002 应用检测T细胞法诊断儿童结核瘸的研究

儿童结核病临床表现非特异性，标本收集困难，结核分枝杆菌（MTB）培养时间过长，结核菌素试验（TST）又受多种因素影响，导致TST诊断的敏感性下降。作者采用酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测对MTB抗原敏感的特异性T淋巴细胞诊断结核病，缩短了时间，提高了结核病诊断的敏感性。     

γ-干扰素释放试验在活动性肺结核诊断中的价值

目的在我国西南部结核病高发区,评价结核γ-干扰素释放试验(tuberculosis interferonγ release assay, TB-IGRA)在疑似肺结核中诊断活动性肺结核的价值。 方法纳入2018年12月20日至2019年12月20日在贵州省织金县人民医院诊断的疑似肺结核患者1 627名,用TB-IGRA、结核菌素皮肤实验(TST)、结核分枝杆菌抗体(TBAb)或结核分枝杆菌免疫球蛋白(TB-Ig)检测诊断活动性肺结核,比较其敏感性、特异性、准确性。并分析卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin, BCG)接种对结果的影响。 结果TB-IGRA的敏感性、特异性和准确性,依次为：91.26%、80.13%和89.37%,均高于TST、TB-IgG的检测。TB-IGRA诊断疑似肺结核中的活动性肺结核,不受BCG接种的影响(χ²＝0.05,P＝0.83)。BCG接种对TST诊断疑似肺结核中的活动性肺结核影响明显(χ²＝108.17,P<0.001)。 结论TB-IGRA在我国西南部结核病高发区诊断活动性肺结核有很高的敏感性、特异性,较TST、TB-Ig有更高价值,且不受BCG接种的影响。     

消化系统结核诊断方法现状和进展

消化系统结核为常见肺外结核,目前常规结核病诊断方法如抗酸杆菌Ziehl-Neelsen染色、结核分枝杆菌培养、结核菌素皮肤试验(TST)、X线检查等对消化系统结核的诊断均有一定局限性。免疫学试验干扰素-γ(IFN-γ)释放测定尤其是T-SPOT.TB是最新潜伏性结核感染诊断技术,可用于可疑结核病患者的辅助诊断,与TST相比具有更高的敏感性和特异性。本文对常见消化系统结核的传统和现代化诊断方法作一综述。     

结核分枝杆菌诊断抗原的性质和应用

结核分枝杆菌（MTB）能增强HIV-1病毒在体内的繁殖,因此,结核病流行国家艾滋病患者感染情况更加严重,1995年美国科学家报道了对MTB的保护性免疫反应的研究,1997年世界卫生组织把发现种属特异性抗原作为结核分枝杆菌的研究重点。自酶联免疫法（ELISA）应用临床以来,血清学检测结核病人特异性抗体和抗原已成为结核病诊断的辅助方法。MTB感染的血清学诊断靶抗原包括胞外分泌性蛋白、胞膜蛋白和胞浆蛋白等蛋白、多肽、多糖、磷脂类和细胞壁骨架成分等。但由于敏感性或特异性不高,一直困扰其在临床上的广泛应用。因此,本文就MTB抗原的性质及其在诊断方面的应用综述如下。     

结核分枝杆菌耐药性检测新进展

结核分枝杆菌(MTB)的耐药形势日趋严重,耐药结核病的及时诊断对患者的治疗结局及结核病的控制十分重要.MTB传统的培养及药敏结果回报需时2～3个月,MTB耐药性的快速准确诊断是一个急需解决的问题.本文总结了MTB耐药性检测的传统技术包括罗氏培养及快速培养,并对比分析了其优缺点.综合国内外文献阐述了显微镜观察药物敏感性测定法的研究进展及分子生物学快速诊断技术包括线性探针杂交技术、Xpert MTB/RIF检测技术、基因芯片诊断技术及滚环扩增技术对于MTB及其耐药性检测的最新动态、各种检测方法的适用范围,并对比分析了各种检测方法的优缺点,为临床医师选择快速准确的诊断工具提供最佳的选择.     

