Differential effect of caspase inhibition on proinflammatory cytokine release in septic patients

The interleukins (IL)-1beta and IL-18 represent potent players in the proinflammatory cytokine cascade. Their activation is regulated predominantly through the IL-1-converting enzyme (ICE)/caspase-1. The role of caspases in the secretion of IL-1beta and IL-18, as well as in the release of the secondary-induced cytokines IL-12 and interferon (IFN)-gamma in whole blood from septic patients compared to healthy controls, was studied. Inhibition of caspase activity by Z-VAD significantly reduced lipopolysaccharide (LPS) and Staphylococcus aureus (SAC) induced release of mature IL-1beta in septic patients and controls. In contrast, in whole blood from septic patients significantly elevated basal level of IL-18 were found, which could neither be further increased by LPS or SAC, nor be inhibited by Z-VAD. Release of IL-12 p40 was significantly lower in septic patients compared to controls and was not affected by Z-VAD. Despite high levels of IL-18, IFN-gamma was not detected in whole blood from septic patients even after stimulation with SAC or LPS. Thus, during sepsis, caspases participate in the processing of IL-1beta, whereas maturation of IL-18 during sepsis appears to be independent of caspases. The lack of IFN-gamma release seen in septic patients could be attributed to low IL-12 release rather than to diminished IL-18 release.     

吡咯烷二硫代氨甲基甲酸盐对缺血再灌注所致肝损伤的保护作用

目的:探讨吡咯烷二硫代氨甲基甲酸盐(PDTC)对肝脏缺血再灌注(HIR)所致大鼠急性肝损伤(ALI)的保护作用及其作用机制。方法:Wister大鼠随机数字表法分为:HIR组,PDTC保护(HIR+PDTC)组。HIR组阻断肝左叶及肝中叶的入肝血流60min后再灌注,PDTC组先经阴茎背静脉注射PDTC120mg/kg后立即按HIR组致伤。分别采用EMSA法及免疫组化法检测再灌注后1,3,6,12hNF-κB活性及TNF-α表达,并用赖氏法检测血浆中ALT含量。另取大鼠20只,亦随机数字表法分为HIR组和PDTC保护组,观察ALT动态变化及生存率。结果:损伤后NF-κB结合活性明显升高,并于再灌注后3h达到高峰,TNF-α表达增加,同时血浆中ALT含量亦明显升高,PDTC保护组NF-κB活性减弱,TNF-α表达减弱,ALT水平降低。PDTC保护组ALT异常时间缩短,生存率增加。结论:PDTC能通过抑制NF-κB的激活,减少致炎因子的基因表达与合成释放,减轻炎细胞浸润,从而对HIR所致ALI起到保护作用,有利于HIR损伤的康复。     

灌注速度对移植肝脏缺血再灌注的损伤

背景：近年来有学者研究发现供体灌注的压力可直接影响移植物的能量代谢从而影响其活力,适当的灌注压力能明显提高供体的质量。目的：观察不同灌注速度对大鼠移植肝脏再灌注损伤的影响。方法：采用改良的Kamada双袖套法建立SD→SD原位肝移植模型。供体肝脏获取时分别以50,100,150,200mL/h进行灌注。检测移植后外周血清肿瘤坏死因子α和谷丙转氨酶水平,观察肝脏组织病理学改变和肝脏组织内皮源性一氧化氮合酶的表达变化。结果与结论：与低灌注速度相比,供体肝脏制备过程中200mL/h的灌注速度导致了更加明显的肝脏病理形态学改变,肝细胞变性、肝血窦扩张和炎细胞浸润也更加明显。术后24h肝功能的检测也发现,150,200mL/h灌注速度组外周血谷丙转氨酶活性、肿瘤坏死因子水平明显高于50,100mL/h灌注速度组（P〈0.05,P〈0.01）,内皮源性一氧化氮合酶表达明显低于50,100mL/h灌注速度组（P〈0.01）,100mL/h灌注速度后,随着灌注速度的增加肝功能损伤也明显加重。证实适当的灌注压力和速度是获得高质量供体的保障,能够减轻移植后肝功能损伤,改善受体预后,在大鼠肝移植供体制备过程中100mL/h是适宜的灌注速度。     

