癫痫大鼠海马结构谷氨酸和nNOS神经元的动态变化

的：探讨谷氨酸(Glu)和一氧化氮(NO)二者在癫痫模型中的作用及其相关性。方法：戊四唑化学点燃癫痫大鼠,分为Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ级组和Ⅴ级后24h组。采用免疫组织化学方法和图像分析技术。结果：(1)Ⅲ、Ⅴ级组Glu免疫反应阳性神经元数目和平均光密度值升高;但Ⅴ级比Ⅲ级组有所下降;Ⅴ级后24h组恢复到对照组水平。(2)Ⅴ级组和Ⅴ级后24h组nNOS免疫反应阳性神经元数目和平均光密度值升高。结论：戊四唑点燃癫痫模型中,随着点燃级别的进展,Glu的含量是呈先增加后减少的趋势,而NO的含量是逐渐增加的,提示二者在癫痫发作中既有相关性又有独立性。     

低水平铅暴露大鼠齿状回nNOS阳性神经元的时程变化

目的:了解齿状回nNOS阳性神经元在铅影响学习记忆神经毒机理中的作用。方法:采用免疫组织化学ABC法,观察了大鼠腹腔注射130mg/kg醋酸铅溶液染毒3h,6h,12h和24h后齿状回nNOS阳性神经元数目的变化。结果:与对照组相比,染铅12h时,齿状回nNOS阳性神经元数目均明显减少(P<0.01),染铅24h时,齿状回uNOS阳性神经元数目仍处于较低水平(P<0.05)。结论:本研究提示齿状回nNOS阳性神经元的时程变化可能为揭示铅对学习记忆影响的分子机制提供了一定的实验依据。     

糖尿病大鼠下丘脑视上核nNOS免疫阳性神经元的变化

目的：观察糖尿病大鼠下丘脑视上核神经元型一氧化氮合酶(nNOS)免疫阳性神经元数量的变化。方法：用链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型;免疫细胞化学染色显示nNOS免疫阳性神经元,并进行定量分析。结果：糖尿病视上核nNOS免疫阳性神经元着色深浅不一,着色较深的阳性神经元散在分布,神经元的形态多样,突起较少。对照组大鼠视上核nNOS免疫阳性神经元较稀疏,各时期无明显改变。糖尿病2w,nNOS免疫阳性神经元数量与对照组无显著差异;7w,nNOS阳性神经元较密集,明显多于对照组;12w,nNOS免疫阳性神经元数量略低于7w,但仍多于对照组。结论：糖尿病大鼠下丘脑视上核nNOS免疫阳性神经元数量明显增多。     

自发性高血压大鼠中脑导水管周围灰质nNOS阳性神经元的变化

目的观察自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensiverats,SHR)中脑导水管周围灰质内神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)阳性神经元的变化。方法取SHR和京都种威斯特大鼠(Wistar-Koytorats,WKY)大鼠各30只,分别于3月(14周)龄,6月龄和12月龄测血压并处死,ABC免疫细胞化学方法显示nNOS阳性神经元。结果SHR血压随鼠龄的增长逐渐升高,于12～14周龄时血压在高位稳定,且均高于WKY大鼠(P<0.05)维持在[(20.8±1.1)～(26.3±1.0)]kPa(P<0.05);WKY大鼠各时期血压无明显差异,维持在[(13.7±1.6)～(15.1±1.7)]kPa。中脑导水管周围灰质nNOS阳性神经元以小细胞为主,突起有2-4个,许多朝中脑水管方向延伸。定量结果显示,SHR大鼠nNOS阳性神经元随着血压升高呈逐渐减少的趋势,12月龄与3月龄和6月龄相比均有显著差异(P<0.01),而各个时期WKY大鼠PAGnNOS阳性神经元均无明显变化。结论SHR中脑导水管周围灰质nNOS阳性神经元的减少可能通过影响延髓的血压调节中枢调控高血压的发生,并有可能与高血压的痛觉过敏有关。     

