IGFBP-rP1与癌变:抑癌基因抑或癌基因蛋白?

ＩＧＦ(ｉｎｓｕｌｉｎｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ)信号传导系统主要由ＩＧＦｓ(包括ＩＧＦⅠ和Ⅱ )、ＩＧＦ受体 (ＲⅠ ,ＲⅡ )、ＩＧＦＢＰｓ (ｉｎｓｕｌｉｎｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎｓ)和ＩＧＦＢＰ蛋白水解酶四部分组成〔1〕。ＩＧＦＢＰｓ共有 15个 ,根据ＩＧＦＢＰｓ与ＩＧＦ亲和力的高低 ,可把ＩＧＦＢＰ超家族分成高亲和力和低亲和力两组〔2〕。前者包括ＩＧＦＢＰ 1～ 6 ,与ＩＧＦ有较高的亲和力 ;后者包括ＩＧＦＢＰ ｒＰ(ＩＧＦＢＰ ｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ) 1～ 9〔2〕。ＩＧＦＢＰ ｒＰ1是…     

病毒致细胞程序性死亡分子机制的研究

细胞凋亡 (Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)又称为细胞程序性死亡 ,是细胞自主死亡的过程 ,在组织发生、免疫系统克隆选择、机体内环境稳定等诸多方面有着广泛的生物学意义[1] ,在某些疾病 ,如肿瘤、艾滋病等发病机制中也具有重要意义。参与细胞凋亡基因很多 ,主要有ｂｃ1 2、ｃ ｍｙｃ、ｐ5 3、ｃｅｄ 3、Ｆａｓ/Ａｐｏ 1等。近年研究发现 ,病毒感染是调节细胞凋亡的重要因素 ,病毒感染后不仅可通过自身基因的表达激活或抑制细胞凋亡的发生 ,也可与细胞凋亡调节基因一起共同参与凋亡的调控[2 ] 。下面拟就细胞凋亡的主要相关基因、病毒诱导或抑制细胞…     

PTEN与信号转导及肿瘤

ＴＥＮ[1] (ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅａｎｄｔｅｎｓｉｎｈｏｍｏｌｏｇｙｄｅｌｅｔｅｄｏｎｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｔｅｎ)又名ＭＭＡＣ1 [2 ] (ｍｕｔａｔｅｄｉｎｍｕｔｉｐｌｙａｄａｎｃｅｄｃａｎｃｅｒ 1 )和ＴＥＰ1 [3 ] (ＴＧＦ -βｒｅｇｕｌａｔｅｄａｎｄｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌ -ｒｉｃｈｅｄｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ 1 ) (以下均称为ＰＴＥＮ) ,是 1 997年由 3个研究小组先后发现的一个具有双特异磷酸酶活性的抑癌基因。ＰＴＥＮ基因异常广泛存在于人类多种恶性肿瘤 ,如恶性神经胶质瘤、前列腺癌、子宫内膜癌、黑色素瘤等…     

碱性成纤维细胞生长因子抗体的研究进展

碱性成纤维细胞生长因子 (ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ)是一种重要的多肽生长因子 ,也是ＦＧＦ家族中原型成员之一。从 1 974年Ｇｏｓｐｏ ｄａｒｏｗｉｃｚ等[1 ] 从牛脑中分离出ＦＧＦ以来 ,近二十多年研究表明 ,ｂＦＧＦ在促进血管生成[2 ] 、创伤愈合[3] 、骨骼修复[4] 、神经营养与修复[5] 、眼晶体再生[6] 以及胚胎的发育与分化[7] 方面均显示出生物学活性。近年研究发现ｂＦＧＦ在恶性肿瘤组织中有强烈表达 ,并与肿瘤病理分级、分期呈正相关 ,同时血清中ｂＦＧＦ水平亦明显增高 ,这提示ｂＦＧ…     

IGF—1R在肿瘤治疗中的研究进展

ＧＦ１Ｒ 为跨膜蛋白，其信号转导途径与肿瘤的发生、发展和转移密切相关。在多种肿瘤细胞已证明，以抗ＩＧＦ１Ｒ 抗体封闭ＩＧＦ１Ｒ，能使ＩＧＦ１Ｒ 不能接受和转导相应配体的信号。他莫茜芬、乙醇、Ｒａｐａｍｙｃｉｎ、苏拉明、除莠霉素Ａ 及生 长激素释放激素的拮抗剂ＭＺ４７１ 可通过不同机制干扰ＩＧＦ１Ｒ介导的信号转导，在肿瘤治疗中有研究前景。以反义ＩＧＦ１ＲＲＮＡ 封闭ＩＧＦ１Ｒ基因及在某些肿瘤进行了以某肿瘤抑制基因抑制ＩＧＦ１Ｒ 表达的肿瘤基因治疗亦在研究中。     

