天麻对束缚急性应激大鼠下丘脑酪氨酸羟化酶的表达影响

目的：实验观察灌胃天麻水提取物对束缚应激火鼠下匠脑酪氨酸羟化酶（TH）遗传因子及蛋白质表达的影响,进一步探讨天麻的镇静作用机制。方法：分别取实验组、对照组及正常大鼠的下丘脑组织,通过逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和蛋白免疫印迹法（Western Blotting）比较TH基因及蛋白质的表达。结果：与正常组相比对照组大鼠下丘脑组织的TH基因和蛋白质表达均明显增高（P〈0．01）;天麻水提取物灌胃（40mg／kg）实验组大鼠下丘脑组织的TH基因和蛋白质表达与对照组相比均明显降低（P〈0.05）。结论：天麻可抑制急性应激而增高的TH的活性,而发挥镇静调节作用。     

左旋四氢巴马汀对黑质、蓝斑、尾核中酪氨酸羟化酶和多巴胺—β—羟化酶活力的影响

用放射性同位素法测定大白鼠酪氨酸羟化酶(TH)和多巴胺—β—羟化酶(DβH)的活力,研究药物对它们的影响:1.DA受体拮抗剂氟哌啶醇和左旋四氢巴马汀的作用不完全相同,氟哌啶醇增强尾核的TH酶活力较明显,而左旋四氢巴马汀以抑制篮斑核TH酶活力为明显;2.排空剂利血平不影响TH和DβH两酶的活力。     

电痉挛刺激对大鼠黑质酪氨酸羟化酶和中缝核色氨酸羟化酶表达的影响

目的观察电痉挛刺激(ECS)对Sprague-Dawley大鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)和中缝核色氨酸羟化酶(TPH)表达的变化,探讨ECS对黑质多巴胺和中缝核5-羟色胺神经元活性的影响。方法将大鼠随机分为对照组、伪ECS组、单次ECS组和重复ECS组。对照组大鼠未给予任何处理,伪ECS组大鼠给予不通电ECS,单次ECT组大鼠给予1次ECS,重复ECS组大鼠给予每日1次ECS,连续14 d。运用免疫荧光技术检测黑质TH和中缝核TPH的阳性细胞数和平均吸光度值。结果免疫荧光技术检测结果显示,对照组、伪ECS组、单次ECS组大鼠黑质TH和中缝核TPH阳性表达神经元个数和神经元纤维光强度比较差异均无统计学意义(P>0.05),而重复ECS组大鼠黑质TH和中缝核TPH阳性表达神经元个数较对照组、伪ECS组和单次ECS组增多(P<0.05),神经纤维光强度较对照组、伪ECS组、单次ECS组增加(P<0.05)。结论重复ECS可促进黑质TH和中缝核TPH的表达,表明重复ECS上调了多巴胺和5-羟色胺神经元的活性。     

酪氨酸羟化酶在肾上腺髓质增生大鼠肾上腺组织中的表达与意义

目的 :探讨酪氨酸羟化酶 (TH)蛋白在肾上腺髓质增生 (AMH)大鼠肾上腺组织中的表达与肾上腺髓质增生的关系。方法 :雄性Wistar大鼠随机分为 2组 :A组 (正常对照组 ) ,B组 (肾上腺髓质增生组 ) ,每组 2 0只。用利血平诱导肾上腺髓质增生大鼠模型。于 6周末用免疫组化的方法检测两组大鼠肾上腺组织中TH的表达 ,同时检测血清中的NE、E和 2 4h尿 3 甲氧 4 羟基苦杏仁酸 (VMA)的含量。结果 :6周末肾上腺组织中TH的表达肾上腺髓质增生组明显高于正常对照组 (P <0 .0 1 ) ,且与血清中的NE、E和 2 4h尿VMA的含量呈正相关 (r =0 .895 ,0 .6 4 6 ,0 .6 6 7,P <0 .0 1 )。结论 :肾上腺髓质增生大鼠肾上腺组织中TH的表达明显增强 ,且与肾上腺髓质增生病变程度有关。     

静宁颗粒对注意缺陷多动障碍模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴及多巴胺的影响

目的 探讨静宁颗粒对注意缺陷多动障碍(Attention-deficit hyperactivity disorder,ADHD)的作用机制.方法 将50只雄性自发性高血压大鼠(SHR)按随机数字表法分为静宁颗粒高、中、低剂量组,盐酸哌甲酯组及模型组,每组10只.同时将10只同龄Wistar大鼠设为正常组.正常组、模型...     

