喉癌患者多药耐药基因,多药耐药相关蛋白基因的表达及临床意义

应用逆转录－多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,检测了３５例喉癌患者ＭＤＲ－１ｍＲＮＡ、ＭＲＰｍＲＮＡ基因的表达,同时,应用免疫组化ＳＡＢＣ法检测了６１例患者ＭＤＲ－１基因产物Ｐ－ｇｐ。喉癌组织中ＭＤＲ－１ｍＲＮＡ及Ｐ－ｇｐ的阳性表达率分别为３７．１％（１３／３５）和３４．４％（２１／６１）;３５例ＲＴ－ＰＣＲ检测标本中,两项指标间有一定的相关性（Ｐ〈０．０１）。晚期患者（Ｔ３－４,１８／１０）,     

急性髓系白血病H-ras、凋亡及多药耐药的研究

目的研究急性髓系白血病（ＡＭＬ）Ｈｒａｓ／Ｐ２１、抗凋亡基因（ｂｃｌ２）、细胞凋亡与多药耐药基因（ｍｄｒ１／Ｐｇｐ）对疗效的影响,并证实流式细胞术（ＦＣＭ）检测Ｐｇｐ和逆转录多聚酶链反应（ＲＴＰＣＲ）检测ｍｄｒ１ｍＲＮＡ间的相关。方法用ＦＣＭ检测８５例初治ＡＭＬ患者的Ｈｒａｓ／Ｐ２１、ｂｃｌ２、细胞凋亡和ｍｄｒ１产物Ｐｇｐ的表达;用ＲＴＰＣＲ检测其中４７例的ｍｄｒ１／ｍＲＮＡ。结果Ｐ２１＋／Ｐｇｐ＋者完全缓解（ＣＲ）率明显低于Ｐ２１－／Ｐｇｐ－者（分别为５８．１％和１００％,Ｐ＜０．０２５）,高ｂｃｌ２／Ｐｇｐ＋的ＣＲ率明显低于低ｂｃｌ２／Ｐｇｐ－者（分别为６０％和９６．３％,Ｐ＜０．００５）。Ｐｇｐ＋３１例中２９例ｍｄｒ１ｍＲＮＡ阳性,Ｐｇｐ－１６例中仅２例ｍｄｒ１ｍＲＮＡ阳性。结论Ｐｇｐ＋同时Ｐ２１＋、高ｂｃｌ２者ＣＲ低,ＦＣＭ检测Ｐｇｐ和ＲＴＰＣＲ检测ｍｄｒ１ｍＲＮＡ相关性良好     

喉癌多药耐药基因和多药耐药相关蛋白基因的表达

（１）目的 探讨喉癌组织中多药耐药基因（ＭＤＲ１）和多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）基因的表达及其意义,（２）方法 利用半定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）,检测４１例喉癌及１０例喉乳头状瘤组织ＭＤＲ１和ＭＲＰ基因的表达。（３）结果 ４１例喉癌和１０例喉乳头状瘤组织均有ＭＤＲ１和ＭＲＰ基因的表达,两种基因在两种组织中表达水平无显著性差异（ｔ＝０．２９,２．３５,Ｐ〉０．０５）。１０例喉癌ＭＲＰ基因呈     

急性髓系白血病H—ras,凋亡及多药耐药的研究

目的 研究急性髓系白血病（ＡＭＬ）Ｈ－ｒａｓ／Ｐ２１,抗凋亡基因、细胞凋亡与多药耐药基因的疗效的影响,并证实流式细胞术检测Ｐ－ｇｐ和逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ｍｄｒ－１ ｍＲＮＡ间的相关。方法 用ＦＣＭ检测８５例初始ＡＭＬ患者的Ｈ－ｒａｓ／Ｐ２１、ｂｃｌ－２,细胞凋亡和ｍｄｒ－ｌ产物Ｐ－ｇｐ的表达;用ＲＴ－ＰＣＲ检测其中４７例的ｍｄｒ－ｌ／ｍＲＮＡ。结果 Ｐ２１＾＋／Ｐ－ｇｐ＾＋者完全     