急性心肌梗死患者溶栓前后血清VEGF水平的变化及临床意义

血管内皮细胞生长因子 (ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃ ｔｏｒ,ＶＥＧＦ)是近年发现的一种促血管生长因子 ,其相对分子质量 (Ｍｒ)为 3.5× 10 4～ 4.5× 10 4属于糖蛋白 ,由两个Ｍｒ为 1.7× 10 4～ 2 .2× 10 4相同的亚单位经二硫键形成二聚体[1 ] 。心肌细胞、平滑肌细胞及肿瘤细胞均可分泌ＶＥＧＦ。缺血、缺氧是刺激ＶＥＧＦ分泌的重要因素[2 ] ,如急性心肌梗死 (ａｃｕｔｅｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ ,ＡＭＩ)时 ,由于心肌缺血、损伤及坏死等病变 ,可导致血清ＶＥＧＦ的水平发生变化。静…     

急性髓细胞白血病中胰岛素祥生长因子—2基因印迹的研究

目的 了解急性髓细胞白血病（ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｓｅｎｉａ,ＡＭＬ）中胰岛样生长因子－２（ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ－２,ＩＧＦ－２）基因的印迹状态。方法 根据ＩＧＦ－２基因第９外显子具有Ａｐａ１位点多态性,利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合限制生长度多态性技术,对２６例ＡＭＬ患者骨髓细胞ＩＧＦ－２基因进行杂合子筛选,并进一步检测杂合子个体该基因的印迹丢失（ｌｏ     

胃癌中Her-2/neu过表达与基因扩增及其意义

Ｈｅｒ 2 /ｎｅｕ基因编码的相对分子质量 185 0 0 0的蛋白质(Ｐ185 )能加速细胞运动 ,促进癌细胞转移。已证实有Ｈｅｒ 2 /ｎｅｕ基因扩增的乳腺癌患者 (约占乳腺癌患者 2 5 % )手术后易复发 ,生存期短并对常用的化疗药物如环磷酰胺、5 氟尿嘧啶等不敏感[1,2 ] 。本项研究的目的是通过双色荧光原位杂交 (ｄｕａｌｃｏｌｏｒｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ ,ＦＩＳＨ)技术和免疫组织化学技术检测各类型胃癌细胞中Ｈｅｒ 2 /ｎｅｕ基因数量及蛋白表达并探讨其临床意义。一、材料和方法1.病例 :收集我院 19…     

碱性成纤维细胞生长因子与肝素结合性质的研究进展

碱性成纤维细胞生长因子 (ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ ,ｂＦＧＦ)是成纤维细胞生长因子 (ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｓ ,ＦＧＦｓ)这一大家族的原型成员 ,自 1974年首次从牛垂体中分离ｂＦＧＦ以来[1] ,ＦＧＦ家族的成员目前已增加至 19位[2 ] 。ＦＧＦｓ各成员结构相关、功能相似 ,调节多种细胞的生长、分化、迁移、凋亡 ,此外 ,该家族成员均能结合肝素或硫酸肝素[3 ] 。ｂＦＧＦ和硫酸肝素的结合是它所具有的复杂生化调节机制的基础。肝素和ｂＦＧＦ及其受体三者共同组成复杂的ｂＦＧＦ…     

胰岛素样生长因子(IGFs)与胎儿宫内生长迟缓(IUGR)的探讨

胎儿宫内生长迟缓 (ＩＵＧＲ)是指足月胎儿体重 <2 5 0 0ｇ或胎儿体重低于同孕龄儿体重。是妊娠的重要并发症 ,也是造成围产儿死亡的重要原因之一。我国发病率为 6 39% ,其死亡数为正常新生儿的 4～ 6倍[1 ] 。ＩＵＧＲ患儿不仅出生时的体重及身高低于正常新生儿 ,而且在以后的成长中也表现出对某些疾病较高的易感性体格及智力发育的迟缓 ,如心血管疾病、代谢性疾病 ,尤其是非胰岛素依赖性糖尿病等发病率高于正常人。近年来众学者研究证明 ,胰岛素样生长因子 (ＩＧ Ｆｓ)是胎儿在宫内发育过程中起重要作用的生长因子 (ＩＧＦｓ有两种异构体…     

