冬虫夏草及人工虫草抗肝纤维化作用谱效关系研究

目的 研究冬虫夏草及人工虫草的高效液相色谱指纹图谱与其抗肝纤维化药效的相关性,以揭示其抗肝纤维化作用的＂药效成分组＂.方法 考察虫草高效液相色谱指纹图谱较优的测定分析方法,通过该HPLC测定分析法得到冬虫夏草、发酵虫草菌粉、百令胶囊及蛹虫草菌粉胶囊的指纹图谱,找出特征共有峰,以LX-2肝星状细胞系为模型研究其对肝纤细胞的抑制效果,用pearson相关分析研究谱效相关性.结果 冬虫夏草、发酵虫草菌粉、百令胶囊及蛹虫草菌粉胶囊的高效液相色谱指纹图谱中共有10个特征共有峰,其中4、5、10号峰与肝星状细胞（LX-2）细胞抑制效果（OD值）相关性最好.结论 冬虫夏草、发酵虫草菌粉及蛹虫草菌粉胶囊对LX-2细胞均有抑制效果,冬虫夏草及人工虫草HPLC指纹图谱与其抗肝纤维化作用之间有一定对应关系,可以作为目前冬虫夏草及人工虫草抗肝纤维化作用的质量控制的有效方法.     

金水宝胶囊中发酵虫草菌粉多糖的指纹图谱研究

目的建立金水宝胶囊发酵虫草菌粉多糖的指纹图谱。方法沸水回流提取金水宝胶囊中的发酵虫草菌粉多糖,经酸水解和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化后采用HPLC法分析,色谱条件为Phenomenex OOG-4252-EO C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.05 mol/L磷酸盐缓冲液梯度洗脱,体积流量1 m L/min,进样量20μL,检测波长250 nm,柱温30℃。结果对组成发酵虫草菌粉多糖的11种单糖成分进行鉴别,并建立了发酵虫草菌粉多糖指纹图谱。通过指纹图谱分析10批金水宝胶囊中各单糖成分,相似度均大于0.999,无显著性差异。结论建立的发酵虫草菌粉多糖指纹图谱操作简单,专属性强,重复性好,能够客观评价金水宝胶囊的质量。     

人工虫草与冬虫夏草成分的比较研究

目的比较人工北虫草、发酵虫草菌粉和冬虫夏草中,核苷及碱基类成分、甘露醇及麦角甾醇的含量,为开发利用虫草的药用价值提供理论依据。方法采用RP-HPLC法测定虫草中核苷及碱基类成分,采用HPLC-ELSD法分析虫草中甘露醇的含量,采用RP-HPLC法分析虫草中麦角甾醇的含量。结果 11批冬虫夏草中核苷及碱基类成分(尿嘧啶、尿苷、肌苷、鸟苷、腺嘌呤、腺苷和虫草素)的平均含量分别为0.008 0、0.738 8、0.251 1、0.200 6、0.003 7、0.229 4、0.005 0 mg/g。10批人工北虫草中核苷及碱基类成分的平均含量分别为0.012 3、0.110 0、0.081 2、0.648 0、0.001 6、0.071 5、0.699 9 mg/g,12批发酵虫草菌粉中核苷及碱基类成分的平均含量分别为0.017 0、1.057 1、0.127 9、0.944 8、0.009 7、1.232 8、0.029 0 mg/g;冬虫夏草、人工北虫草、发酵虫草菌粉中甘露醇的平均含量分别为88.66、44.23、17.40 mg/g;冬虫夏草、人工北虫草、发酵虫草菌粉中麦角甾醇的平均含量分别为1.723 8、5.123 3、5.321 9 mg/g。结论人工北虫草、发酵虫草菌粉含有与冬虫夏草相似的主要活性成分,但人工虫草与冬虫夏草中各种活性成分的含量存在差异。     

不同处理方法对发酵虫草菌粉质量的影响

目的:考察粉碎及加热温度、时间对发酵虫草菌粉(Cs-C-Q80)活性成分的影响。方法:对发酵虫草菌粉进行粉碎,放置在不同温度下,加热不同时间,采用HPLC方法测定腺苷的含量;采用梯度洗脱法测定指纹图谱,利用中药色谱指纹图谱相似度评价软件对指纹图谱进行相似度分析;并对6个主要色谱峰进行比较分析。结果:不同粒度,加热不同温度及时间对腺苷的含量及化学指纹图谱均无明显影响,指纹图谱相似度均大于0.9,6个主要色谱峰峰面积RSD5.0%,保留时间RSD3.0%。结论:综合指标成分定量测定及化学指纹图谱分析方法,能较全面地考察工艺中不同处理方法对发酵虫草菌粉内在质量的影响,可为制剂生产的质量控制提供参考。     