急性白血病多药耐药基因MDR1表达及临床意义

目的 探讨急性白血病（ＡＬ）多药耐药基因ＭＤＲ１的表达及临床意义。方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）,对７７例ＡＬ病人及１０例正常人ＭＤＲ１基因表达进行检测。结果 ７７例ＡＬ病人ＭＤＲ１阳性率为６４．９％（５０／７７）,其平均表达水平为０．２６±０．１９,与对照组比较,差异无显著性（Ｘ＾２＝０．０９４,ｔ＝１．５４８,Ｐ〉０．０５）;复发组和临床耐药组表达水平明显高于初治组和完全缓     

多药耐药基因在淋巴—浆细胞系统恶性肿瘤中的表达及临床意义

本文应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ—ＰＣＲ）技术检测急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）２０例，慢性淋巴细胞白血病（ＣＬＬ）８例，多发性骨髓瘤（ＭＭ）１７例等肿瘤细胞多药耐药（ＭＤＲ１）基因的表达，其中初治２８例，难治复发６例，完全缓解（ＣＲ）１１例。发现ＭＤＲ１基因在ＡＬＬ、ＣＬＬ及ＭＭ中表达阳性率分别为３５．７％，８３．３％及９％。难治复发组明显高于初治及ＣＲ组，三者比较差异显著（Ｐ＜０．０１）。初治ＭＤＲ１基因阴性表达组ＣＲ率（９４．４％）显著低于ＭＤＲ１基因阳性表达组（３０％）（Ｐ＜０．０１）。其结果表明：①淋巴—浆细胞系统恶性肿瘤细胞中ＭＤＲ１发生有原发性和继发性两种形式，其中ＭＭ发生率较低。②淋巴—浆细胞系统恶性肿瘤患者ＭＤＲ１基因表达与肿瘤细胞多药耐药性密切相关，可为临床合理制定化疗方案提供有用的依据。     

荧光定量PCR技术在检测HCV—RNA中的应用

目的 评价荧光定量ＰＣＲ技术测定ＨＣＶ－ＲＮＡ水平的价值,探讨ＰＢＭＣ中检出ＨＣＶ－ＲＮＡ的意义。方法 采用荧光定量ＫＲ及ＲＴ－ＰＣＲ技术同时检测８７例血液透析患者的血清和淋巴细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果血清、淋巴细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ的荧光定量ＰＣＲ检出率（４９．４％、６９．０％）,分别高于相应标本中ＨＣＶ－ＲＮＡ的ＲＴ－ＰＣＲ阳性率（３３．３％、３５．６％）（Ｐ ＜０．０５）。血清、淋巴细胞中同时检出ＨＣＶ－ＲＮＡ的一致率,荧光定量ＰＣＲ法（３１．０％）显著高于ＲＴ－ＰＣＲ定性法（６．９％）（Ｐ＜０．００１）． 荧光定量ＰＣＲ法,淋巴细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ检出率高于血清（Ｐ＜０．０１）。结论 与 ＲＴ－ＰＣＲ相比,荧光定量ＰＣＲ技术检测 ＨＣＶ－ＲＮＡ敏感性较高,对ＰＢＭＣ内ＨＣＶ－ＲＮＡ检测有利于提高ＨＣＶ检测的阳性率。     

多药耐药基因在急性白血病治疗过程中的表达研究

目的 研究多药耐药（ＭＤＲ－１）基因在急性白血症（ＡＬ）治疗中的表达。方法 用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测４７例ＡＬ的８７份骨髓血标本。结果 ①ＭＤＲ－１基因阳性表达率在４０例初诊和２２例完全缓解（ＣＲ）的病例中分别为２２．５％和１３．６％，显著低于未缓及复发者（１１例）和死亡前期者（１４例）的中数值（７２．７％和７８．６％，Ｐ〈０．０１）。②ＣＲ率在其表达阴性的初诊者（３１例）中     