大鼠桡神经钳夹伤后背根节和脊髓nNOS免疫阳性神经元的变化

目的研究大鼠桡神经钳夹伤后背根神经节(DRG)和脊髓nNOS免疫阳性神经元的变化,探讨NO是否参与大鼠桡神经钳夹伤后的DRG和脊髓水平的痛觉调制。方法用辣根过氧化物酶追踪大鼠桡神经的由来;大鼠桡神经钳夹伤结合免疫组化法,研究桡神经钳夹伤后DRG鄄和脊髓的nNOS免疫阳性结构变化。结果(1)大鼠桡神经的组成范围在C5～T1;(2)大鼠桡神经钳夹伤后,DRG内nNOS免疫阳性神经元的变化难以分析:脊髓后角nNOS免疫阳性结构数量减少、免疫强度下降。结论大鼠桡神经钳夹伤后,脊髓nNOS免疫阳性结构发生可塑性变化,NO在桡神经钳夹伤后的痛觉调制中有一定的作用。     

高血压大鼠中脑导水管周围灰质内nNOS样阳性神经元的变化

目的：观察高血压大鼠中脑导水管周围灰质(PAG)内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)样阳性神经元数量的变化。方法：用双肾双夹法建立高血压大鼠模型,ABC法显示PAG内nNOS样阳性神经元并进行定量分析。结果：nNOS样阳性神经元分布于PAG的背外侧区。PAG内nNOS样阳性神经元的数量、光密度在对照组各时期无明显变化;在高血压大鼠7d时的数量略减少,光密度略下降;而在30d、70d则数量、光密度逐渐减少,与对照组比较差异显著。结论：中脑PAG内nNOS样阳性神经元及阳性产物的减少可能与其对心血管功能活动、感觉信息传导的影响以及高血压的形成和发展有关。     

大鼠海马结构中兴奋性氨基酸神经元的发育

目的：研究胚胎时期大鼠海马结构中谷氨酸和门冬氨酸神经元的分布及发育规律。方法：用免疫组化ＡＢＣ方法，对Ｅ１４，Ｅ１６，Ｅ１８、Ｅ２２天大鼠胚胎海马结构中谷氨酸和门冬氨酸神经元的发育情况进行观察。结果：Ｅ１４天，在海马神经上皮内谷氨酸和门冬氨酸能前体细胞散在分布；Ｅ１６天，随着丛状层的出现，成熟的谷氨酸和门冬氨酸神经元迁入其内；Ｅ１８天，阿蒙角神经上皮增厚，阳性前体细胞增多，ＣＡ１锥体层刚出现即分布     

金纳多对血管性痴呆小鼠海马结构NOS表达的影响

目的观察银杏叶提取物(EGB)金纳多对血管性痴呆(VD)小鼠海马结构神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响,探讨银杏叶提取物对血管性痴呆的治疗作用。方法复制VD小鼠模型,利用Y-迷宫检测VD模型小鼠学习记忆能力及不同剂量EGB治疗组的改善作用,实时定量PCR方法检测不同剂量EGB对VD小鼠海马结构中NOSmRNA转录水平的影响,组织化学和免疫组化方法研究其对NOS和nNOS蛋白表达的影响。结果行为学结果显示VD模型组和各治疗组小鼠均比对照组小鼠Y-迷宫学习记忆训练次数明显增多(<0.05),高低两个剂量EGB治疗组迷宫学会次数与模型组相比明显减少(<0.05),有剂量依赖性。实时定量PCR结果显示在背侧海马VD模型组nNOS mRNA转录水平显著提高,而高低EGB治疗组的nNOS mRNA转录水平显著降低(<0.05)。组织化学和免疫组化结果显示在海马结构CA1区VD模型组比对照组NOS和nNOS阳性神经元的数量明显增多(<0.05),高低两个EGB治疗组与VD模型组相比阳性神经元数量明显减少(<0.05)。结论银杏叶提取物对VD小鼠神经元有保护作用,可能与减少海马结构NOS的表达相关。     

