牙髓炎患者牙髓组织中单核细胞趋化蛋白1的表达及意义

目的:探讨牙髓炎患者牙髓组织中单核细胞趋化蛋白1 （MCP-1）的表达,揭示MCP-1在牙髓炎性疾病发生、发展中的作用机理。方法：应用免疫组织化学方法检测MCP-1在正常人健康牙髓（正畸或烤瓷牙需要拔髓者）、急性及慢性牙髓炎患者牙髓组织(各30例)中的分布。结果:在健康牙髓组织中未发现MCP-1表达阳性细胞。在急性牙髓炎症组织中,可见大量的中性粒细胞游出血管并向炎症中心趋化,MCP-1阳性细胞主要分布于中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞, 阳性细胞平均灰度值119.73±17.12。在慢性牙髓炎症组织中,可见血管内皮细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、成纤维细胞、新生的毛细血管上MCP-1有不同程度的阳性表达,阳性细胞平均灰度值121.26±2.04,与急性牙髓炎症组织阳性细胞平均灰度值比较差异无显著性(P>0.05)。结论：MCP-1在牙髓炎牙髓组织中有表达,在牙髓炎发生、发展过程中可能促进炎症组织的愈合。     

巨噬细胞炎性蛋白1α mRNA在人炎症牙髓组织中的表达及意义

目的:探讨炎症牙髓中巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)的表达,揭示MIP-1α在牙髓炎发生及发展中的可能作用.方法:选择正常牙髓组织及炎症牙髓组织各4例,采用HE染色观察正常牙髓组织及牙髓炎牙髓组织形态学改变,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测正常牙髓组织及牙髓炎牙髓组织中MIP-1α的表达.结果:正常牙...     

在大鼠牙髓炎中的八聚体结合转录因子4B免疫组化研究

目的研究内毒素(LPS)诱导大鼠牙髓炎模型中八聚体结合转录因子4B(Oct-4B)在不同时间的表达特点及定位情况,以探讨Oct-4B在牙髓炎症中的可能作用,推测它在牙髓炎发生、发展中的意义.方法通过对LPS诱导的大鼠磨牙牙髓炎进行连续组织切片,同时采用免疫组织化学检测大鼠牙髓炎中Oct-4B的表达情况.结果 1 d组:成牙本质细胞呈中度阳性表达,牙髓成纤维细胞为中度至强阳性表达;3、5、7 d组:成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞阳性表达减弱.2周组:坏死区扩大呈均质弱阳性表达,成牙本质细胞、牙髓成维维细胞及内皮细胞减少,呈阳性,修复牙本质呈弱阳性表达;3周组:大部分坏死牙髓组织呈均质弱阳性表达.结论 Oct-4B在大鼠牙髓炎发生、发展呈动态表达,Oct-4B可能参与调节牙髓炎发生、发展及修复过程.     

大鼠实验性牙髓炎组织中炎症信号血管粘附分子-1的表达及意义

目的 观察血管粘附分子1(VCAM-1)在正常大鼠牙髓及大鼠实验性牙髓炎中的表达情况,探讨其在实验性牙髓炎中的作用.方法 应用开髓暴露法建立大鼠实验性牙髓炎模型,采用免疫组化法及图像分析技术检测正常牙髓组、牙髓炎1h组、1d组、3d组、5d组、7d组中VCAM-1的表达情况.结果 正常牙髓组织中存在VCAM-1,VCAM-1在实验组比正常组阳性表达增强,光密度值增高,实验组第1天第达到高峰,到第7天逐渐减少,总体差异有统计学意义.结论 与正常牙髓组织相比,炎症牙髓组织中VCAM-1表达增强,提示VCAM-1在牙髓炎发展过程中起一定作用.     

Cryopyrin在大鼠实验性牙髓炎中的表达

目的:建立大鼠实验性牙髓炎模型,了解Cryopyrin在大鼠牙髓组织的表达情况。方法:30只SpragueDawley大鼠随机分为0,1,3,5,7d5组。除0d组外,其余四组大鼠双侧下颌第一磨牙开髓后暴露于口腔环境中,分别于开髓后1,3,5和7d处死大鼠,分离双侧下颌骨。常规组织学处理后HE染色观察牙髓炎症状况,免疫组化检测Cryopyrin在牙髓炎中的表达及定位。结果:大鼠正常牙髓组织成牙本质细胞层Cryopyrin阳性表达,牙髓内部血管内皮细胞偶见表达,牙髓成纤维细胞未见表达。炎性牙髓组织血管内皮细胞表达增加,牙髓成纤维细胞及多种炎症细胞均有阳性表达,且表达的数量和牙髓的炎症浸润强度显著正相关(r=0.655,P<0.01)。结论:Cryopyrin在牙髓组织中表达并在牙髓炎的发生发展中起着重要作用。     

