未合并变应性鼻炎及哮喘的OSAHS儿童血清Th1/Th2细胞因子检测及临床意义

目的:探讨未合并变应性鼻炎(AR)及哮喘的OSAHS患儿血清Th1/Th2免疫平衡相关细胞因子的水平及临床意义。方法:对我科收治的91例OSAHS患儿进行鼻内镜检查,并按其是否合并AR及哮喘进行分组,采用ELISA方法测定其血清中Th1细胞因子TNF-β和IFN-γ,以及Th2细胞因子IL-4和IL-5水平。收集105例正常儿童为对照组,同样分组并进行血清细胞因子检测。结果:本组患者中16例合并AR,4例合并哮喘、6例合并AR及哮喘,未合并AR及哮喘65例。未合并AR及哮喘的OSAHS患儿中,血清IFN-γ水平低于对照组(P<0.01),其余血清Th1/Th2免疫平衡相关细胞因子(TNF-β、IL-4及IL-5)与对照组之间无显著差异。结论:未合并变应性疾病的OSAHS患儿中,血清IFN-γ水平下降导致Th1细胞介导的保护性细胞免疫反应下降,引起Th1/Th2失衡而致病。     

Th1/Th2失衡与变应性鼻炎

1986年Mosmamn等报告小鼠的T辅助淋巴细胞(CD4^ )根据其分泌细胞因子的不同可以分为Th1和Th2细胞。此后又发现了Th1和Th2细胞的前身细胞Th0细胞。1991年Wierenga等证实人类同样存在Th1和Th2亚群。Th1细胞主要分泌γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子-β(TNF-β)；而Th2细胞主要分泌IL-4、     

特异性脱敏治疗对变应性鼻炎血中Th1/Th2细胞比例调节的影响

目的:探讨经鼻内和(或)舌下特异性脱敏治疗常年性变应性鼻炎(PAR)的效果及对患者血清Th1/Th2细胞因子平衡的调节及总IgE(tIgE)水平表达的影响.方法:选择36例PAR患者经鼻特异性脱敏治疗(鼻喷组)和36例PAR舌下特异性脱敏治疗(舌下组),并进行疗效比较,以32例健康成年人作为正常对照组.同时用免疫放射平衡法和双抗夹心法检测鼻喷组及舌下组治疗前后血清IL-2、IL-4、IL-8及tIgE水平;用酶联免疫吸附法检测IFN-γ;鼻分泌物涂片观察局部嗜酸粒细胞的浸润与变化.结果:变应性鼻炎(AR)患者在经鼻和舌下特异性免疫治疗(SIT)前两组血清Th1细胞因子IL-2及IFN-γ含量显著减少,而Th2细胞因子IL-4、IL-8和tIgE含量显著增高,鼻喷组及舌下组与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);SIT至维持量后,AR患者血清中IL-2及IFN-γ含量较治疗前明显增高,而IL-4、IL-8及tIgE含量则明显降低(P<0.01或P<0.05).SIT后鼻喷组和舌下组临床总有效率分别为97.22%和94.44%,两组疗效比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:AR患者体内存在Th1/Th2细胞比例和细胞因子平衡失调,表现为Th2细胞功能亢进.经鼻黏膜和舌下脱敏治疗能通过对AR血中Th1/Th2细胞因子比例平衡和细胞因子水平表达的调控及对血tIgE水平的调节来改善和纠正Th1/Th2细胞失平衡,能明显改善AR的临床症状.     

鼻咽癌患者外周血Th1/Th2细胞因子的变化趋势及其临床意义

目的 分析鼻咽癌患者外周血Th1和Th2细胞因子变化,为其免疫治疗提供实验依据.方法 用刺激物刺激57例鼻咽癌患者外周血CD3 T细胞增加细胞因子的表达,然后加入荧光标记的特异性抗细胞因子单克隆抗体,应用流式细胞仪分析特异性细胞因子表达水平.用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中相应的细胞因子水平,同时设正常对照组,以评价其水平变化趋势.结果 鼻咽癌患者Th1型细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、自细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-12(IL-12)表达水平较正常对照组显著降低,Th2型细胞因子白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)表达水平较正常对照组升高,差异有统计学意义.肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平较正常对照组升高,差异有显著性意义.结论 鼻咽癌患者体内Th2型细胞因子模式占优势,这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸,从而导致肿瘤的发生或者转移的原因之一.     

