益肾降脂方对慢性肾功能衰竭大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

目的观察益肾降脂方对大鼠肾小球系膜细胞(Glomerularmesanialcell,GMC)增殖的影响。方法采用灌胃法给予实验性慢性肾功能衰竭(Chronicrenalfailure,CRF)大鼠益肾降脂方汤剂,观察其对大鼠血清GMC增殖的影响。结果与灌服生理盐水的对照组大鼠相比,益肾降脂方治疗组能明显抑制系膜细胞增殖(P<0.01),且优于至灵胶囊治疗组(P<0.01)。结论该方可能是通过抑制GMC的增殖起到治疗慢性肾功能衰竭的作用。     

炎症因子及益肾活血泄浊汤对大鼠肾小球系膜细胞生长的影响

目的：探讨部分炎症因子及益肾活血泄浊汤对体外培养大鼠肾小球系膜细胞生长的影响。方法：应用脂多糖（ＬＰＳ）及白细胞介素６（ＩＬ－６）作为刺激因子，观察其促系膜细胞增殖的作用；并采用血清药理学方法，提取动物的含药血清作用于一述受刺激的系膜细胞，观察益肾活血泄浊汤对系膜细胞增殖的影响。结果：ＬＰＳ和ＩＬ－６具有明显促进系膜细胞增殖作用。结论：系膜细胞是益肾活泄浊汤发挥治疗作用的重要靶细胞，这可能是该方防     

益肾泻浊方治疗慢性肾衰的临床与实验研究

探讨中药益肾泻浊方(主药：黄芪、太子参、生地、淫羊藿、黄精、红花、炙水蛭、制大黄)治疗慢性肾功能衰竭(CRF)的疗效与机制。32例患者以该方治疗1a,并与28例包醛氧化淀粉治疗的相同病例比较。观察两组患者治疗前、后证候及BUN、Scr的变化,用5／6肾切除的方法诱导大鼠肾小球硬化模型并分别给予益肾泻浊方及依那普利治疗6周,观察大鼠BUN、Scr、IL-6、TNF和残余肾组织的病理改变。结果：中药组患者治疗后临床证候明显改善,BUN、Scr明显下降。西药组治疗前后对比,各项指标均无明显差异。动物实验显示,益肾泻浊方能明显改善模型鼠肾功能,肾脏组织学损伤也相应减轻,且疗效优于依那普利组。提示：益肾泻浊方能有效改善患者临床证候及肾功能,延缓肾小球硬化模型鼠的病变进程。     

泻浊祛瘀益肾法治疗慢性肾功能衰竭的临床研究

目的：观察泻浊祛瘀益肾法治疗慢性肾功能衰竭的临床疗效。方法：将84例慢性肾功能衰竭患者按1：1随机分为治疗组和对照组。两组均常规西医对症治疗,治疗组加服泻浊祛瘀益肾法的方药。结果：治疗组与对照组在提高血红蛋白、降低Scr和BUN方面比较差别有显著性意义（P〈0．05）。结论：运用泻浊祛瘀益肾法治疗慢性肾功能衰竭能够清除代谢产物,减轻肾脏负担,改善肾功能。     

益肾胶囊对慢性肾衰大鼠肾小球系膜增殖硬化的影响

目的:观察益肾胶囊对慢性肾衰大鼠肾小球系膜增殖硬化的影响。方法:采用灌胃法给予7/8肾切除慢性肾功能衰竭大鼠益肾胶囊,观察给药后大鼠肾脏病理学变化。结果:与灌服生理盐水的未治疗组大鼠相比较,益肾胶囊能明显阻抑系膜细胞及系膜基质的增殖,减轻肾小球全球硬化、节段硬化、球囊粘连及肾小球代偿性肥大;降低 IgM、Fib 系膜区沉积及 TGF-β系膜区表达(P<0.05或P<0.01)。结论:该方能减轻7/8肾切除大鼠肾小球系膜增殖硬化程度。     

肾康注射液对常规培养体系中肾小球系膜细胞增殖的影响

目的：探讨中药肾康注射液(SK)对肾小球系膜细胞增殖的影响。方法：采用人的肾小球系膜细胞进行体外培养,用氚标记的胸腺嘧啶核苷(^3H-TdR)掺入法观察其增殖情况。结果：不同肾康注射液剂量组H-TdR掺入率均明显低于对照组。结论：肾康注射液可明显抑制人肾小球系膜细胞增殖。肾康注射液业师叶传惠教授依据中医理论．结合现代中药药理研究成果而研制的中药复方静脉制剂,具有益气活血、降逆泻浊的功效。我们以往的临床与实验研究表明,该药治疗慢性肾功能衰竭的总有效率达81．7％。本研究采用体外培养的huMC进行研究,观察其对常规培养体系中huMC增殖的影响。     

