硫酸铵梯度法制备莫西沙星脂质体的工艺研究

目的 制备具有较高包封率和载药量且体外放置稳定的莫西沙星脂质体。方法 采用硫酸铵梯度法制备包载莫西沙星的脂质体,以粒径及其分布和包封率、载药量为指标对处方和工艺进行优化。结果 最佳制备条件为：空白脂质体中硫酸铵质量浓度70 mg/mL、磷脂质量浓度50 mg/mL、脂质体粒径120 nm左右、透析时间5 h、载药时药脂比2∶3、孵育温度40 ℃、孵育时间30 min。制备得到的莫西沙星脂质体粒径为（143.00±3.98）nm,包封率为（74.56±3.21）%,载药量为（26.39±1.88）%。结论 硫酸铵梯度法制备的莫西沙星脂质体包封率较高,粒径均一,室温放置稳定性良好。     

RP-HPLC法同时测定复方脂质体中阿霉素与槲皮素的含量

目的:建立RP-HPLC方法,同时测定复方脂质体中阿霉素(DOX)与槲皮素(QUE)的含量。方法:Kromasil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),甲醇-乙腈-pH 3.8磷酸缓冲盐(19∶29∶52)等度洗脱,流速1mL/min,检测波长254nm,柱温25℃。结果:DOX与QUE分别在0.50～10.00μg/mL、0.03～2.00μg/mL范围内线性良好(r分别为0.999 7、0.999 4);低、中、高浓度回收率分别为(99.53±2.56)%、(103.12±0.37)%、(103.21±2.02)%和(96.10±1.38)%、(102.30±1.76)%、(103.78±1.06)%(n=3)。结论:本方法准确,重复性好,可用于同时测定阿霉素-槲皮素复方脂质体中两种药物的含量。     

β-谷甾醇替代胆固醇制备槲皮素脂质体的可行性研究

目的 探讨用β-谷甾醇替代胆固醇制备槲皮素脂质体的可行性,并筛选最佳制备工艺与处方。方法 以卵磷脂和β-谷甾醇为膜材制备不含胆固醇的槲皮素脂质体;以离心沉淀法测定脂质体的包封率;以包封率和载药量为评定指标,筛选该新型槲皮素脂质体的最佳制备方法;用正交设计优化该脂质体的制备工艺;用粒径、Zeta电位、AFM电镜、体外释放表征该新型槲皮素脂质体。结果 该新型脂质体的最佳制备方法为薄膜分散法,通过正交设计得最佳工艺为槲皮素与卵磷脂的质量比为1∶5,卵磷脂与β-谷甾醇的质量比为6∶1,PBS缓冲溶液pH值为6.0,水化时间为2 h。制备的槲皮素脂质体的包封率为（82.55±1.10）%,载药量为（11.40±1.14）%,粒径为（194.60±4.38）nm,Zeta电位为（?30.45±0.42）mV;AFM电镜验证表明该新型脂质体呈规则球形,粒径均一;新型脂质体体外释放与普通脂质体无差异。结论 用β-谷甾醇替代胆固醇制备槲皮素脂质体方法可行,采用最佳工艺制备的槲皮素脂质体包封率高,形态和粒径均较好,重现性好,可应用于工业化生产。     

粉防己碱阿霉素脂质体的制备与体外释放度的研究

目的 以阿霉素和粉防己碱为模型药物制备脂质体并进行工艺研究,同时对该脂质体进行体外释放度的研究.方法 采用3种不同脂质体制备方法,并以包封率为指标采用正交设计法进行处方筛选和工艺优化.结果 确定了硫酸铵梯度法结合pH梯度法制备脂质体的最佳制备处方为:药脂比为1:20,磷脂与胆固醇质量的比例为3:1、外水相pH值为7.6,孵育温度50℃、硫酸铵浓度为250 mmol/L.释放度试验显示脂质体中阿霉素和粉防己碱分别在24 h和16 h内完全释放.结论 制备的粉防己碱阿霉素脂质体包封率及外观良好,具有一定的缓释效果.     