变应性鼻炎患者外周血单个核细胞Th1/Th2细胞因子的检测及其意义

目的探讨T淋巴细胞活化及释放的Th1/Th2细胞因子失平衡与变态反应性鼻炎发病的关系.方法用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定40例变态反应性鼻炎患者,20例慢性鼻炎患者和20例健康人的外周血单个核细胞(PBMC),经PHA诱导培养后上清液中Th1细胞因子γ干扰素(IFN-γ)和Th2细胞因子白介素4(IL-4)、白介素5(IL-5)的水平及血清中可溶性白介素2受体(sIL-2R)的水平,并分别对变应性鼻炎患者的sIL-2R与IFN-γ、IL-4、IL-5的相关性进行研究.结果PBMC培养的上清液中变应性鼻炎组的IL-4和IL-5水平显著高于慢性鼻炎组和正常组(P＜0.01);而IFN-γ水平却显著低于后两组(P＜0.01).变应性鼻炎组患者血清的sIL-2R变应性鼻炎组均显著高于后两组(P＜0.01)且与PBMC培养的上清液中IL-4和IL-5的浓度呈正相关(r分别为0.625和0.595,P＜0.01).与IFN-γ浓度呈负相关(r=-0.580,P＜0.01).结论变应性鼻炎患者体内激活的T淋巴细胞是Th2细胞,并释放Th2细胞因子,Th1细胞和Th1细胞因子分泌则受到抑制;Th2细胞因子在调节变应性鼻炎IgE合成及嗜酸性细胞浸润等病理生理机制上起重要作用.     

滨蒿内酯对实验性变应性鼻炎大鼠血清Th1/Th2细胞因子表达的影响

目的：观察滨蒿内酯（Scoparone）对变应性鼻炎（AR）模型大鼠血清Th1/Th2细胞因子表达的影响。方法32只雄性SD大鼠随机分为4组,即正常对照组（NC组）、变应性鼻炎模型组（模型组）、滨蒿内酯组（Sco组）和地塞米松组（Dex组）。以卵清蛋白致敏和激发方法建立变应性鼻炎模型并予相应治疗。观察大鼠行为学改变及鼻黏膜病理组织学变化,ELISA法检测血清IgE和细胞因子IFN-γ、IL-4及IL-5水平。结果在Sco组动物,其行为学评分（1.93±0.70）明显低于AR模型组（6.69±0.88,P＜0.01）,与Dex组（2.06±0.55）和NC组（1.45±0.31）比较差异无统计学意义（P＞0.05）;鼻黏膜炎性反应表现明显轻于AR模型组;血清IFN-γ水平（51.01±5.27）明显高于AR模型组（37.41±4.66）,IgE、IL-4和IL-5水平则明显低于AR模型组（均P＜0.01）,但与Dex组和NC组比较均P＞0.05。结论滨蒿内酯可能通过调节Th1/Th2细胞因子表达并抑制IgE分泌而对变应性鼻炎产生治疗作用。     