结核感染T细胞斑点试验在结核病诊断中的应用价值

目的探讨结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)在结核病诊断中的应用价值。方法 248例疑似结核患者采用T-SPOT.TB试验和结核菌素试验(TST),比较两者对结核诊断的灵敏性、特异性、假阳性率和假阴性率。结果 T-SPOT.TB试验的灵敏性和特异性明显高于TST试验(P<0.05);T-SPOT.TB试验的假阳性率和假阴性率明显低于TST试验(P<0.05)。结论 T-SPOT.TB具有更高的灵敏性和特异性,是结核筛检的有效试验方法。     

牛分枝杆菌脂多糖在动物结核病血清学诊断中的应用价值

目的:评价牛分枝杆菌脂多糖在动物结核病血清学诊断中的临床应用价值。方法:从灭活的牛分枝杆菌中提取具有生物活性的脂多糖，用提取的脂多糖进行酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA),检测阴性牛血清和结核病、副结核病、布鲁氏菌病、口蹄疫、衣原体病和新孢子虫病阳性牛血清，判断脂多糖用于动物结核病诊断的特异性。同时，收集牛血清样本245份[结核菌素皮肤试验(tuberculin skin test, TST)阳性177份，TST阴性68份],梅花鹿血清样本29份(TST阳性10份，TST阴性19份),獐子血清样本14份(TST阳性14份),通过ELISA方法检测血清中的抗体水平，以TST结果为参照，评估脂多糖在动物结核病血清学诊断中的临床应用价值。结果:除结核病阳性牛血清外，其余阳性病牛血清的检测结果与阴性牛血清差异无统计学意义(P>0.05),且均低于Cut off值。基于脂多糖建立的ELISA抗体检测方法与TST结果的总符合率为88.54%(255/288),总敏感度为87.56%(176/201),总特异度为90.80%(7...     

结核分枝杆菌早期分泌抗原ESAT-6的高效表达及其在结核分枝杆菌特异细胞免疫检测中的应用

目的 获得纯化的MTB早期分泌抗原ESAT-6,并对其抗原性及在MTB特异性细胞免疫检测中的应用价值进行评价.方法 采用基因工程技术表达MTB ESAT-6蛋白,通过Western blot法分析ESAT-6与特异性抗体的反应性.以纯化ESAT-6为抗原,用酶联免疫斑点技术(Elispot)检测肺结核患者、健康医务工作者、自然村居民外周血γ-干扰素的应答水平,同时与用于隐性结核感染及结核病诊断的QFT-G检测法进行平行比较,对其在MTB感染细胞免疫检测中的应用价值进行评价.结果 成功表达和纯化了 ESAT-6重组蛋白,所表达的蛋白能被特异性抗ESAT-6抗体识别,同时与肺结核外周血单核细胞反应,刺激后者产生γ-干扰素.Elispot技术检测肺结核患者、健康医务工作者、自然村居民的阳性率分别为36/49(73.5%)、11/62(17.7%)、17/194(8.8%),同时用QFT-G法对肺结核患者和健康医务工作者进行检测阳性率分别为38/49(77.6%)、14/58(24.1%),两种检测方法比较敏感度(73.5%,77.6%;χ2=0.381,P>0.05)和特异度(82.3%,75.9%;χ2=0.406,P>0.05),差异无统计学意义.结论 利用pET原核表达系统可成功地表达和纯化MTB ESAT-6重组蛋白,以ESAT-6为抗原建立的Elispot外周血IFN-γ检测技术与QFT-G的特异性和敏感性相当,可用于结核病的辅助诊断.     

活动性结核标志物(ATM)快速诊断结核的研究

结核病的实验室诊断方法很多；效果不一，特别是对菌阴结核病的诊断还无统一标准，目前普遍开展的多种诊断方法中，如PPD、细菌学检查、BACTEC 460-TB、PCR等敏感性和／或特异性不理想，需要时间长、条件设备要求高等，因此，寻找快速、价廉、简便而敏感性和特异性都很高的诊断方法日显重要。我们通过活动性结核标志物(ATM)来快速诊断结核病，取得了良好的效果，现总结如下。     

结核分枝杆菌脂多糖的提取及其检测血清结核抗体的研究

目的提取结核分枝杆菌(MTB)脂多糖抗原,检测结核血清参考品,评价其在血清学诊断中的价值。方法将MTB菌体冰浴超声破碎,用酚/氯仿、氯仿/甲醇抽提除去蛋白和脂质,再用DNase I酶和RNase酶作用除去DNA和RNA,得到初步纯化的脂多糖即LPS-1,LPS-1在去污剂Triton-X114作用后,分成含有阿拉伯甘露糖(AM)的水相即LPS-2和含有脂阿拉伯甘露糖(LAM)和脂甘露糖(LM)的有机相即LPS-3,以三种多糖作为抗原,通过ELISA方法检测结核阳性和阴性血清参考品。结果LPS-1对结核血清参考品检测的敏感性为71.7%,特异性为96%,LPS-3的敏感性为43.9%(18/41),而特异性达到100%。结论脂多糖抗原检测血清结核抗体显示出较强的特异性,可望成为结核病血清学的诊断组合抗原之一。     

