LC-MS法测定Beagle犬血浆中埃博霉素B及其药动学研究

目的建立液相色谱串联质谱（LC—MS）法测定Beagle犬血浆中埃博霉素B含量,分析埃博霉素B在Beagle犬体内的药动学参数。方法采用LC—MS方法测定Beagle犬接受O．05,O．10和0．15mg／kg埃博霉素B静脉给药后不同时问点的血浆浓度,药物浓度一时间数据通过DAS2．0版软件进行分析。结果血浆中埃博霉素B在O．1～18ng／mL浓度范围内线性关系良好（r=O．9999）,血浆中样品提取回收率大于70％,日内和日间的精密度（RSD）均小于15％。药动学参数t1/2β分别为（76．20±7．24）、（71．41±10．62）和（64．62±9．76）h,AUCo。分别为（43．89±7．95）、（95．16±20．82）和（127．43±31．41）μg／（L·h）。结论LC—MS测定方法操作简便,专属性强,灵敏度高,适用于Beagle犬体内埃博霉素B的浓度测定和药动学研究。Beagle犬静脉注射3个剂量埃博霉索B后的药物浓度一时问数据符合二室模型特征,且埃博霉素B在犬体内半衰期较长。     

丹酚酸B与大鼠血浆蛋白结合率的测定

建立测定丹酚酸B与大鼠血浆蛋白结合率的方法; 体外采用平衡透析法, 模拟丹酚酸B与血浆蛋白的结合过程, 体内采用超滤法, 并以高效液相色谱法进行测定。透析内液用甲醇沉淀蛋白, 透析外液过滤后直接测定。结果透析外液线性范围为0.5～20 μg·mL⁻¹, 透析内液的线性范围为2～200 μg·mL⁻¹, 提取回收率68.6%～81.9%, 日内日间精密度均小于8.5%, 丹酚酸B的体外血浆蛋白结合率为75.2%, 体内血浆蛋白结合率为92.1%, 丹酚酸B与大鼠血浆蛋白结合率较高。建立的方法灵敏度高, 重现性好, 操作简单, 能够满足分析要求。     

银杏内酯B在血浆中的蛋白结合率研究

目的测定银杏内酯B(ginkgolide B,GB)与大鼠和人的血浆蛋白结合率。方法将血浆样品加入内标23-羟基白桦酸,乙醚液液萃取后,高效液相色谱-质谱联用仪分析,采用平衡透析法测定GB在大鼠及人血浆中的血浆蛋白结合率。结果人和大鼠血浆中GB药物浓度在0.05～5.00 mg.L-1范围内血浆蛋白结合呈线性关系;GB与大鼠血浆蛋白结合率约为25%,与人血浆蛋白结合率约为20%。结论 GB的血浆蛋白结合率较低,在人血浆的蛋白结合率略低于大鼠,但不存在显著性差异;约80%的药物以游离态形式存在。     

超滤法结合液质联用法测定姜黄素大鼠血浆蛋白结合率

目的建立液相色谱串联质谱（LC-MS）测定方法并检测姜黄素的大鼠血浆蛋白结合率。方法建立LC-MS检测方法,结合超滤法测定姜黄素的血浆蛋白结合率。结果3种浓度（100、300和1000ng·mL^-1）姜黄素与大鼠血浆蛋白结合率分别为（80．3±5．28）％、（75．3±4．45）％和（62．64—1．98）％。结论姜黄素血浆蛋白结合率较高,LC—MS可用于姜黄素血浆蛋白结合率的测定。     

水杨酸在不同血浆中的蛋白结合率测定

目的研究水杨酸与大鼠、比格犬和人的血浆蛋白结合率。方法采用平衡透析法,以高效液相色谱法对透析内液与外液中水杨酸的含量进行测定,计算水杨酸与大鼠、比格犬和人的血浆蛋白结合率。结果水杨酸低、中、高(0.6,1,3μg/ml)3个浓度的大鼠血浆蛋白结合率分别为(91.1±1.4)%,(90.2±2.5)%,(90.7±3.1)%;比格犬血浆蛋白结合率分别为(82.5±2.1)%,(81.3±1.8)%,(83.1±2.3)%;人血浆蛋白结合率分别为(96.5±2.7)%,(97.2±3.0)%,(96.4±1.6)%。结论水杨酸与血浆蛋白具有高强度的结合,其中与人血浆中的蛋白结合较强,且人>大鼠>比格犬。     

