LC-MS法测定Beagle犬血浆中埃博霉素B及其药动学研究

目的建立液相色谱串联质谱（LC—MS）法测定Beagle犬血浆中埃博霉素B含量,分析埃博霉素B在Beagle犬体内的药动学参数。方法采用LC—MS方法测定Beagle犬接受O．05,O．10和0．15mg／kg埃博霉素B静脉给药后不同时问点的血浆浓度,药物浓度一时间数据通过DAS2．0版软件进行分析。结果血浆中埃博霉素B在O．1～18ng／mL浓度范围内线性关系良好（r=O．9999）,血浆中样品提取回收率大于70％,日内和日间的精密度（RSD）均小于15％。药动学参数t1/2β分别为（76．20±7．24）、（71．41±10．62）和（64．62±9．76）h,AUCo。分别为（43．89±7．95）、（95．16±20．82）和（127．43±31．41）μg／（L·h）。结论LC—MS测定方法操作简便,专属性强,灵敏度高,适用于Beagle犬体内埃博霉素B的浓度测定和药动学研究。Beagle犬静脉注射3个剂量埃博霉索B后的药物浓度一时问数据符合二室模型特征,且埃博霉素B在犬体内半衰期较长。     

超滤法结合液质联用法测定姜黄素大鼠血浆蛋白结合率

目的建立液相色谱串联质谱（LC-MS）测定方法并检测姜黄素的大鼠血浆蛋白结合率。方法建立LC-MS检测方法,结合超滤法测定姜黄素的血浆蛋白结合率。结果3种浓度（100、300和1000ng·mL^-1）姜黄素与大鼠血浆蛋白结合率分别为（80．3±5．28）％、（75．3±4．45）％和（62．64—1．98）％。结论姜黄素血浆蛋白结合率较高,LC—MS可用于姜黄素血浆蛋白结合率的测定。     

雷公藤红素在不同血浆中的蛋白结合率测定

目的:研究雷公藤红素与大鼠、比格犬和人的血浆蛋白结合率。方法:采用血浆平衡透析法,以高效液相色谱法对透析内液与外液中雷公藤红素的含量进行测定,计算雷公藤红素与大鼠、比格犬和人的血浆蛋白结合率。结果:雷公藤红素低中高(0.25,0.5,1.0μg.mL-1)3个浓度的大鼠血浆蛋白结合率分别为(78.5±1.6)%,(77.3±2.2)%,(76.4±2.9)%,比格犬血浆蛋白结合率分别为(69.6±4.7)%,(71.1±3.4)%,(68.0±2.1)%,人血浆蛋白结合率分别为(85.6±2.7)%,(84.0±4.7)%,(83.1±2.8)%。结论:雷公藤红素与血浆蛋白具有中等强度的结合,其中与人血浆中的蛋白结合较强,且人>大鼠>比格犬。     

平衡透析法测定人体外血浆中原花青素B2、表儿茶素蛋白结合率

目的 建立检测原花青素B2、表儿茶素在血浆中药物浓度的方法,并测定其体外血浆蛋白结合率.方法 采用平衡透析法测定血浆蛋白结合率,建立HPLC法测定各成分的血药浓度及游离药物浓度,生物样本用乙酸乙酯溶液提取的方法.结果 在低、中、高3种浓度下,原花青素B2和表儿茶素在人体外血浆中的蛋白结合率分别为(44.21±2.80)%,(52.60±1.92)%,(48.11±3.09)%和(47.12±2.85)%,(55.03±2.47)%,(43.69±1.53)%.结论 采用HPLC法对原花青素B2、表儿茶素进行分离,方法简便、可靠、稳定.体外实验中原花青素B2和表儿茶素与人血浆属中等结合型药物,且蛋白结合率随着药物浓度的增加无明显的浓度依赖性.     