肾上腺嗜铬细胞的超微结构与多巴胺-β-羟化酶,苯乙胺-N-甲基转移酶的免疫细胞化学定位

以一般电镜技术,及用抗大鼠多巴胺-β-羟化酶(DβH)、苯乙胺-N-甲基转移酶(PNMT)血清作免疫细胞化学染色后,对大鼠、猫和豚鼠肾上腺嗜铬细胞进行电镜观察。结果显示:大鼠和猫嗜铬细胞,按所含颗粒的不同电子密度,可明显区分为肾上腺素细胞、去甲肾上腺素细胞和混合颗粒细胞。猫还有小颗粒嗜铬样细胞。DβH和PNMT阳性反应产物均定位于大鼠、豚鼠和猫嗜铬细胞的嗜铬颗粒内,颗粒形状有环形和致密两种。细胞基质和细胞器均无免疫反应产物沉着。     

乐果对大鼠纹状体和血清中多巴胺-β-羟化酶活性的影响

 目的 观察乐果染毒对大鼠大脑纹状体和血清中多巴胺-β-羟化酶(dopamine-β hydroxylases,DβH) 活性变化的影响,对乐果中毒机制作进一步的探讨。方法 56只雄性SD大鼠随机分为对照组(生理盐水,n=8)和乐果染毒低(38.9 mg/kg,n=8)、中(83.7 mg/kg,n=8)和高(180 mg/kg,n=32)3个剂量组,腹腔一次注射染毒。高剂量组大鼠分别在给药后0.5、2、8、24 h断头处死取血制备血清待测,并分离脑组织纹状体,生理盐水匀浆待测。其他组动物在给药后2 h断头处死,同样方式取样供分析。利用DβH将酪胺代谢为真蛸胺原理检测DβH活性。另取正常大鼠血清和纹状体匀浆,体外乐果染毒,观察其对DβH抑制状况。结果 给予不同剂量乐果对大鼠纹状体和血清DβH活性均有抑制作用,并随剂量增加而加深,存在剂量 效应关系(r=-0.996 7, P<0.05)。乐果高剂量(180 mg/kg)染毒后大鼠大脑纹状体和血清中DβH活性与对照组相比,在不同时程观察点差异均有统计学意义(P<0.05),随时程增加抑制也加深,24 h内时程效应关系(P<0.05)明确。体外乐果对纹状体和血清DβH活性均有抑制作用,并随剂量增加而加深,有剂量 效应关系(r=-0.891 2, P<0.05),但在高浓度有饱和现象。结论 大鼠大脑纹状体和血清中DβH水平有随染毒剂量和时程的增加而抑制加深的趋势,存在剂量效应和时程效应关系。     

大鼠纹状体突触体酪氨酸羟化酶自身调节的研究

依赖Ｃａ２＋／ＣａＭ的ＰＫⅡ和依赖Ｃａ２＋／ＰＩ的ＰＫＣ对大鼠纹状体突触体的磷酸化均显著激活酪氨酸羟化酶（ＴＨ）的活性，增加Ｌｄｏｐａ的生成。选择性Ｄ２受体激动剂ＬＹ１７１５５５不影响ＰＫⅡ和ＰＫＣ对ＴＨ的磷酸化激活。ＣａＭ拮抗剂Ｗ７和去除反应液中的Ｃａ２＋均不影响Ｋ＋６０ｍｍｏｌ／Ｌ去极化对纹状体ＴＨ的激活，而ＰＫＣ抑制剂多粘菌素Ｂ却能完全阻滞Ｋ＋去极化对ＴＨ的激活效应。研究结果表明：（１）多巴胺（ＤＡ）自身受体介导的自身递质生物合成的负反馈调控与ＰＫⅡ和ＰＫＣ对ＴＨ的磷酸化激活不偶联；（２）Ｋ＋去极化对ＴＨ的激活是由ＰＫＣ介导的，不受ＤＡ自身受体的调控。     