缺氧诱导因子-1与肿瘤

缺氧诱导因子 1(ｈｙｐｏｘｉａ ｉｎｄｕｃｉｂｌｅｆａｃｔｏｒｌ,ＨＩＦ 1)是缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种转录因子。ＨＩＦ 1可调节多种靶基因如血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ) ,红细胞生成素等的表达 ,它的活性对维持肿瘤细胞的能量代谢、新血管生成、促进肿瘤增殖和转移起重要作用 ,且受多种因子如肿瘤抑制蛋白ＶＨＬ ,癌基因ｖ ｓｒｃ等的调控或影响。研究缺氧诱导因子与肿瘤的关系将为进一步地探索肿瘤的抗血管生成治疗提供新的思路和途径。一、ＨＩＦ 1的结构ＨＩＦ 1是一种异源二聚体ｂａｓｉｃ ｈｅｌｉｘ ｌｏｏｐ…     

DNA甲基化与胃癌关系的研究进展

胃癌是我国最常见的恶性肿瘤 ,多种研究表明 ,ｐ5 3、ｐ2 1、ｃ ｅｒｂＢ 2、ｃ ｍｙｃ等基因的突变、缺失等遗传学改变与胃癌的发生、发展密切相关。然而 ,只有部分或少部分胃癌中检测到有重要基因的突变 ,最近人们逐渐认识到基因表达的异常与肿瘤关系甚为密切。 1999年 ,在《自然》杂志上发表了一篇题为“癌症的ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃｓ时代来临”[1] 。同年 ,在《科学》杂志上也发表了一篇关于ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃｓ的文章[2 ] ,由此可见ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃｓ已成为国际研究热点。ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃｓ是ｇｅｎｅｔｉｃｓ(遗传学 )的…     

凋亡的双向调节机制

细胞凋亡的基本过程大致包括刺激期、信号传递期、效应期 (人类效应物半胱氨酸蛋白酶类总称ｃａｓｐａｓｅｓ)及死后期。在从线虫到人类不同有机体细胞凋亡的前几期研究中逐步认识到 ,凋亡的发生是细胞受促进性和抑制性双向因素共同调节的结果 ,已发现凋亡的双向调节机理分述如下。一、含死亡区分子的作用在凋亡的刺激期 ,细胞接受的刺激因素包括各种细胞因子如肿瘤坏死因子 (ＴＮＦ)、ＦａｓＬ、干扰素 (ＩＦＮ) γ、白细胞介素(ＩＬ) 6 ,某些生长因子如神经生长因子 (ＮＧＦ)、内皮生长因子(ＥＧＦ)、血小板源生长因子 (ＰＤＧＦ)等 ,这…     

人IFN－γcDNA逆转录病毒载体的构建及其在Lewis肺癌细胞的稳定表达

应用分子克隆技术构建了含８４３ｂｐ的全长人ＩＦＮ－γｃＤＮＡ的逆转录病毒表达载体Ｎ２／ＩＦＮ，采用磷酸钙共沉淀方法转染包装细胞ΨＣＲＥ和ΨＣＲＩＰ，并能得到较高滴度的含病毒颗粒上清。然后应用ΨＣＲＩＰ细胞培养上清的复制缺陷性病毒颗粒感染Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞（ＬＬＣ），经过Ｇ４１８筛选克隆得到一株能稳定分泌ＩＦＮ（６４００Ｕ／Ｍ）的克隆，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹证实ＩＦＮ－γ基因已插入ＬＬＣ基因组。结果表明，该逆转录病毒载体系统能有效地介导基因转移，并能使目的基因在靶细胞稳定表达。结果为肿瘤基因治疗及制备新型肿瘤疫苗奠定了基础。     

p33ING1基因及其研究进展

抑癌基因对于肿瘤的发生具有抑制作用 ,细胞内一种或多种抑癌基因的失活可以导致肿瘤的发生。迄今 ,在为数不多的抑癌基因中 ,与肿瘤关系最密切、研究最为广泛的可能是ｐ5 3基因。近年来又发现了一种与ｐ5 3密切相关的新基因ｐ3 3ＩＮＧ1,它对ｐ5 3功能的发挥可能起至关重要的作用。一、ｐ3 3ＩＮＧ1的发现1996年 ,Ｇａｒｋａｖｔｓｅｖ等[1] 在减数杂交的基础上 ,用一种ｇｅｎｅｔｉｃｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒｅｌｅｍｅｎｔ(ＧＳＥ)方法 ,克隆出一个新基因。用该基因ｃＤＮＡ片段反向插入表达载体并转染小鼠永生化乳腺上皮细胞后 ,接种于裸鼠…     

