三联疗法对兔膝骨性关节炎软骨MMP-1,MMP-13及TIMP-1 mRNA的影响

目的:观察模型兔膝骨性关节炎软骨中MMP-1、MMP-13及TIMP-1 mRNA表达水平及"三联疗法"对它的影响.方法:将56只大耳白兔随机取8只作正常对照组,48只进行手术方法制作兔膝OA模型.8周后待兔膝骨性关节炎模型建立后,随机将48只追模动物分为模型组、中药薰洗组、功能锻炼组、手法弹拨组、扶他林组、三联疗法组.各治疗组分别进行4周治疗后,取股骨内髁内侧退变软骨用反转录-多聚酶链反应的方法检测各治疗组对软骨中MMP-1、-13及TIMP-1 mRNA表达的影响.结果:正常组软骨中MMP-1、MMP-13及TIMP-1 mRNA表达较低,模型组软骨中MMP-1、MMP-13的mRNA表达明显增高,TIMP-1的mRNA检测为阴性表达.各治疗组软骨中MMP-1、MMP-13的mRNA表达降低,三联疗法组比其它治疗组降低显著(P<0.05),各治疗组软骨中TIMP-1的mRNA表达极低,且各治疗组比较差异无统计学意义.结论:各治疗组均能抑制软骨中MMP-1、-13的mRNA表达,不同程度减轻兔膝骨性关节炎软骨的退变,各治疗组对软骨中TIMP-1的mRNA表达无影响.三联疗法组与其它治疗组在抑制MMP-1、MMP-13在兔膝骨性关节炎软骨中比较差异有统计学意义(P<0.05),说明"三联疗法组"在治疗兔膝骨性关节炎抑制基质胶原溶解破坏减轻软骨退变优于其它治疗组,它对兔膝骨性关节炎的治疗作用机制之一可能与抑制MMP-1、-13表达有关.     

自制膝痹膏穴位贴敷治疗膝关节骨性关节炎

目的探讨自制膝痹膏穴位贴敷治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效。方法选取自2014年3月—2016年2月于大连市中医医院骨科A病房收治的膝关节骨性关节炎患者患者60例,试验组与对照组均应用信封法随机分组,对照组30例,外用通络骨质宁膏治疗方案,试验组30例,应用自制膝痹膏穴位贴敷治疗方案治疗,观察两组患者治疗前后的WOMAC骨关节炎指数及临床疗效。结果试验组治疗后膝关节骨关节炎指数(WOMAC)评分及临床疗效均明显高于对照组,有统计学差异(P0.05)。结论膝关节骨性关节炎患者通过自制膝痹膏穴位贴敷治疗后可明显减轻患者疼痛程度,促进局部经络循环,活血化瘀、消肿止痛,改善骨关节代谢,提高患者生活质量及自理能力,临床满意度较高,值得临床推广。     

伤科薰洗方对实验性兔膝骨性关节炎软骨组织形态学的影响

目的：观察模型兔膝关节软骨滑膜形态学的变化,以及伤科薰洗方对实验性兔膝关节软骨光镜下形态学的影响。探讨伤科薰洗方治疗膝骨性关节炎的疗效。方法：32只日本大耳兔随机分成四组：空白组,模型组,扶他林组,中药熏洗组,手术方法制作兔膝骨性关节炎模型,造模成功后中药熏洗组给予中药熏洗汤治疗4周,扶他林组给予扶他林外搽4周。治疗完成后肉眼及光镜观察各组兔膝关节软骨形态及组织学变化,评定中药熏洗汤治疗膝骨性关节炎的疗效。结果：与空白组相比,模型组有明显的组织形态学的改变,差异有统计学意义（P〈0.05）;与模型组和扶他林组相比,中药熏洗组病理改变明显改善,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：本实验成功复制了兔膝骨性关节炎的模型,用伤科薰洗方薰洗有减轻模型兔膝骨性关节炎软骨细胞及细胞外基质破坏的作用。说明中药熏洗汤能有效治疗膝骨性关节炎。     