生姜HPLC-DAD指纹图谱的优化研究

目的优化生姜高效液相色谱指纹图谱,为其质量控制提供可靠依据。方法采用Aichrom Bond-AQ C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)和水(B)流动相,梯度洗脱(0~8min,25%A;8~20min,25%A→60%A;20~40min,60%A→70%A;40~70min,70%A→88%A;70~80min,88%A→90%A;80~85min,90%A),检测波长280nm,流速1ml/min,柱温40℃。采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004A版)"进行指纹图谱分析。结果分别优化色谱柱、检测波长、流动相和HPLC梯度洗脱条件,标定了15个共有指纹特征峰,指认了6-姜酚、8-姜酚、香兰素3个色谱峰,建立10个批次的生姜HPLC-DAD色谱指纹图谱,相似度均大于0.9。结论该方法经方法学考察符合指纹图谱技术要求,为有效地控制生姜的品质评价和质量控制提供参考依据。     

冬虫夏草水提液和醇提液HPLC指纹图谱分析

目的:建立冬虫夏草水提液和醇提液的高效液相指纹图谱。方法:采用高效液相色谱对20批冬虫夏草和2批发酵冬虫夏草菌粉的水提液和醇提液进行分析;并对所获得的色谱数据进行相似度计算和聚类分析。结果:建立了冬虫夏草水提液和醇提液指纹图谱,水提液指纹图谱确定了7个共有峰,醇提液指纹图谱确定了8个共有峰;冬虫夏草水提液和醇提液指纹图谱相似度评价结果均显示20批冬虫夏草样本的相似度系数大于0.9,2批发酵冬虫夏草菌粉的相似度系数小于0.9;冬虫夏草水提液和醇提液共有峰聚类分析结果均显示,20批冬虫夏草与2批发酵冬虫夏草菌粉分别聚为不同类。结论:本文所建立的方法稳定可靠,可以对冬虫夏草质量进行综合评价,为其提高产品质量控制提供了依据。     

黔产钩藤药材茎枝和叶的HPLC指纹图谱比较

目的:比较黔产钩藤带钩茎枝和叶的HPLC指纹图谱,分析二者化学成分的差异,为钩藤叶的后续研究提供实验依据。方法:采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004A版计算钩藤带钩茎枝和叶各10批样品的HPLC指纹图谱的相似度,以钩藤碱和异钩藤碱为指标成分进行指纹图谱比较,色谱条件为Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇(A)-0.02%氨水(B)梯度洗脱(0~45 min,30%~60%A;45~75 min,60%~64%A;75~90 min,64%~70%A;90~95 min,70%~70%A),流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长245 nm,进样量10μL。结果:确定了16个共有峰构成10批钩藤茎枝药材的特征指纹图谱,各批样品的相似度均>0.87;16个共有峰构成10批钩藤叶特征指纹图谱,各批样品的相似度均>0.80。结论:钩藤叶中异钩藤碱含量高于钩藤茎枝,但二者含有的钩藤碱含量相差不大。建立的指纹图谱条件能用于比对钩藤茎枝和叶中主要化学成分,为钩藤叶的药用研究提供参考。     

基于主成分分析和聚类分析的发酵虫草菌粉类产品氨基酸比较研究

目的分析不同发酵虫草菌粉类产品氨基酸的含量差异,结合聚类分析和主成分分析法评价发酵虫草菌粉类产品的质量。方法采用氨基酸自动分析仪测定氨基酸含量,色谱柱为LCA K06/Na离子柱,流动相为柠檬酸钠0.06 mol/L(pH 3.45)(A)-柠檬酸钠0.1 mol/L(pH 10.85)(B),梯度洗脱:0~3.5 min,100%A;3.5~11.0 min,85%A;11.0~17.0 min,80%A;17.0~23.5 min,67%A;23.5~28.0 min,20%A;28.0~45.0 min,100%B,体积流量为0.45 m L/min洗脱泵+0.25 m L/min衍生泵;检测波长440 nm(脯氨酸)+570 nm(其余氨基酸);温度为58~74℃梯度控温,进样50μL,外标法测定氨基酸含量。结果分别对3种发酵虫草菌粉类产品A、B、C中氨基酸进行含量测定,产品A总氨基酸质量分数为251.82~265.93 mg/g,产品B总氨基酸质量分数为279.67~333.40 mg/g,产品C总氨基酸质量分数为321.37~370.86 mg/g,样品各批次间一致性较好。产品A和产品B为同一原料药,氨基酸含量差异不明显,产品C中组氨酸和精氨酸含量与产品A和产品B存在较大差异。主成分分析筛选的前3个主成分的累积方差贡献率达到93.551%,包含了各样品中氨基酸含量的大部分信息。聚类分析将30批样品聚为2类,其中产品A和产品B聚为一类,产品C聚为一类,聚类分析结果与实际情况相符。变量聚类分析表明当氨基酸变量聚为5类时,随机选择其中的5个变量能够准确反映发酵虫草菌粉氨基酸的质量。结论通过氨基酸含量差异研究,能够有效区别不同发酵虫草菌粉类产品,结合主成分分析和聚类分析能够客观评价发酵虫草菌粉类产品的质量。     