灌注速度对移植肝脏缺血再灌注的损伤

背景:近年来有学者研究发现供体灌注的压力可直接影响移植物的能量代谢从而影响其活力,适当的灌注压力能明显提高供体的质量.目的:观察不同灌注速度对大鼠移植肝脏再灌注损伤的影响.方法:采用改良的Kamada双袖套法建立SD→SD原位肝移植模型.供体肝脏获取时分别以50,100,150,200 mL/h进行灌注.检测移植后外周血清肿瘤坏死因子α和谷丙转氨酶水平,观察肝脏组织病理学改变和肝脏组织内皮源性一氧化氮合酶的表达变化.结果与结论:与低灌注速度相比,供体肝脏制备过程中200 mL/h的灌注速度导致了更加明显的肝脏病理形态学改变,肝细胞变性、肝血窦扩张和炎细胞浸润也更加明显.术后24 h肝功能的检测也发现,150,200 mL/h灌注速度组外周血谷丙转氨酶活性、肿瘤坏死因子水平明显高于50,100 mL/h灌注速度组(P < 0.05,P < 0.01),内皮源性一氧化氮合酶表达明显低于50,100 mL/h灌注速度组(P < 0.01),100 mL/h灌注速度后,随着灌注速度的增加肝功能损伤也明显加重.证实适当的灌注压力和速度是获得高质量供体的保障,能够减轻移植后肝功能损伤,改善受体预后,在大鼠肝移植供体制备过程中 100 mL/h是适宜的灌注速度.     

尼莫地平对大鼠烫伤后库普弗细胞白介素-1β和白介素-6产生的抑制作用

目的 :探讨钙离子通道阻断剂尼莫地平对烧伤后库普弗细胞 (KC)合成释放白介素 1β(IL 1β)、IL 6的调控作用 ,为寻找一种有效减轻、控制烧伤后过度全身炎症反应的措施提供理论依据。方法 :内灌注消化、密度梯度离心法分离培养正常 SD大鼠 KC,显微荧光分光光度计复合倒置显微镜技术观察烫伤血清作用下单个 KC细胞内钙 (〔 Ca2 +〕i)变化 ,酶联免疫吸附法 (EL ISA)测定烫伤血清培养的 KC上清中 IL 1β和IL 6的浓度变化。 SD大鼠行 30 %总体表面积 (TBSA) 度烫伤 ,伤后 6 h分离 KC,RNA酶保护分析法测定KC中两种细胞因子 m RNA的表达量 ,并测定血浆细胞因子水平 ;观察尼莫地平存在时上述结果的改变。结果 :与对照组相比 ,烧伤组 KC〔 Ca2 + 〕i峰值及培养上清中 IL 1β、IL 6浓度增加值均显著增加 (P均 <0 .0 1) ,在 1μm ol/L尼莫地平存在时 ,两者均显著减少 (P均 <0 .0 1)。烧伤后 6 h KC中 IL 1β和 IL 6的m RNA表达量及其血浆水平均显著升高 ,静脉予尼莫地平 (40 μg· kg- 1 · h- 1 )后两者均显著减少 (P均 <0 .0 1)。结论 :大鼠严重烧伤后 ,KC合成释放 IL 1β和 IL 6 ,此过程通过细胞内钙离子通道信号传导途径实现。尼莫地平能抑制烧伤后 KC中 IL 1β和 IL 6 m RNA表达 ,使 KC产生 IL 1β、IL 6明显     