表达绿色荧光蛋白的重组腺病毒伴随病毒的产生

来源于维多利亚水母 (Ａｅｑｕｏｒｅａｖｉｃ ｔｏｒｉａ)的绿色荧光蛋白 (ｇｒｅｅｎｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｐｒｏｔｅｉｎ ,ＧＦＰ)是近年来发现的一种新的报告基因 ,由于其具有产生荧光不需任何底物或辅助因子、可以活体观察等特点 ,因此在目前的基因转移、基因治疗研究中得到了广泛的应用[1 ] 。重组腺病毒伴随病毒 (ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔａｄｅｎｏ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｖｉｒｕｓ,ｒＡＡＶ)具有安全性好、可介导外源基因长期稳定表达等特点 ,是目前比较理想的基因治疗载体。构建表达ＧＦＰ的ｒＡＡＶ载体 (ｒＡＡＶ ＧＦＰ)对于…     

血小板衍生性生长因子对体外培养人肾小球系膜细胞生长的影响

目的观察血小板衍生性生长因子（ＰＤＧＦ）对体外培养的人肾小球系膜细胞（ＭｓＣ）生长、基质合成和分泌以及ｃ┐ｍｙｃ癌基因表达的影响。方法体外培养的ＭｓＣ培养液中掺入５┐溴脱氧尿嘧啶（ＢｒｄＵ）,采用ＢｒｄＵ单克隆抗体免疫组化法检测ＭｓＣ的增殖情况;应用［３Ｈ］脯氨酸掺入酶消化法测定ＭｓＣ细胞内、外胶原蛋白总量;采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹法检测纤维连接蛋白（ＦＮ）、Ⅳ型胶原、核癌基因ｃ┐ｍｙｃｍＲＮＡ表达结果。结果（１）ＢｒｄＵ掺入法的阳性细胞标记指数在对照组为１９．５％,ＰＤＧＦ组为３４．５％（Ｐ＜０．０１）;（２）ＭｓＣ经ＰＤＧＦ作用后,细胞内、外胶原蛋白量分别为２．６９±０．６０％和３．８７±０．６５％,较正常对照组１．２５±０．５０％和１．６１±０．５１％明显增加（Ｐ＜０．０１）;（３））Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹法显示ＰＤＧＦ组细胞的ＦＮ、Ⅳ型胶原及ｃ┐ｍｙｃｍＲＮＡ的表达明显高于正常组。结论ＰＤＧＦ不仅可刺激肾小球ＭｓＣ的增殖和胶原蛋白合成,而且可从基因转录水平增加ＦＮ、Ⅳ型胶原及ｃ┐ｍｙｃ癌基因的表达。由此推断ＰＤＧＦ在肾小球疾病的发生、发展中可能起着重要作用     

基因组印迹与糖尿病

基因组印迹是来自精子和卵子的等位基因或染色体在发育过程中,由于甲基化程度不同导致单等位基因表达。近年来的研究表明,新生儿暂时性糖尿病（TNDM）与染色体6q24父源印迹基因过量表达有关,进一步研究发现6q24附近的ZAC/HYMAI基因父源复制以及ZAC/HYMAI基因CpG岛的异常甲基化可能在TNDM发生中起关键作用。     

病毒与非病毒介导的绿色荧光蛋白基因转导的比较研究

自 1992年绿色荧光蛋白 (ＧＦＰ)基因的ｃＤＮＡ被成功克隆以来 ,由于ＧＦＰ结构稳定、在受到蓝光或紫外光照射时可自发发出绿色荧光 ,而这一过程不需要其他共刺激因子、底物或其他基因产物的协助 ,故在生物医学领域的应用日益广泛[1,2 ] 。因此 ,深入研究各种基因转导方法在ＧＦＰ基因转导方面的效率及优缺点、分析ＧＦＰ对细胞生长速度和生物学行为的影响等 ,对于合理应用ＧＦＰ十分重要。一、材料与方法1 重组质粒 :ＧＦＰ真核表达质粒ｐＥＧＦＰ Ｎ1购自Ｃｌｏｎｔｅｃｈ公司。ＧＦＰ重组逆转录病毒质粒ｐＬＮＣＸ ＥＧＦＰ是我们自己构…     

印迹基因H19和IGF2的遗传学特征与生物学意义

印迹基因Ｈ１９和ＩＧＦ２的遗传学特征与生物学意义张春莲颜建华孙永玉基因组印迹（ｇｅｎｏｍｉｃｉｍｐｒｉｎｔｉｎｇ）是新近发现的依靠单亲传递某种遗传性状的遗传规律。印迹基因指源自双亲的两个等位基因中一方不表达或者很少表达的基因。印迹的机理和印迹本身的分...