平衡透析法结合LC-MS/MS研究奥克梯隆型皂苷元的大鼠血浆蛋白结合率

目的研究奥克梯隆型皂苷元奥克梯隆(ocotillol)的大鼠血浆蛋白结合率。方法采用甲醇沉淀蛋白法对大鼠血浆和磷酸盐缓冲液中的待测物ocotillol和内标人参三醇(PT)进行提取,色谱分离采用Gemini C18柱(50 mm×4.6 mm,3μm),以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱;质谱检测采用电喷雾(ESI)离子源,正离子多反应监测模式(MRM)。并根据FDA指导原则从专属性、线性、定量下限(LLOQ)、准确度、精密度、提取回收率、基质效应以及稳定性等方面进行系统的方法学验证。以平衡透析法为基础,通过建立的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法测定平衡后透析袋内血浆和透析袋外缓冲液中的ocotillol浓度,计算血浆蛋白结合率。结果 LC-MS/MS法测定ocotillol的线性关系良好(r≥0.995),质控样品的日内、日间精密度(RSD)均<11.68%、提取回收率较高且可重现,无明显的基质效应,样品在室温放置12 h、反复冻融三次、-80℃放置20 d以及处理后自动进样器放置24 h等条件下均能保持稳定。Ocotillol在低、中、高3个浓度下与大鼠的平均血浆蛋白结合率为(84.55±1.69)%,且3个浓度间的血浆蛋白结合率数据无显著性差异。结论 Ocotillol与大鼠血浆蛋白有较强的结合作用。     

葡萄内酯大鼠血浆蛋白结合率的测定

目的:建立大鼠血浆中葡萄内酯的检测方法,测定葡萄内酯与大鼠血浆蛋白的结合率。方法:采用平衡透析法研究葡萄内酯在大鼠体内与血浆蛋白结合率。利用醋酸乙酯萃取富集袋内外样品中的葡萄内酯,并用HPLC法测定其浓度,进而求出血浆蛋白结合率。结果:在低、中、高3种浓度下,葡萄内酯的血浆蛋白结合率分别为100.0%、(99.7±0.6)%、(99.1±0.8)%。结论:葡萄内酯溶液与大鼠血浆蛋白属高度结合。     

阿莫西林对格列美脲血浆蛋白结合率的影响

目的 研究阿莫西林对格列美脲蛋白结合率的影响。方法 采用平衡透析法结合高效液相色谱法，比较未加和加入阿莫西林后格列美脲的血浆蛋白结合率。结果 4种浓度下，单用格列美脲时的血浆蛋白结合率分别为94.2％、92.8％、91．4％、91．0％；与阿莫西林合用时，格列美脲的血浆蛋白结合率依次变为90．9％、89．0％、89．6％、90．0％。结论 与阿莫西林合用后，格列美脲的血浆蛋白结合率下降。     

LC-MS/MS法测定去氧鬼臼毒素与大鼠和人血浆中蛋白结合率

目的 研究去氧鬼臼毒素在大鼠和人血浆蛋白的结合率.方法 建立去氧鬼臼毒素LC-MS/MS测定法,测定透析内、外液中2种成分质量浓度,并计算血浆蛋白结合率.结果 去氧鬼臼毒素线性关系、精密度与准确度、提取回收率和稳定性均符合方法学要求.去氧鬼臼毒素在高、中、低浓度(500,1500、4500ng·mL-1)中,大鼠血浆蛋...     

蟛蜞菊内酯与大鼠血浆蛋白结合率的测定

目的：测定蟛蜞菊内酯与大鼠血浆蛋白的结合率。方法：采用平衡透析法模拟蟛蜞菊内酯与大鼠血浆蛋白的结合过程,建立HPLC-UV法测定蟛蜞菊内酯与大鼠血浆蛋白的结合率。结果：在透析24 h后,蟛蜞菊内酯在低（0.62μg·mL-1）、中（3.10μg·mL-1）、高（9.92μg·mL-1）3个质量浓度下与大鼠血浆蛋白的结合率分别为（87.9±2.1）%、（84.7±2.5）%、（83.8±1.9）%。结论：蟛蜞菊内酯与大鼠血浆蛋白有较强的结合作用。     

西瑞香素与大鼠血浆蛋白结合率的测定

目的采用HPLC法对西瑞香素与大鼠血浆蛋白结合率进行研究。方法采用平衡透析法,结合HPLC法测定西瑞香素的大鼠血浆蛋白结合率。结果西瑞香素在低(0.50 mg.L-1)、中(1.0 mg.L-1)、高(2.0 mg.L-1)3个质量浓度下,其血浆蛋白结合率分别为(91.7±1.8)%、(91.6±1.4)%和(90.7±0.81)%。结论西瑞香素具有较强的血浆蛋白结合率。     

齐墩果酸在人血浆蛋白和血清白蛋白中结合率的测定

齐墩果酸(oleanolic acid,OA)又名庆四素(图1),系五环三萜类化合物,以游离或结合成苷的形式广泛存在于白花蛇舌草、山楂、丁香、大枣、女贞子、枇杷叶、橡木和夏枯草等植物中。临床上主要用于急     

2-甲氧基雌二醇大鼠血浆蛋白结合率的测定

目的建立测定2-甲氧基雌二醇大鼠血浆蛋白结合率的方法。方法采用平衡透析法对2-甲氧基雌二醇大鼠血浆蛋白结合率进行HPLC测定。结果高、中、低3个浓度(2、4、8 mg.L-1)的2-甲氧基雌二醇血浆蛋白结合率分别为(85.2±3.4)%、(82.1±5.3)%、(83.0±5.2)%。结论该方法灵敏度高,重现性好,操作简单,能满足生物样品分析要求。2-甲氧基雌二醇大鼠血浆蛋白结合率不具有浓度依赖性,使其临床用药具备较好的安全性。     

