莲花总黄酮对PM_(2.5)致人支气管上皮BEAS-2B细胞急性损伤保护作用的研究

目的探讨阿尔泰金莲花总黄酮对PM_(2.5)致人支气管上皮BEAS-2B细胞急性损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法将细胞分为正常对照组,PM_(2.5)模型组,PM_(2.5)+阿尔泰金莲花总黄酮高、中和低剂量(28.19、14.10和7.05 mg/L)组,PM_(2.5)+地塞米松阳性对照(1 mmol/L)组;实验开始时,各组根据所设药物剂量分别干预细胞24 h;24 h后除正常对照组外,其余各组均用浓度为100 mg/L PM_(2.5)溶液作用于BEAS-2B细胞24 h,构建急性肺损伤(ALI)模型;24 h后收集细胞与培养上清液,酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养上清液IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-α含量,比色法细胞内超氧化物歧化酶(SOD)含量、丙二醛(MDA)含量、还原型谷胱甘肽(GSH)含量和培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出量;qRT-PCR检测各组细胞内IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-αmRNA含量。结果与PM_(2.5)模型组相比,PM_(2.5)+阿尔泰金莲花总黄酮各剂量组细胞培养上清液中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α含量与细胞内IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-αmRNA的表达水平均降低均降低(P0.05);PM_(2.5)+阿尔泰金莲花总黄酮各剂量组细胞内SOD和GSH含量均升高,细胞内MDA和细胞培养上清中LDH含量均降低(P0.05);相比于PM_(2.5)+地塞米松阳性对照组,PM_(2.5)+阿尔泰金莲花总黄酮高和中剂量组细胞培养上清液中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α含量与细胞内IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-αmRNA的表达水平均降低(P0.05);细胞内SOD和GSH含量均升高,细胞内MDA和细胞培养上清中LDH含量均降低(P0.05)。结论阿尔泰金莲花总黄酮提取物对PM_(2.5)诱导的BEAS-2B细胞急性损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与其抑制炎症反应、抗氧化损伤有关。     

uPA uPAR PAI-1在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的：为了研究尿激酶型纤溶酶原激活系统（uPA系统）中的尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）及其受体（uPAR）和尿激酶型纤溶酶原激活剂抑制剂（PAI-1）在正常子宫内膜及子宫内膜异位症（内异症）患者的在位内膜和异位内膜上的表达,探讨三者与内异症发生的关系。方法：运用免疫组化法分别检测正常子宫内膜和内异症患者的在位内膜及异位内膜病理蜡块标本中的uPA uPAR PAI-1表达水平。结果：正常子宫内膜与子宫内膜异位症（内异症）患者在位内膜和异位内膜中uPA uPAR PAI-1表达水平有显著差异,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）;内异症患者的在位内膜和异位内膜中uPA uPAR PAI-1表达水平有显著差异,差异亦有统计学意义（P〈0.05）。结论：子宫内膜组织中uPA、uPAR、PAI-1的表达的变化可能与子宫内膜异位症的发生、发展有关。     

Ang-2、Tie-2与ER-α在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的:探讨血管生成素2(Ang-2)及其酪氨酸蛋白激酶受体2(Tie-2)和雌激素受体α(ER-α)在子宫内膜异位症(内异症)发病中的表达.方法:选择30例内异症患者的在位内膜作为内异症组,30例卵巢其他良性肿瘤患者的子宫内膜作为对照组,增殖期和分泌期各15例,应用免疫组织化学SP法检测Ang-2、Tie-2和ER-α在其中的表达.结果:Ang-2和Tie-2主要在子宫内膜的腺上皮表达,血管内皮和间质也有少许表达,但较腺上皮表达少,定位于细胞浆.ER-α在子宫内膜腺上皮和间质均有表达,定位于细胞核.内异症组的增殖期和分泌期内膜中Ang-2表达,分泌期时Tie-2的表达,增殖期ER-α的表达均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01).2组增殖期时Tie-2的表达,分泌期时ER-α的表达差别无统计学意义(P>0.05).Ang-2及Tie-2在2组中的表达均是分泌期高于增殖期,ER-α则是增殖期高于分泌期(P<0.05).结论:内异症在位内膜分泌期的Ang-2和Tie-2及增殖期ER-α高表达可能与内异症的发病有密切关系.