星点设计-效应面法优化PFV修饰的表阿霉素与五味子乙素脂质体的处方及其细胞毒性评价

目的:采用星点设计-效应面优选PFV修饰的表阿霉素与五味子乙素的最佳制备工艺,并对该脂质体进行细胞毒性评价。方法:采用薄膜水化-硫酸铵梯度法构造PFV修饰的表阿霉素与五味子乙素脂质体。以包封率为考察指标,采用星点设计-效应面法对胆固醇含量、水化温度、表阿霉素含量三个因素进行优化。采用SRB染色法考察该脂质体对MDA-MB-231和MCF-7两种乳腺癌细胞的杀伤能力。结果:脂质体的最佳制备工艺为处方量5mL、胆固醇9.6mg、表阿霉素含量0.48mg、水化温度40℃,平均包封率为99.1%。该脂质体对MDA-MB-231细胞的IC50值为(1.36±1.14)μmol/L,对MCF-7的IC50值为(1.31±1.52)μmol/L。结论:该制备工艺重复性良好,可用于PFV修饰的表阿霉素与五味子乙素脂质体的制备,构建出的脂质体具备杀伤乳腺癌细胞的性能。     

制备HB-Ⅰa脂质体的工艺处方研究

目的优化HB-Ⅰa脂质体的工艺处方,提高包封率。方法采用逆相蒸发法制备HB-Ⅰa脂质体,以包封率为指标,通过正交实验对工艺处方进行了优化研究,用HPLC法测定其包封率。用透射电镜扫描观察其外观形态和测定平均粒径。结果最佳的处方比例为卵磷脂:胆固醇:HB-Ⅰa=400∶200∶60,平均包封率为(85.92±0.61)%,平均粒径为11.25μm。结论优化的处方工艺合理,包封率显著提高。     

甘草次酸-丹参酮IIA复方脂质体处方优化及制备工艺研究

目的 研究甘草次酸(GA)-丹参酮ⅡA(Tan ⅡA)复方脂质体(GT-Lip)的制备工艺.方法 以大豆卵磷脂(SPC)和胆固醇(Ch)为膜材,薄膜分散探头超声法制备GT-Lip.通过单因素考察确定水合温度和探头超声功率,正交设计法优化处方工艺;低速离心法测定脂质体中GA与Tan ⅡA包封率,动态光散射粒径仪测定脂质体粒径与Zeta电位,透射电镜测定脂质体形态.结果 优化处方工艺为SPC-Ch质量比6∶1,SPC-TanⅡA物质的量之比30∶1,SPC-GA物质的量之比24∶1,水合温度为30℃,探头超声条件为380 W超声5min;制备得到的GT-Lip中Tan ⅡA、GA的包封率分别为(81.50±0.76)％、(98.63±0.90)％(n=3),平均Zeta电位为(-19.00±0.98)mV(n=3),平均粒径为(120.5±1.62) nm(n=3).结论 优化的GT-Lip制备工艺稳定可行.     

熊果酸脂质体的制备及体外释放特性考察

目的:制备熊果酸脂质体,优化熊果酸脂质体的处方工艺,并研究其理化性质及体外释放特性。方法:采用摇瓶法考察熊果酸在不同pH介质中的油水分配系数;采用薄膜-超声法制备熊果酸脂质体,以包封率为指标,通过正交试验优选熊果酸脂质体的处方工艺。采用透射电镜观察其形态,激光粒度测定仪测定其粒径和zeta电位,动态透析法考察其体外释放的特性。结果:熊果酸油水分配系数lgPo/w随pH增大而降低,且均>0.5,说明熊果酸具有较好的亲脂性。优选的处方工艺为载药量6 mg,磷脂-胆固醇2∶1,PBS摩尔浓度0.01 mol.L-1,超声时间3 min。制备的熊果酸脂质体透射电镜下呈球形或椭圆球形,平均粒径(223.7±68.4)nm,zeta电位-20.63 mv,包封率(89.85±1.66)%,48 h体外累计释放率>80%,体外释放符合一级动力学模型。结论:制备的熊果酸脂质体包封率高,体外释放性能良好,具有缓释特性。     