滨蒿内酯对大鼠血清Th1／Th2细胞因子及IgE表达的影响

目的：观察滨蒿内酯（Scoparone,20ml／kg,浓度为168mg／L）对变应性鼻炎（AR）大鼠模型血清Th1／Th2细胞因子及IgE表达的影响,以探讨其治疗机制。方法：40只雄性SD大鼠,随机分为4组：正常对照组（NC组）、AR组、滨蒿内酯组（Sco组）和地塞米松组（Dxm组）,以卵清蛋白致敏和激发建立大鼠AR动物模型并给予相应治疗。观察AR大鼠行为学改变;组织病理学方法观察鼻黏膜改变;采用ELISA法检测血清IgE和细胞因子IFN-γ、IL-4及IL-5水平。结果：Sco组行为学得分明显低于AR组,差异有统计学意义（P〈0．01）,与Dxm组和NC组比较差异无显著性（P〉0．05）。Sco组鼻黏膜炎性反应明显轻于AR组。Sco组血清IFN-γ水平明显高于AR组,而血清IgE、IL-4和IL-5水平明显低于AR组,差异有统计学意义（P〈0．01）;Sco组血清IFN-γ、IgE、IL-4、IL-5水平与Dxm组和NC组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：滨蒿内酯可通过调节Th1／Th2细胞因子的表达,抑制IgE的产生而对AR产生治疗作用。     

喉鳞状细胞癌患者Th1/Th2转录因子与细胞因子的表达及其临床意义探讨

目的:从转录因子与细胞因子的角度分析喉鳞状细胞癌患者Th1/Th2细胞分化趋势,探讨T-bet/GATA3与p53的相关性,了解其与肿瘤转移之间的关系。方法:利用荧光定量PCR技术检测49例喉鳞状细胞癌患者(实验组)及30例正常人(正常对照组)外周血单个核细胞(PBMC)中T-bet、GATA3和IFN-γ、IL-4mR-NA的水平;应用免疫组织化学法检测实验组中p53的表达状况。结果:实验组T-bet、GATA3、IFN-γ、IL-4的表达率依次为42.86%(21/49)、71.43%(35/49)、26.53%(13/49)、63.27%(33/49)。定量PCR结果显示,实验组的T-bet和IFN-γ的表达明显低于正常对照组(P<0.05),而GATA3和IL-4的表达则明显高于正常对照组(P<0.05)。在p53阳性的患者中,T-bet的表达量较低,而GATA3的表达量较高,且T-bet和GATA3的表达与p53具有相关性。结论:喉鳞状细胞癌患者有明显的Th2漂移现象,且T-bet与GATA3可作为反映肿瘤转移的参考指标。     

变应性鼻炎患者外周血白介素4和13的检测

Th1／Th2平衡和复杂的细胞因子网络学说是变应性鼻炎发病机制较新的观点。虽然IL4被认为是生成Th2型细胞的主要介质之一，但IL-13也日益受到重视。有研究表明，IL4缺陷的转基因小鼠也能产生IgE反应，而IL-4／IL-13都缺陷的转基因小鼠不能产生IgE反应。IL—13缺陷小鼠的T细胞不能产生Th2型细胞因子。阻断IL-13可显著抑制抗原导致的气道高反应。本研究通过采用流式细胞仪检测变应性鼻炎患者细胞内IL4、IL-13、干扰素-γ（IFN-γ）的表达，以及酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测血清中IL4、IL-13含量，以探讨变应性鼻炎的发病机制。     

YKL-40在变应性鼻炎患者血清中的表达及与IL-4和IFN-γ相关性分析

目的:比较不同类型变应性鼻炎(AR)患者血清中YKL-40的表达水平,分析其与IL-4、IFN-γ的相关性,探讨其在AR发病机制中的可能作用。方法:选取轻度间歇性、轻度持续性、中-重度间歇性、中-重度持续性AR患者各20例作为实验组,正常健康者20例作为对照组。应用酶联免疫吸附法检测各组血清中YKL-40、IL-4、IFN-γ的表达水平。对以上各组数据进行统计学分析。结果:1不同实验组与对照组血清YKL-40相比表达均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。轻度持续组与轻度间歇组血清YKL-40相比表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。中-重度持续组与中-重度间歇组血清YKL-40相比表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。在轻度间歇组与中-重度间歇组、轻度持续组与中-重度持续组之间表达差异均无统计学意义(P>0.05)。2不同实验组与对照组血清IL-4相比表达均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。各实验组之间血清IL-4表达差异均无统计学意义(P>0.05)。3不同实验组与对照组血清IFN-γ相比表达均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。各实验组之间血清IFN-γ表达差异均无统计学意义(P>0.05)。4AR血清YKL-40水平升高与血清IL-4水平呈正相关,与血清IFN-γ呈负相关。结论:1AR血清中YKL-40表达升高,且与IL-4水平呈正相关,与IFN-γ水平呈负相关,提示YKL-40可能通过调节Th细胞的分化,促进Th1向Th2的免疫偏移,参与AR的发病。2与间歇性AR患者相比,持续性AR患者血清中YKL-40表达升高,提示YKL-40可能会促进AR症状的持续发作。     