供肝冷保存再灌注过程中肝细胞、肝窦内皮细胞及枯否细胞损伤的比较

目的:冷保存及再灌注损伤是决定移植物功能及受者存活率的重要因素之一,这与供肝冷保存再灌注过程中枯否细胞的活化及肝窦内皮细胞的损伤密切相关.建立大鼠同种异体原位肝脏移植模型,比较不同冷保存再灌注时间下供肝肝细胞、肝窦内皮细胞及枯否细胞的损伤情况.方法:①实验于2005-12/2006-12在河南省实验动物中心及郑州大学第一附属医院肝移植实验室完成,实验方法符合动物伦理学要求.②选用Wistar大鼠63只,采用随机数字表法取7只大鼠为正常对照组,另外56只平分为供体组与受体组,两两配对后再分为供肝冷保存3 h,6 h,8 h和12 h组(每组供、受体各7只).各冷保存组用4 ℃ Euro-collins液灌注和保存供肝,之后行同种异体原位肝移植.③于受体门脉复流后15,30,60 min检测各组大鼠肝窦内皮细胞损伤指标血清透明质酸、枯否细胞激活指标肿瘤坏死因子α含量及肝细胞损伤指标丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶活性;观察受体门脉复流后60 min移植肝肝细胞、肝窦内皮细胞及枯否细胞的超微结构变化.结果:63只大鼠均顺利完成模型建立,术中无异常死亡.①各冷保存组在门脉复流后15,30,60 min血清透明质酸、肿瘤坏死因子α含量均高于正常对照组(P < 0.05),并且随冷保存时间延长依次升高.②各冷保存组在门脉复流后15 min血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶活性与正常对照组无显著性意义(P > 0.05);在门脉复流30 min后血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶活性高于正常对照组(P < 0.05).③冷保存3 h及6 h组肝细胞结构基本正常,冷保存8及12 h组出现结构变化;而各冷保存组中,肝窦内皮细胞均有损伤并较肝细胞为重,枯否细胞均有激活表现.结论:供肝冷保存再灌注过程中,肝窦内皮细胞的损伤及枯否细胞的激活明显早于并重于肝细胞损伤.     

肝细胞内糖原拮抗肝脏缺血——再灌注损伤的临床初步研究

目的：探讨临床上施行复杂的肝脏手术前增加肝细胞内糖原含量能否减轻术中因阻断肝血流所带来的肝脏缺血一再灌注损伤。方法：将近3年我院收治的临床基本情况相近的17例患者分为实验组及对照组。实验组患者于术前24h内静脉滴注25％葡萄糖250ml,共4次（1次／6h）,对照组不作特殊处理。两组患者均采用阻断第一肝门方法行病变肝脏切除术。术中分别于肝脏缺血前、缺血后及再灌注1h获取相对正常的肝组织测定组织中ATP含量,此外于术前及术后第1、5d,抽取血液标本,检测患者肝功能情况。结果：两组患者于缺血后及再灌注1h,实验组肝组织ATP含量显著高于对照组（P＜0.01）;术后第1、5d,实验组肝功能改善程度均显著优于对照组（P＜0.01）,而术前组间则差异不显著。结论：临床上在阻断肝脏血流施行复杂的肝脏手术之前,增加肝细胞内糖原含量可有效地减轻肝脏缺血一再灌注损伤程度,降低手术风险。     

肿瘤坏死因子α抗体对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF α)抗体对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法雄性SD大鼠 12 0只分为正常对照组 (A组 ,40只 )、缺血再灌注组 (B组 ,40只 )和TNF α抗体处理组 (C组 ,40只 ) ,于肝脏缺血 60分钟 (再灌注开始 )及再灌注1h、3h、6h、12h后 ,检测血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、丙二醛 (MDA)含量及观察肝组织病理学变化。结果肝脏缺血再灌注后 ,肝脏瘀血明显 ,B组血清ALT和MDA含量均较A组明显增高 (P <0 0 1) ;与B组相比 ,C组肝组织瘀血减轻 ,血清ALT和MDA含量明显降低 (P <0 0 1)。结论TNF α抗体可以抑制大鼠肝脏缺血再灌注所致的炎症反应 ,对缺血再灌注损伤有保护作用。     

肢体缺血再灌注后肝损伤中细胞凋亡的发生及牛磺酸的保护效应

目的 观察大鼠肢体缺血再灌注(LIR)后肝损伤和肝脏细胞凋亡情况及其发生机制,并探讨牛磺酸的保护效应.方法 实验采用Wistar大鼠30只,建立大鼠LIR损伤模型,随机分为对照组、缺血再灌注(IR)组和牛磺酸+缺血再灌注(TR)组,每组10只.分别测定各组大鼠肝组织丙二醛(MDA)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、髓过氧化物酶(MPO)及Ca2+含量的改变;利用琼脂糖凝胶电泳观察DNA梯状条带,利用TUNEL法检测各组肝脏细胞的凋亡情况.HE染色观察肝脏形态学变化.结果 与对照组比较,IR组大鼠肝组织MDA、XOD、MPO、Ca2+含量均明显升高(P均<0.01),肝脏细胞DNA琼脂糖凝胶电泳可见梯状条带;TUNEL染色结果 显示凋亡百分率明显升高(P<0.01).与IR组相比,TR组血浆和肝组织中MDA、XOD、Ca2+含量和MPO反均有所下降(P<0.01或<0.05),肝脏细胞DNA琼脂糖凝胶电泳显示梯状条带不明显;凋亡百分率降低(P<0.01).结论 细胞凋亡参与了大鼠LIR后肝损伤的发生,而牛磺酸可减轻大鼠UR所致肝脏损伤及细胞凋亡的发生.     