载阿霉素混合胶束的制备及制剂工艺优化

目的制备载阿霉素(DOX)的混合胶束,并优化其冻干制剂工艺。方法以TPGS-甘草次酸偶联物(TG偶联物)和TPGS修饰的羧甲基壳聚糖-大黄酸偶联物(TCR偶联物)为混合胶束载体材料(TCR-TG),利用透析法制备载DOX的混合胶束(DOX/TCR-TG胶束),以载药量、包封率、粒径为评价指标,考察TG偶联物和TCR偶联物的投料比、DOX与TCR-TG的投料比,确定DOX/TCR-TG胶束最佳制备工艺。考察冻干保护剂的种类及用量,确定DOX/TCR-TG胶束的最佳冻干工艺。结果 DOX/TCR-TG胶束平均粒径为(121.3±8.49)nm,PDI为(0.21±0.02),Zeta电位为(-21.9±0.2)mV,载药量为(31.22±3.19)%,包封率为(62.59±6.39)%,其中TG偶联物和TCR偶联物最佳投料比为1∶2,DOX和TCR-TG的最佳投料比为1∶1.7,DOX/TCR-TG混合胶束冻干制剂的最佳保护剂为0.1%甘露醇。结论 TG偶联物与TCR偶联物形成的混合载体材料包载DOX,可制备成载药量和包封率较好,粒径分布均匀,形态圆整的聚合物胶束制剂。     

大黄酚脂质体的制备及其质量评价

目的研究大黄酚脂质体的最佳制备工艺和处方,并对其进行质量考察。方法采用薄膜-超声分散法制备大黄酚脂质体,以包封率为评价指标,采用单因素和正交试验法优化大黄酚脂质体的制备处方和工艺条件,并观察其粒径、形态及稳定性。结果大黄酚脂质体优化后的制备处方和工艺条件为:胆固醇与大豆卵磷脂质量比为1∶3,药脂比为1∶10,pH值为8.2,成膜温度为45℃。按该处方工艺制备的大黄酚脂质体包封率在87%以上。结论优选处方和制备工艺稳定可行,制备的大黄酚脂质体包封率和稳定性高,粒径均匀。     

大黄提取物对急性肝衰大鼠肝性脑病的防治作用

目的:探讨大黄提取物对急性肝衰大鼠肝性脑病的防治作用及其机制。方法:用硫代乙酰胺(TAA)灌胃建立大鼠急性肝衰的肝性脑病模型,观察大黄提取物对肝性脑病大鼠的神经行为改变、神经病学测试、血氨浓度、血浆内毒素浓度和肝脏病理损伤的影响。结果:大黄提取物能明显改善肝性脑病大鼠的神经反射,降低大鼠肝性脑病的分期;显著降低血氨,血浆内毒素浓度,减轻肝脏病理损伤。结论:大黄提取物对TAA引起的大鼠肝性脑病有较好的防治作用,其作用机制与降低血氨、血浆内毒素浓度,保护肝细胞有关。     

ICP-OES/ICP-MS技术研究枯矾及其伪品的差异特征元素及无机元素含量分布

目的:分析临床用枯矾及其伪品铵明矾炮制品的差异无机元素,并建立其特征图谱,为枯矾提供新的质量控制手段。方法:应用ICP-OES及ICP-MS测定枯矾和铵明矾炮制品中22种无机元素的含量,采用SPSS 16. 0软件对原始数据进行分层聚类分析,以SIMCA-P 13. 0软件配合t检验及秩和检验对差异性无机元素进行识别,建立枯矾与伪品的无机元素特征谱。结果:枯矾中主含K,Al等元素,伪品主含Al,Fe等元素;枯矾Cr,Sr,Mn含量相对较高,铵明矾炮制品Mn,Ti,Ga含量相对较高。其中枯矾中K元素含量约为伪品的205倍;相反,Fe,Ti,Mn,Ga等元素,伪品的平均含量远高于枯矾,分别约为枯矾平均含量的33,46,38,27倍。聚类分析将18个样品聚类为枯矾和铵明矾炮制品两大类。共筛选出18种含量具有显著性差异(P 0. 05)的元素,分别为Be,Mg,Al,K,Ti,V,Mn,Fe,Co,Ni,Cu,Ga,As,Sn,Sb,Hg,Tl,Pb。建立了枯矾、伪品枯矾含21种无机元素特征谱。结论:该分析方法可用于枯矾的质量控制。     

延胡索中季铵生物碱的高分辨基质辅助激光解吸电离质谱研究

目的：研究中药中季铵生物碱的基质辅助激光解吸电离质谱行为。方法：以延胡索为例，采用2，5-二羟基苯甲酸为基质，以样品和基质混合均匀点样，直接分析中药生物碱提取物；利用高分辨质谱数据确定生物碱化合物的元素组成。结果：从延胡索中检出并鉴定了去氢紫堇碱等5种季铵生物碱。结论：基质辅助激光解吸电离质谱为中药中季铵生物碱提供了一种快速分析方法。     

血根碱脂质体制备工艺研究

目的：制备包封率较高的血根碱脂质体。方法：采用薄膜分散法、pH梯度法、硫酸铵梯度法制备血根碱脂质体,使用Sephadex G50葡聚糖凝胶柱及HPLC法测定血根碱脂质体的包封率,并以包封率为主要指标优选硫酸铵梯度法的工艺参数。结果：硫酸铵梯度法较适合于制备血根碱脂质体,在单因素筛选的基础上获得一较优处方,其包封率达90%以上,平均粒径为135nm。结论：采用硫酸铵梯度法可制得粒径合适且包封率高的血根碱脂质体,且方法简便易行。     

马钱子总生物碱复合磷脂脂质体的药剂学性质研究

目的:制备了以氢化大豆磷脂(HSPC)和普通大豆磷脂(SPC)为膜材的马钱子总生物碱复合磷脂脂质体,并与相应的单一磷脂脂质体比较药剂学性质。方法:采用浸渍法提取马钱子总生物碱并进行了纯化。采用硫酸铵梯度法和隐形脂质体技术制备了马钱子总生物碱复合磷脂脂质体和相应的2种单一磷脂(HSPC,SPC)脂质体,比较了3者的包封率、粒径、电位、释放度等性质。结果:HSPC-SPC(1∶3)为载药效果最好的复合磷脂比例。当药脂质量比为1∶6时,马钱子总生物碱复合磷脂、SPC和HSPC脂质体的包封率分别为(73.6±2.9)%,(62.9±1.8)%和(54.7±1.0)%(n=3)。与2种单一磷脂脂质体相比,马钱子总生物碱复合磷脂脂质体粒径明显减小但电位没有差别。释放度显著提高,但加入大鼠血浆后,复合磷脂脂质体的释放度显著低于SPC脂质体。结论:考虑到包封率提高、血液中稳定以及磷脂的价格,作为中药抗肿瘤药物载体,复合磷脂脂质体比相应的单一磷脂脂质体更具有开发价值。     

溶石颗粒剂对结石模型大鼠肾骨桥蛋白表达的影响

目的：通过测定用药前后肾脏骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的变化,来阐明民间验方溶石颗粒剂防治肾结石的作用机制。方法：采用乙二醇、氯化胺法致大鼠肾结石,同时每天1次ig给予溶石颗粒剂5.8,11.6,17.4 g·kg^-1,实验全程21 d。每7 d作以下测定：尿标本以EDTA法测定钙浓度,比色法测定草酸浓度；肾组织HE染色,以免疫组化法检测大鼠肾骨桥蛋白的表达。结果：模型组大鼠肾OPN的表达明显增加,与溶剂对照组相比P<0.01,其中21 d模型组OPN的表达最高,OPN的表达为溶剂对照组的1.4倍（0.281 3/0.201 8）；溶石颗粒剂各剂量组均能明显抑制大鼠肾结石模型OPN的表达（P<0.05）,且呈现明显的量效关系；溶石颗粒剂各剂量组能减轻大鼠肾脏草酸钙结晶程度,显著降低大鼠尿钙和草酸浓度(P<0.01)。结论：溶石颗粒剂可以抑制大鼠肾结石模型中OPN的表达。     

盐酸维拉帕米脂质体的制备及其影响因素

 目的 制备盐酸维拉帕米脂质体,并对处方和制备过程中的影响因素进行考察。 方法 分别以被动载药法和硫酸铵梯度法制备盐酸维拉帕米脂质体,对处方进行优化,并考察硫酸铵梯度法的影响因素。测定其粒径、 Zeta 电位和稳定性。 结果 硫酸铵梯度法所得包封率远大于被动载药法,且受硫酸铵浓度、载药温度和载药时间的影响。按优化的处方和工艺制备的盐酸维拉帕米脂质体,包封率大于 95 % ,平均粒径 136 nm ,粒径分布均匀, Zeta 电位为 - 13.4 mV ,稳定性良好。 结论 采用硫酸铵梯度法可成功制备盐酸维拉帕米脂质体,通过对处方和工艺进行优化,可以达到很高的包封率和良好的稳定性。     

温经汤不同煎煮方法比较研究

目的:比较温经汤传统煎煮方法和现代医疗机构煎煮方法所得汤剂的质量差异,为温经汤的临床应用提供科学依据。方法:采用高效液相色谱法测定两种方法所得汤剂中芍药内酯苷、芍药苷、β-蜕皮甾酮、甘草苷、阿魏酸、甘草素、肉桂酸、桂皮醛、丹皮酚、甘草酸铵的含量,并对两种方法所得汤剂的总皂苷和浸膏率进行比较。结果:两种方法所得的汤剂中,芍药内酯苷、芍药苷、甘草苷、甘草素、肉桂酸、甘草酸铵含量差异具有统计学意义(P<0.05),β-蜕皮甾酮、阿魏酸、桂皮醛、丹皮酚、总皂苷、浸膏率差异均无统计学意义(P> 0.05)。结论:两种煎煮方法所得的温经汤质量存在差异,医疗机构煎煮法更具科学性。     

补肺健脾方联合茚达特罗格隆溴铵治疗老年慢性阻塞性肺疾病疗效研究

目的:探讨补肺健脾方联合茚达特罗格隆溴铵对老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者疗效及对磷脂酰肌醇激酶3/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路和炎症因子的影响。方法:选择老年COPD稳定期患者122例,运用随机数字表法分为两组,各61例。对照组给予茚达特罗格隆溴铵治疗,观察组给予补肺健脾方联合茚达特罗格隆溴铵治疗,两组疗程均为8周。比较两组治疗疗效,治疗前后肺功能、COPD评估测试(CAT)问卷评分、6 min步行距离(6MWT)、血清PI3K、血清Akt水平、PI3K/Akt蛋白表达,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-8(IL-8)和白介素-15(IL-15)水平。结果:观察组治疗总有效率高于对照组。治疗后,两组FEV1、PEF、FEV1/FVC和6MWT高于治疗前,而CAT评分、血清PI3K、血清Akt水平、PI3K/Akt蛋白表达灰度值、TNF-α、IL-8、IL-15水平低于治疗前,差异有统计学意义(均P<0.05)。治疗后,两组FEV1、PEF、FEV1/FVC和6MWT高于对照组,而CAT评分、血清PI3K、血清Akt水平、PI3K/Akt蛋白表达灰度值、TNF-α、IL-8、IL-15水平低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:补肺健脾方联合茚达特罗格隆溴铵对老年COPD稳定期患者疗效较好,患者肺功能明显改善,生活质量、运动耐力明显提高,且PI3K/Akt信号通路表达下调,细胞炎症反应降低。     

逍遥丸(水丸)质量标准

目的:建立HPLC测定逍遥丸(水丸)甘草中甘草酸铵的含量.方法:采用HPLC测定甘草中甘草酸铵的含量,色谱柱Agilent(4.6 mm×250 mm,5μm),YMC(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-0.2 mol·L -1醋酸铵缓冲液[0.2 mol·L-1醋酸铵-冰醋酸(33∶1)](62∶38)为流动相,流速1.0 mL· min -1,检测波长250 nm,柱温30℃.结果:甘草酸在0.03974～3.972 μg呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为101.8％,RSD 1.4％(n=9).结论:建立的HPLC操作简便、结果准确、重复性好,耐用性好,可用于逍遥丸丸的质量控制.