硫酸长春新碱靶向缓释制剂的血浆蛋白结合率测定

目的:测定硫酸长春新碱靶向缓释制剂的血浆蛋白结合率,为该缓释制剂的药效学和临床研究提供相关参数。方法:采用平衡透析法测定硫酸长春新碱缓释制剂在Wistar大鼠血浆中的蛋白结合率,利用液-液萃取法提取药物,高效液相色谱法测定药物浓度。结果:硫酸长春新碱靶向缓释制剂在120h时达到最好平衡点,质量浓度为2.50,5.00,10.00,20.00,40.00和80.00mg.L-1的缓释制剂,血浆蛋白结合率分别为35.91%,40.01%,35.79%,32.55%,39.24%和41.34%。结论:硫酸长春新碱靶向缓释制剂中的高分子材料降解缓慢,故内部包裹药物可长期释放,同时,由于该制剂吸附和包裹药物的释放速率不同,导致血浆蛋白结合率在初期具有较大的波动性,但随着时间的延长,血浆蛋白结合率仍可达到稳定水平。     

白藜芦醇衍生物RT-B与大鼠血浆蛋白结合率的测定

目的建立测定白藜芦醇衍生物RT—B与大鼠血浆蛋白结合率的方法。方法采用平衡透析法对RT-B与大鼠血浆蛋白结合率进行HPLC测定。结果低、中、高3种浓度下,RT-B的血浆蛋白结合率分别为(79.2±s 0.7)%,(80.1±0.9)%和(80.2±0.9)%。结论本方法灵敏度高,重现性好,操作简单,能满足分析要求。RT-B与大鼠血浆蛋白的结合率较高。     

美沙拉嗪PEG化前药在不同种属血浆中蛋白结合率的测定

目的:测定美沙拉嗪PEG化前药在不同种属血浆中的蛋白结合率,考察PEG化对药物蛋白结合率的影响。方法:采用血浆平衡透析法,以紫外分光光度法对透析内液与外液中的药物含量进行测定,计算药物与小鼠血浆、犬血浆、兔血浆及牛血浆的蛋白结合率。结果:美沙拉嗪PEG化物的低、中、高(1.08,1.35,1.62 mg·mL^-1)3种质量浓度的小鼠血浆蛋白结合率分别为(22.31±5.28)%,(17.15±3.21)%,(16.11±4.55)%;犬血浆为(25.16±5.87)%,(22.47±4.14)%,(23.14±3.46)%;兔血浆为(17.13±8.26)%,(13.87±6.32)%,(15.93±2.31)%;牛血浆为(14.41±6.21)%,(18.84±7.80)%,(14.18±5.23)%。结论:美沙拉嗪PEG化物血浆蛋白结合程度较低,种属间存在一定差异。与原型药物相比,药物经PEG化后,血浆蛋白结合呈下降趋势。     

氯化两面针碱人血浆蛋白结合率的测定

目的建立测定人血浆中氯化两面针碱的高效液相色谱法,并研究氯化两面针碱与人血浆蛋白的结合情况。方法离子对试剂萃取技术对样品进行预处理,乙腈-0.15%磷酸(36:64,V:V,用三乙胺调pH值至3.5)为流动相,C_(18)柱(250mm×4.6mm,5μm)为固定相,紫外检测波长271nm,以氯霉素为内标,采用平衡透析法对氯化两面针碱的人血浆蛋白结合率进行测定。结果氯化两面针碱与内标完全分离,样品中其他成份无干扰,在0.03188～2.040mg·L~(-1)范围内线性关系良好,低、中、高3种不同质量浓度的方法回收率>95%,日内、日间精密度均符合方法学要求。低、中、高3种药物浓度的血浆蛋白结合率分别为68.9%、67.4%、67.9%。结论方法简便、快速,结果准确、可靠,能满足生物样品分析要求。氯化两面针碱具有中等强度的蛋白结合率,蛋白结合率与透析液的药物浓度无关。     

用HPLC法测定人血浆中野黄芩苷的蛋白质结合率

目的：建立人血浆中野黄芩苷的检测方法,测定野黄芩苷的蛋白质结合率。方法：用HPLC法测定血浆和透析液中野黄芩苷的浓度,用平衡透析法测定血浆蛋白质结合率,蛋白质结合率按B%=[（ct-cf）/ct]×100%计算。结果：正常人血浆中野黄芩苷浓度在0.05、0.5、5μg/L时的蛋白质结合率分别为（79.9±1.71）%（、82.0±1.02）%和（68.9±1.21）%。结论：野黄芩苷在0.05和0.5μg/L时,属于高度结合,但随着浓度升高,蛋白质结合率降低。