甲状腺机能亢进症患者血浆多巴胺-β-羟化酶(DBH)活性降低

本文观察到甲亢(Gravcs病)病人未治疗组血浆DBH活性低于正常人组(P<0.05); 而甲亢缓解组DBH活性又恢复正常水平,与未治疗组相比,差异有显著性(P<0.05)。提示甲亢病人交感神经亢进症状群的表现可能系甲状腺激素和多巴胺共同作用所引起。     

三仁汤对脾胃湿热证大鼠行为学及下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

目的观察脾胃湿热证大鼠的行为学和HPA轴改变情况,以及三仁汤的作用机理。方法将50只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、三仁汤(高、中、低剂量)组,通过旷场实验观察大鼠行为学改变,同时采用放射免疫法检测大鼠血浆促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、血清皮质醇(Cor)的水平。结果造模后大鼠行为发生改变,三仁汤各剂量组对大鼠行为均有恢复作用,但各剂量组间无显著性差异。造模成功后的各组大鼠血浆CRH、ACTH及血清Cor升高,三仁汤治疗组各剂量对其均有降低作用,以中剂量组效果最好(P<0.01)。结论三仁汤通过调节神经-内分泌系统对脾胃湿热证大鼠行为和亢进的HPA轴有干预作用,这可能是三仁汤清热祛湿的机制之一。     

基于血清代谢组学的天麻炮制前后对小鼠生物学效应影响

目的:本研究以中药整体观为指导,运用血清代谢组学的方法,从整体代谢角度分析天麻生药与饮片干预小鼠后可能存在的血清内源性代谢物的变化,筛选并鉴别出差异代谢物和代谢途径,从而评价和探讨天麻炮制前后对于机体代谢的影响。方法:通过不同时段(1,3,5 d)灌胃小鼠,利用LC-MS技术检测不同时段的小鼠血液代谢图谱,采用主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)法,变量重要性投影(VIP)和t检验筛选潜在差异代谢标志物,从整体代谢角度分析天麻炮制前后生物学效应的差异。结果:通过对小鼠体内代谢物质以及代谢通路的分析,确定15个差异代谢物。在血清代谢的层面,炮制后天麻与生药有显著的生物学效应差别。结论:天麻生药经过炮制以后,会引起氨基酸代谢、肠道菌群代谢等多条代谢通路在不同层面协同发挥作用,具有多靶点性,产生与天麻生药不同的功效,为探讨天麻炮制增效机制提供理论和数据支撑。     

急性脑缺血大鼠边缘系统谷氨酸及其受体对下丘脑垂体肾上腺轴的影响

目的观察脑缺血／再灌流过程中海马和下丘脑的谷氨酸、谷氨酸受体（ＧｌｕＲ）的变化特征及其对下丘脑－垂体－肾上腺轴（ＨＰＡ）活动的影响。方法应用高效液相色谱、受体的放射配体结合分析、核酸原位杂交、放射免疫分析分别监测大脑中动脉闭塞大鼠海马和下丘脑的谷氨酸含量、促皮质释放激素（ＣＲＨ）信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）表达水平、血浆促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）浓度变化。结果动脉闭塞１５分钟，下丘脑、海马两部位的谷氨酸含量迅速增加，缺血１小时达高峰，复流后迅速回落至基线水平；再灌流２４小时再次中度升高，并持续至４８小时后缓慢回降。缺血期海马、下丘脑的ＧｌｕＲ下调，再灌流期呈现典型的上向同种特异性正向调节。缺血１小时颞皮质，海马、下丘脑等区ＣＲＨｍＲＮＡ表达明显活跃，并持续至再灌流９６小时，血浆ＡＣＴＨ浓度同步升高。再灌流损伤高峰期下丘脑谷氨酸含量与ＣＲＨｍＲＮＡ阳性表达细胞数、血浆ＡＣＴＨ浓度间均呈显著正相关。结论谷氨酸参与了急性脑缺血特定条件下ＨＰＡ的异常活动，可能是一个重要的触发因子     