淫羊藿黄酮类成分指纹图谱研究

目的建立淫羊藿中黄酮类成分HPLC指纹图谱。方法采用Agilent ZORBAX Eclispse SB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱(0～8 min,15%→25%A;8～25 min,25%A;25～32 min,25%→33%A,32～48 min,33%→38%A;48～60 min,38%→60%A;60～70 min,60%→85%A;70～75min,15%A),流速1.0m L/min,柱温30℃,检测波长为270nm,进样量10μL。对11批淫羊藿指纹图谱进行相似度分析及方法学考察。结果 11批淫羊藿药材有21个共有峰,相似度为0.845～0.952,对5个色谱峰进行了归属;方法学考察结果表明,建立的分析方法重复性、精密度、稳定性良好;相似度分析将11批淫羊藿分为4大类,与淫羊藿物种鉴定结果一致。结论不同产地淫羊藿有一定的相似性,HPLC指纹图谱能够为淫羊藿的物种鉴定及内在质量评价提供依据。     

冬虫夏草蛋白LC-MS指纹图谱研究

目的采用高效液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)研究冬虫夏草蛋白指纹图谱,为冬虫夏草质量研究提供科学依据。方法色谱柱:Sepax bio-C4 (4. 6 mm×250 mm,3μm),流动相:0. 1%甲酸-水(A),0. 1%甲酸-乙腈(B),梯度洗脱,流速0. 6 m L/min,柱温30℃,检测器MSD。采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2004 A版)对12批冬虫夏草指纹图谱进行分析,确定共有峰并进行相似度评价。结果建立了冬虫夏草蛋白LC-MS对照图谱,标示出了9个共有峰,12批冬虫夏草样品指纹图谱与对照图谱的相似度均0. 90,而6种其他虫草样品指纹图谱与对照图谱的相似度均0. 10,说明建立的指纹图谱方法专属性强。结论建立的分析方法专属性强,重复性及稳定性良好,可用于冬虫夏草的真伪鉴别。     

冬虫夏草及其混淆品亚香棒虫草的鉴别

目的 :比较鉴别冬虫夏草与亚香棒虫草。方法 :对冬虫夏草、亚香棒虫草的外观性状、显微鉴别、紫外吸收、纸层析等进行了鉴别研究。结果 :冬虫夏草与亚香棒虫草的外观性状、显微鉴别、紫外吸收有明显差异 ,纸层析没有差异。结论 :亚香棒虫草不能混充冬虫夏草入药 ,应予以鉴别     

适用于冬虫夏草和新疆虫草鉴别的DNA条形码技术研究

目的：应用DNA条形码技术对青海冬虫夏草和新疆虫草进行鉴别,考查ITS序列和18S序列作为DNA条形码的可行性。方法：利用ITS序列和18S序列对冬虫夏草和新疆虫草的DNA提取物进行PCR扩增并测序,并与GenBank数据库中下载的共23条近缘虫草的ITS序列和18S序列进行比对;利用MEGA 6.0分析软件计算的K-2-P距离,构建虫草样品和参比序列的18S、ITS序列的NJ树。结果：通过遗传距离和NJ树分析可知,本研究所用20份青海冬虫夏草和新疆虫草样本确定为虫草类,与其近缘虫草各自聚为一支;ITS序列构建的NJ树能够从种属水平上将青海冬虫夏草和新疆虫草成功鉴别开来。结论：ITS序列较18S序列更适合作为冬虫夏草和新疆虫草的条形码进行鉴定研究。     

