小鼠肝炎病毒抗体Dot-ELISA诊断试剂盒的研制

本文报道以硝酸纤维素膜为固相载体制备的小鼠肝炎病毒(MHV)抗原诊断膜片，用以检测MHV抗体的斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)诊断试剂盒的研制。研究结果表明：试剂盒不仅具有特异性强、灵敏性高、重复性和稳定性好等特点．而且还具有成本低、操作简便快速(2～3h即可作出诊断)．结果客现，便于长期保存，不需特殊仪器，肉眼易判定等优点，具有推广和应用价值。本研究在国内尚未见报道。     

小鼠肝炎病毒抗体检测试剂盒的标准化研究

目的筛选适合制备检测试剂盒的抗原组合。方法用 ＥＬＩＳＡ方法，将５株小鼠肝炎病毒（ＭＨＶ）抗原分别组合作为包被抗原，研究ＭＨＶ抗原不同组合与标准毒株抗体的反应性，分析ＭＨＶ各毒株间的差别，进一步比较不同组台抗原的灵敏性、特异性。结果通过对１９９７～１９９９年送检２３８只普通级实验小鼠检测，结果表明，ＭＨＶ的感染率虽有下降趋势，但感染率仍然很高（５９％～８７％）。结论我国分离的ＭＨＶ－ＨＵ７９株，在本次研究中表明能够用于ＭＨＶ抗体检测试剂盒。     

两种不同组织嗜性的小鼠肝炎病毒组合抗原检测抗体的间接ELISA方法

目的研究不同组织嗜性的小鼠肝炎病毒（MHV）组合抗原检测抗体的间接ELISA技术。方法比较两种不同组织嗜性抗原和组合抗原为基础的检测MHV抗体水平。将呼吸型MHV-1、肠型MHV-JX和混合抗原包被酶标板后，检测不同MHV毒株感染抗体。结果两种抗原都能检测出相应的MHV抗体，但交互检测效果差；组合抗原能同时检测两种MHV抗体，组合抗原可以提高MHV感染的检出率。临床样品中呼吸型感染率40％-58％，呼吸型感染率22％-70％，两型的共感染率为为17％-30％。结论组合抗原可以用于MHV感染的诊断试剂。     

临床ELISA试剂盒的选择与使用体会

目前 ,肝炎病毒学标志、甲胎蛋白、性腺激素等项目的检测方法以酶联免疫吸附试验 (EL ISA)最常用。 EL ISA试剂盒虽有质量标准 ,但质量高低不一、国家也加大了检查监督力度 ,尤其是对用于供血员检查的试剂盒实行“批批检”,贴有防伪标志。但实验室如何选择和使用试剂盒 ,才能确     

丙型肝炎病毒抗体ELISA法弱反应性分析及其确认意义

目的：分析抗HCV ELISA法弱反应性结果,减少漏诊误诊。方法：采用ELISA法检测抗HCV,对吸光度值／临界值（S／CO）比值在0．75—3．50之间的标本再采用聚合酶链反应（PCR）进行确认。结果：在抗HCV呈弱反应性即S／CO在0．75—3．50之间的24份标本中,0．75≤S／C0〈1．0的标本9份,S／CO≥1．0的标本15份;经PCR确认,有5份阳性,其余19份为阴性,其中4份阳性样本的S／CO〈1．0,14份阴性样本的S／CO≥1．0。结论：对于弱反应性样本,应进一步做确认检测,以防止漏诊误诊。     

兔出血症抗体间接ELISA检测试剂盒的研制与初步应用

目的建立检测兔病毒性出血症(RHD)血清抗体的间接ELISA方法并组装成试剂盒,进行初步应用。方法通过差速离心和蔗糖密度梯度离心提纯RHDV病毒粒子作为包被抗原,优化反应条件和筛选试剂,建立间接ELISA检测方法,组装试剂盒并对其总体性能进行评价。结果试剂盒敏感性为血凝抑制试验的4~32倍,重复性和特异性良好,保质期为4℃3个月。对105份兔血清进行随机检测,与血凝抑制试验的复核率为95%。结论本试剂盒可以在检测和科研中初步应用。     

HIV抗体ELISA试剂盒的性能验证

目的对本实验室所使用的HIV抗体ELISA试剂盒进行性能验证,判断该试剂盒是否能够满足本实验室的日常检验要求。方法分析并计算该试剂盒的最低检测下限、精密度（包括重复性和中间精密度）、阴阳符合率,与试剂盒说明书提供的性能指标进行比较,对试剂盒提供的CUTOFF值进行验证,判断其是否适用于实验室周边人群,以此评估试剂盒的性能情况。结果 HIV ELISA试剂盒的最低检测下限为0.125NCU/ml;重复性试验中检测浓度为2NCU/ml的质控血清和健康人新鲜血清的CV%分别为5.6%和6.4%;中间精密度试验的CV%为10.9%;阴阳符合率均为100%;CUTOFF值验证试验中选定标本的检测结果OD值的（x±3SD）为0.038,小于试剂盒提供的CUTOFF值,验证通过。结论本实验室所使用的HIV ELISA试剂盒基本适用于实验室进行日常的初筛检测。     