糖皮质激素对肥胖大鼠和普通大鼠下丘脑神经肽Y mRNA的影响

目的:研究糖皮质激素对肥胖大鼠和普通大鼠下丘脑中神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)mRNA表达的影响。方法:高脂饲料构建肥胖大鼠模型,肥胖大鼠和普通大鼠分别随机分为生理盐水组、小剂量组和大剂量组,分别连续20天腹腔注射生理盐水0.2 ml/100 g、琥珀酸氢化可的松5 mg/kg和15 mg/kg。并观察其摄食变化,用实时荧光定量PCR方法,检测大鼠下丘脑中NPY mRNA的表达水平。结果:应用大剂量糖皮质激素后普通大鼠和肥胖大鼠的摄食量低于盐水组(P<0.05);应用大剂量糖皮质激素后普通大鼠和肥胖大鼠的下丘脑中NPY mRNA的表达水平低于盐水组(P<0.01);应用小剂量糖皮质激素后普通大鼠的下丘脑中NPY mRNA的表达水平低于盐水组(P<0.01)。结论:大剂量糖皮质激素使普通大鼠和肥胖大鼠食欲下降,抑制肥胖大鼠和普通大鼠NPY mRNA的表达;小剂量糖皮质激素抑制普通大鼠NPY mRNA的表达,NPY在食欲调节中起重要作用。     

缺血对胰岛素抵抗大鼠Apelin mRNA、APJ mRNA表达的影响

目的：研究胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）大鼠心肌Apelin、孤儿G蛋白偶联受体（APJ）表达及缺血对它的影响。方法：将24只SD大鼠随机分三组,即IR组、IR＋缺血组和对照组,每组8只。采用Real-time-PCR法测定心肌组织Apelin mRNA和APJ mRNA表达水平。结果：IR组Apelin mRNA、APJ mRNA相对表达量较对照组升高,两组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。IR＋缺血组Apelin mRNA、APJ mRNA相对表达量较对照组降低,两组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：大鼠心肌组织存在Apelin、APJ表达。在胰岛素抵抗大鼠中,心肌组织Apelin、APJ代偿性表达增加,推测Apelin、APJ可能参与了胰岛素抵抗的发生,对心脏发挥保护性作用。胰岛素抵抗大鼠心肌缺血后,心肌组织Apelin、APJ表达明显下降,推测可能与Apelin代偿不足或由于肾素-血管紧张素-醛固酮系统激活,反馈性抑制Apelin、APJ表达有关,Apelin、APJ对心脏的保护作用减弱。     

次声作用引起大鼠下丘脑c—fos mRNA与CRF mRNA的表达

目的：了解次声引起应激反应的中枢机制。方法：采用反转录ＰＣＲ方法,研究了８Ｈｚ １２０ｄＢ次声作用后不同时间引起大鼠下丘脑ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ及促肾上腺皮质激素释放因子（ＣＲＦ）ｍＲＮＡ的表达情况。     

天麻地上部分降压作用的实验研究

目的:观察天麻地上部分对肾型高血压大鼠血压的影响。方法:建立两肾一夹型(模型)大鼠高血压模型,以天麻块茎为对照,给药后测定并比较各组大鼠的血压,心率及血浆AngII、A1d含量,考察其降压作用。结果:天麻地上部分能明显降低肾型高血压大鼠的收缩压。结论:天麻地上部分具有降压作用。     

急性低温低氧对大鼠下丘脑NOS及c-fos表达的影响

目的：探讨急性低温低氧对大鼠下丘脑ＮＯＳ及ｃ－ｆｏｓ表达的影响。方法：用ｃ－ｆｏｓ免疫组化技术和ＮＡＤＰＨ－ｄ组化法研究急性低温低氧大鼠下丘脑内ｃ－ｆｏｓ原癌基因的表达,一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的分布及两者的共存。