Therapeutic Efficacy of Th1 and Th2 L‐selectin− CD4+ Tumor‐Reactive T Cells

Objective To evaluate the cytokine secretion profile and therapeutic efficacy of Th1 CD4+ L‐selectin? tumor‐draining lymph node lymphocytes in the treatment of murine pulmonary metastases. Study Design Prospective, murine in vivo and in vitro study. Methods B6 mice were injected bilaterally subcutaneously with MCA 205 sarcoma cells to initiate tumor growth. Eleven days later, tumor‐draining inguinal lymph nodes were harvested. Single‐cell suspensions were prepared and fractionated using magnetically activated cell sorting. Sorted CD4+ L‐selectin? lymphocytes were activated with anti‐CD3 monoclonal antibody for 48 hours either alone to give a Th1 phenotype, or in the presence of interleukin (IL)‐4 and anti‐interferon‐γ (α‐IFN‐γ) monoclonal antibody to elicit a Th2 phenotype. Activated cells were then expanded for 3 days in IL‐2. Resulting cells were used to treat 3‐day pulmonary metastases. Enzyme‐linked immunosorbent assay and intracellular fluorescent‐activated cell‐sorter (FACS) scanning were used to evaluate the cytokine secretion profiles of these cells. Results Activated and expanded L‐selectin? CD4+ T cells demonstrated a Th1 cytokine profile and excellent antitumor efficacy. In contrast, L‐selectin? CD4+ lymphocytes activated in the presence of IL‐4 and α‐IFN‐γ monoclonal antibody demonstrated a Th2‐like profile and significantly (P < .05) poorer antitumor efficacy. Conclusions The cytokine environment during the activation of tumor‐draining lymph nodes can influence the therapeutic efficacy of activated L‐selectin?, CD4+ T cells. Cell mediated, Th1‐dependent immunity appears to play an important role in mediating tumor regression. Culture conditions promoting Th2 cells resulted in T cells associated with diminished antitumor efficacy.     

槲皮素对大鼠变应性鼻炎血清Th1/Th2细胞因子表达的影响

目的分析槲皮素（QUE）对大鼠变应性鼻炎（allergic rhinitis, AR）血清T细胞辅助因子Th1/Th2表达的影响。方法采用二异氰酸甲苯酯（TDI）制作大鼠实验性AR模型并进行评分,45只大鼠按照数字随机法平分为3组：正常对照组、模型组和实验组,正常对照组为正常大鼠,模型组和实验组大鼠进行变应性鼻炎造模。实验组利用QUE 80 mg/kg腹腔注射治疗2周,而正常对照组和模型组均注射等量生理盐水。2周后HE染色观察各组大鼠鼻黏膜组织学变化;ELISA法检测血清中细胞因子白细胞介素-2（IL 2）、干扰素-γ（IFN γ）以及IL 4、IL 5水平;实时荧光定量PCR（q PCR）检测基因Tim1、Tim3表达。结果2周后实验组评分显著低于正常对照组与模型组（P＜0.05）;ELISA检测显示模型组IL 2、IFN γ显著低于正常对照组（P＜0.05）,IL 4,IL 5显著高于正常对照组（P＜0.05）;实验组IL 2、IFN γ显著高于模型组（P＜0.05）,IL 4,IL 5显著低于模型组（P＜0.05）;q PCR检测显示实验组大鼠鼻黏膜组织Tim1、Tim3表达明显低于模型组（P＜0.05）,模型组大鼠鼻黏膜组织Tim1、Tim3表达明显高于正常对照组（P＜0.05）,实验组大鼠鼻黏膜组织Tim1、Tim3表达明显高于正常对照组（P＜0.05）。结论QUE能不同程度减轻大鼠变应性鼻炎鼻部症状,改善鼻黏膜炎症程度;通过调节Th1和Th2细胞因子表达,从而调节大鼠变应性鼻炎Th1/Th2细胞因子平衡,对变应性鼻炎具有一定保护作用。     