艾灸治疗对兔KOA软骨损伤及MMP-1和TIMP-1表达调节作用的实验研究

目的:探讨艾灸治疗对膝骨性关节炎(KOA)软骨损伤及MMP-1和TIMP-1的表达调节作用,为艾灸治疗KOA的机理提供实验依据。方法:对兔膝关节注射木瓜蛋白酶制造KOA模型,经艾灸和药物治疗6周后,病理组织评分判断软骨损伤情况,定量图像分析技术检测膝关节软骨中MMP-1和TIMP-1光密度的改变,并计算MMP-1与TIMP-1的比值(MMP-1/TIMP-1)变化情况。结果:艾灸组软骨病理评分和MMP-1光密度均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05),TIMP-1的光密度与模型组比差异无统计学意义(P>0.05),但MMP-1/TIMP-1明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05),艾灸治疗作用与药物组相似。结论:艾灸能够起到减轻KOA软骨破坏,减轻关节病损的作用,其对KOA的治疗机制可能是通过减轻MMP-1的破坏作用,降低MMP-1/TIMP-1实现的。     

乌头注射液对膝骨关节炎模型兔关节软骨细胞MMP-1、MMP-3、MMP-13的影响

目的:观察关节腔注射乌头注射液对兔膝骨关节炎模型关节软骨MMP-1、MMP-3、MMP-13的影响,初步探讨乌头注射液治疗骨性关节炎的可能作用机理。方法:50只兔随机分为正常组、模型组、玻璃酸钠组、正清风痛宁组和乌头注射液组,除正常组外其余各组兔经关节腔注射木瓜蛋白酶溶液诱导骨关节炎模型,2周后各组分别于第1、4、7、10 d共4次关节腔注射给药,1周后处死兔取膝关节软骨组织,肉眼观察关节软骨改变,采用免疫组织化学法检测关节软骨MMP-1、MMP-3、MMP-13表达。结果:乌头注射液组关节软骨MMP-1、MMP-3、MMP-13表达较模型组和各药物对照组均明显降低,组间比较均有统计学意义(P0.05)。结论:乌头注射液关节腔注射能够显著降低膝关节骨性关节炎模型兔关节软骨MMP-1、MMP-3、MMP-13表达,对骨性关节炎软骨组织改变具有一定保护作用。     

中药萃取超导透入治疗兔膝骨关节炎疗效的实验研究

目的:研究中药组方补肾通络方萃取物经超导透入治疗膝骨性关节炎的疗效,探讨其防治骨性关节炎的可行性。方法:24只新西兰大白兔随机分为模型组(8只)、中药组(8只)、治疗组(8只)。右膝关节内注射木瓜蛋白酶建立兔膝骨性关节炎模型,左膝为正常对照组。成模后中药组患膝外涂中药组方萃取物,治疗组将中药萃取物经超导透入患膝,8周后镜下观察各组动物模型关节软骨、滑膜组织形态学变化及硝酸还原酶法测NO浓度。结果:中药组滑膜及软骨组织形态学改变略轻于模型组,治疗组关节改变较模型组明显减轻,且滑膜组织NO浓度明显降低(P<0.01);结论中药萃取物超导透入较传统外敷用药更能够减轻兔膝骨性关节炎的软骨退行性变和滑膜炎症。     