用链亲和素—胶体金原位杂交方法检测白血病多药耐药基因的表达

目的：检测白血病患者骨髓单个细胞多药耐药基因（ＭＤＲ１）的表达。方法：链亲和素－胶体金原位杂交（ＳＡＧ－ＩＳＨ）。结果：５２例患者中２４例（４６．２％）ＭＤＲ１呈阳性表达，其中初治组阳性１０／２８＝３５．７％，复发难治组１２／１８＝６６．７％，两组相差显著（Ｐ〈０．０５）。持续完全缓解组１／４＝２５．０％。结论：ＳＡＧ－ＩＳＨ检测ＭＤＲ１方法简便，敏感且特异，并能准确定位，可预测白血病对化疗的敏感     

ＲＮＡｉ沉默ＰＥＬＰＩ／ＭＮＡＲ基因对子宫内膜癌细胞增殖和细胞周期的作用

【目的】 构建脯氨酸－谷氨酸－亮氨酸富集蛋白１（ＰＥＬＰ１）基因慢病毒表达载体,研究沉默ＰＥＬＰ１／雌激素受体非基因组活性辅助调节因子（ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ）基因表达对子宫内膜癌细胞增殖和周期的作用及机制。【方法】 构建合成靶向ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ＲＮＡｉ慢病毒表达载体,并转染子宫内膜癌Ｉｓｈｉｋａｗａ细胞,Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ ＰＣＲ和ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ｍＲＮＡ和蛋白水平的表达。使用普通培养基和加入Ｅ２的培养基培养各组细胞,ＭＴＴ检测各组细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞生长周期情况;Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＥＲ下游靶基因ｃ－ｆｏｓ,ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１的蛋白表达水平。【结果】 成功构建合成靶向ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ＲＮＡｉ慢病毒表达载体,转染子宫内膜癌Ｉｓｈｉｋａｗａ细胞,转染后 ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ｍＲＮＡ的表达和蛋白的表达分别下降８６％和６５％（Ｐ ＜ ０．０５）。转染后Ｉｓｈｉｋａｗａ细胞与对照组相比增殖抑制（Ｐ ＜ ０．０５）, 细胞周期Ｇ０／Ｇ１期细胞比例增加,Ｓ期细胞比例减少 （Ｐ ＜ ０．０５）。加入雌激素后,三组细胞的生长速度加快,细胞Ｓ期的比例增加,转染组增殖抑制明显（Ｐ ＜ ０．０５）,Ｓ期比例降低（Ｐ ＜ ０．０５）。转染组ＥＲ下游基因ｃ－ｆｏｓ、ｃｙｃｌｉｎ－Ｄ１蛋白水平均显著降低（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 在子宫内膜癌细胞中沉默ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ的表达能能抑制细胞生长、使细胞阻滞在Ｇ１期,下调ＥＲ靶基因蛋白表达,ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ有望成为子宫内膜癌治疗的潜在靶点。     

原发性肾癌组织中MDR1和MRP基因的表达

①目的　研究肾癌组织中多药耐药 (MDR1)基因和多药耐药相关蛋白 (MRP)基因的mRNA表达及其临床意义。②方法　应用定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR) ,检测 2 0例原发性肾癌组织、10例正常人肾脏组织新鲜标本MDR1和MRP基因的mRNA表达水平。③结果　正常肾脏组织和肾癌组织均有MDR1和MRP基因表达 ,肾癌组织MDR1基因表达水平低于正常肾脏组织 ,MRP基因表达水平高于正常肾脏组织 ,差异有显著性 (t=2 .2 93,2 .96 8,P <0 .0 5 ,0 .0 1)。MDR1和MRP基因的表达与肾癌的病理类型、病理分期和组织学分级无关 ,与肾癌病人的无进展生存期无关 ,正常肾脏组织的MDR1基因和MRP基因的表达呈高度正相关关系 (r =0 .932 ,P<0 .0 1) ;肾癌组织MDR1基因和MRP基因的表达无明显相关关系。④结论　MDR1基因和MRP基因复合表达与肾癌固有的多药耐药现象有关     