益肾冲剂治疗IgA肾病大鼠的实验研究

目的：探讨中药益肾冲剂对IgA肾病的治疗作用。方法：用牛血清白蛋白(BSA)和葡萄球菌肠毒素B(SEB)诱导SD大鼠IgA肾病模型。用益肾冲剂与强的松治疗，观察其对模型大鼠蛋白尿、肾功能及血浆蛋白的影响以及对肾脏病理的改善。结果：益肾冲剂组对肾病大鼠血浆蛋白水平的改善优于强的松组，对蛋白尿的降低、肾功能的保护及减少免疫复合物在肾小球系膜区的沉积与强的松组无明显差异。结论：益肾冲剂通过降低蛋白尿、纠正低蛋白血症、减少IgA在肾小球系膜区的沉积，而对IgA肾病大鼠有保护肾功能。延缓病情发展的治疗作用．     

肾衰宁对体外培养的肾小球系膜细胞增殖及其分泌细胞因子白细胞介素-1的影响

目的：探讨肾衰宁对系膜细胞增殖及其分泌细胞因子白细胞介素－１（ＩＬ １）的影响。方法：采用血清药理学方法，提取动物的含药血清作用于体外培养的人系膜细胞（ＨＭＣ）体系，观察具有益气固本、化瘀泻浊作用的中药肾衰宁对ＨＭＣ增殖及其分泌细胞因子ＩＬ １的影响。结果：肾衰宁具有抑制ＨＭＣ增殖及其分泌细胞因子ＩＬ １的作用，该抑制作用具有一定的量效关系。结论：ＨＭＣ是肾衰宁发挥治疗作用的重要靶细胞，这可能是该方防治慢性肾功能衰竭的机制之一。     

通络益肾方对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞MMP-9/TIMP-1和TGF-β1表达的影响

目的观察通络益肾方对高糖培养下大鼠肾小球系膜细胞增殖、细胞外基质调控系统MMP-9/TIMP-1、TGF-β1表达的影响,探讨其防治糖尿病肾病的可能机制。方法以体外培养的大鼠肾小球系膜细胞为研究对象,将培养的肾小球系膜细胞分为空白对照组、高糖培养组(高糖组)、通络益肾方高、中、低剂量组及西药对照组,用大鼠含药血清给药,分别给予相应处理48 h后,采用四甲偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,ELISA法检测细胞培养上清液TGF-β1、MMP-9和TIMP-1的水平。结果与空白对照组比较,高糖组肾小球系膜细胞增殖明显(P<0.01),上清液中TGF-β1和TIMP-1水平显著增加,MMP-9水平减少(均P<0.01);通络益肾方高、中、低剂量均能明显抑制肾小球系膜细胞增殖(P<0.01或P<0.05),下调TGF-β1和TIMP-1表达,上调MMP-9表达(P<0.05或P<0.01),尤以高剂量组效果最佳,呈剂量依赖性;西药对照组上述指标表达水平和中药中剂量组相当(P>0.05)。结论通络益肾方可能通过抑制肾小球系膜细胞增殖和下调TGF-β1、促进细胞外基质的降解而拮抗糖尿病肾病肾小球硬化,发挥其肾保护作用。     

益肾降浊方防治慢性肾衰肾组织纤维化的机理研究

目的:观察益肾降浊方对5/6肾切除慢性肾衰(CRF)大鼠肾组织TGF-β_1、BMP-7及体外培养SD大鼠肾小球系膜细胞(MC)和肾间质成纤维细胞(FC)增殖情况,探讨益肾降浊方治疗慢性肾功能衰竭的机理。方法:采用动物模型和细胞培养的方法。清洁级7周龄雄性SD大鼠60只,随机分为空白组、假手术组、CRF模型组、CRF对照组、CRF治疗组。分别进行手术造模并予不同药物治疗后,免疫组化法观察肾组织TGF-β_1、BMP-7;体外培养SD大鼠肾小球系膜细胞(GMC)、肾间质成纤维细胞(RIF),制备各组含药血清,细胞给药后MTT法测定细胞增殖情况。结果:益肾降浊方可降低CRF大鼠血清BUN、SCr(P0.05),降低残余肾组织中TGF-β_1而提高BMP-7(P0.05);肾组织HE染色结果示肾组织纤维化减轻;益肾降浊方含药血清能抑制体外培养SD大鼠GMC和RIF的增殖(P0.05)。结论:益肾降浊方能够有效地减缓慢性肾衰肾组织纤维化发展,是防治慢性肾衰的有效方药。     

