TACO与细胞膜具有非依赖肌动蛋白方式的结合

目的 探讨TACO与细胞膜之间的相互作用.方法 利用免疫荧光分析检测内源性TACO在细胞内的分布情况,然后利用细胞膜内膜表面展示分析和差速离心分离亚细胞组分分析检测TACO蛋白与细胞膜的结合,以及该结合与细胞膜上肌动蛋白纤维之间的相互关系.结果 TACO主要分布在细胞膜和核膜附近区域.结论 TACO与细胞膜具有非依赖肌动蛋白方式的结合,这一结果为阐释TACO在细胞吞噬初始阶段的功能提供了有力的实验依据.     

遗传性红细胞膜缺陷相关溶血性贫血研究进展

遗传性红细胞膜缺陷相关溶血性贫血主要是由于编码红细胞膜蛋白及骨架蛋白的基因发生突变引起的遗传性疾病,相关基因突变可导致红细胞膜变形性及渗透脆性降低,红细胞半衰期缩短.近年来,随着分子生物学技术的不断进步,国外不少研究证实了红细胞膜缺陷相关溶血性贫血的分子机制,本文就红细胞膜缺陷所致溶血性贫血的临床表现及分子机制进行综述,为国内医生的临床诊疗提供思路.     

人肺腺癌细胞膜钾通道特性研究

目的 研究人肺腺癌细胞系A-549细胞膜离子通道特性.方法 采用膜片钳技术全细胞记录方式检测A-549细胞膜离子通道的特性.结果 人肺腺癌细胞系A-549细胞获得稳定的高阻封接的最佳培养时间是细胞传代培养48 h,细胞膜跨膜离子电流具有电压依赖性,在500 ms内不失活,其翻转电位为-70～-80 mV,与细胞膜K 电流的平衡电位相一致.该细胞平均膜电容为(15.13±1.02) pF,TP为 110 mV时细胞膜跨膜通道的电流密度为(48.73±8.58) pA/pF.TP为-40～ 110 mV时,细胞膜跨膜通道激活时间常数为12.57～3.14 ms.该跨膜电流能被钾通道阻断剂TEA和CsCl所阻断,表明该跨膜离子电流为K 电流.结论 在人肺腺癌细胞系A-549细胞膜上存在一种类似于神经元和肌肉细胞膜上的延迟整流性K 通道.     

氟灭酸对豚鼠微动脉平滑肌细胞BKCa通道的增强作用

目的 观察氟灭酸对微动脉平滑肌细胞电生理学特性的影响.方法 应用全细胞膜片钳技术在离体豚鼠脑动脉(BA)和肠系膜动脉(MA)的平滑肌细胞上,观察氟灭酸(100～1 000 μ mol/L)对微动脉平滑肌细胞膜电流的影响.结果 4-氨基吡啶(1 mmol/L)和四乙胺(1mmol/L)都可以部分抑制微动脉平滑肌细胞膜电流.氟灭酸可以浓度依赖的增强微动脉平滑肌细胞膜电流,100、300和1000μmol/L氟灭酸分别使BA平滑肌细胞膜电流幅度(+40 mV)增强了(36±14)％、(136±26)％和(223±24)％,使MA平滑肌细胞膜电流幅度(+40mV)分别增强了(45±11)％、(166±24)％和(278±24)％.氟灭酸增强平滑肌细胞膜电流具有电压依赖性,氟灭酸主要增强0～+40 mV电压区间的激活电流,其中对+40 mV激活电流的增强作用最强.背景灌流四乙胺(1mmol/L)能显著抑制氟灭酸对微动脉平滑肌细胞膜电流的增强作用.结论 氟灭酸可以浓度和电压依赖的激活微动脉平滑肌细胞膜上BKCa通道.     

细胞膜色谱技术用于中药活性成分筛选的研究进展

细胞膜色谱技术是生物色谱法在中药活性成分研究中的一个热点,适用于中药及天然药物药效物质基础的筛选研究.简要综述了细胞膜色谱技术在中药活性成分筛选方面的研究进展,并探讨了细胞膜色谱技术在其发展中所面临的问题及对策.     