恶性淋巴瘤mdr1和MRP mRNA及 P-gp表达水平与化疗疗效的相关研究

目的探讨恶性淋巴瘤mdr1、MRP mRNA和P-gp表达水平与化疗疗效的相关性.方法应用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术和流式细胞术(FCM)方法,以8例人正常淋巴结为正常对照,对46例淋巴瘤患者[23例初治(HD1例,NHL22例)及23例复发(HD5例,NHL18例)]的mdr1 mRNA、MRP mRNA和P-gp表达水平与化疗疗效间的关系进行了前瞻性研究.结果复发患者mdr1基因和P-gp表达水平及阳性率均高于初治患者(P<0.001),而MRP基因表达水平及阳性率在复发与初治患者间差异无显著意义(P>0.05).mdr1基因及P-gp表达阳性患者的化疗有效(CR+PR)率(33.33%和26.67%)明显低于mdr1基因及P-gp表达阴性患者(85.71%和83.87%,P<0.001),而MRP基因表达阳性患者与阴性患者的化疗有效率差异无显著意义(P>0.05).相关分析显示,mdr1基因和P-gp表达水平之间有明显相关性(r=0.296 3,P<0.05),而mdr1和MRP之间、MRP与P-gp之间均无明显相关性(r=0.072 3,P>0.05;r=0.081 8,P>0.05).结论 mdr1基因及P-gp表达是恶性淋巴瘤患者多药耐药的主要机制,而MRP基因不是产生耐药的主要机制.mdr1基因及P-gp表达水平的高低与恶性淋巴瘤化疗疗效密切相关,而MRP基因的表达与化疗疗效未见相关.     

nm23-H1基因在急性白血病中表达及与多药耐药关系

①目的 检测急性白血病病人nm23-H1基因表达,探讨其与病人预后和多药耐药的关系。②方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术,检测46例初诊急性白血病病人及15例正常对照组骨髓细胞nm23-H1表达,同时检测其多药耐药基因MDR1及MRP表达。③结果 正常骨髓细胞nm23-H1表达阴性;46例急性白血病病人中,43例有nm23-H1表达。且其表达水平与MDR1及MRP表达水平无明显相关性（r=0．39、0．21,P〉0．05）。④结论 nm23-H1高表达与急性白血病发生有关,但与MDR1及MRP基因的表达无关。     

急性白血病多药耐药相关蛋白基因表达及临床意义

（１）目的 探讨急性白血病（ＡＬ）多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）基因的表达及临床意义。（２）方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法,对７７例ＡＬ病人及１０例健康人基因表达进行检测。（３）结果 ７７例ＡＬ病人ＭＲＰ平均表达水平与对照组比较差异无显著性,复发组ＭＲＰ平均表达水平与初治组比较差异有显著性（ｔ＝５．３２,Ｐ〈０．０１）。（４）结论 ＡＬ的复发与ＭＲＰ表达有关,ＭＲＰ基因的过度表     

多药耐药相关蛋白基因在急性白血病中的表达

（1）目的 探讨多药耐药相关蛋白基因（MRP）在急性白血病中表达的意义。（2）方法 应用半定量逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）。检测了48例不同病期的急性白血病病人骨髓及10例正常人外周血单个核细胞MRP信使RNA（mRNA)的表达。（3）结果 正常人外周血单个核细胞存在MRP的低水平表达;复发的急性白血病病人MRPmRNA表达明显增高,其对预后及复发的预测作用有待进一步研究。     