内皮素的mRNA在实验性牙髓炎组织中的表达

目的通过检测内皮素-1(ET-1)在牙髓组织中的表达，探讨ET-1与正常及炎性牙髓组织的关系。方法以改良的单纯穿髓开放法建立Wistar大鼠实验性牙髓炎的动物模型，病理观察分析该型的牙髓组织情况；Nonhern杂交分析牙髓组织内ET-1的mRNA表达水平。结果ET-1mRNA在正常组及牙髓炎组均有表达，且在炎症时增长明显，以牙髓炎3天组表达量最多。结论ET-1参与了牙髓炎症的发生与发展过程。     

细胞间粘附分子-1在老年患者牙髓炎中的表达及其意义

目的:研究急性牙髓炎高龄患者牙髓组织、牙龈组织细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的临床意义。方法:选取我院自2013年10月至2014年10月收治的43例急性牙髓炎高龄患者(急性牙髓炎组)、42例高龄全口义齿修复者(正常牙髓组)为研究对象,采用免疫组化(ABC)法对两组牙髓组织、牙龈组织ICAM-1实施免疫定位。结果:急性牙髓炎组牙髓组织光镜下面积值、积分吸光度值,牙龈组织白细胞数目、ICAM-1(+)白细胞数目及其所占比例均高于正常牙髓组(P0.05)。结论:针对急性牙髓炎高龄患者牙髓组织、牙龈组织ICAM-1表达增高的特点,可以将维持ICAM-1稳定状态作为切入点,制定拮抗ICAM-1的综合性抗炎治疗方案。     

热休克蛋白27在大鼠牙髓炎中的免疫组化研究

目的：研究内毒素（LPS）诱导大鼠牙髓炎模型中HSP27在不同时间的动态表达及定位情况，观察HSP27在牙髓炎中的表达特点，推测它在牙髓炎发生、发展中的意义。方法：通过对LPS诱导的大鼠磨牙实验性牙髓炎组织连续进行切片，同时超敏免疫组化分析。结果：1d组HSP27在成牙本质细胞呈中度阳性表达，成纤维细胞、血管壁及内皮细胞中均呈阳性表达，3、5、7d组中HSP27在成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞及内皮细胞表达减少，2周以后，成牙本质细胞、成牙本质细胞突、修复性牙本质和牙髓成纤维细胞可见HSP27阳性表达，3、4周以后，成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞、修复性牙本质呈弱阳性表达，5周以后，牙髓组织变性、坏死，呈均质弱阳性染色。结论：HSP27在牙髓炎早期能够保护牙髓细胞，限制炎症发展，在损伤晚期则可能参与牙齿矿化修复过程。     

牙髓炎模型大鼠血清褪黑素水平及其对牙髓炎症反应的抑制作用

目的：探讨牙髓炎大鼠血清褪黑素水平对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1（NLRP3/caspase-1）信号通路的影响,阐明褪黑素对牙髓炎的作用机制。方法：将130只大鼠随机分为对照组（n=40）、牙髓炎组（n=60）和牙髓炎+褪黑素组（n=30）,其中30只牙髓炎大鼠随机分为牙髓炎1 d组、牙髓炎3 d组和牙髓炎5 d组,采用开髓暴露法建立牙髓炎大鼠模型,牙髓炎+褪黑素组大鼠开髓术后腹腔注射褪黑素。HE染色确定各组大鼠牙髓炎建模情况,ELISA法检测各组大鼠血清白细胞介素1β（IL-1β）和褪黑素水平以及牙髓组织中IL-1β水平,RT-PCR法检测各组大鼠牙髓组织中NLRP3和caspase-1 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组大鼠牙髓组织中NLRP3和caspase-1蛋白表达水平。结果：HE染色,对照组大鼠牙髓组织正常,牙髓炎组大鼠牙髓有脓腔形成,可见大量炎性细胞聚集。牙髓炎1 d和3 d组大鼠血清IL-1β水平明显高于对照组（P<0.05）,褪黑素水平明显低于对照组（P<0.05）;牙髓炎3 d组大鼠血清IL-1β水平明显低于牙髓炎1 d组（P<0.05）,褪黑素水平明显高于牙髓炎1 d组（P<0.05）;牙髓炎组和牙髓炎+褪黑素组大鼠牙髓组织中IL-1β水平明显高于对照组（P<0.05）,且牙髓炎+褪黑素组大鼠牙髓组织中IL-1β水平明显低于牙髓炎组（P<0.05）;牙髓炎组和牙髓炎+褪黑素组大鼠牙髓组织中NLRP3和caspase-1mRNA和蛋白表达水平均明显高于对照组（P<0.05）,且牙髓炎+褪黑素组大鼠牙髓组织中NLRP3和caspase-1mRNA和蛋白水平明显低于牙髓炎组（P<0.05）。结论：牙髓炎大鼠血清褪黑素水平降低,褪黑素可通过抑制NLRP3/caspase-1信号通路降低牙髓炎大鼠牙髓组织的炎症反应。     