PCR法与ELISA法检测丙型肝炎病毒及乙型肝炎病毒比较

目的:探讨PCR与ELISA 2种方法检测丙型肝炎病毒和乙型肝炎病毒的差异和临床意义.方法:随机抽取无偿献血者标本300份,分为ALT升高组和ALT正常组,用ELISA法检测抗-HCV和HbsAg,用RT-PCR检测HCV-RNA和HBV-DNA.结果:抗-HCV阳性标本26例阳性率为8.7%,经RT-PCR检测,HCV-RNA均为阳性,抗-HCV阴性的标本中有2例HCV-RNA为阳性.HCV-RNA的阳性率为16%,2种方法检测结果差异有统计学意义(P<0.01);300份标本中HBsAg阳性和HBV-DNA阳性比率分别为11.3%和12.7%,两者无明显差异(P>0.05).结论:ELISA方法检测丙型肝炎病毒存在一定的漏检现象,应用RT-PCR检测HCV-DNA利于早期诊断,也是筛选献血员是否携带丙型肝炎病毒的较可靠方法.     

乙肝5项ELISA试剂盒CUTOFF值适用性的验证

目的 验证本实验室乙肝5项定性检测试剂盒的CUTOFF值是否适用于本实验室所属区域内的个体人群.方法 测定120份标本HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb-IgG,计算其检测结果OD值的均值(-x)和标准差s.夹心法试剂盒计算((-x)+3s)结果与试剂盒提供的CUTOFF值进行比较,竞争法计算((-x)-3s)结果与试剂盒提供的CUTOFF值进行比较.结果 各夹心法检测项目HBsAg、HBsAb、HBeAg其((-x)+3s)均小于相应CUTOFF值,各竞争法检测项目HBeAb、HBcAb-IgG其((-x)-3s)均大于其CUTOFF值.结论 本实验室所使用的乙肝5项ELISA试剂盒所选择的CUTOFF值适用于本实验室所属区域内的99％正常人群.     

南通市崇川区居民430例乙型肝炎抗原抗体系统检测

目的：对本地区城镇居民乙型肝炎病毒感染情况进行分析。方法：运用酶联免疫吸附试验对430例城镇居民乙型肝炎抗原抗体系统进行检测，并进行统计学处理。结果：城镇居民HBsAg阳性为12．32％，抗HBsAg阳性为56．98％，HBeAg阳性为2．09％，抗HBeAg阳性为15．81％，抗HBe阳性为11．63％。结论：本区属于乙型肝炎高发区，要重点加强对HBsAg阴性和抗HBs阴性人群的预防接种及其他预防措施。     

实验小鼠豚鼠弓形虫抗体ELISA试剂盒的研制及应用

本文研究了快速、特异性强、敏感性好的弓形虫抗体ELISA诊断试剂盒。IHA、IFAT和ELISA平行检测3份阳性血清和30份阴性血清，符合率均为100％。IHA和ELISA检测61份小鼠和84份豚鼠血清，结果表明ELISA法敏感于IHA。用本ELISA诊断试剂共检测了319份血清，小鼠阳性率为0．67％．豚鼠为2.22％．说明弓形虫在实验小鼠、豚鼠中感染率报低。     

酶联免疫吸附测定诊断试剂盒使用中出现的问题和解决方法

自从1971年Engvall等发表了酶联免疫吸附测定(En—zynle linked immunosorbent assay ELISA)用于IgG定量测定的文章后,使1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测量方法,即当今广泛使用的ELISA     

乙型肝炎病毒重叠感染其它肝炎病毒分析

目的：探讨乙肝病毒感染者重叠其它肝炎病毒感染的情况。方法：对130例乙肝感染者进行了其它肝炎病毒血清检测。结果：乙肝感染者病毒复制越活跃，其它肝炎病毒重叠感染率越高，其中以庚型肝炎病毒感染率最高。     

应用ELISA抑制法检测小鼠红细胞内约氏疟原虫抗原

应用ELISA抑制法检测小鼠红细胞内约氏疟原虫抗原的敏感性和特异性进行了观察,微板抗原包被剂量为20μg/ml,用反复感染原虫小鼠20只的感染混合血清作为抑制反应剂,结果表明ELISA抑制法的敏感度随着感染混合血清稀释度增加而提高,当1:500稀释时红细胞内抗原测水平为1虫/10~4BRC;感染小鼠阳性率为95.8％(64/48),正常小鼠阴性率为90.3％(28/31)。     

