七叶皂苷钠通过降低4EBP1的磷酸化水平抑制梗阻性黄疸大鼠小胆管增生

目的 探讨七叶皂苷钠对梗阻性黄疸大鼠增生胆管的抑制作用.方法 81只健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为3组:单纯胆管结扎组(n=36)、七叶皂苷钠组(n=27)、假手术组(n=18).胆管结扎术后24h开始第1次腹腔注射给药,连续给药7d后,获取各组大鼠肝脏组织.HE染色观察肝脏组织形态结构,Masson染色观察肝脏组织胶原纤维增生情况,免疫荧光染色观察各组大鼠肝脏组织Ⅰ型胶原纤维(COL-Ⅰ)、Ⅲ型胶原纤维(COL-Ⅲ)的增长,免疫组化染色检测相关蛋白的表达.结果 七叶皂苷钠可以改善梗阻性黄疸大鼠引起的肝纤维化,抑制COL-Ⅰ、COL-Ⅲ以及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,减少大鼠肝脏汇管区周围小胆管增生以及胆管细胞内磷酸化真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1(p-4EBP1)的表达.结论 七叶皂苷钠可以通过降低真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)的表达抑制梗阻性黄疸大鼠的小胆管增生.     

NF-κB在梗阻性黄疸引发的大鼠肝脏损害中的作用

目的探讨NF-κB(核因子-κB)在梗阻性黄疸引发肝脏损害中的作用。方法将30只Wister大鼠随机分为假手术对照组(SH组),梗阻性黄疸组(OJ组),梗阻性黄疸+前列腺素E1治疗组(OJ+PGE1组)。采用胆总管结扎法(CB-DL)建立大鼠梗阻性黄疸模型,术后第7d起OJ+PGE1组应用前列腺素E1注射液0.1μg/(kg·d)腹腔注射治疗14d。其他两组注射同量生理盐水。3组大鼠分别于术后第21 d处死,检测血清胆红素(DBIL)、谷丙转氨酶(ALT)、胆汁酸(TBA)以及血浆内毒素、D-乳酸、TNF-α、IL-6、肝脏NF-κB、Bcl-2(B淋巴细胞瘤-2)、ICAM-1(肝组织细胞间黏附分子-1)的表达,肝细胞上皮凋亡指数,观察肝脏病理组织学改变,并作比较。结果 OJ+PGE1组及OJ组大鼠肝脏各检测指标高于对照组(P0.05),但OJ+PGE1组增高的程度低于OJ组(P0.05),并且病理改变也较轻。结论 NF-κB信号通路在梗阻性黄疸大鼠肝损害中起重要作用,NF-κB参与的炎症反应是梗阻性黄疸引起肝脏损害的重要原因。     

阻断淋巴通道对梗阻性黄疸大鼠肠道细菌易位的影响

目的：从阻断淋巴通道角度探讨实验性梗阻性黄疸肠道细菌易位作用的机理。方法：结扎Wistar大鼠胆管，制作梗阻性黄疸模型，60只大鼠分为假手术组（A组）、梗阻性黄痘组（B组）和梗阻性黄疸＋乳糜管结扎组（C组），每组各20只，手术后15d剖腹分别抽取下腔静脉血、门静脉血、检测其内毒素、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）的含量，并对肠系膜淋巴结、肺组织行细菌培养，对末端小肠及肺组织行病理学检查。结果：大鼠梗阻性黄痘模型建立后15d，外周静脉和门静脉血浆中内毒素含量均明显升高（P〈0．01），同时外周静脉血浆TNF-α、IL-6含量、肠系膜淋巴结及肺组织细菌培养阳性率亦明显升高（P〈0．01），并伴有肺泡腔出血水肿及大量炎性细胞浸润；孔糜管结扎显著降低外周血内毒素、TNF-α、IL-6含量（P〈0．01），明确减轻肺细菌易位率及肺病理损伤程度（P〈0．01）。结论：阻断淋巴通道可减轻梗阻性黄疸时肠道细菌易位所致的高内毒素血症及炎症因子的过表达，改善肺损伤程度。     