白血病细胞株HL60和HL60/DNR的多药耐药性

目的研究白血病细胞的多药耐药性（ＭＤＲ）。方法用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测ＨＬ６０，ＨＬ６０／ＤＮＲＭＤＲ１的ｍＲＮＡ表达，用流式细胞仪分析单抗ＵＩＣ２标记的细胞株Ｐ糖蛋白（Ｐｇｐ）的表达，了解它们摄取和滞留荧光素Ｒ１２３的功能。结果ＨＬ６０／ＤＮＲ在ｍＲＮＡ水平高度表达ＭＤＲＩ，在蛋白质水平高度表达Ｐｇｐ，功能性试验中细胞内Ｒ１２３最终浓度ＨＬ６０为ＨＬ６０／ＤＮＲ的５０倍。结论ＨＬ６０／ＤＮＲ为典型的表达ＭＤＲ１的细胞株     

急性白血病多药耐药基因检测及其临床意义

应用原位杂交方法检测多药耐药基因（Ｍｄｒｌ）表达，观察其与临床耐药的关系，探讨Ｍｄｒｌ检测的临床应用价值。方法自行构建ＲＮＡ探针直接在骨髓涂片上行原位杂交，检测４５例急性白血病ＭｄｒｌｍＲＮＡ表达。对部分高表达者调整临床治疗方案。结果复治组中Ｍｄｒｌ阳性占８８％，初治组４２．８％，有极显著差异。经标准化疗２个疗程后初治组中Ｍｄｒｌ阳性者完全缓解率（ＣＲ）２２％，阴性者ＣＲ６３．６％，Ｐ＜０．００１。对Ｍｄｒｌ阳性病例通过调整化疗方案或加用逆转剂可改善预后。结论Ｍｄｒｌ高表达确为白血病不良预后的主要指标，原位杂交检测Ｍｄｒｌ表达对临床治疗有指导意义。     

急性白血病多药耐药性与临床疗效关系的探讨

目的：探讨白血病细胞的多药耐药性与临床疗效及预后的关系。方法：采用逆转录聚合酶链法（RT－PCR）检测65例急性白血病（AL）患者的多药耐药基因（MDR1mRNA)表达。同时采用MTT法对35例患者做体外药物敏感试验。结果：初治组MDR1mRNA阳性表达率为31．1％,复发难治组性表达率为75．0％;MDR1mRNA阳性表达组完全缓解率和总缓解率均低于MDR1mRNA阴性表达组（P＜0．01）。药敏试验与化疗疗效相关,总临床符合率为80．0％。结论：MDR1mRNA表达及体外药敏检测与AL的化疗效果及预后密切相关,可作为判断疗放与预后的重要指标。     

肺耐药蛋白基因在急性白血病中的表达及意义

目的 :检测急性白血病患者肺耐药蛋白 (lung resistance protein,LRP)基因 m RNA表达 ,探讨其与多药耐药和预后的关系。方法 :采用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT-PCR)技术检测 47例急性白血病患者及 7例正常对照者骨髓细胞 LRP基因的表达。结果 :正常骨髓细胞 LRP基因表达阴性 ,2 5例初治急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)患者中 1 4例 LRP表达阳性 ,1 2例初治急性淋巴细胞白血病 (ALL)中仅 1例阳性 ,1 0例复发难治患者 8例阳性 ;初治 ANLL组及复发难治组较正常对照组相比表达率明显升高 ,差异有显著性 (P=0 .0 0 1 ,P=0 .0 2 4) ,LRP m RNA表达水平与初次化疗不敏感及预后差有关 ,LRP阳性患者的完全缓解率明显低于表达阴性者 (分别为 3 / 1 1 ,4/ 5 ,P<0 .0 5 )。结论 :LRP基因表达水平与急性非淋巴细胞白血病化疗效果及预后密切相关 ,是一项新的耐药指标。检测 LRP的表达可以指导治疗 ,估计预后