SKLB023 protects mice against acute liver injury by inhibiting proinflammatory cytokine production in both T cells and macrophages

Acute liver failure is a severe clinical syndrome accompanied with excessive inflammatory response. Our previous study demonstrated that SKLB023, a novel thiazolidinedione derivative, showed potent anti-inflammatory activity in rheumatoid arthritis. The purpose of the present study is to evaluate the protective effect of SKLB023 on lipopolysaccharide (LPS)/D-GalN-induced liver failure and to explore the underlying molecular mechanisms. Our results showed that SKLB023 significantly improved mortality and liver injury as indicated by reduced serum levels of aminotransferases and alleviated pathological damage. Additionally, SKLB023 decreased the percentage of activated T cells and macrophages as well as the serum levels of cytokines in vivo. Furthermore, SKLB023 decreased levels of TNF-α and IL-6 secreted from liver macrophages (Kupffer cells) stimulated by LPS in vitro. Our results indicated that the protective effects of SKLB023 were associated with its significant impact on the inflammatory cytokines, which were produced by both T cells and macrophages.

A novel thiazolidinedione derivative SKLB023 offers a potent therapeutic strategy for the treatment of acute liver failure.     

氨溴素对大鼠肺缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 探讨氨溴索对在体肺缺血-再灌注(I/R)损伤的保护作用.方法 夹闭大鼠左肺门1.5 h,再灌注2 h,建立在体肺缺血-再灌注模型.将24只SD大鼠随机分成对照组(control组),缺血-再灌注组(I/R组)和氨溴索组(AMB组),AMB组缺血前30 min给予腹腔注射氨溴索25 mg/kg,再灌注前5 min颈静脉注射氨溴索25 mg/kg.再灌注2 h后采颈动脉血检测血气、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α).摘取左肺测湿干比、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)活力并行病理学检查.统计结果行两样本t检验.结果 再灌注2 h后,动脉血氧分压和二氧化碳分压三组间差异无统计学意义;I/R组肺湿干比、MPO活力(U/g)、MDA含量(nmol/mg)分别为(5.3±0.5)、(1.30±0.26)和(0.66±0.16),显著高于control组,AMB组可使上述指标降至(4.8±0.3)、(0.93±0.40)和(0.51±0.07),同时使SOD(U/mgprot)由I/R组的(39.3±3.0)升高至(49.9±7.3).I/R组血清IL-1β(pg/ml)、IL-8(pg/ml)、TNF-α(pg/ml)含量分别为(22.08±3.85)、(21.92±5.56)、(30.50±3.77)显著高于control组,AMB组可使上述指标降至(17.11±2.22)、(15.07+3.56)和(22.97±3.22).结论 氨溴索对肺缺血-再灌注损伤具有保护作用,可能与其抗氧化和抑制中性粒细胞和炎症因子分泌有关.     

Ghrelin inhibits leptin- and activation-induced proinflammatory cytokine expression by human monocytes and T cells

Ghrelin, a recently described endogenous ligand for the growth hormone secretagogue receptor (GHS-R), is produced by stomach cells and is a potent circulating orexigen, controlling energy expenditure, adiposity, and growth hormone secretion. However, the functional role of ghrelin in regulation of immune responses remains undefined. Here we report that GHS-R and ghrelin are expressed in human T lymphocytes and monocytes, where ghrelin acts via GHS-R to specifically inhibit the expression of proinflammatory anorectic cytokines such as IL-1beta, IL-6, and TNF-alpha. Ghrelin led to a dose-dependent inhibition of leptin-induced cytokine expression, while leptin upregulated GHS-R expression on human T lymphocytes. These data suggest the existence of a reciprocal regulatory network by which ghrelin and leptin control immune cell activation and inflammation. Moreover, ghrelin also exerts potent anti-inflammatory effects and attenuates endotoxin-induced anorexia in a murine endotoxemia model. We believe this to be the first report demonstrating that ghrelin functions as a key signal, coupling the metabolic axis to the immune system, and supporting the potential use of ghrelin and GHS-R agonists in the management of disease-associated cachexia.     