黄芪对阻塞性黄疸幼鼠血清和肝组织转化生长因子β1水平的影响

目的 探讨黄芪对梗阻性黄疸幼鼠血清和肝组织转化生长因子β1(TGF-β1)的影响.方法 将40只Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、梗阻性黄疸组(OJ)、OJ 黄芪组.OJ 黄芪组术后每日腹腔注射黄芪注射液250 mg/100 g体重,共7d.检测实验鼠血清和肝组织TGF-β1的含量,光镜下观察各组肝组织的形态学变化.结果 OJ组、OJ 黄芪组血液TGF-β1水平显著高于正常对照组和假手术组,OJ 黄芪组肝组织TGF-β1水平较OJ组显著降低;OJ 黄芪组肝脏形态学改变较OJ组有所减轻.结论 黄芪有助于改善梗阻性黄疸幼鼠的肝脏形态结构,减轻肝脏纤维化的发生.     

5-脂氧合酶在梗阻性黄疸大鼠肝组织中的表达

目的 研究5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)在梗阻性黄疸大鼠(obstructive jaundice,OJ)肝组织中的表达.方法 将48只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(Sham组)、胆管结扎组(BDL)和AA-861干预组(AA-861组).分别于术后第7天、14天处死大鼠,鲎试剂测定血浆内毒素含量,用免疫组织化学法检测肝组织5-LOX的表达,ELISA法检测大鼠血清LTB4及TNF-α、IL-6水平;肝组织匀浆检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量,全自动生化分析仪测定血浆ALT、AST水平.结果 Sham组5-LOX轻微表达,BDL组明显表达,AA-861组各时相点相比,BDL组5-LOX表达显著降低,BDL、AA-861组较Sham组血浆内毒素、LTB4、TNF-α、IL-6、alt、AST水平明显升高,AA-861组较BDL组每个时相点LTB4、TNF-α、ALT、IL-6、ALT、AST水平明显降低,差异有显著性,AA-861组较BDL组肝组织MDA含量明显减少;SOD含量明显增高.结论 梗阻性黄疸时,5-LOX表达明显增加,使用AA-861后,5-LOX表达明显减少,肝损伤明显减轻.     

茵陈五苓散对梗阻性黄疸大鼠肝组织中钙蛋白酶的干预作用

目的：探索梗阻性黄疸时钙蛋白酶在大鼠肝组织中的表达变化及其意义;探讨梗阻性黄疸术后中药茵陈 五苓散对肝脏的保护作用及与钙蛋白酶表达的关系。方法：建立梗阻性黄疸SD大鼠肝损害模型,并将成年SD大鼠分 为假手术对照组(S组),梗阻性黄疸组(O组),梗阻性黄疸+中药茵陈五苓散组(OC组),梗阻性黄疸+生理盐水组(OW 组)。检测血清中TBIL,ALT,AST等生化指标含量;肝组织切片行HE染色观察肝组织的病理改变;免疫组织化学 和Western印迹测肝组织中钙蛋白酶表达变化;Real-time PCR检测大鼠肝组织钙蛋白酶基因表达量,观察梗阻性黄疸 时钙蛋白酶在大鼠肝组织中的表达变化。结果：随着造模时间的延长,钙蛋白酶蛋白及基因表达水平呈逐渐增加趋 势。梗阻性黄疸大鼠给予中药茵陈五苓散可以抑制钙蛋白酶的表达,减少因钙蛋白酶高表达引起的肝细胞损伤,改 善肝脏因梗阻引起的肝功能异常。钙蛋白酶基因表达水平与梗阻性黄疸肝损伤程度变化一致。结论：梗阻性黄疸患 者辩证使用茵陈五苓散可促进术后肝脏功能恢复,降低并发症发生率,从而为临床围手术期合理应用中药提供理论 依据。     