水杨酸在不同血浆中的蛋白结合率测定

目的研究水杨酸与大鼠、比格犬和人的血浆蛋白结合率。方法采用平衡透析法,以高效液相色谱法对透析内液与外液中水杨酸的含量进行测定,计算水杨酸与大鼠、比格犬和人的血浆蛋白结合率。结果水杨酸低、中、高(0.6,1,3μg/ml)3个浓度的大鼠血浆蛋白结合率分别为(91.1±1.4)%,(90.2±2.5)%,(90.7±3.1)%;比格犬血浆蛋白结合率分别为(82.5±2.1)%,(81.3±1.8)%,(83.1±2.3)%;人血浆蛋白结合率分别为(96.5±2.7)%,(97.2±3.0)%,(96.4±1.6)%。结论水杨酸与血浆蛋白具有高强度的结合,其中与人血浆中的蛋白结合较强,且人>大鼠>比格犬。     

栀子苷和栀子苷元血浆蛋白结合率的HPLC法测定

建立了高效液相色谱法测定栀子苷和栀子苷元的血浆蛋白结合率.采用C18色谱柱,流动相为乙腈-0.05％磷酸(15∶85),检测波长238 nm.测得栀子苷、栀子苷元与小牛血清白蛋白、人血清白蛋白和大鼠血浆的蛋白结合率分别为(38.1±4.2)％和(63.4±1.2)％,(17.6±4.9)％和(81.5±6.2)％,以及(24.5±3.8)％和(94.6±1.0)％.结果表明栀子苷元与血浆蛋白的结合力高于栀子苷.     

阿奇霉素口服混悬液在比格犬体内的药动学研究

目的:建立比格犬血浆中阿奇霉素的超高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定方法,研究比格犬体内阿奇霉素口服混悬液中阿奇霉素的药动学参数。方法:血浆样品中加入内标罗红霉素后,加入乙腈提取,采用LC-MS/MS法正离子方式定量检测;药动学实验采用双周期随机交叉实验设计,取6只健康比格犬将其随机分为2组(每组3只),按犬体质量10 mg/kg阿奇霉素给予内服单次药物,两周期之间间隔2周为洗脱期。结果:阿奇霉素血浆浓度在0.2~50.0 ng/m L范围内呈良好的线性关系(r=0.996 3),其在血浆中的定量限为0.2 ng/m L;回收率介于92.8%~103.8%之间,精密度小于10.9%;单次给予阿奇霉素口服混悬液或干混悬剂后的药动学参数AUC_(0~120)、c_(max)、t_(max)、t_(1/2)分别为(9 111.91±2 072.13)和(6 260.12±2 006.02)ng/(h·m L)、(570.39±192.16)和(663.73±213.69)ng/m L、(1.42±0.92)和(0.67±0.26)h、(52.85±22.48)和(38.15±7.62)h。结论:该方法灵敏度高,无杂质干扰,结果准确;阿奇霉素口服混悬液或干混悬剂生物利度不等效,其口服混悬液AUC明显高于干混悬剂,其他药动学参数之间经比较其差异无统计学意义。     

克拉霉素胶囊的人体药物动力学及生物等效性研究

目的:建立人血浆中克拉霉素的LC-MS/MS方法,测定克拉霉素胶囊的药物动力学参数及相对生物利用度.方法:血浆样品中加入内标罗红霉素后,用甲醇沉淀蛋白,高速离心后取上清液进入LC-MS/MS系统分析.色谱柱:Lichrospher C18 (150 mm ×4.6 mm i.d.,5 μm),流动相:10 mmol·L-1醋酸铵水溶液-甲醇(22∶78),流速:1.0 mL·min-1,柱温:40℃.质谱条件:电喷雾离子化(ESI),正离子检测方式,检测离子:克拉霉素:m/z 770.45→ 613.30;内标罗红霉素:m/z 859.87→598.40.结果:克拉霉素的线性范围为0.02～3.0 μg·mL-1 (r=0.9999),定量下限为 0.02 μg·mL-1.受试制剂及参比制剂的生物半衰期分别为4.42±1.08 h 和3.98±1.07 h,达峰时间2.4±1.3 h 和2.2±0.8 h,达峰浓度0.98±0.25 μg·mL-1和1.02±0.22 μg·mL-1.克拉霉素受试制剂的相对生物利用度为(101.8±12.0)%.结论:本法准确、灵敏、简便.统计学结果表明,两种制剂生物等效.     