阳和汤含药血清对膝骨性关节炎兔膝软骨MMP-1、MMP-3和TIMP-1表达的影响

目的:阳和汤含药血清对膝骨性关节炎兔膝软骨MMP-1、MMP-3和TIMP-1表达的影响。方法:按照阳和汤药配方水煎阳和汤汤剂,将10只新西兰大白兔5只/组随机分为两组,含药血清制备组兔50ml/只,早晚各灌胃1次,连续3d;空白组灌胃等剂量蒸馏水。末次灌胃3h后,腹主动脉取血,分离血清～20℃备用。将30只白兔10只/组随机分为假手术组、模型组和阳和汤含药血清治疗组(治疗组),采用改良Hulth法制备关节炎模型,构建模型当日,治疗组兔子右膝关节腔注射1.5ml含药血清,每日1次;假手术组和模型组注射等剂量的普通血清,连续注射7d。兔处死后取右膝软骨组织通过HE染色进行病理分析和TUNEL染色进行凋亡分析,商业试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)水平;westernblot分析软骨组织中Bcl-2、Bad、cleaved-caspase-3、MMP-1、MMP-3和TIMP-1蛋白表达。结果:HE病理分析结果显示,与模型组相比,治疗组兔膝关节软骨损伤明显改善,Tunel显示凋亡细胞比例明显降低(P0.05),同时软骨组织中MDA和血清中LDH的水平明显降低,SOD含量显著上升(P0.05);Westernblot结果显示,与模型组相比,治疗组兔软骨组织中MMP-1的表达量明显降低,MMP-3和TIMP-1蛋白表达显著提高(P0.05)。结论:阳和汤含药血清能够通过降低MMP-1的表达,上调MPP-3和TIMP-1的表达改善兔膝骨性关节炎软骨损伤。     

夏季贴敷膏治疗膝关节骨性关节炎(膝痹病-风寒湿痹型)的临床观察

目的:观察夏季贴敷膏治疗膝关节骨性关节炎(膝痹病-风寒湿痹型)的临床疗效。方法:将102例本病患者随机分为A组(51例)和B组(51例)。A组采用夏季贴敷膏,B组采用麝香壮骨膏外用。治疗2周后观察两组疼痛、肿胀、活动度、WOMAC评分改善情况及疗效。结果:治疗后A组和B组疼痛、肿胀、活动度、WOMAC评分及疗效差异均有统计学意义(P0.05)。结论:夏季贴敷膏治疗膝关节骨性关节炎(膝痹病-风寒湿痹型)疗效好,值得推广。     

虎力散胶囊联合通络骨质宁膏治疗膝关节骨性关节炎80例临床观察

目的:观察内服虎力散胶囊内服、通络骨质宁膏外用治疗膝关节骨性关节炎的临床效果。方法:选取80例膝关节骨性关节炎患者为研究对象,给予虎力散胶囊内服联合通络骨质宁膏外用治疗,半月为1个疗程,连续治疗2个疗程。对比治疗前后临床疗效。结果:治疗后患者疼痛、关节肿胀等主要症状有所改善,总有效率76%;疼痛VAS评分较治疗前有所降低,炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平有所下降,治疗前后比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:虎力散胶囊内服联合通络骨质宁膏外用能有效改善膝关节骨性关节炎患者的临床症状,缓解关节疼痛,抗炎作用明显,疗效较好,值得临床推广应用。     

骨痛膜对兔膝骨性关节炎病理形态学与氨基己糖影响的实验研究

目的:观察骨痛膜对日本大耳白兔膝关节骨性关节炎病理形态学与氨基己糖含量的作用与影响。方法:将30只日本大耳白兔随机分为正常组、造模组、治疗组(骨痛膜组)、对照组(通络祛痛膏组)、基质膏组,除正常组(只切开皮肤)外,均行右股静脉、臀下静脉结扎造兔膝骨性关节炎模型。造模8周后,予以骨痛膜、通络祛痛膏、基质膏外敷。治疗3周后取材,首先肉眼观察各组兔的膝关节软骨表面情况,然后将剪取的部分关节软骨标本,进行光镜和电镜观察并摄像,剩余部分关节软骨标本依照标准曲线计算法测定氨基己糖含量。结果:①肉眼观察、光镜和电镜下正常组兔的膝关节软骨基本无破坏;造模组关节软骨破坏严重;对照组关节软骨破坏程度较造模组轻;治疗组关节软骨破坏程度较造模组明显减轻。②正常组和治疗组比较氨基己糖含量差异无统计学意义(P0.05);造模组、对照组、基质膏组氨基己糖含量分别与正常组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:骨痛膜外敷对膝骨性关节炎模型兔的关节炎具有明确的治疗效果。     

葛根素对兔膝关节骨性关节炎的影响

目的：观察葛根索（Pue）治疗兔膝关节骨性关节炎的关节软骨的基质金属蛋白酶及其抑制剂的水平。方法：将兔50只随机分为正常组、模型组、生理盐水组、透明质酸组、葛根素组等五组。后四组采用Huhh方法建立兔膝关节骨性关节炎模型,生理盐水组、透明质酸组、葛根素组分别于动物模型制备完成后膝关节内注射生理盐水、透明质酸、葛根素各0．3ml,5周共10次。治疗后1周,采用免疫组化检测基质金属蛋白酶-1（MMP-1）及其抑制剂（TIMP-1）的表达。结果：正常组有少许MMP-1及TIMP-1的阳性表达,模型组MMP-1的表达量增加,葛根素组和透明质酸组MMP-1的阳性细胞数较模型组减少,表达量较模型组降低,葛根素组与模型组和生理盐水组比较减少明显有差异（P〈0．05）。而TIMP—l表达呈阴性,生理盐水组与模型组相似;TIMP—l在葛根素组和透明质酸组中的表达均较低,且无显著的差异。结论：葛根素具有-定的抑制细胞外基质中胶原的降解作用,从而有可能减缓骨性关节炎的病程进展,其机制可能与抑制MMP-1生成有关。实验结果为防止骨性关节炎提供理论依据。     

益肾活血方治疗兔膝骨性关节炎的实验研究

目的：观察益肾活血方对家兔膝骨性关节炎模型的疗效及作用机制。方法：将30只新西兰大耳兔随机分成3组,用制动法复制膝骨性关节炎模型。造模1周后,正常组和模型组用生理盐水,药物组用益肾活血方灌胃。于灌胃第6周后,对组织病理学,关节液中IL-1、TNF-α和MMP-3含量的影响进行观察。结果：病理组织学观察药物组软骨破坏减轻,与模型组比较,关节液中IL-1、TNF-α和MMP-3含量明显降低（P〈0.05）。结论：益肾活血方能缓解兔膝骨性关节炎模型关节软骨破坏,并能有效抑制炎症细胞因子（IL-1,TNF-α等）、MMP-3的释放,从而延缓对软骨的降解作用可能是其作用机制。     

跌打通痹膏对兔膝骨关节软骨细胞MMP-1,MMP-3,MMP-13及COL-Ⅱ的mRNA表达的影响

目的:研究跌打通痹膏对兔膝骨关节炎关节软骨细胞MMP-1,MMP-3,MMP-13及COL-Ⅱ的mRNA表达的影响,探讨跌打通痹膏干预软骨基质降解的作用机制。方法:新西兰兔60只随机分成空白组、假手术组、模型组、跌打通痹膏组、骨通贴组,每组12只。空白组不做任何处理,模型组、跌打通痹膏组、骨通贴组采用改良Hulth造模法,假手术组打开关节腔后不做处理,直接缝合。正常组、假手术组不予处理,模型组、跌打通痹膏组、骨痛贴组分别用胶带、跌打通痹膏、骨痛贴膏贴敷治疗4周。术后第5周各组随机选择1只兔处死验证造模,进行膝关节软骨形态肉眼观察和切片光镜观察,检测关节软骨中MMP-1,MMP-3,MMP-13及COL-Ⅱ的mRNA表达。结果:1)膝关节软骨形态肉眼观察和切片光镜观察:模型组与空白组有差异,跌打通痹膏组、骨通贴组与模型组比较有差异,跌打通痹膏组与骨通贴组比较无差异。2)MMP-1,MMP-3,MMP-13和COL-Ⅱ的mRNA表达检测:模型组与空白组比较,MMP-1,MMP-3及MMP-13的mRNA表达显著提高,差异有统计学意义(P0.01),COL-ⅡmRNA表达显著降低,差异有统计学意义(P0.01);跌打通痹膏组、骨通贴组与模型组比较,MMP-1,MMP-3及MMP-13的mRNA表达显著降低,差异有统计学意义(P0.01),COL-ⅡmRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P0.05);跌打通痹膏组与骨通贴组比较,MMP-1,MMP-3,MMP-13及COL-Ⅱ的mRNA表达差异无统计学意义(P0.05)。结论:1)跌打通痹膏和骨通贴对KOA均有治疗作用,可延缓KOA的病程,且两者间差异无统计学意义。2)跌打通痹膏通过抑制MMP-1,MMP-3及MMP-13的mRNA表达,减缓COL-Ⅱ降解,从而有效保护膝骨关节炎模型兔关节软骨,延缓关节软骨退变。     