梗阻性黄疸大鼠肝组织中α-平滑肌肌动蛋白和肿瘤坏死因子-α的表达

[目的]探讨梗阻性黄疸大鼠肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达及其意义.[方法]采用胆总管结扎法建立梗阻性黄疸大鼠模型,4周后检测大鼠肝组织羟脯氨酸、透明质酸和层黏连蛋白的含量,观察肝组织的病理变化,并采用免疫组织化学染色方法观察大鼠肝组织中TNF-α和HSC标志物-αSMA的表达情况.[结果]胆总管结扎组与假手术对照组比较,大鼠肝组织中羟脯氨酸、透明质酸和层黏连蛋白的含量均明显增高,肝组织内可见大量胆管及纤维组织增生,纤维间隔形成,多数大鼠形成胆汁性肝硬化.胆总管结扎组大鼠肝组织内-αSMA阳性细胞主要分布在增生的胆管周围、纤维组织及间隔内,TNF-α阳性表达的肝细胞呈散在分布.[结论]梗阻性黄疸大鼠肝组织中羟脯氨酸、透明质酸和层黏连蛋白含量明显升高,可见TNF-α在肝细胞中表达,而TNF-α及α-SMA阳性细胞的分布特征不相同.     

维拉帕米对梗阻性黄疸大鼠肝组织核因子κB表达的影响

目的:探讨维拉帕米对梗阻性黄疸时肝组织核因子-κB(nuclear factor kappa B, NF-κB)表达的影响. 方法:将雄性SD大鼠48只随机分成胆管结扎组、维拉帕米组和假手术组.分别于术后第7天、14天处死大鼠,观察肝组织NF-κB p65表达、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量以及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)的变化. 结果:维拉帕米组肝组织NF-κB p65表达、MDA含量及血清TNF-α,IL-6水平均明显低于胆管结扎组(P＜0.05或P＜0.01). 结论:维拉帕米可下调肝组织NF-κB的表达,减轻梗阻性黄疸时肝损伤.     

健脾活血方对酒精复合内毒素脂多糖诱导的肝损伤大鼠库普弗细胞活化信号通路的干预

目的:观察健脾活血方对酒精复合内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的肝损伤大鼠库普弗细胞活化信号通路的影响。方法:采用Lieber-Decarli酒精饮料饲养6周诱导的酒精性肝损伤模型,分设正常组,无酒精饮料组,酒精饮料组和酒精饮料加健脾活血方组,造模第3周起灌胃给药或蒸馏水至第6周末,各组再以LPS 10 mg/kg一次性灌胃,3.5 h后取材。检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)活性和肝组织甘油三酯(triglyceride,TG)含量;HE染色观察大鼠肝组织病理改变;CD68免疫组化观察库普弗细胞活化状态;ELISA法检测门脉血浆肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量;Western-blotting方法检测肝组织TNF-α、磷酸化的IκB(phosphorylation-IκB,P-IκB)、Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、CD68蛋白表达。结果:经健脾活血方干预后,大鼠肝脏组织病理损伤减轻,肝组织TG含量以及血清ALT活性和门脉血浆TNF-α含量下降;同时,大鼠肝脏TNF-α、P-IκB、TLR4和CD68蛋白表达明显减轻。结论:健脾活血方对酒精复合LPS诱导的肝损伤大鼠CD68、TLR4、P-IκB和TNF-α具明显抑制作用。     

雷帕霉素对大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤的保护作用

目的：评价雷帕霉素（RAPA）对大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤的影响。方法：健康雄性sD大鼠24只随机分为3组,每组8只。假手术组（A组）大鼠仅接受麻醉后开腹,游离肝叶及相关血管后关腹;对照组（B组）采用肝脏冷缺血再灌注模型,分别采用门静脉插管和肝下下腔静脉缺口作为灌注道和流出道,用4℃乳酸林格氏液对肝脏进行冷灌注20min;实验组（C组）大鼠术前连续3d给予10mg／（kg·d）雷帕霉素灌胃,手术操作同B组。3组大鼠均于再灌注24h后经下腔静脉采血离心获取血清,测定血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）浓度及天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）的含量。取血后处死大鼠获取肝脏标本,用于检测肝组织中丙二醛（MDA）的含量及超氧化物歧化酶（SOD）的活性,光镜下观察肝组织病理学改变。结果：B、C组血清中TNF-α和IL-6的浓度、AST、ALT的含量以及肝组织MDA的水平高于A组,而SOD活性降低（P〈0．05）;C组除SOD活性比B组有所升高外,其余指标均低于B组（P〈O．05）。A组肝脏组织形态结构未见异常,B、C组均见肝细胞损伤,C组损伤较B组减轻。结论：术前给予RAPA能减轻大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤。