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1.
目的探讨结核病患者手术切除标本进行结核分枝杆菌检测的临床意义。方法应用罗氏培养、液体培养及定量RT—PCR方法检测12例不同化疗疗程后行手术,术中取材的标本中结核分枝杆菌。结果不同化疗疗程的手术标本中可以应用罗氏培养法及液体培养法检测到结核分枝杆菌,并有病例存在结核分枝杆菌持留菌特征性ICL及ACR的高表达。结论手术标本是结核菌培养及持留菌检测的很好材料,对患者术后化疗有指导意义。  相似文献   

2.
目的探讨结核病患者手术切除标本进行结核分枝杆菌检测的临床意义。方法应用罗氏培养、液体培养及定量RT—PCR方法检测12例不同化疗疗程后行手术,术中取材的标本中结核分枝杆菌。结果不同化疗疗程的手术标本中可以应用罗氏培养法及液体培养法检测到结核分枝杆菌,并有病例存在结核分技杆菌持留菌特征性ICL及ACR的高表达。结论手术标本是结核菌培养及持留菌检测的很好材料,对患者术后化疗指导有指导意义。  相似文献   

3.
目的通过建立体内外结核分枝杆菌持留状态模型,检测在不同条件和化疗阶段中结核分枝杆菌持留菌ICL、Acr及85B mRNA的表达变化,并探讨与化疗作用及复发的关系。方法建立体外结核分枝杆菌低氧培养及小鼠体内持留感染模型(Cornell模型的改进型),应用定量RT-PCR的方法检测结  相似文献   

4.
结核分枝杆菌持留状态体内外模型的建立与检测   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的建立体内外结核分枝杆菌持留状态模型,检测在不同条件和化疗阶段中结核分枝杆菌持留菌,探讨其与化学治疗的关系。方法应用低氧培养、定量逆转录聚合酶链反应测定结核分枝杆菌异柠檬酸裂解酶(ICL)、小分子热休克蛋白(Acr)及85B蛋白的mRNA表达变化的方法检测体内外模型中结核分枝杆菌持留菌。结果体外及动物模型中均存在结核分枝杆菌低氧培养阳性,体外模型中结核分枝杆菌ICLmRNA和Acr蛋白mRNA在低氧条件下表达逐渐增加,4d时显著增加,其对数值分别为(5.3±0.9)和(6.4±1.6)拷贝/ml,而85BmRNA在有氧条件下明显增加,10d时的对数值为(6.1±0.9)拷贝/ml,在低氧条件下无明显变化。在小鼠感染与治疗模型中,ICLmRNA在感染的2周和4周均有表达,在治疗4周后下降;AermRNA在感染4周及治疗4周不表达或表达很少,治疗8和10周表达量增加,10周的对数值为(6.2±1.7)拷贝/ml,治疗12周直至停药后4周仍有表达,停药4周的对数值为(3.0±1.6)拷贝/ml;而85B蛋白mRNA则在治疗前高表达,对数值为(6.4±1.1)拷贝/ml,随着治疗时间延长而逐渐降低,治疗12周时测定值为阴性。结论成功建立了结核分枝杆菌持留状态的体外及动物模型,ICLmRNA、Acr蛋白mRNA高表达可作为持留菌存在的标志,应用液体低氧培养并联合mRNA检测有可能检测到结核分枝杆菌持留菌。  相似文献   

5.
MPB64抗原检测快速诊断结核分枝杆菌的临床价值   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的比较痰涂片抗酸染色、改良酸性罗氏培养、MPB64的免疫胶体金法用于检测结核分枝杆菌特异性的分泌蛋白质MPB64,评价MPB64的免疫胶体金法在结核分枝杆菌快速检测中的应用价值。方法选取438例确诊肺结核患者痰液,进行痰涂片抗酸染色、7H9液体培养基和改良酸性罗氏培养基培养、基于MPB64的免疫胶体金法检测,对结果进行比较分析。并选取痰涂片确认为阳性的标本33例,用米氏7H9液体培养和基于MPB64的免疫胶体金法进行检出时间对比。结果痰涂片阳性率为14.8%,罗氏培养阳性率为20.7%,7H9液体培养阳性率24.8%,MPB64的免疫胶体金法阳性率为25.1%。基于MPB64的免疫胶体金法在培养的第15天检出32例阳性;而单纯的7H9液体培养加抗酸染色检测法在第15天只检出11例阳性。结论7H9液体培养配合基于MPB64的免疫胶体金法可以作为一种较为敏感和特异的检测结核分枝杆菌感染的方法,并可以有效的区分结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌。  相似文献   