新火针对家兔膝骨性关节炎基质金属蛋白酶-1、金属蛋白酶抑制剂-1影响的实验研究

目的观察新火针对家兔膝关节骨性关节炎模型血清基质金属蛋白酶(MMP-1)、金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1)的调节作用,探讨其防治膝骨关节炎的作用机制。方法将40只正常新西兰兔随机分为空白组、模型组、西药组、传统火针组、新火针组,每组8只。参照KITOH方法制造膝关节骨性关节炎模型,造模后第7天开始,分别用玻璃酸钠、传统火针、新火针对各治疗组(西药组、传统火针组、新火针组)家兔进行治疗。疗程结束后采用ELISA法测定各组家兔血清中MMP-1、TIMP-1含量。结果与空白组比较,模型组家兔血清MMP-1和TIMP-1表达极显著升高(P0.01);经治疗后,西药组、传统火针组和新火针组家兔血清中MMP-1和TIMP-1表达较模型组极显著降低(P0.01);三个治疗组间两两比较无显著性差异,其中西药组和新火针组MMP-1水平已接近于空白组,传统火针组与空白组仍有显著差异(P0.05)。结论新火针是治疗膝关节骨性关节炎的一种简便有效方法,其作用机制可能是通过降低血清中异常升高的MMP-1含量,调节MMP-1和TIMP-1比例关系,调节细胞外基质的降解过程,从而减缓软骨退变的进程。     

超微肿痛贴治疗膝骨陛关节炎疗效及其对关节液中IL-1β的影响

目的观察超微肿痛贴治疗膝骨性关节炎的临床疗效及其对关节液中IL-1β的影响。方法将60例膝骨性关节炎患者随机分为治疗组（超微肿痛贴组）与对照组（狗皮王膏组）;比较两组临床疗效及患者膝关节液中IL-1β变化情况。结果治疗组在临床疗效和降低IL-1β方面均优于对照组。结论超微肿痛贴治疗膝骨性关节炎临床疗效较好;降低膝关节液IL-1β浓度为其作用机制之一。     

健步通络熏蒸液对KOA大鼠血清和关节液中TNF-α、MMP-3的影响

目的:探索健步通络熏蒸液防治膝关节骨性关节炎的机制及其临床意义,为辨证施治提供依据。方法:选用Wistar大鼠32只,随机分为正常组,健步通络熏蒸液组,模型组,扶他林组。建立膝关节骨性关节炎模型,用药8周后处死动物,酶联免疫吸附法检测血清和关节液中IL-1β、MMP-3的含量及行病理切片观察软骨组织的形态学变化。结果:膝骨性关节炎大鼠血清和关节液中TNF-α、MMP-3明显高于正常组和治疗组。结论:健步通络熏蒸液减少了各种细胞活性因子的渗出,从而减轻了各种细胞因子对关节软骨的损害,直接或间接改善了软骨基质代谢,促进软骨修复。     