肿瘤坏死因子在肝缺血/再灌注损伤中的作用及异丙酚的干预

目的 探讨肿瘤坏死因子(TNF)在肝缺血/再灌注损伤(HIRI)中的作用及异丙酚对其的影响。方法 选择HIRI实验兔及肝癌手术患者,观察血浆TNF含量、谷丙转氨酶(ALT)活性、肝形态学的变化及异丙酚对上述指标的影响。结果 HIRI期间,TNF和ALT明显升高(P均<0.01),两者呈显著正相关(实验兔r=0.912,P<0.01;患者r=0.535,P<0.01),肝形态学发生异常变化;使用异丙酚后,上述指标的异常变化显著减轻,其差异有显著性意义(P<0.05和P<0.01)。结论TNF是HIRI的重要发病因素,异丙酚可通过降低TNF减轻HIRI。     

Inhibition of lipid peroxidation by superoxide dismutase following regional intestinal ischemia and reperfusion

In a feline model of regional intestinal ischemia, reoxygenation resulted in a rise in the concentration of oxidized glutathione, from 2.3 +/- 0.7 to 4.1 +/- 0.5% of the total glutathione. Also conjugated diene as an indirect measurement for lipid peroxidation increased after reperfusion from 2.5 +/- 0.5 mumol/g to 5.5 +/- 1.2 micrograms mol/g tissue. These results are in line with the hypothesis that ischemia results in an accumulation of hypoxanthine and a conversion of xanthine dehydrogenase into its O2-dependent form. Upon reoxygenation, hypoxanthine can be oxidized giving yield to a burst of O2-. and its interconversion products. These may initiate peroxidative tissue damage. Pretreatment of the cats with superoxide dismutase inhibited the biochemical alterations and protected the tissue from peroxidation damage.     

N-乙酰半胱氨酸对小鼠肝部分缺血/再灌注后肝肺损伤的保护作用

目的 研究抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）对肝脏部分缺血/再灌注（I/R）后肝、肺损伤的保护作用及对Toll样受体2/4（TLR2/4）表达的影响。方法 以BALB/c小鼠复制肝脏部分I/R损伤模型,将小鼠随机分为假手术组、I/R组和NAC干预组（NAC组）,每组10只。于再灌注后1h和3h取门静脉血测定血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）浓度,取眼动脉血测定血浆丙氨酸转氨酶（ALT）水平;同时取受损肝、肺组织行逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白质免疫印迹法（Western blotting）观察TLR2/4表达的变化。结果I/R后受损肝叶和肺组织内出现TLR2/4 mRNA和蛋白的高表达,NAC干预可抑制其表达水平（P〈0.05或P〈0.01）。I/R损伤后血中TNF-α和ALT水平均较假手术组明显升高;NAC干预后各时间点TNF-α和ALT均较I/R组明显下降（P〈0.05或P〈0.01）。结论 小鼠肝部分I/R后,TLR2/4不仅在受损肝组织内有表达,在远隔器官肺内也有表达。NAC可通过调整氧化还原状态,抑制再灌注后TLR2/4的活化和细胞因子TNF-α的表达,从而减轻肝、肺组织的损伤。     