6.
目的从手术切除的33例肺结核标本的细菌学结果评价外科治疗肺结核的意义。方法采集33例自2008年10月-2009年6月在北京胸科医院行肺结核手术的手术切除标本,将标本进行结核分枝杆菌罗氏培养及菌种鉴定和药物敏感试验,与术前痰菌结果进行比较。结果手术标本中结核分枝杆菌培阳率为72.7%(24/33),痰中结核分枝杆菌的培阳率为21.2%(7/33)。24例培养阳性的菌株进行药物敏感试验,显示均有不同程度的耐药性。对于影像学上显示已经稳定的纤维化、钙化病灶,结核分枝杆菌培养阳性率仍较高。结论手术治疗肺结核是避免复发和产生耐药结核病的有效手段之一。  相似文献   

7.
背景:发展中国家已经提出通过开展结核分枝杆菌(以下简称结核分枝杆菌)培养来加强结核病(TB)控制工作。目的:研究赞比亚国家结核病参比实验室自制的和商业生产的改良罗氏培养基(HLJ和CLJ),以及自动和手工的液体培养基(AMGIT和MMGIT)费用和成本效益。方法:费用是从供应商的角度根据每月平均结核分枝杆菌培养标本量来进行估算的。成本效益的估计是建立在研究期间收益。结果:4种培养方法,每个标本培养成本相当(均在28-32美元之间)。发现1个结核分枝杆菌阳性样本,使用手动液体培养MMGIT、自动液体培养AMGIT、商业生产的改良罗氏培养CLJ和实验室自制的改良罗氏培养HLJ,成本分别为197美元,202美元,312美元和340美元。4种培养方法,当培养标本量达到最大时,发现1个结核分枝杆菌阳性样本成本均高于95美元。当仅对涂片阴性的样本进行检测时,应用手动液体培养MMGIT确定1个额外的结核分枝杆菌阳性样本需要487美元,其他方法价格更高。结论:基于成本效益的理由,液体培养基相比传统的固体培养基更好,特别是液体培养基的产量大大高于传统罗氏培养基。结果表明:总体上,结核分枝杆菌培养成本较高,将培养扩展到标本量较低的基层防治机构可能会导致更高的成本。  相似文献   

8.
结核分枝杆菌药敏试验方法改进的探讨   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的 探讨改进结核分枝杆菌药敏试验方法。方法 以BACTEC法7H12B液体培基分离50例临床结核分枝杆菌菌株,经不同稀释后,直接接种于改良罗氏药敏培基上,与BACTEC法药敏结果对比,观察其耐药性。结果 1.7H12B液体培基中结核分枝杆菌菌液GI值500~900时,1ml相当于1mg结核分枝杆菌湿重的活菌(菌数10^6~7)。2.取7H12B液体培基的菌液直接接种于罗氏药敏培养基,其耐药结果与  相似文献   

9.
目的 进行环介导等温扩增法(LAMP法)快速检测结核分枝杆菌的临床验证与应用,评估该方法在结核病临床诊断中的效能。方法 选取广东6地市专业结核病防治机构(简称“结防机构”)的肺部不同疾病及健康人员的痰标本2129份,分别采用直接涂片法、罗氏固体培养法及LAMP法检测痰标本中结核分枝杆菌;另广州、汕头两市337例结核病患者的痰标本浓缩处理后进行实时荧光定量(qPCR)及LAMP两种方法检测。 结果 2129例痰标本中,直接涂片法、罗氏固体培养法和LAMP法的阳性检出率分别为13.2%(282/2129)、21.7%(463/2129)和20.3%(432/2129);同罗氏培养法相比,LAMP法灵敏度、特异度、阳性和阴性预测值分别为89.1%(432/485)、95.5%(1570/1644)、85.4%(432/506)和96.7%(1570/1623);337例浓缩处理后的痰标本qPCR阳性率为35.0% (118/337),LAMP阳性率为35.9% (121/337);LAMP法同直接涂片法检测、罗氏固体培养法和qPCR法比较,检测结果实际一致率分别为87.9%(Kappa值=0.612)、96.1%(Kappa值=0.89)和91.4%(Kappa值=0.812)。 结论 LAMP法用于痰标本中结核分枝杆菌检测,其效能同罗氏培养法及qPCR法相当,同直接涂片法相比,LAMP法能够大幅提高阳性检出率,具有很好的临床应用和推广前景。  相似文献   