正常与炎症牙髓组织中肿瘤坏死因子-α含量的测定

目的:检测人正常与急、慢性牙髓炎牙齿牙髓组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,揭示TNF-α与牙髓炎的关系。方法:收集18例正常牙齿、26例急性牙髓炎、20例慢性牙髓炎患牙的牙髓组织,称重后加入100μlpH7.0PBS缓冲液,碾碎,2500r/min离心5min,上清液用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测TNF-α含量。结果:正常和急、慢性牙髓炎症组织中均检出TNF-α,含量分别为(28.23±15.16)、(1228.19±763.02)、(963.16±457.91)pg/g。正常牙髓与急、慢性牙髓炎牙髓组织中TNF-α的含量有显著性差异(P<0.01)。急性牙髓炎和慢性牙髓炎牙髓组织中TNF-α的含量有显著性差异(P<0.05)。结论:TNF-α参与了牙髓炎的发生和发展,是牙髓炎症反应中的重要细胞因子。     

Sonic Hedgehog信号通路在大鼠牙髓炎中的作用

目的:观察Sonic Hedgehog(Shh)信号分子在大鼠牙髓炎中的免疫定位,探讨Shh信号通路在牙髓防御和修复中所起的作用。方法:将15只SD大鼠随机分成1d、3d和7d组,每组5只,用穿髓开放法建立大鼠牙髓炎模型,3组大鼠分别于术后1,3,7d处死,取出下颌磨牙,常规组织学处理,免疫组化方法检测Shh,Smo,Ptc,Gli1的表达,并对Shh信号通路在大鼠牙髓炎中的表达进行半定量分析,对照组为大鼠正常牙髓。结果:大鼠牙髓炎模型1,3,7dShh广泛表达于穿髓孔下方牙髓间充质细胞及远离穿髓孔的根髓细胞中,表达量随炎症的进展无显著性提高(P>0.05)。Ptc、Smo、Gli1在大鼠牙髓损伤后1d未见阳性表达,3d和7d均表达于穿髓孔下方牙髓间充质细胞中,且表达量均有显著性提高(P<0.05)。空白对照组中Shh信号通路阴性表达。结论:Shh信号通路在牙髓炎过程中表达,提示其可能被激活,参与牙髓炎症反应。     

转化生长因子-β受体Ⅰ型及Ⅱ型在大鼠牙髓炎中的表达

目的研究转化生长因子-β受体Ⅰ型及Ⅱ型（TGF—βSRⅠ、Ⅱ）在大鼠牙髓炎模型中在不同时间动态表达及定位情况；观察转化生长因子-β受体Ⅰ型及Ⅱ型在牙髓炎中表达特点，推测它在牙髓炎发生、发展中的意义．方法通过对内毒素（LPS）诱导的大鼠磨牙实验性牙髓炎组织连续进行切片，同时超敏免疫组化分析．结果1d组、3d组，TGF-βRⅠ、Ⅱ在成纤维细胞中均呈弱阳性表达，成牙本质细胞呈强阳性表达，至2周修复期为阳性表达．2周以后，成牙本质细胞，前期牙本质细胞呈阳性表达减弱．3周、4周以后，成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞、修复性牙本质呈弱阳性表达．5周以后，牙髓组织变性、坏死，呈阴性染色．结论TGF—βRⅠ、Ⅱ在大鼠牙髓炎的损伤修复过程中具有重要作用．     