华蟾酥毒基和酯蟾毒配基与不同血浆蛋白结合率的测定

建立测定华蟾酥毒基和酯蟾毒配基与人、比格犬和大鼠血浆蛋白结合率的方法;采用平衡透析法,并以高效液相色谱法进行测定,计算华蟾酥毒基和酯蟾毒配基与不同血浆的蛋白结合率。华蟾酥毒基和酯蟾毒配基在3种不同透析内液中的线性范围均为0.50～40.00μg.mL 1,透析外液均为0.25～4.00μg.mL 1。在3种不同透析内液和透析外液中,华蟾酥毒基提取回收率为(68.73±2.16)%～(79.27±1.62)%,酯蟾毒配基为(71.59±4.31)%～(83.47±2.63)%。华蟾酥毒基在人、大鼠和比格犬血浆中的平均血浆蛋白结合率分别为85.63%、80.21%和70.10%,酯蟾毒配基分别为84.51%、75.11%和70.60%。结果表明,华蟾酥毒基和酯蟾毒配基与3种血浆蛋白结合率较高,且结合率人>大鼠>比格犬。     

HPLC测定人血浆中舒尼替尼浓度及其血浆蛋白结合率

目的采用HPLC测定人血浆中舒尼替尼浓度,并结合平衡透析法和超滤法测定舒尼替尼血浆蛋白结合率。方法采用WatersXBridgeTM C18色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-0.02mol·L^-1磷酸二氢钠(70∶30),流速1.0 mL·min^-1,检测波长310 nm。结果舒尼替尼在0.0575~34.5μg·mL^-1内线性关系良好,定量下限为0.0575μg·mL^-1;舒尼替尼在低、中、高3个浓度下平衡透析法测得的血浆蛋白结合率为(84.1±2.1)%,(81.0±1.8)%,(80.6±1.6)%,超滤法蛋白结合率分别为(80.8±1.7)%,(84.2±2.0)%,(82.6±2.2)%,2种方法结果比较接近。结论本方法简单、快速、灵敏,能满足分析要求。舒尼替尼与人血浆蛋白有较高的结合率,且蛋白结合率与浓度无关。     

HPLC法测定戟叶马鞭草苷在不同血浆中的蛋白结合率

目的:建立测定戟叶马鞭草苷在大鼠血浆、人血浆和牛血清白蛋白(BSA)中蛋白结合率的方法,并计算不同介质中的相关参数。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法测定不同介质中戟叶马鞭草苷的浓度,并结合平衡透析法测定其蛋白结合率。结果:低、中、高浓度下,戟叶马鞭草苷的蛋白结合率分别为大鼠血浆:(19.52±4.7)%、(25.60±5.4)%、(20.91±3.9)%;人血浆:(23.12±5.7)%、(21.76±6.5)%、(24.30±7.6)%;牛血清白蛋白:(25.83±7.0)%、(27.70±9.1)%、(26.19±5.6)%。结论:本方法快速、简便、可靠,戟叶马鞭草苷与大鼠血浆、人血浆和牛血清白蛋白的蛋白结合率低,且与血药浓度无显著相关性。     

HPLC法测定蝙蝠葛碱与大鼠和人血浆蛋白的结合率

目的:建立测定蝙蝠葛碱的高效液相色谱(HPLC)法,并研究蝙蝠葛碱与大鼠和人血浆蛋白的结合率。方法:采用平衡透析法,HPLC法测定蝙蝠葛碱的浓度,计算蝙蝠葛碱大鼠及人血浆蛋白结合率。结果:透析外液中的蝙蝠葛碱检测浓度在0.24～15.10μg.mL-1范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系;大鼠血浆中的蝙蝠葛碱检测浓度在0.24～15.10μg.mL-1范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系;人血浆中的蝙蝠葛碱检测浓度在0.24～15.10μg.mL-1范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系。蝙蝠葛碱在高、中、低浓度下,其大鼠血浆蛋白结合率分别为(69.63±1.30)%、(68.64±1.10)%、(72.54±0.50)%,人血浆蛋白结合率分别为(82.1±1.00)%、(84.96±0.70)%、(78.79±0.60)%。结论:HPLC法用于蝙蝠葛碱生物样品测定具有简便、灵敏与选择性高的特点;蝙蝠葛碱具有较强的血浆蛋白结合率,且大鼠和人血浆蛋白结合率具有种属差异性,人血浆蛋白结合率高于大鼠血浆蛋白结合率(P<0.05)。     