10.
目的 探讨显微镜观察药物敏感度检测技术(MODS)对肺外结核的诊断价值.方法 采用24孔细胞培养板液体培养方法建立MODS.收集74份结核性胸膜炎患者的胸腔积液、63份结核性脑膜炎患者的脑脊液和18份非结核病患者胸腔积液和脑脊液标本,分别采用抗酸染色法、改良罗氏培养法和MODS进行结核分枝杆菌检测,对改良罗氏培养法和MODS培养获得的分枝杆菌采用免疫层析法鉴定,数据比较采用x2检验.结果 MODS、改良罗氏培养法和抗酸染色法 检测结核性胸膜炎的阳性率分别为58.1%(43/74)、18.9%(14/74)和6.8%(5/74);检测结核性脑膜炎的阳性率分别为54.0%(34/63)、20.6%(13/63)和4.8%(3/63).MODS检测结核性胸膜炎和结核性脑膜炎的阳性率均高于改良罗氏培养法,差异有统计学意义(x2=24.00,P<0.01;x2=14.97,P<0.01).所有改良罗氏培养法和MODS检测获得的分枝杆菌均为结核分枝杆菌.三种方法检测18份非结核病患者胸腔积液和脑脊液结果均为阴性.MODS检测脑脊液和胸腔积液标本的阳性检出中位时间分别为9d和14d,明显短于改良罗氏培养法所需的31d.结论 MODS与传统 病原学检测方法相比,具有敏感性好、检出时间短的优势,适用于肺外结核病的临床快速诊断.  相似文献   

11.
目的 探讨分枝杆菌培养中同步筛检依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)的临床应用价值,以期为临床依R菌早期发现提供帮助。 方法 采用临床典型依R菌株在罗氏(L-J)培养基上的最佳生长利福平药物浓度100μg/ml(简称“L-J R100”),建立临床依R菌初代筛检模式,即在临床分枝杆菌BD960快速分离培养中,平行接种L-J R100 管和罗氏空白对照管(L-J对照)培养;按照其模式对重庆市公共卫生医疗救治中心2011年3月7日至2012年2月15日期间共5362份临床标本平行培养结果进行统计分析(实验结果录入瑞美检验网络LIS系统)。 结果BD960、L-J R100和L-J对照管3种方法平行培养的总阳性检出率为43.92% (2355株/5362份),其中BD960阳性检出率39.56%(2121株/5362份),L-J对照管阳性检出率25.57%(1371株/5362份)。BD960阴性但L-J对照管培养阳性者234份;L-J R100阳性703株,占检出阳性的29.85%(703株/2355株);发现有依R菌现象的258株(合计221例,其中重复出现依R菌现象2次的33例、3次的1例、4次的3例,另外有14株L-J R100阳性而对照为阴性的绝对依赖株),占L-J对照管阳性的18.82%(258株/1371株),占L-J R100阳性的36.70%(258株/703株)。 结论 临床分枝杆菌培养中同步筛检依R菌能分离到绝对依赖株,可提早为临床提示分离阳性株是否为利福平依赖菌或耐药菌;同时可提高分枝杆菌培养阳性检出率;其方法简单易行,有较好的临床应用价值。  相似文献   

12.
目的 探讨骨关节结核病灶中 ,结核菌L型的存在状况。方法 样本均采自骨科住院病人的脓液、肉芽、干酪物等 ,经碱液处理后 ,分别进行直接涂片,并接种在罗氏培养基上、Bactec培养液及结核菌L型培养液中 ,以查找结核杆菌及结核菌L型。结果 在 6 0例中 ,查到结核菌L型 11例(18.3% ),涂片阳性 9例 (15 % ) ,罗氏培养阳性 3例 (5 % ) ,快速培养阳性 12例 (2 0 % )。结论 对骨关节结核病灶进行结核菌培养的同时,加做结核菌L型检查是十分必要的。  相似文献   