金属烤瓷修复对活髓牙牙髓组织的影响分析

目的:探讨金属烤瓷修复对活髓牙牙髓组织的影响。方法:以近年来行金属烤瓷固定修复的58例患者为研究对象,对全部患者行活髓基牙金属烤瓷固定桥修复,随访观察修复后活髓牙牙髓组织病变情况。结果:共发生牙髓组织病变19例,占总基牙的20.7%(19/92);牙髓组织病变类型主要为慢性牙髓炎、急性牙髓炎和慢性尖周炎等症状。结论:金属烤瓷修复可能于1年内引起慢性牙髓炎、急性牙髓炎和慢性尖周炎等活髓牙牙髓组织病变,主要与基牙、修复体和牙体预备等原因相关。     

HSP27在大鼠磨牙钻磨后牙髓的表达

目的 研究热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)在成年大鼠磨牙受到钻磨刺激后不同时间牙髓组织中的表达特点及定位情况. 方法 建立大鼠牙髓炎模型,用免疫组织化学方法检测热休克蛋白27在大鼠上颌磨牙钻磨后3 d,6d,9 d的表达. 结果 热休克蛋白27在牙髓炎晚期成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞、血管壁及内皮细胞中表达逐渐减弱.结论 热休克蛋白27的表达与牙髓炎症发生发展的程度有关,提示热休克蛋白27在牙髓损伤修复期可能是参与牙髓损伤修复的细胞因子之一.     

α7烟碱型乙酰胆碱受体基因敲除小鼠牙髓炎模型的构建

目的：构建α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7 nicotine acetylcholine receptor,α7 nAChR）基因敲除小鼠牙髓炎模型,为研究α7 nAChR在牙髓炎发生发展过程中的作用机制提供实验模型。方法：取16只α7 nAChR基因敲除（knock out,KO）小鼠和16只野生型（wide type,WT）C57BL/6鼠的上颌第一磨牙的牙髓暴露法建立牙髓炎模型,分别在牙髓暴露后1、3、7 d处死小鼠,HE染色、免疫组化检测牙髓组织NOD样受体蛋白3（NOD?like receptor protein 3,NLRP3）表达情况。结果：HE染色结果显示牙髓暴露后1 d,α7 nAChR KO鼠及WT鼠的穿髓孔周围血管充血、组织水肿;牙髓暴露后3 d,炎症细胞聚集,α7 nAChR KO鼠炎症细胞聚集已达冠髓底部,WT鼠的炎症细胞主要聚集在穿髓孔周围的牙髓组织中;牙髓暴露后7 d,α7 nAChR KO鼠的牙髓炎症细胞浸润至根部牙髓,而 WT鼠的牙髓炎症细胞仍然主要聚集于冠髓底部。免疫组化染色结果显示,牙髓暴露后,α7 nAChR KO鼠牙髓NLRP3表达高于WT鼠,差异有统计学意义（P < 0.05）。结论：成功建立了α7 nAChR基因敲除鼠的牙髓炎模型,而且α7 nAChR基因敲除鼠牙髓炎症浸润明显快于WT小鼠。     

卵巢上皮性肿瘤MCP-1基因表达的研究

目的 研究趋化因子MCP-1在卵巢上皮性肿瘤中的表达,探讨MCP-1在卵巢肿瘤发生、发展中的作用及临床意义.方法 采用半定量RT-PCR方法检测12例良性肿瘤、6例交界性卵巢肿瘤、22例卵巢癌原发病灶组织、8例卵巢癌转移病灶组织及10例正常卵巢组织中MCP-1 mRNA的表达情况.结果 正常卵巢组织、卵巢良性、交界性、恶性原发病灶组织及转移病灶组织中MCP-1表达的阳性率依次为25.0%、25.0%、50.0%、95.5%、87.5%.相对表达强度依次为0.11±0.01、0.18±0.03、0.51±0.05、0.73±0.08、0.45±0.08.MCP-1的阳性表达率和相对表达强度在卵巢交界性肿瘤中明显高于良性肿瘤,在卵巢恶性肿瘤中又明显高于交界性肿瘤,差异有统计学意义.MCP-1的表达与卵巢上皮癌组织学类型、组织分化及淋巴结转移情况无关,临床分期为Ⅲ～Ⅳ期的病例MCP-1的阳性表达率和相对表达强度与Ⅰ～Ⅱ期者相比,虽无显著性差异,但呈下降趋势.卵巢癌原发病灶组织中MCP-1的表达强度明显高于卵巢癌转移病灶组织,差异有统计学意义.MCP-1表达水平与肿瘤组织巨噬细胞浸润程度成正相关.结论 MCP-1基因在卵巢肿瘤发生、发展过程中起重要作用.MCP-1可趋化和激活巨噬细胞而发挥抗肿瘤效应,因此MCP-1极可能成为卵巢恶性肿瘤治疗的效应分子.     