结核感染T细胞斑点试验、结核菌素试验诊断小儿肺结核效能比较

目的比较结核感染T细胞斑点试验(TSPOT.TB)、结核菌素试验(TST)诊断小儿肺结核的效果。方法选择疑似肺结核患儿100例,对患儿分别行TSPOT.TB、TST。100例用《传染性肺结核诊断标准及处理原则》(金标准)确诊肺结核68例、非结核32例。根据金标准比较两种方法诊断小儿肺结核的敏感性及特异性。结果 TSPOT.TB与TST诊断小儿肺结核的敏感性分别为94.21%和44.41%,特异性分别为94.50%和61.47%,PPV分别为74.20%和40.89%,NPV分别为94.17%和75.64%,LR+分别为6.14%和1.67%,LR-分别为0.13%和0.74%;两种方法各指标比较,P均<0.05。结论与TST比较,TSPOT.TB诊断小儿肺结核的效果更好。     

结核分枝杆菌感染检测两步法在学校结核病筛查中的应用价值

目的: 初步评估结核菌素皮肤试验(TST)联合γ-干扰素释放试验(IGRA)(简称“两步法”)检测在学生健康体检中筛查结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染和活动性肺结核的应用价值。方法: 采用横断面研究的方法,选取2017—2021年广东省74358名学生作为研究对象,其中50701(68.18%)名完成了胸部X线摄片(简称“胸片”)筛查,74148名(99.72%)完成了TST筛查;9702(13.08%)名TST检测阳性者进一步完成了IGRA检测。最后对胸片异常、TST和IGRA检测“双阳者”完善肺结核相关检查。结果: 以IGRA检测结果为参照标准,分别以TST检测硬结平均直径为5、10和15mm为阳性临界值,TST与IGRA检测MTB感染的一致率分别为15.97%(1549/9702)、26.63%(2584/9702)、81.11%(7869/9702),Kappa值分别为0.014、0.014和0.112。TST检测MTB感染率[11.67%(8652/74148)]明显高于两步法[1.02%(759/74148)],差异有统计学意义(χ²=7068.423,P<0.001)。对TST中阳和强阳者完善结核病相关检查后的肺结核检出率[0.29%(15/5219)]明显低于对“双阳者”的检出率[1.84%(14/759)],差异有统计学意义(χ²=30.133,P<0.001)。结论: TST和IGRA检测MTB感染的一致性较差,“两步法”可明显提高MTB感染的精准性和肺结核患者筛查效率。     

γ干扰素释放反应在结核分枝杆菌潜伏感染及结核病诊断中的临床意义

目的 探讨三种结核分枝杆菌抗原刺激外周血单个核细胞（PBMC)后γ干扰素(IFN-γ)释放反应对结核分枝杆菌潜伏感染及结核病的诊断意义。并与结核菌素皮试(TST)进行比较。方法 研究对象共分三组，活动性结核组(57例)，健康对照组(27例)，肿瘤组(29例)，分别用结核分枝杆菌纯蛋白衍生物(PPD)，早期分泌抗原靶6kDa蛋白(early secretary antigenic target 6kDa protein ESAT-6)，38kDa抗原与PBMC共同培养5天，后采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清液中IFN-γ的浓度。结果 ①健康组：TST与BCG接种史及排菌病人密切接触程度呈正相关(B=0．047和P=0．041)，ESAT-6为抗原的IFN-γ释放水平与结核病接触程度密切相关(P=0．005)，而与BCG接种史无明显相关。②当阴阳性界定值定为1000pg／ml时。38kDa抗原刺激后的IFN-γ浓度对于结核病诊断的敏感性为64．9％，特异性为89．3％.结论 ESAT-6刺激后的IFN-γ释放反应对结核分枝杆菌潜伏感染的诊断意义可能优于TST。38kDa抗原刺激后的IFN-γ释放反应可能有结核病的辅助诊断意义。     

基层常用结核病诊断方法及展望

长期以来,结核病的实验室诊断对结核病的防治起到了很重要的作用。传统的结核杆菌感染的诊断方法有金标法(DICA)结核抗体、抗酸染色涂片(AFS)法及结核菌素纯蛋白衍生物皮试(PPD)等,但这些方法均存在检测周期长,阳性率低,特异性差等缺点而不能满足临床需要[2]。而基因芯片法(GCT)直接检测结核分枝杆菌(MTB)具有简单快速等优     

T淋巴细胞斑点试验在结核病诊断中的临床应用

目的观察T淋巴细胞斑点试验(T-SPOT.TB)在结核病诊断中的临床应用价值。方法 205例疑似结核患者采用T-SPOT.TB试验、结核菌素试验(TST)和痰涂片检查,比较三种方法对结核诊断的灵敏性、特异性、假阳性率和假阴性率。结果 T-SPOT.TB试验的灵敏性明显高于TST试验和痰涂片检查(P<0.05);T-SPOT.TB试验的假阴性率明显低于TST试验和痰涂片检查(P<0.05)。结论 T-SPOT.TB具有更高的灵敏性,是结核筛检的有效试验方法。     