13.
目的对手工MGIT液体培养系统(manual mycobacteria growth indicator tube system, M-MGIT)检测分枝杆菌的效果进行评价。方法收集2012年1月至2013年2月北京市朝阳区疾病预防控制中心结核病门诊初诊患者526例,收集首次痰标本526份,分别对同份标本进行罗氏(Lowenstein-Jensen,L-J)固体培养、全自动BACTEC MGIT 960 系统培养(A-MGIT)和M-MGIT系统培养,统计学分析采用χ2检验和t检验,以P<0.05 为差异有统计学意义。结果526份标本中,3种分离培养方法共分离出261株分枝杆菌菌株,检出率为49.6%;M-MGIT法、A-MGIT法和L-J法阳性检出率分别为48.7%(256/526)、49.0%(258/526)和41.3%(217/526)。M-MGIT和A-MGIT培养法检出率均高于L-J培养法,差异有统计学意义(χ2值分别为5.84、6.45,P值均<0.05),但M-MGIT和A-MGIT培养法检出率差异无统计学意义(χ2=0.02,P>0.05)。M-MGIT法、A-MGIT法和L-J法阳性菌株平均报告时间分别为13d[(13±6)d]、12d[(12±6)d]和24d[(24±9)d],M-MGIT和A-MGIT法阳性报告时间明显短于L-J法,差异有统计学意义(t值分别为15.84、18.32,P值均<0.05),M-MGIT和A-MGIT之间的差异无统计学意义(t=1.89,P>0.05)。M-MGIT法、A-MGIT法和L-J法污染率分别为4.6%(24/526)、4.9%(26/526)和4.1%(43/1052),差异无统计学意义(χ2=0.64,P>0.05)。结论M-MGIT液体培养系统能快速检测分枝杆菌,检出率高,阳性报告时间短,成本低廉,适合基层结核病实验室应用。  相似文献   

14.
目的 比较RT-LAMP、LAMP、L-J法检测MTB的效果,为结核病的快速诊断提供依据。方法 用常见的非结核分枝杆菌与其他常见的呼吸道感染病菌(金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌)检测特异性,并用酶切实验对结核分枝杆菌特异性产物进行酶切鉴定;用RT-LAMP、LAMP、L-J法检测100名结核病患者和22名来自无结核病患者痰标本中的结核分枝杆菌测试灵敏性;对浓度为1 ng/μL H37Rv标准株进行对倍比稀释用于RT-LAMP极限检测实验。结果 RT-LAMP、LAMP、L-J方法的阳性率分别为100%,92%和88%;RT-LAMP和L-J, RT-LAMP和LAMP差异均有统计学意义;RT-LAMP的灵敏度比LAMP高10倍;RT-LAMP不仅可以识别活菌,并且能够重复检测MTB的单一拷贝。结论 RT-LAMP检测效果优于LAMP及L-J,适于基层医院结核病诊断的推广和应用。  相似文献   

15.
目的 了解上海市某结核病定点医院结核病房空气中的分枝杆菌污染情况及潜在传染性。 方法 采用液体撞击式微生物气溶胶采样器(FA-1型撞击式空气微生物采样器)采集该医院22间结核病房中空气样本134份,均在痰涂片抗酸杆菌阳性(+~++++)患者床边采集。每间病房均有4张床位,每间病房的空间布局相同,但患者组成情况不完全相同。经氢氧化钠-N-乙酰-L-半胱氨酸(NALC-NaOH)前处理,分别采用罗氏培养、BacT/ALERT 3D全自动快速培养进行分枝杆菌分离培养,并对培养阳性样本采用DNA序列分析的方法进行菌型鉴定。两种分离培养方法对医院空气样本中分枝杆菌分离率的比较采用配对卡方检验,以P<0.05为差异有统计学意义。 结果 134份结核病房涂阳患者床边采集到的空气样本中有3份分枝杆菌分离培养阳性,经DNA序列分析证实分别为结核分枝杆菌、胞内分枝杆菌和戈登分枝杆菌。BacT/ALERT 3D培养阳性3份,经DNA序列分析证实分别为结核分枝杆菌、胞内分枝杆菌和戈登分枝杆菌,污染2份,阳性检出率为2.3%(3/132)。罗氏培养阳性2份,经DNA序列分析证实分别为胞内分枝杆菌和戈登分枝杆菌,污染1份,阳性检出率为1.5%(2/133)。经配对卡方检验,两种分离培养方法对医院空气样本中分枝杆菌分离率差异无统计学意义(χ2=0.00,P>0.05)。 结论 该医院结核病房痰涂片抗酸杆菌阳性患者床边所采集的空气样本中可分离到分枝杆菌,虽然目前尚无法判断这些菌株是否由于就诊患者传播所致,但是定期监测医院内空气质量是预防与控制医院内感染的一项重要措施。  相似文献   