Th17细胞在小鼠变应性鼻炎模型中的表达及调控作用

目的:通过探讨变应性鼻炎小鼠与正常小鼠、抗IL-17抗体治疗后的变应性鼻炎小鼠的行为学、组织病理学,Th1、Th2、Th17细胞因子的数量以及Th17细胞特异性转录因子的表达水平,评价Th17细胞在变应性鼻炎发病机制中的作用.方法:以卵清蛋白致敏模型组和治疗组小鼠建立BALB/c小鼠变应性鼻炎模型,造模成功后治疗组予IL-17抗体治疗.对照组以生理盐水对照.采集外周血ELISA法测IL-17、IL-4和IFN-γ.并取黏膜行苏木精-伊红染色及RT-PCR法测孤儿核受体(RORγt)mRNA的表达水平.结果:卵清蛋白造模成功,治疗后症状及炎症病理缓解.模型组IL-17、IL-4及RORγt mRNA表达水平均较对照组明显增高,IFN-γ降低;治疗后前三者降低而后者升高(P<0.05).结论:Th17细胞与Th2细胞在变应性鼻炎中大量表达,说明两者可能与其发病机制有关,本实验从IL-17抗体局部治疗有效方面提出治疗依据,通过调控Th17细胞可能成为有效阻止变应性鼻炎的治疗方法.     

Increase of Th2 and Tc1 cells in patients with Kimura's disease

Objective

A Th1/Th2 cytokine imbalance with a predominance of Th2 cytokines has been suggested to be of pathogenic importance in Kimura's disease.

Methods

To evaluate the role of Th1/Th2 cytokines in Kimura's disease, the subsets of Th1, Th2, Tc1 and Tc2 cells from patients with Kimura's disease were examined by intracellular cytokine flow cytometry. The expressions of IL-5, eotaxin and RANTES in the lesions were investigated by RT-PCR.

Results

The population of Th2 and Tc1 cells in Kimura's disease was significantly increased compared with these cells in control (p < 0.05). Th1 and Tc2 cells in Kimura's disease were not significantly increased compared with control subjects. The titers of IgE and the number of Th2 cells were correlated. The expression of IL-5 and RANES was observed in the lesions of patients with Kimura's disease.

Conclusion

These results indicate that the predominance of Th2 and Tc1 cells might contribute to the mechanism in pathogenesis of Kimura's disease.     

Th17相关细胞因子在CRSsNP中的表达及意义

目的:检测Th17细胞核转录因子RORC及细胞因子IL-17A、IL-22以及中性粒细胞标记MPO在慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉(CRSsNP)中的表达及其相关性,进而探讨Th17在CRSsNP发病机制中的作用及其与中性粒细胞炎症的关系。方法:实时定量方法检测17例CRSsNP患者筛窦黏膜及10例鼻中隔偏曲矫正患者下鼻甲组织中RORC、IL-17A及IL-22mRNA表达并探讨其相关性;免疫组织化学检测IL-17A+细胞的表达;ELISA检测MPO的表达并探讨其与Th17的相互关系。结果:RORC及IL-17A、IL-22mRNA在CRSsNP组中的表达较对照组显著上调且RORC、IL-17A及IL-22mRNA表达呈正相关,免疫组织化学证实CRSsNP组较对照组具有更高的IL-17A表达。CRSsNP组较对照组含有更高的MPO表达,然而MPO的表达与Th17相关因子表达无相关性。结论:Th17细胞以及中性粒细胞炎症反应可能共同参与了CRSsNP的发病,然而二者可能并无内在的相互作用。     