基于肿瘤细胞膜纳米载药系统的构建及评价

目的 研究并明确肿瘤细胞膜纳米粒载药系统的体外应用价值.方法 本实验设计并成功构建了一种新型肿瘤细胞膜纳米粒载药系统.该系统以肿瘤细胞膜为载体,以聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为内核,负载香豆素-6(Coumarin-6)作为荧光探针.在体外通过流式细胞仪及激光共聚焦成像分析并评价肿瘤细胞膜纳米粒(CNPs)及红细胞膜纳米粒(RNPs)、脂质体纳米粒(LNPs)在肿瘤细胞中的摄取差异.结果 CNPs可粘附到肿瘤细胞表面,且肿瘤细胞对CNPs摄取最多.结论 肿瘤细胞膜纳米粒载药系统在肿瘤靶向递药领域具有应用前景.     

胆红素对细胞膜Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性的影响

目的了解不同剂量的胆红素作用下人红细胞膜Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性的变化.探讨胆红素的细胞膜毒性及其机理.方法洗涤人抗凝红细胞,钼酸铵定磷法测定.结果随着胆红素剂量增加,细胞膜Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性逐渐降低,呈现一定剂量～效应关系.当胆红素剂量为25 μmol·L-1时,对两种酶活性的抑制效应与对照相比有显著性差异.结论胆红素对细胞膜Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性均有抑制作用.     

肝细胞肝癌与癌旁肝组织胰岛素受体结合特性的对比研究

目的　研究肝细胞肝癌与癌旁肝组织胰岛素受体密度与亲和力的差异。方法　采用体外受体结合实验 ,通过 Scatchard分析 ,计算两种细胞膜的最大结合容量 (Bmax)与平衡解离常数 (Kd值 )。结果　肝癌细胞膜胰岛素受体 Bmax为 1.94± 0 .6 4pm ol/ mg蛋白 ,Kd值为 2 .12± 0 .6 2 nmol/ L;癌旁肝组织细胞膜胰岛素受体 Bmax为1.42± 0 .5 7pmol/ mg蛋白 ,Kd值为 2 .2 1± 0 .78nm ol/ L。肝癌细胞膜胰岛素受体 Bmax显著高于癌旁组织细胞膜 (P<0 .0 5 ) ,而肝细胞肝癌与癌旁肝组织细胞膜的胰岛素受体亲和力无显著性差异 (P>0 .0 5 )。结论　肝细胞肝癌较癌旁肝组织表达胰岛素受体增高 ,而受体亲和力无明显差异     

蝎毒抗癌多肽对CNE-2Z细胞膜电位的影响

目的: 观察蝎毒多肽(APBMV)对鼻咽癌CNE-2Z细胞株细胞膜电位的影响.方法: 细胞经培养传代,分组处理.空白对照组加生理盐水,其他3组分别加入浓度为8,12和16 mg/L的APBMV. 采用玻璃微电极细胞内记录法测定CNE-2Z细胞膜电位,MTT法观察APBMV对CNE-2Z细胞的毒性作用. 结果: CNE-2Z 细胞经APBMV处理48 h后,细胞膜负电位(13.00±3.58) mV明显小于空白对照组(23.00±8 .21)mV,P<0.01,细胞膜呈去极化状态;CNE-2Z细胞代谢MTT的能力下降,显示明显的毒性反应.结论: APBMV可能具有膜毒素的作用,通过降低CNE-2Z细胞膜电位 ,继而影响肿瘤细胞的增殖.     

低浓度α-生育酚对神经元细胞膜的保护作用

目的: 探讨低浓度α-生育酚对神经元细胞膜的保护作用. 方法: 培养SD胎鼠皮层神经元细胞作为实验对象. 将神经元细胞进行分组:正常对照组、氧自由基损伤组和不同浓度α-生育酚处理组(10,20,40和80 mg/L). 用Fenton反应对神经元细胞膜造成损伤. 在损伤后1及2 h分别对各组神经元进行PI染色,利用激光共聚焦显微镜观察神经元细胞膜的损伤情况,并用TBA法检测神经元细胞外液中丙二醛(MDA)生成量. 结果: 80 mg/L浓度α-生育酚可减少氧自由基对神经元细胞膜的损伤, 且可减少MDA生成量. 结论: 80 mg/L浓度α-生育酚可以有效对抗氧自由基对神经元细胞膜的损伤.     