结核感染T细胞斑点试验在结核诊断中的应用

目的 比较结核感染T细胞斑点试验（T SPOT.TB）和结核菌素试验（（TST）在结核诊断中的敏感性和特异性,探讨两者在结核感染中的诊断价值.方法 对疑患结核的90例患者进行前瞻性研究.收集患者临床资料,采用T SPOT.TB和TST试验,比较二者对结核诊断的敏感性、特异性、阳性预测值（PPV）、阴性预测值（NPV）、阳性似然比（LR＋）和阴性似然比（LR-）.结果 90例疑患结核患者确诊结核28例.T SPOT.TB实验在敏感性、特异性、PPV、NPV、准确度等方面显著优于TST（P＜0.05）;T SPOT.TB的LR＋值明显高于TST,LR-值明显低于TST.TST和TSPOT.T的一致性弱（κ＜0.4）.结论 T SPOT.TB较TST有更高敏感性和特异性,较TST更适于作为结核筛检试验,也适用于肺外结核的检测及结核的排除诊断.T SPOT.TB受免疫抑制影响小,应作为有免疫抑制危险因素患者隐匿性结核的筛查项目.     

γ-干扰素体外释放试验在结核诊断中的应用评价

目的探寻γ-干扰素体外释放试验在结核诊断中的应用价值方法 34例菌阳肺结核患者,238例菌阴肺核患者,33例非结核患者,30例健康体检者,分别进行血清结核杆菌抗体检测、结核菌素试验(TST)以及结核分枝杆菌相关γ-干扰素体外释放酶联免疫试验(TB-IGRA),对其检测结果进行统计分析。结果TB-IGRA、血清结核杆菌抗体试验以及TST的诊断敏感性分别为87.13%、76.10%和64.71%;诊断特异性分别为90.48%、66.67%和71.43%;阳性预测值分别为97.53%、90.79%和90.72%;阴性预测值分别为61.96%、39.25%和31.91%;诊断效率分别为87.77%、74.33%和65.97%。TB-IGRA的诊断敏感性和诊断特异性均显著高于血清结核杆菌抗体试验以及TST(P0.01)。结论 TB-IGRA对结核的诊断具有较高敏感性和特异性,对于菌阴肺结核的辅助诊断和疑似结核感染患者的排除优于其它两种方法。     

免疫印迹法检测结核特异性抗体对结核病的诊断价值

目的 结核病特异性诊断方法研究是目前结核病研究的主要部分之一,为探讨免疫印迹检测技术对结核病的诊断价值, 建立了一套完整的实验方法?方法 应用结核分支杆菌 H37 Rv 株特异性抗原( T B S Ag 1) 建立了结核特异性抗体免疫印迹检测技术?结果 经361 例结核病患者?350 例正常人和150 例非结核病患者临床检测,实验敏感性为89.5 % ?特异性为95.6 % ,并将免疫印迹技术与 Myco Dot 技术对比,结果免疫印迹技术对结核病的诊断敏感性并不高于 Myco Dot 技术( P> 0.05) ?结论 免疫印迹法对结核病特异性诊断,尤其对菌阴结核?肺外结核的诊断具有较高的应用价值?     

γ-干扰素释放试验在活动性结核病中的诊断价值

在活动性结核病（ATB）患者中,菌阴肺结核患者约占40％～60％。由于缺乏诊断的“金标准”,菌阴肺结核以及肺外结核病成为诊断与鉴别诊断中的难点,也是造成误诊、漏诊、过诊、延迟诊断的重要原因。目前,活动性结核病的辅助诊断指标主要是血清或体液腺苷脱氨酶（ADA）、痰或血聚合酶链反应（PCR）、血清抗结核抗体（LAM）、皮肤结核菌素试验（TST）等,然而,这些指标的敏感性或佴口特异性较低,     

结核病黏膜疫苗的研究进展北大核心CSCD

呼吸道黏膜免疫是机体抵御结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染的第一道防线,是重要的抗MTB感染的保护性免疫,如何通过黏膜免疫,诱导黏膜免疫系统产生抗MTB感染的特异性免疫,是目前结核病疫苗研究的新方向。本文基于近年来结核病黏膜疫苗的研究,总结了不同类型疫苗的特点、黏膜免疫后的免疫学特性和免疫保护效果,展望了未来结核病黏膜疫苗的研究方向,希望能够对研发更加高效的结核病黏膜疫苗有所启示。