保肾片对大鼠肾间质成纤维细胞作用的实验研究

目的 :从细胞水平上探讨对慢性肾功能衰竭疾病治疗有效的中药复方保肾片对体外培养的大鼠肾间质成纤维细胞的影响。方法 :本实验取SD大鼠肾间质成纤维细胞进行体外培养 ,以保肾片喂服SD大鼠后的含药血清加入到培养细胞中 ,应用MTT法和流式细胞仪检测细胞的增殖和凋亡。结果 :喂服中药保肾片的大鼠血清 ,与不喂药的大鼠血清对照组相比 ,显著抑制细胞增殖 (P <0 .0 5 ) ,并且能诱导细胞发生凋亡。结论 :保肾片延缓慢性肾衰进展的作用机理可能与抑制肾间质成纤维细胞增殖和诱导其发生凋亡有关     

肾衰宁分散片治疗腺嘌呤致慢性肾衰竭大鼠的实验研究

目的:观察肾衰宁分散片对慢性肾衰竭(CRF)大鼠的治疗作用。方法:72只SD大鼠,雌雄各半,随机分为6组:正常对照组、模型对照组、尿毒清组、肾衰宁大、中、小剂量组,后5组大鼠用0.5%腺嘌呤饲料喂养制作CRF模型。各治疗组给相应药物治疗7周后,测定各组大鼠肾功能、血白蛋白、血常规和电解质水平,观察大鼠一般情况和肾脏组织改变。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠血清BUN、Scr水平明显升高,白蛋白水平明显降低,钾、钠、磷水平明显升高,钙水平明显降低,红细胞数(RBC)、血红蛋白(HGB)、细胞压积(HCT)水平明显降低,大鼠肾脏指数增大,病理检查出现明显异常;肾衰宁分散片能明显改善上述指标。结论:肾衰宁分散片能通过改善CRF大鼠肾功能,调整血电解质紊乱,升高血清白蛋白水平,改善贫血和肾脏组织病理变化,有效治疗CRF。     

当归芍药散加味方及其拆方对中老年大鼠淋巴细胞增殖的影响

目的：研究当归芍药散加味方(Dss)及其拆方对中老年大鼠淋巴细胞功能的影响。方法：选用中老年大鼠(18月龄),分组灌服DSS全方及其拆方水煎液,3周后,各组大鼠脾细胞分别加入ConA、异丙肾上腺素(ISO)、心得安或DSS大鼠血清诱导淋巴细胞增殖,用四氮唑蓝比色法比较各组大鼠淋巴细胞增殖(A值)变化。结果：全方组、君臣药组、佐药组大鼠淋巴细胞增殖的A值与对照组比较,差异有显著性(P<0．01);加入ISO后全方组各ConA浓度A值明显减少(P<0．01),再加入心得安或DSS大鼠血清后,A值又恢复到未加ISO水平。结论：DSS及其拆方均可促进老年大鼠淋巴细胞增殖,DSS可拮抗ISO的抑制淋巴细胞增殖作用。     

补肾活血复方含药血清对MSCs增殖和骨向分化影响的时效及量效研究

目的:筛选补肾活血复方含药血清促SD大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖和骨向分化最佳取血时间和浓度。方法:10月龄SD雌性大鼠30只,随机分为补肾活血复方低(11.6 g/kg)、中(34.8 g/kg)、高(104.4 g/kg)剂量组,每组10只。灌胃1次/d,连续12 d。分别于末次灌胃后的0.5、1.0、1.5、2.0、3.0 h取血,分离血清,然后将上述复方含药血清分别用不同添加浓度干预3月龄SD大鼠MSCs,以MTT法检测细胞增殖情况,以碱性磷酸酶(ALP)确定各组MSCs骨向分化情况。结果:补肾活血复方含药血清促MSCs增殖以复方低剂量灌胃12 d,末次灌胃1 h后取血,25%的添加浓度为佳;促MSCs骨向分化以复方高剂量灌胃12 d,末次灌胃1 h后取血,25%～30%的添加浓度为佳。结论:补肾活血复方含药血清能促进SD大鼠MSCs增殖及骨向分化。     

益肾活血胶囊抗肾纤维化的实验研究

目的:观察益肾活血胶囊对慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠肾组织纤维化及血浆内皮素(ET)和肿瘤坏死因子(TNF)的影响。方法:用腺嘌呤灌胃建立大鼠 CRF 模型,予益肾活血胶囊进行防治。结果:治疗组大鼠肾功能明显改善,ET 及 TNF 在血浆中含量明显降低,和病理组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。肾组织病理见病理组病损严重,肾小球系膜细胞增生,间质明显纤维化,而治疗组则明显减轻。结论:益肾活血胶囊具有改善肾功能,拮抗血浆 ET 及 TNF,抗肾纤维化的作用。     