蝎毒抗癌多肽对CNE-2Z细胞膜电位的影响

目的观察蝎毒多肽(APBMV)对鼻咽癌CNE-2Z细胞株细胞膜电位的影响.方法细胞经培养传代,分组处理.空白对照组加生理盐水,其他3组分别加入浓度为8,12和16mg/L的APBMV.采用玻璃微电极细胞内记录法测定CNE-2Z细胞膜电位,MTT法观察APBMV对CNE-2Z细胞的毒性作用.结果CNE-2Z细胞经APBMV处理48h后,细胞膜负电位(13.00±3.58)mV明显小于空白对照组(23.00±8.21)mV,P<0.01,细胞膜呈去极化状态;CNE-2Z细胞代谢MTT的能力下降,显示明显的毒性反应.结论APBMV可能具有膜毒素的作用,通过降低CNE-2Z细胞膜电位,继而影响肿瘤细胞的增殖.     

柚皮苷抗红细胞膜脂质过氧化作用研究

目的 研究柚皮苷在体外对氧自由基引发的红细胞膜脂质过氧化的影响.方法 采用黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶(Xan-Xo)系统、紫外线(UV)照射及H2O2在体外诱导红细胞膜脂质过氧化,脂质过氧化物用硫代巴比妥酸比色法测定.结果 柚皮苷能抑制上述3种方法引起的红细胞膜硫代巴比妥酸反应物(TBARS)生成的增加,并呈剂量依赖性.结论 柚皮苷对氧自由基引起的细胞膜脂质过氧化损伤有保护作用.     

初次献血对红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性的影响

目的探讨初次献血对红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性的影响.方法应用比色法分别检测50例符合献血条件的健康初次献血者献血前后的红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性,并对结果进行分析.结果初次献血者献血前后红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性分别为3.121±0.441和2.907±0.397 μmol.Pi/107 RBC.h,两者比较无明显差异(P＞0.05).结论初次献血对红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性无影响,献血不会造成红细胞功能损伤.     

人红细胞膜固定相在抗人胸腺细胞免疫球蛋白生产中的应用

为了建立一种兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白生产中抗红细胞杂抗体的去除方法,收集人红细胞,裂解收集红细胞膜,以硅胶为载体,将人红细胞膜固定在其表面制备成红细胞膜固定相,用人红细胞膜固定相吸附兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白中抗红细胞杂抗体并测定其使用效率.结果表明,用人红细胞膜固定相吸附杂抗体,兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白总收率从2 979 mg/L提高至3 607 mg/L,进行t检验,P<0.01,具显著性差异,并且人红细胞膜固定相重复使用15次保持81.8%的活性,具有良好的应用前景.     

薄荷油对HaCaT细胞膜流动性及膜电位的影响及其机制研究

目的 考察薄荷油作为天然经皮促透剂对HaCaT皮肤角质形成细胞膜流动性及膜电位的影响,探讨薄荷挥发油经皮促透作用机制.方法 采用细胞增殖-毒性试验(CCK-8)测定薄荷挥发油的细胞毒性,利用荧光漂白恢复技术(FRAP)考察不同浓度薄荷挥发油对细胞膜流动性的影响,采用流式细胞仪测定不同浓度薄荷挥发油对细胞膜电位的改变和对HaCaT细胞内Ca2+浓度的影响,采用超微量CA2+-ATP酶试剂盒测定薄荷油对HaCaT细胞内Ca2-ATP酶活性的影响.结果 与常用化学促透剂氮酮相比,薄荷挥发油具有较低细胞毒性.薄荷挥发油可增加HaCaT细胞膜流动性、降低细胞膜电位,降低Ca2+-ATP酶活性、增加HaCaT细胞内Ca2+浓度而影响细胞Ca2平衡.结论 薄荷挥发油可能通过影响皮肤表皮细胞Ca2平衡而改变细胞膜流动性及膜电位,降低皮肤屏障作用,从而促进药物的透皮吸收.     