ICR小鼠自然感染小鼠肝炎病毒后的抗原抗体变化

【摘要】 目的 了解小鼠肝炎病毒(MHV)污染的设施内,ICR小鼠自然感染后MHV抗原抗体存在情况。方法 选择50只ICR小鼠,通过更换“脏垫料”的方式进行饲养,分别在实验第2,4,8,14,21,28,35,42,56和84天各剖杀动物5只,采集血清、盲肠内容物、粪便、肝脏以及肺脏检测抗原抗体分布情况。结果 实验开始第2天,肺脏中检出小鼠肝炎病毒,检出率为20%（1/5）,第4天开始,肝脏、肺部、盲肠以及粪便中均可检出小鼠肝炎病毒; 84天后,肺脏、盲肠、粪便和肝脏阳性检出率降为0。实验第8天,血清中抗体检出阳性,阳性率为100%（5/5）,直至第84天实验结束,抗体阳性率仍维持在100%（5/5）。结论 血清学方法可作为日常监督主要诊断方法,而抗原检测方法只能应用于早期诊断。 【关键词】小鼠肝炎病毒 自然感染 抗原抗体     

豚鼠弓形虫抗体ELISA检测方法的建立及应用

目的 建立以弓形虫重组抗原的豚鼠弓形虫抗体ELISA方法,并进行初步应用.方法 根据重组抗原的工作浓度包被酶标板,确定酶标二抗浓度,对方法的特异性、灵敏度、稳定性和重复性等进行测试.结果 确定酶标二抗最佳稀释度为1∶8000;与豚鼠淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCM)、仙台病毒(SV)、肺炎病毒(PVM)及呼肠孤3型(Reo3)阳性血清均无交叉反应;对已知阳性血清的检测上限可达1∶2560;6个月的稳定性试验显示A490值的相对偏差均小于15％;批内变异系数(CV)5.7％ ～ 9.5％,批间变异系数(CV)1.9％～9.0％;对182份样本的检测表明豚鼠弓形虫抗体阳性率为7.14％(13/182),与IFA检测结果的符合率为100％,与商品化试剂盒的阳性符合率为92.3％,阴性符合率为100％.结论 建立的豚鼠弓形虫重组抗原ELISA检测方法可用以弓形虫抗体的常规检测.     

双抗原夹心ELISA法检测抗-HCV的临床价值研究

目的 研究双抗原夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)的临床价值.方法 选取2018年1月至2019年12月在血站无偿献血的486份标本为研究对象.收集无偿献血筛查标本并均实施间接ELISA法、双抗体夹心ELISA法检查.观察间接ELISA法、双抗体夹心ELISA法诊断抗-HCV结果,并...     

乙型肝炎病毒前S1抗原（Pre-S1）应用价值的探讨

目的：分析HBsAg阳性血清乙型肝炎前S1蛋白(Pre-S1)与乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)含量检测的关系。探讨Pre-S1的应用价值。方法：用荧光定量PCR技术检测225例HHsAg阳性血清HBV-DNA的含量，同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测Pre-S1蛋白。结果：在HBsAg、HBeAg、HBcAb同时阳性标本中Pre-S1Ag阳性率为89．3％、HBV-DNA阳性率为98．6％。在HBsAg、HBeAb、HBcAb同时阳性标本中Pre-S1Ag阳性率为34.6％、HBV-DNA阳性率为30．7%。在不同HBV血清模式(HBV-M)中Pre-S1Ag的出现与HBV-DNA的含量有正相关的关系。结论：Pre-S1Ag与HBeAg、HBV-DVA有较好的相关性,Pre-S1Ag与HHV-DNA一样可以作为HBV复制的指标．对乙肝五项检测有重要补充作用，尤其适合县市级以下基层医院开展。     

ICR小鼠自然感染小鼠肝炎病毒后抗原抗体的变化

目的了解小鼠肝炎病毒(MHV)污染的设施内,ICR小鼠自然感染后MHV抗原抗体存在情况。方法选择50只ICR小鼠,通过更换"脏垫料"的方式进行饲养,分别在实验第2,4,8,14,21,28,35,42,56和84天各剖杀动物5只,采集血清、盲肠内容物、粪便、肝脏以及肺脏检测抗原抗体分布情况。结果实验开始第2天,肺脏中检出小鼠肝炎病毒,检出率为20%(1/5),第4天开始,肝脏、肺部、盲肠以及粪便中均可检出小鼠肝炎病毒;84天后,肺脏、盲肠、粪便和肝脏阳性检出率降为0。实验第8天,血清中抗体检出阳性,阳性率为100%(5/5),直至第84天实验结束,抗体阳性率仍维持在100%(5/5)。结论血清学方法可作为日常监督主要诊断方法,而抗原检测方法只能应用于早期诊断。