肢体缺血预处理对兔腰段脊髓急性缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察肢体缺血预处理对脊髓急性缺血再灌注损伤能否产生保护性,并通过电生理学、组织病理学等检测评估其效用。方法:实验于2003-07/2004-03在解放军总医院骨科实验室完成。①造模:将20只新西兰白兔随机分为3组,假手术组4只,缺血再灌注组与预处理组各8只,后2组兔采用肾下腹主动脉阻断40min-开放法建立腰段脊髓急性缺血再灌注模型,假手术组仅开腹,不阻断腹主动脉。②肢体缺血预处理方法:预处理组兔在阻断前,先对左下肢进行预处理,以止血带在大腿根部绑扎,阻断血管5min,再灌注10min,共反复4次。③功能评估指标:对比各组兔在再灌注后2,8,24h、7d时后肢功能(0～4级,0级为后肢完全瘫痪,4级为正常行走)、皮质体感诱发电位消失和再现时间以及组织病理学上的差异。结果:20只进入结果分析。①假手术组兔后肢神经功能正常;预处理组兔各时间点后肢神经功能评级高于缺血再灌注组(F=17.37,P=0.0016),与假手术组比较无差异(P=0.0719)。②再灌注7d时,缺血再灌注组组织病理学上有严重改变,表现为神经元细胞水肿、脱失,白质脱髓鞘;预处理组病理改变轻微;对照组无明显改变。③预处理组动脉夹闭后皮质体感诱发电位消失时间长于缺血再灌注组[(27.2±1.7),(13.6±2.2)min,t=13.79,P=0.00];预处理组再灌注后皮质体感诱发电位再现时间短于缺血再灌注组[(2.1±1.8),(7.1±5.0)min,t=-2.65,P=0.02]。结论:肢体缺血预处理能减轻脊髓缺血再灌注引起的组织病理变化和神经功能缺陷,对急性脊髓缺血后的再灌注损伤起到明显的保护作用。     

牛肠碱性磷酸酶对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用途径

背景：肝移植以及广泛的肝叶切除等手术常见的病理过程为肝脏缺血再灌注损伤。研究表明，外源性碱性磷酸酶能通过对内毒素的脱磷酸作用而减轻其毒性作用。 目的：建立大鼠肝缺血再灌注损伤模型，观察牛肠碱性磷酸酶预处理对肝缺血再灌注损伤的保护作用。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2007～04／11在南方医院消化科实验室完成。 材料：选用SD大鼠72只，用于建立大鼠肝缺血再灌注模型。方法：将72只肝缺血再灌注模型大鼠按随机数字表法分为3组（n=24）：①假手术组打开腹腔，不阻断肝脏供血。②生理盐水组阻断入肝血流20min，在再灌注前5min从尾静脉注射生理盐水1mL。③牛肠碱性磷酸酶预处理组阻断入肝血流20min，再灌注前5min从尾静脉注射牛肠碱性磷酸酶0、5U／g。 主要观察指标：3组大鼠分别于缺血再灌注后1，3，6，12h各时点分别取6只，分别采用鲎试剂终点显色法检测血清内毒素水平：采用酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素10水平；检测肝组织髓过氧化物酶活性；应用苏木精-伊红染色法观察肝组织病理改变。 结果：①生理盐水组及牛肠碱性磷酸酶预处理组血清内毒素、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平及肝组织髓过氧化物酶活性在再灌注后均高于假手术组（P〈0、05）。②肝脏缺血再灌注损伤后不同时点牛肠碱性磷酸酶预处理组血清内毒素、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平及髓过氧化物酶活性均低于生理盐水组（P〈0、05），白细胞介素10水平高于生理盐水组（P〈0、05），肝组织病理改变也轻于生理盐水组。 结论：牛肠碱性磷酸酶能减少血清内毒素含量，抑制促炎细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6的释放并促进抗炎细胞因子白细胞介素10的释放，减少中性粒细胞在肝组织的浸润活化，从而减轻肝脏缺血再灌注损伤。     

肢体缺血预处理大鼠肝损伤保护效应中内皮素1的变化和意义

背景:研究体内最强的缩血管物质内皮素1在肢体缺血预处理保护大鼠肢体缺血再灌注后肝损伤中的变化和意义,有助于从肝脏微循环角度探讨肢体缺血预处理的保护作用。目的:探讨内皮素1在肢体缺血预处理保护大鼠肢体缺血再灌注后肝损伤中的变化和意义。方法:雄性Wistar大鼠随机分为对照组、肢体缺血再灌注组和肢体缺血预处理组。肢体缺血预处理组以橡皮带预先阻断双后肢血流5min,然后恢复血流灌注5min,反复4次进行缺血预处理。然后肢体缺血再灌注组和肢体缺血预处理组以橡皮带环绕结扎大鼠双后肢根部,阻断血流4h后松解,恢复血流灌注4h制备肢体缺血再灌注模型,并于再灌注前20min于左侧颈外静脉插管滴注生理盐水。对照组双后肢松弛环绕橡皮带但不阻断血流,其后操作同肢体缺血再灌注组。结果与结论:大鼠肢体缺血再灌注后血浆内皮素1、透明质酸酶、丙二醛、谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平和肝组织内皮素1、丙二醛、髓过氧化物酶水平均明显升高(P<0.05),肢体缺血预处理干预后上述指标均明显降低(P<0.05)。光镜下可见肢体缺血再灌注组肝细胞肿胀,肝索排列不规则;肢体缺血预处理组上述损伤表现减轻。结果可见大鼠肢体缺血预处理对肢体缺血再灌注后肝损伤的保护作用可能与抑制了内皮素1的缩血管作用从而改善肝脏的微循环有关,也可能与内皮素1含量的降低减少了白细胞过度聚集活化和减弱脂质过氧化有关。     