硒对阵发性睡眠性血红蛋白尿病人红细胞膜的保护作用——硒对PNH病人红细胞膜Na~+.K~+-ATP酶活性和膜流动性的影响

硒对人红细胞膜具有一定的保护作用。阵发性睡眠性血红蛋白尿(简称PNH)病人红细胞膜有病理性缺陷,其Na.K-ATP酶和膜流动性明显低于对照组,将人红细胞用亚硒酸钠预处理后,PNH病人红细胞膜Na.K-ATP酶活性和膜流动性明显升高(P<0.02)。     

烧伤大鼠血清对肠上皮细胞膜磷脂代谢及膜流动性的影响

目的观察烧伤大鼠血清对肠上皮细胞膜损害的影响.[ HTXBS 方法制作烧伤大鼠模型,采集血清;肠上皮细胞株IEC-6经烧伤大鼠血清刺激后,细胞膜磷脂分析采用高效毛细管电泳法;膜流动性测定用荧光偏振法;并对膜丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性进行测定.结果 IEC-6经烧伤血清作用后,早期即出现细胞膜流动性下降;膜磷脂含量降低,组分改变;SOD活性持续降低;但MDA含量增加.结论烧伤后血清中的有害物质可致肠上皮细胞膜磷脂降解、脂质过氧化增强,导致膜流动性降低,并可能是肠上皮细胞膜结构和功能损害的重要机制.     

红细胞膜外翻囊泡钙摄取方法的建立

细胞膜上的ATP和Mg~(2 )依赖性的Ca~(2 ),Mg~(2 )-ATP酶(即钙泵)的基本功能是主动转运Ca~(2 ),维持胞内Ca~(2 )的相对恒定.细胞内Ca~(2 )浓度持续升高将会危及细胞的各种功能.细胞膜Ca~(2 )转运障碍与高血压发病有密切关系.红细胞膜是研究各种浆膜Ca~(2 )转运的理想模型.作者改进了文献方法.建立了以红细胞膜IOV来研究Ca~(2 )摄取的方法,为研究高血压发病过程中细胞膜Ca~(2 )的摄取异常机理,提供了一种可靠的手段.     

红花黄色素对氧自由基引起人红细胞膜损伤的保护作用

目的:研究羟基红花黄色素A(HSYA)和红花黄色素B(SYB)对超氧阴离子自由基(O2-.)引发的人红细胞膜氧化损伤的保护作用。方法:采用邻苯三酚制备人红细胞膜过氧化损伤模型,研究HSYA和SYB对人红细胞膜氧化损伤的影响。结果:O2-.能引起红细胞膜脂质过氧化,使膜流动性下降。而红细胞膜经过一定量的HSYA和SYB预处理后,膜流动性提高。结论:HSYA和SYB对氧自由基引发的红细胞膜损伤具有一定的保护作用。     

盐酸氯丙嗪促进药物直肠吸收机制研究

目的 应用Caco-2细胞(the human colon adenocarcinoma cell lines)考察盐酸氯丙嗪对直肠黏膜上皮细胞完整性与稳定性的影响.方法 以不同浓度的盐酸氯丙嗪作用Caco-2细胞后,采用Bradford法测定上清液吸光度值[D(595)],计算细胞膜破坏百分率以r解Caco-2细胞膜完整性的变化;应用DPH(1,6-diphenyl-1,3,5-hexatriene)荧光探针法测定细胞膜脂质DPH的荧光强度并计算荧光偏振度,评价细胞膜流动性的变化,以了解其对Caco-2细胞膜稳定性的影响.结果 盐酸氯丙嗪浓度>140 μmol/L时能影响Caco-2细胞膜完整结构,使细胞内容物释出,且浓度与对膜破坏程度呈现S型曲线.盐酸氯丙嗪浓度<112 μmol/L时Caco-2细胞膜脂质荧光偏振度值随浓度的增高及作用时间的延长,呈逐渐下降的趋势(P<0.05).结论 盐酸氯丙嗪在低浓度时能够增大Caco-2细胞膜的流动性,使其结构紊乱,影响膜的稳定性;当超过一定浓度时可破坏细胞膜的完整性,使细胞内容物释出;这些改变很可能是盐酸氯丙嗪促进药物跨膜转运吸收的机制之一.