16.
目的 评估实时荧光核酸恒温扩增检测技术(simultaneous amplification and testing,SAT)在结核病患者的痰液、体液及病灶组织等标本中检测结核分枝杆菌的价值.方法 收集在广州市胸科医院就诊的疑似结核病患者的痰液734份、体液标本94份(包括68份胸腔积液、21份脑脊液、5份关节积液,以下统称“体液”)及病灶组织标本76份,共计904份标本.同时采用SAT法、改良罗氏培养法进行检测,培养阳性者进行基因芯片菌种鉴定.SAT法与改良罗氏培养法结果不相符的标本,用结核分枝杆菌聚合酶链(polymerase chain reaction technology for Mycobacterium tuberculosis,PCR-TB)荧光诊断试剂盒进行检测.采用x2检验比较SAT法与改良罗氏培养法对结核病患者的阳性检出率.结果 以改良罗氏培养结果为金标准,则SAT法在痰液、体液、病灶组织标本的敏感度、特异度、符合率分别为90.20%(230/255)、92.48%(443/479)、91.69%(673/734);94.74%(18/19)、81.33%(61/75)、84.04%(79/94);100.00%(14/14)、77.42%(48/62)、81.58%(62/76).以扩大金标准(培养+PCR法)比对,则SAT法在痰液、体液、病灶组织标本的敏感度、特异度、符合率分别为96.30%(260/270)、99.35%(461/464)、98.23%(721/734);96.97%(32/33)、100.00%(61/61)、98.94%(93/94);100.00%(27/27)、97.96%(48/49)、98.68%(75/76).改良罗氏培养法和SAT法在痰液、体液、病灶组织标本的阳性检出率分别为34.74%(255/734)和36.24%(266/734)、20.21%(19/94)和34.04%(32/94)、18.42%(14/76)和36.84%(28/76);痰标本两者的阳性率比较,差异没有统计学意义(x2=0.36,P>0.05).体液与病灶组织标本中,SAT法较改良罗氏培养法的阳性率高出13.83%和18.42%,差异有统计学意义(x2值分别为4.55、6.44,P值均<0.05).结论 SAT法检测痰液、体液及病灶组织标本中的结核分枝杆菌,具有快速、敏感度和特异度较高的优点,可提高结核分枝杆菌的检出率.  相似文献   

17.
The contribution of Mycobacterium bovis to the global burden of tuberculosis (TB) in man is likely to be underestimated due to its dysgonic growth characteristics and because of the absence of pyruvate in most used media is disadvantageous for its primary isolation. In Brazil Mycobacterium culture, identification and susceptibility tests are performed only in TB reference centers, usually for selected cases. Moreover, solid, egg-based, glycerol-containing (without pyruvate supplementation) L?wenstein-Jensen (L-J) or Ogawa media are routinely used, unfavouring M. bovis isolation. To determine the importance of M. bovis as a public health threat in Brazil we investigated 3046 suspected TB patients inoculating their clinical samples onto routine L-J and L-J pyruvate enriched media. A total of 1796 specimens were culture positive for Mycobacterium spp. and 702 TB cases were confirmed. Surprisingly we did not detect one single case of M. bovis in the resulting collection of 1674 isolates recovered from M. bovis favourable medium analyzed by conventional and molecular speciation methods. Also, bacillary DNA present on 454 sputum smears from 223 TB patients were OxyR genotyped and none was recognized as M. bovis. Our data indicate that M. bovis importance on the burden of human TB in Brazil is marginal.  相似文献   