胰岛素对糖尿病大鼠海马一氧化氮合酶阳性神经元变化的影响

观察实验性糖尿病大鼠海马一氧化氮合酶（NOS）阳性神经元变化及胰岛的治疗作用。给成年SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型，每日给予长效胰岛素2－3U使血糖低于10mmol/L，于第3月及第6月末以NADPH－d组化法显示海马NOS阳性神经元。并做Morris水迷宫行为学测试。海马NOS阳性神经元密度变化如下：糖尿病组齿状回3月时显著减少（P＜0．01），6月时更明显（P＜0．01）；CA1区6月时显著降低（P＜0．01）；治疗组齿状回3月时恢复正常，而6月时低于正常（P＜0．01）但高于糖尿病组3月时（P＜0．05），CA1区3月，6月均恢复正常。行为学测试中各组大鼠逃避潜伏期变化与齿状回NOS阳性神经元密度变化一致。以上变化可能与糖尿病学习记忆功能损伤有关。胰岛素治疗可延缓其发生。     

出生后大鼠海马结构的发育

目的：定量观察出生后大鼠海结构锥体细胞层和颗粒细胞层的发育。方法：用体视学原理定量分析。结果：阿蒙角锥体层,尤其是ＣＡ１区,其细胞层数逐渐减少。数密度、面数密度和体密度逐渐下降,平均体积逐渐增大。齿状回内臂逐渐延长,至Ｐ１４天接近成年水平。内外臂的细胞层数逐渐增加,至Ｐ９０天仍有增加趋势。在ＣＡ１、ＣＡ３、ＣＡ４区的锥体层和齿状回颗粒层中,数密度,面数密度和体密度按大小排序为：颗粒层〉ＣＡ１〉ＣＡ     

Morphofunctional Changes in Neurons of Hippocampal Fields and Neocortical Layers in Rats Treated with Polydan

Light microscopy revealed four types of neurons differing by staining intensity and size in each of the pyramidal neuron populations in the dorsal hippocampal fields and layer V of the neocortical somatosensory area and in granular cells of the dentate fascia and stellate cells of layer II of the same cerebrocortical area in rats. Treatment with Polydan according to different protocols led to redistribution of these types of cells, which attests to stimulation of synthetic processes in these brain areas, rather than to similar sequence of the involvement of different brain areas in this process. Polydan promoted the increase in the mean number of nucleoli in the nuclei of neurons of all types, the degree of this increase being different for each type. It seems that morphological signs (staining intensity and number and size of nucleoli in the nuclei) reflect certain functional states of the neurons in the homogeneous populations. Presumably, various factors can stimulate transition of neurons from one morphofunctional status into another.     

新型胆碱酯酶抑制剂(NAI)对AD大鼠海马结构和红细胞膜AChE的抑制作用

目的探讨新型胆碱酯酶抑制剂(NAI)对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马结构神经元胞浆和血液红细胞膜的抑制作用,为AD病的临床治疗提供新的基础研究资料。方法选用48只W istar雄性大鼠,随机分为4组(n=12):NAI组、石衫碱甲(Hup)组、AD组、空白(B lank)组。将前3组大鼠切断穹窿-海马伞制作AD动物模型。2周后静脉给予NAI和Hup,采用分光光度计对各组大鼠海马结构神经元胞浆和红细胞膜分别进行AChE酶活性测定。结果AD海马结构神经元胞浆和红细胞膜的AChE活性均较B lank组明显增高(P<0.01);NAI组上述两个部位的AChE活性较AD组显著降低(P<0.01),Hup组与AD组比较其活性也降低(P<0.05)。并且NAI组上述两个部位的AChE活性均较Hup组降低(P<0.05)。结论NAI和Hup对AD大鼠海马结构神经元胞浆和血液红细胞膜AChE均具有较强的抑制作用,NAI抑制作用强于Hup。     

复方地黄对阿尔次海默大鼠学习记忆及海马细胞凋亡的影响

目的观察复方地黄对阿尔海默病(Alzheimer'sdisease,AD)模型大鼠学习记忆的影响并探讨其与海马细胞凋亡的关系。方法用立体定位技术对大鼠海马CA1区微量注射喹啉酸(QA)造成AD模型,Morris水迷宫检测大鼠学习记忆水平,电子显微镜、Tunnel和流式细胞仪检测海马细胞凋亡。结果复方地黄可明显提高QA所致痴呆大鼠学习记忆水平,显著降低海马细胞的凋亡率。结论复方地黄对AD大鼠的保护作用可能与降低海马细胞凋亡有关。     

Hippocampal Subregions are Differentially Affected in the Progression to Alzheimer's Disease