枸杞多糖通过调控TLR9/AP-1信号通路对变应性鼻炎大鼠Th1/Th2细胞因子及鼻黏膜中嗜酸性粒细胞炎症的影响

目的 探究枸杞多糖通过调控Toll样受体9/激活蛋白-1(TLR9/AP-1)信号通路对变应性鼻炎大鼠Th1/Th2细胞因子、鼻黏膜中嗜酸性粒细胞炎症的影响。方法 选取60只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(A)组,模型(B)组,糠酸莫米松(C)组,枸杞多糖(D)组,TLR9/AP-1信号通路抑制剂(E)组,TLR9/AP-1信号通路抑制剂联合枸杞多糖(F)组,每组各10只,对B、C、D、E、F组采用卵清蛋白致敏法建立变应性鼻炎模型,A组不建立该模型。建模成功后,对C组给予1喷/侧的糠酸莫米松喷鼻治疗,对D组灌胃100 mg/kg的枸杞多糖,对E组灌胃20 mg/kg AP-1抑制剂SP100030,对F组给予SP100030联合枸杞多糖,A、B组同期给予灌胃同体积生理盐水,对大鼠鼻部症状进行评分,HE染色法检测鼻黏膜组织病理形态及嗜酸性粒细胞并计数,ELISA法检测大鼠血清中Th1/Th2细胞因子水平,免疫印迹法检测鼻黏膜组织中TLR9/AP-1信号通路相关蛋白表达。结果 与A组相比,B组鼻部症状评分、鼻黏膜中嗜酸性粒细胞数目、血清IL-4含量显著升高(P<0.05),血清中INF-γ含量显著降低(P<0.05);与B组比较,C、D两组鼻部症状评分、鼻黏膜中嗜酸性粒细胞数目、血清IL-4含量显著降低(P<0.05),血清中INF-γ含量显著升高(P<0.05),且D组比C组变化显著(P＜0.05);A组大鼠鼻黏膜组织结构完整,B组鼻黏膜上皮结构紊乱且不完整,出血及嗜酸性粒细胞等炎性细胞浸润;与B组相比,C、D组病理状态明显改善,嗜酸性粒细胞明显减少;与A组比较,B组鼻黏膜组织中TLR9、AP-1蛋白表达显著升高(P<0.05),与B组比较,C、D组鼻黏膜组织中TLR9、AP-1蛋白表达显著降低(P<0.05),且D组比C组变化显著(P＜0.05),而E组与D组相比无明显差异(P＞0.05),F组比E组降低明显(P<0.05)。结论 枸杞多糖可有效调控变应性鼻炎大鼠Th1/Th2细胞因子水平、减轻鼻黏膜中嗜酸性粒细胞炎症,其机制可能与抑制TLR9/AP-1信号通路有关。     

芳香烃受体抑制变应性鼻炎Th17免疫应答的研究进展

变应性鼻炎是指特应性个体暴露于变应原后由IgE介导的鼻变应性疾病。在探讨其发病机制时,仅单纯研究Th1/Th2细胞模式已不适用,而Th1/Th2及Thl7/Treg细胞模式近来受到广泛关注。芳香烃受体(AhR)属于螺旋-环-螺旋蛋白家族的成员,其在激活后能够通过调控树突状细胞和T淋巴细胞的分化进而发挥强大的免疫调节能力,这种潜能可以在某些自身免疫和过敏性疾病中发挥保护作用。综述AhR激活与AR患者Th17免疫应答相关性的研究,为AR的进一步诊断和治疗提供新的线索。