18.
目的通过免疫磁珠分离技术(immunomagnetic beads separation techniques,IMBS)富集痰液中的结核分枝杆菌,提高痰液培养的阳性率,以期用于结核病的快速诊断。方法制备兔抗结核杆菌IgG抗体,并将其结合于免疫磁珠表面。采集71例确诊结核病患者的痰液标本,通过免疫磁珠分离技术捕获、富集吸附结核分枝杆菌后用改良罗氏培养基培养,并与传统改良罗氏(L-J)培养法和痰涂片抗酸染色法作比较。结果 71例结核病患者痰涂片抗酸染色检查阳性26例,阳性率36.6%;传统改良L-J培养阳性34例,阳性率47.9%;免疫磁珠分离技术捕获、富集结核分枝杆菌后进行改良L-J培养阳性48例,阳性率67.6%。三者阳性率差异有统计学意义(P<0.05),改良L-J培养和痰涂片检查阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用免疫磁珠分离技术捕获、富集痰液中的结核分枝杆菌后进行培养,可显著提高痰培养的阳性率,该方法可用于结核病的快速诊断。  相似文献   

19.
目的 评价rRNA扩增方法 在临床应用的效果。 方法 选取到北京胸科医院、山东省胸科医院、河南疾控中心结核病防治所3个机构就诊的肺结核可疑症状者及健康志愿者的痰标本为研究对象,共纳入551例痰标本,对每例痰标本均进行涂片显微镜检查、罗氏培养、rRNA扩增试验以及实时荧光定量PCR。与罗氏培养方法 比较分析rRNA扩增方法 的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值以及与实时荧光定量PCR扩增方法 的一致性。 结果rRNA扩增方法 的敏感性为98.5%,特异性为95.0%,阳性预测值为95.0%,阴性预测值为98.5%,rRNA扩增方法 在涂阳标本和涂阴标本间的敏感度和特异度差异均有统计学意义(χ2=9.60,P=0.002;χ2=79.80,P<0.01)。与PCR检测结果的一致性为93.8%,涂阳和涂阴标本中2种方法 的一致性差异有统计学意义(χ2=4.45,P=0.035)。 结论 rRNA扩增方法 的敏感度和特异度均较好,且能明显缩短诊断时间,该方法 是一种较有前景的结核病实验室诊断方法 。  相似文献   

20.
目的 比较骨关节结核病灶中脓液、干酪、肉芽及死骨组织的结核分枝杆菌培养阳性率,及结核分枝杆菌BACTEC MGIT 960(简称“MGIT 960”)培养、改良罗氏培养基培养、PCR检测的联合阳性率.方法 2011年6月至2012年5月首都医科大学附属北京胸科医院收治的经病理明确诊断为骨关节结核的患者50例,通过手术获取病灶中的脓液(50份)、干酪(42份)、肉芽(48份)及死骨组织标本(43份),分别进行结核分枝杆菌MGIT 960培养及改良罗氏培养基培养,比较4种组织标本的培养阳性率,计算2种培养方法的联合阳性率;对脓液标本单独通过PCR方法进行了阳性率检测;计算脓液标本3种方法的联合阳性率.结果 4种标本MGIT 960培养的阳性率依次为:死骨组织(41.9%,18/43)>脓液(40.0%,20/50)>肉芽(33.3%,16/48)=干酪(33.3 %,14/42);4种标本改良罗氏培养阳性率依次为:肉芽(20.8%,10/48)>脓液(20.0%,10/50)>死骨组织(16.3 %,7/43)>干酪(14.3%,6/42);脓液的PCR检测阳性率为48.0%(24/50).MGIT 960和改良罗氏培养2种结核分枝杆菌培养方法的联合阳性率为50.0%(25/50),而PCR检测、MGIT960和改良罗氏培养3种方法的联合阳性率为68.0(34/50).结论 骨关节结核患者,应尽可能选择多种标本以提高培养阳性率.MGIT 960培养可以作为首选的细菌学诊断方法,但如果再联合使用改良罗氏培养和PCR扩增技术,能够进一步提高检出阳性率.  相似文献   

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