Atrophy within the hippocampus (HP) as measured by magnetic resonance imaging (MRI) is a promising biomarker for the progression to Alzheimer's disease (AD). Subregions of the HP along the longitudinal axis have been found to demonstrate unique function, as well as undergo differential changes in the progression to AD. Little is known of relationships between such HP subregions and other potential biomarkers, such as neuropsychological (NP), genetic, and cerebral spinal fluid (CSF) beta amyloid and tau measures. The purpose of this study was to subdivide the hippocampus to determine how the head, body, and tail were affected in normal control, mild cognitively impaired, and AD subjects, and investigate relationships with HP subregions and other potential biomarkers. MRI scans of 120 participants of the Alzheimer's Disease Neuroimaging Initiative were processed using FreeSurfer, and the HP was subdivided using 3D Slicer. Each subregion was compared among groups, and correlations were used to determine relationships with NP, genetic, and CSF measures. Results suggest that HP subregions are undergoing differential atrophy in AD, and demonstrate unique relationships with NP and CSF data. Discriminant function analyses revealed that these regions, when combined with NP and CSF measures, were able to classify by diagnostic group, and classify MCI subjects who would and would not progress to AD within 12 months. Anat Rec, 2012. © 2011 Wiley Periodicals, Inc.     

Increased Seizure Susceptibility and Up-regulation of nNOS Expression in Hippocampus Following Recurrent Early-life Seizures in Rats

This study aimed to determine the long-term change of seizure susceptibility and the role of nNOS on brain development following recurrent early-life seizures in rats. Video-EEG recordings were conducted between postnatal days 50 and 60. Alterations in seizure susceptibility were assayed on day 22 or 50 using the flurothyl method. Changes in nNOS expression were determined by quantitative immunoblotting on day 50. On average, rats had 8.4±2.7 seizures during 10 daily 1 hr behavioral monitoring sessions. As adults (days 50-60), all rats displayed interictal spikes in the hippocampus and/or overlying cortex. Brief electrographic seizures were recorded in only one of five animals. Rats appeared to progress from a period of marked seizure susceptibility (day 22) to one of lessened seizure susceptibility (day 50). Up-regulation of nNOS expression following early-life recurrent seizures was observed on day 50. In conclusion, these data suggested that recurrent early-life seizures had the long-term effects on seizure susceptibility late in life and up-regulatory nNOS expression on the hippocampus during brain development, and nNOS appeared to contribute to the persistent changes in seizure susceptibility, and epileptogenesis.     

Graves'病患者肝纤维化指标测定的意义

目的：探讨Graves’Disease（GD）与肝纤维化指标的关系及其可能的机理。方法：用放射免疫分析（RIA）检测GD患者治疗前40例，治疗后35例和30例健康成人的血清Ⅳ型胶原（Ⅳ—C）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）的含量。结果：GD患者血清中Ⅳ—C、PCⅢ含量比正常对照组显著性升高（P〈0.01），治疗后甲状腺激素水平下降，Ⅳ—C、PCⅢ含量也随之下降（与治疗前比较P〈0．01），HA、LN在以上各组中无显著性差异（P〉0．05）。结论：GD患者甲状腺激素水平升高时，Ⅳ-C、PCⅢ含量也增高，在判断肝纤维化时应注意有无合并GD。     

阿尔茨海默氏病动物模型的建立

目的　建立大鼠阿尔茨海默氏病动物模型 ,观察大鼠病理学和行为学改变。方法　 2 4只Wis tar大鼠被随机分为实验组 (12只 )和对照组 (12只 ) ,实验组用ALZET微型渗透泵侧脑室内缓慢灌注Aβ1-42 ,对照组灌注等量的磷酸缓冲液。 2 8天后用Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力 ;用硫磺素 S法和镀银法检测大鼠海马、大脑皮质中老年斑和神经原纤维缠结形成情况。结果　实验组大鼠的学习、记忆功能与对照组相比均明显下降 (P <0 .0 5 ) ,实验组大鼠海马和皮层可见老年斑沉积和神经原纤维缠结形成 ,而对照组大鼠未见老年斑沉积和神经原纤维缠结形成。结论　通过微型渗透泵侧脑室内慢性灌注Aβ1-42 是一种成功的Alzheimer’s病动物模型。