Antiaging effect of Cordyceps sinensis extract

This experiment studied the effect of Cordyceps sinensis extract (CSE) on mice aged by d-galactose and castrated rats to analyse its antiaging effect. Water maze and step-down type avoidance tests were used to examine the effect of CSE on learning and memory. CSE shortened escape latency, prolonged step-down latency and decreased the number of errors in mice aged by d-galactose. The effect of CSE on the sexual function of castrated rats was evaluated by measuring the penis erection latency, mount latency and ejaculation latency. CSE appeared to shorten penis erection latency and mount latency in castrated rats. The study also measured the effect of CSE on the activity of age-related enzymes. The results showed that CSE improved the activity of superoxide dismutase, glutathione peroxidase and catalase and lowered the level of lipid peroxidation and monoamine oxidase activity in the aged mice. The study demonstrated that CSE can improve the brain function and antioxidative enzyme activity in mice with d-galactose-induced senescence and promote sexual function in castrated rats. All of these findings suggest that CSE has an antiaging effect.     

冬虫夏草化学成分研究进展

冬虫夏草是我国的名贵中药材,是冬虫夏草菌寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫的子座及幼虫尸体的复合体.含有氨基酸、核苷、多糖、甾醇及甘露醇等多种活性成分,另外还含有脂肪酸、挥发油以及无机元素等多种成分.对近年来国内外关于冬虫夏草化学成分的研究进行综述.     

冬虫夏草及人工虫草核苷类成分的TLCS研究

目的：以腺苷、尿苷、鸟苷为指标测定天然虫草与人工虫草菌丝体中核苷类有效成分的含量，并对不同虫草样品进行薄层色谱指纹图谱对比研究，探求虫草中核苷类化合物鉴别的专属性。方法：采用高效薄层色谱扫描法进行含量测定，同时建立了不同虫草样品的荧光淬灭薄层色谱指纹图谱。结果：虫草菌丝体中测得腺苷、尿苛鸟苷成分高于天然虫草。结论：该法快速简便，重现性好，能有效鉴别出虫草中核苷类成分以及评价不同电菌样品的质量。     

人工蛹虫草中核苷类化学成分的研究

目的：研究人工蛹虫草Cordyceps militaris中核苷类化学成分。方法：建立人工蛹虫草中核苷类化合物的提取方法并用色谱水法分离各个核苷类化合物。结果：分离鉴定了4个化合物，分别是尿嘧啶核苷（1）、腺嘌呤核苷（2）、鸟嘌呤核苷（3）和酪氨酸（4）。结论：从核苷类物质分析来看，该人工蛹虫草菌丝体中核苷类物质含量丰富，主要为化合物1、2、3，三者总和约占菌丝体干重的1．3％。     

青海冬虫夏草资源初探

本文对青海省冬虫夏草资源作了初步介绍，为进一步开发利用，提供依据。     

HPLC法测定冬虫夏草中腺苷含量

采用甲醇为溶剂,提取冬虫夏草及其虫体、子座中的核苷类成分,用ＨＰＬＣ法测定腺苷的含量;色谱条件以μＢｏｎｄａｐａｋ Ｃ_(１８)（４．６ ｍｍ × ２５０ ｍｍ,１０μｍ）为色谱柱,０．０１ ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液（ｐＨ６．５）－ 甲醇（８５： １５）为流动相,检测波长 ＵＶ２６０ ｎｍ,ｒ＝０．９９９９,线性范围 ０．２～１μｇ,回收率１０４．５％。     

冬虫夏草与蔗蛾虫草药理作用的比较

蔗蛾虫草与冬虫夏草在镇静、耐缺氧、扩张气管、雄激素样作用、抗炎及毒性等药理作用方面相似。作者认为蔗蛾虫草可以代替冬虫夏草在临床上应用。     

RP-HPLC测定天然虫草与人工虫草中核苷类成分的含量

 目的分析不同来源的天然虫草与人工虫草中主要核苷类成分的差异。方法应用RP-HPLC检测18个样品中尿苷、腺嘌呤、腺苷、虫草素的含量。Symmetry Shield Rp18柱(3.9 mm×150 mm,5μm),以乙腈-水为流动相,梯度洗脱。流速0.2～1.2mL·min^-1,检测波长260 nm,柱温30℃。结果本法高效灵敏,重现性好。所测人工虫草核苷类成分的含量较天然虫草高,不同产地天然虫草4种主要的核苷类成分的差异较不同来源人工虫草的小。结论本法能有效鉴别虫草的核苷类成分,可用于天然虫草和人工虫草中核苷类成分的分析,评价不同来源虫草的质量。