调肝益气通络方药物血清对骨髓间充质干细胞体外增殖的影响

目的:通过观察调肝益气通络方对大鼠间充质干细胞增殖能力的影响,从而评价该方的促增殖能力。方法:腹腔注射"CCl4-橄榄油"混悬液制备Wistar小写大鼠(35只)肝纤维化模型;其中30只灌胃给予调肝益气通络方(低、中、高3个剂量)1个月,制备含药血清;另外5只用于MSC细胞的分离与培养;用含药血清诱导MSC向肝细胞的分化连续7 d;在各检测点进行形态学观察及通过MTT对细胞增殖情况进行评价。结果:各浓度含药血清在加入1⁷ d后,其细胞数量均比常规培养组增多,并同用药剂量呈正比,浓度越大细胞数量越多,细胞数随着时间的推移而不断增大。结论:调肝益气通络方对大鼠骨髓里的间充质肝细胞的增殖能力具有显著的促进作用。     

荜茇提取物对大鼠骨髓间质干细胞MSC的增殖作用及与化学官能团的关系

目的:观察荜茇挥发油和水溶性部分对大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)体外增殖的影响,并进一步探讨了与分子中化学官能团的关系.方法:使用密度梯度法分离大鼠骨髓间质干细胞,体外培养,经Brdu标记和CD44染色及两者双重染色鉴定后,观察在培养液中添加不同浓度荜茇挥发油及其水溶性部分的条件下MSC的生长变化.应用形态学、MTT法和5-溴脱氧尿嘧啶(5-Bromodeoxyuridine,Brdu)、增殖细胞核抗原(Proliferation cellnuclear antigen,PCNA)免疫细胞化学方法测定细胞增殖活性.结果:荜茇挥发油以浓度依赖方式促进MSC增殖活力和增加Brdu、PCNA阳性细胞数,与对照组比较有显著性(P＜0.05).经GC-MS检测,荜茇挥发油含C=C(50.66%)、-OH(27.02%)、多种官能团(5.05%)等;而荜茇水提物对MSC无增殖作用.结论:荜茇挥发油明显促进MSC的增殖,这种作用可能与分子中C=C、-OH等官能团有关.     

补肾壮骨颗粒含药血清对骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响

目的：探讨补肾壮骨颗粒含药血清对去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞（ MSCs）体外增殖的影响。方法：选用10只6月龄SD大鼠去卵巢制作骨质疏松模型,对骨质疏松骨髓间充质干细胞进行分离和体外培养,传代后的 MSCs分为OP组、OP＋补肾壮骨颗粒含药血清组和OP＋空白血清组,倒置显微镜观察各组MSCs的生长情况,进行形态学观察,并用四甲基偶氮唑蓝（ MTT）法测定生长曲线。结果：OP＋含药血清组,MSCs呈典型的集落生长,细胞呈长梭形,突起细长且多,细胞增殖较旺盛,细胞数量不断增加,随着传代次数的增多,细胞增殖速度减慢。OP组及OP＋空白血清组MSCs接种后胞体立体感下降,体积较大,细胞偏圆形,突起收缩,增殖速度较慢,细胞数量减少;随着传代次数的增多,细胞增殖速度显著减慢。OP＋补肾壮骨颗粒含药血清组骨髓间充质干细胞增殖能力明显提高,生长曲线有显著性差异。结论：补肾壮骨颗粒含药血清能促进去卵巢骨质疏松大鼠MSCs的增殖。     

清络通痹颗粒含药血清对破骨细胞骨吸收的影响

目的:确定清络通痹颗粒(QLT)含药血清的制备方法并观察其对体外培养破骨细胞的活性和骨吸收的影响。方法:选用高效液相色谱外标一点法测定,QLT含药血清中青藤碱的含量以确定含药血清的制备条件;乳鼠破骨细胞1×108/mL加入96孔板,将QLT 3.6,7.2,14.4 g.kg-1给药的大鼠含药血清1∶10稀释,分别加入各孔培养48 h,观察其对破骨细胞增殖、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性及破骨细胞形成的骨吸收陷窝的影响。结果:QLT 7.2,14.4 g.kg-1给药的含药血清可明显抑制破骨细胞的增殖能力和吸收陷窝面积(P<0.05,P<0.01),QLT 3.6,7.2,14.4 g.kg-1给药的含药血清可明显抑制破骨细胞的TRAP活性(P<0.05,P<0.01)。结论:QLT含药血清可抑制破骨细胞增殖、TRAP活性和骨吸收能力,对破骨细胞引起的骨质破坏产生抑制作用。