Zeste同源蛋白2增强子通过调节巨噬细胞趋化影响牙髓炎症反应

目的:探讨表观遗传调控子zeste同源蛋白2增强子(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)在牙髓炎过程中的表达变化及其对巨噬细胞的趋化作用。方法:以10 g/L脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激大鼠牙髓,建立大鼠牙髓炎模型。采用免疫组织化学染色检测牙髓炎进展过程中EZH2的表达变化,采用免疫荧光双染法检测EZH2与CD68的表达及两者的共定位,利用CCK-8细胞增殖-毒性试剂盒检测不同浓度(1、10、20、40、100 μg/L)EZH2重组蛋白对人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)及人白血病单核细胞系(human leukaemia-derived monocytic cell line,THP-1)细胞增殖的影响,从而筛选出EZH2重组蛋白刺激hDPCs及THP-1细胞的适宜浓度。采用Transwell迁移实验检测EZH2重组蛋白处理的hDPCs上清液对THP-1细胞迁移作用的影响。结果:HE染色结果表明,在LPS诱导的大鼠牙髓炎模型中,随着LPS刺激时间延长,牙髓炎症反应逐步加重。免疫组织化学结果显示,在LPS诱导牙髓炎8 h内,EZH2表达下降,但在刺激 1、3、7 d后,EZH2表达随刺激时间延长逐步上调。与对照组相比,LPS刺激大鼠牙髓3 d时EZH2与CD68表达显著升高,并且可以检测到两者在巨噬细胞中的共表达。CCK-8结果提示,EZH2重组蛋白刺激hDPCs及THP-1细胞的适宜浓度为20 μg/L。与对照组上清液相比,加入EZH2重组蛋白刺激hDPCs后的上清液可以显著促进巨噬细胞趋化。结论:EZH2参与了牙髓炎发展过程,并促进巨噬细胞的趋化,提示EZH2在牙髓炎发展过程中有重要调控作用。     

解旋酶DDX41在人牙髓组织及牙髓细胞中的表达

目的研究解旋酶DDX41在人牙髓组织和细胞中的表达,为深入探讨其在龋病及牙髓病天然免疫应答过程中的作用奠定
基础。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫细胞化学和免疫组织化学技术对人牙髓组织和牙髓细胞中DDX41的
表达和定位进行分析。结果RT-PCR结果显示DDX41 mRNA在人牙髓细胞中有显著表达;免疫细胞化学和免疫组织化学染
色结果显示DDX41在牙髓细胞的胞浆和胞核中皆有表达,但胞核中的表达水平较低;在牙髓组织中,DDX41主要在牙髓组织
表面的成牙本质细胞的胞浆和胞核中皆有表达。结论人牙髓组织中的成牙本质细胞作为牙髓免疫的效应细胞之一,在龋病和
牙髓炎的免疫反应过程中,细胞内可能存在DDX41/STING依赖的TBK1-IRF3-IFN-β信号通路的活化。
     

单核细胞趋化蛋白-1在异位子宫内膜组织中的表达及相关性研究

目的 研究单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在正常子宫内膜组织与异位子宫内膜组织中的表达分布情况及其在子宫内膜异位症发生、发展过程中的作用及可能机制.方法 采用免疫组织化学法(S-P法)检测40例子宫内膜异位症(EM)患者MCP-1的表达水平,并以37例正常子宫内膜组织作为对照组.结果 异位子宫内膜组织MCP-1表达阳性率高于正常子宫内膜组织,有显著性差异.结论 MCP-1在异位子宫内膜组织中的表达明显升高,其可能在子宫内膜异位症的发病中起重要作用.     

单核细胞趋化因子-1与核因子-κB在溃疡性结肠炎模型的表达

目的研究单核细胞趋化因子-1(MCP-1)与核转录因子-κB(NF-κB)在溃疡性结肠炎(UC)模型中的表达。方法采用SP免疫组织化学方法对雄性SD大鼠UC模型组及正常对照组各30例标本中MCP-1、NF-κB的表达进行检测。结果MCP-1主要表达于胞浆,NF-κB主要表达于胞浆及胞核。UC模型组结肠组织中的MCP-1及NF-κB的表达明显高于正常对照组(P<0·001)。UC模型组结肠组织中MCP-1与NF-κB的表达呈正相关(r=0·87,P<0·05)。结论MCP-1与NF-κB在UC结肠组织中的高表达密切相关。两者的高表达在UC发生发展中具有重要作用。