丹参注射液对体外培养兔膝关节软骨细胞MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的:观察丹参注射液对体外培养兔膝关节软骨细胞MMP-9、TIMP-1表达情况的影响。方法:取12只6月龄新西兰大白兔关节软骨作体外细胞培养,培养后软骨细胞随机分为正常组、模型组、玻璃酸钠组、丹参组4组。采用Western blot法测定软骨细胞内MMP-9、TIMP-1蛋白表达,RT-PCR检测软骨细胞内MMP-9 mRNA、TIMP-1mRNA相对表达量。结果:Western Blot检测结果:相对正常组,OA模型组的软骨细胞组织中MMP-9、TIMP-1蛋白表达明显上调(P0.01);玻璃酸钠组MMP-9、TIMP-1蛋白表达低于空白模型组(P0.05),丹参组MMP-9、TIMP-1蛋白表达低于空白模型组(P0.01);丹参组MMP-9蛋白表达低于玻璃酸钠组,TIMP-1蛋白表达高于玻璃酸钠组。荧光定量PCR检测结果:与空白组相比,OA模型组家兔关节软骨组织MMP-9 mRNA相对表达量显著升高(P0.01),MMP-9/TIMP-1失衡;治疗后,与OA模型组相比,玻璃酸钠组、丹参组MMP-9mRNA相对表达量显著降低(P0.01),TIMP-1mRNA相对表达量显著升高(P0.01);与玻璃酸钠组相比丹参组MMP-9mRNA相对表达量显著降低(P0.01),TIMP-1mRNA相对表达量显著升高(P0.01)。结论:丹参注射液能够有效纠正MMP-9和TIMP-1在骨性关节炎软骨组织中异常表达,减轻软骨损伤,有效治疗骨性关节炎。     

中医内服加外敷疗法治疗膝关节骨性关节炎对照观察

目的：探讨中医内服加外敷疗法治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效。方法：将144例膝关节炎患者分为两组。治疗组采用内服虎力散胶囊＋外敷通络骨质宁膏治疗。对照组口服美洛昔康胶囊治疗。结果：治疗组72例中,显效48例,有效19例,无效5例,总有效率93.10%。结论：中医内服加外敷疗法治疗膝关节骨性关节炎效果显著,在治疗膝关节骨性关节炎方面有很好的前景。     

中药洗剂对兔膝骨性关节炎模型组织形态学及关节液中MMP-3的影响

目的:探讨中药洗剂对兔膝骨性关节炎(OA)模型组织形态学及关节液中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的影响。方法:将新西兰大白兔40只,雌雄不限,体质量(2.50±0.10)kg,随机分为4组:A组(正常对照组)、B组(模型对照组)、C组(中药洗剂组)、D组(扶他林软膏组),每组10只。适应性喂养7天后,B、C、D组兔膝关节腔内注入木瓜蛋白酶造成OA及滑膜炎病变模型。术中注意不刺激关节软骨及滑膜;A、B组造模成功后每天用热水袋热敷膝关节,早晚各1次,C组造模成功后用中药洗剂热敷膝关节,早晚各1次,D组造模成功后用扶他林软膏涂抹后每天用热水袋热敷膝关节,早晚各1次,以上各组均外敷右膝关节表面,每次均为40分钟,治疗8周后,测关节液中MMP-3的含量。结果:1)中药洗剂、扶他林软膏都能明显改善兔膝关节功能活动;2)模型对照组血清MMP-3含量高于正常对照组(P0.05),中药洗剂可降低关节液MMP-3水平;中药洗剂组、扶他林软膏组与模型对照组比较差异有统计学意义(P0.05),但中药洗剂组与扶他林软膏组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:1)中药洗剂外敷与扶他林软膏外擦对兔膝骨性关节炎均有治疗作用;2)中药洗剂可降低关节滑液中MMP-3含量,对骨性关节炎具有治疗作用。     

膝痛宁穴位贴敷配合关节内注射玻璃酸钠治疗膝关节骨性关节炎疗效观察

目的:观察膝痛宁穴位贴敷配合关节内注射玻璃酸钠治疗膝关节骨性关节炎的疗效.方法:将60例膝关节骨性关节炎的患者随机分为治疗组和对照组各30例,治疗组以膝痛宁穴位贴敷配合关节内注射玻璃酸钠为治疗方法,对照组以常规电体针法治疗.结果:治疗组总有效率为86.7%,治愈率36.7%;对照组总有效率为73.3 %,治愈率23.3...