齐墩果酸在人血浆蛋白和血清白蛋白中结合率的测定

齐墩果酸(oleanolic acid,OA)又名庆四素(图1),系五环三萜类化合物,以游离或结合成苷的形式广泛存在于白花蛇舌草、山楂、丁香、大枣、女贞子、枇杷叶、橡木和夏枯草等植物中。临床上主要用于急     

二-（2,4-二氯苯甲酰异羟肟酸）二苯基合锡大鼠血浆蛋白结合率的测定

目的建立二-（2,4-二氯苯甲酰异羟肟酸）二苯基合锡（DPDCT）在大鼠血浆中蛋白结合率的测定方法。方法采用HPLC法测定大鼠血浆中药物总浓度及游离药物浓度,结合平衡透析法测定血浆蛋白结合率。结果 DPDCT在质量浓度为0.2、1.0、5.0μg/mL时与大鼠的血浆蛋白结合率分别为（58.9±2.0）%、（57.4±1.2）%和（58.6±0.8）%。不同浓度组血浆蛋白结合率差异无统计学意义。结论该方法灵敏度高,重复性好,操作简单,能够满足生物样品分析的要求。DPDCT具有中等强度的血浆蛋白结合率。     

用HPLC法测定人血浆中野黄芩苷的蛋白质结合率

目的：建立人血浆中野黄芩苷的检测方法,测定野黄芩苷的蛋白质结合率。方法：用HPLC法测定血浆和透析液中野黄芩苷的浓度,用平衡透析法测定血浆蛋白质结合率,蛋白质结合率按B%=[（ct-cf）/ct]×100%计算。结果：正常人血浆中野黄芩苷浓度在0.05、0.5、5μg/L时的蛋白质结合率分别为（79.9±1.71）%（、82.0±1.02）%和（68.9±1.21）%。结论：野黄芩苷在0.05和0.5μg/L时,属于高度结合,但随着浓度升高,蛋白质结合率降低。     

超滤法结合液质联用技术测定抗肿瘤化合物CJ-6在不同种属中的血浆蛋白结合率

目的:通过建立测定血浆中抗肿瘤化合物N-(4-((2-(环丙烷甲酰胺)吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-4-甲基-3,5-二氧基-2-苯基-2,3,4,5-四氢-1,2,4-三嗪-6-甲酰胺(CJ-6)的分析方法,测定CJ-6在不同种属(大鼠、猴、人)中的血浆蛋白结合率.方法:采取超滤法测定CJ-6在大鼠、猴、人血浆...     

平衡透析法测定具栖冬青苷和毛冬青酸的大鼠血浆蛋白结合率

目的建立测定具栖冬青苷、毛冬青酸血药质量浓度的方法,并测定其大鼠体外血浆蛋白结合率。方法采用高效液相色谱法和平衡透析法测定具栖冬青苷、毛冬青酸在大鼠体外血浆中的血浆蛋白结合率。结果低、中、高3种质量浓度,具栖冬青苷在大鼠体外血浆中的蛋白结合率分别为39.72%±2.68%,52.05%±3.35%和52.32%±0.76%;毛冬青酸在大鼠体外血浆中的蛋白结合率分别为55.18%±3.66%,60.79%±2.20%和47.00%±1.59%。结论建立HPLC法对具栖冬青苷和毛冬青酸进行分离,方法简便。体外实验,具栖冬青苷和毛冬青酸与大鼠血浆属中等结合型药物,且蛋白结合率与药物质量浓度无关。