NMDA受体过度激活对严重创伤大鼠血清炎性细胞因子水平的影响

摘要：目的 观察N-甲基-D-天冬氨酸（N-methyl-D-aspartate， NMDA）受体的过度激活对大鼠严重创伤血清炎性细胞因子水平中的影响，为探索从中枢的某一环节着手，来抑制严重创伤后的炎性反应失调提供理论依据。方法 以30% TBSA Ⅲ度烧伤为严重创伤模型，利用ELISA方法检测激活NMDA受体对血清炎性细胞因子TNF-α、IL－1β、IL6水平的影响；通过膜片钳技术检测严重创伤能否导致大鼠神经元NMDA受体的过度开放；再观察阻断NMDA受体能否抑制严重烧伤后血清炎性细胞因子TNF-α、IL－1β、IL6水平的上升。结果 ①与对照组相比，使用NMDA 0.5mg/kg激活NMDA受体，血清TNF－α，IL－1β、IL6明显升高，加大剂量（2mg/kg ）可以使血清TNF－α，IL－1β、IL6进一步升高；②在35pS电导水平的开放中，烧伤使通道开放概率增加非常显著，在100pS电导水平的开放中，开放时间常数τ1、通道开放概率增加非常显著；③腹腔注射MK-801（3mg/kg）阻断NMDA受体可以抑制烧伤后血清TNF-α、IL－1β、IL6水平的上升，加大注射剂量（5mg/kg）可以进一步抑制烧伤后血清TNF-α、IL－1β、IL6水平的上升。结论 NMDA受体是严重创伤后（烧伤）大鼠血清炎性细胞因子过度升高的重要环节。     

电针兴奋胆碱能抗炎通路对内毒素引起的细胞因子释放和脏器功能损害作用研究

目的 探讨针刺的抗炎和器官保护作用及其可能机制。方法 80只Wistar大鼠被随机分为手术对照组、内毒素脂多糖（LPS，5mg／kg）模型组、穴位对照组、电针治疗组、迷走神经切断（迷切）对照组、迷切后电针组、N型胆碱能受体α7亚基阻断对照组、α7亚基阻断后电针组，每组10只。α7亚基阻断对照组和阻断后电针组于注射LPS后0．5h给予α-银环蛇毒素（α—BGT）1μg／kg，迷切对照组和迷切后电针组则切断双侧迷走神经干，各电针组针刺双侧后三里（即足三里）穴。检测大鼠血浆肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白细胞介素-10（IL-10）、丙氨酸转氨酶（ALT）、心肌肌酸激酶同工酶（CK—MB）和小肠组织二胺氧化酶（DAO）水平变化。结果 与手术对照组比较，LPS模型组血浆TNF—α、IL-10、ALT和CK—MB显著升高，小肠组织DAO活性显著降低（P均〈0．01）。电针足三里能显著降低促炎细胞因子TNF—d水平和ALT、CK—MB活性，升高小肠组织DAO活性（P均〈0．01），但对抗炎细胞因子IL-10含量无显著影响（P〉0．05）。电针前切断双侧迷走神经干或阻断N型胆碱能受体α7亚基能显著减轻或消除电针的抗炎和器官保护作用，进一步升高血浆TNF—α、IL-10含量和ALT、CK—MB活性，降低小肠组织DAO活性（P〈0．05或P〈0．01）。结论 电针足三里能抑制内毒素血症大鼠促炎细胞因子释放和改善脏器功能指标，其机制可能与兴奋胆碱能抗炎通路有关。