RP-HPLC法测定人血浆中丙泊酚的浓度

目的:建立测定人血浆中丙泊酚浓度的方法。方法:血浆样品经6%高氯酸乙腈溶液沉淀蛋白后采用反相高效液相色谱-二极管阵列检测器法进样测定,色谱柱为Kromasil C184.0),流速1.0 mL·min-1流动相为乙腈-0.01 mol·L-1磷酸二氢钾水溶液(70∶30,磷酸调pH值至4.0),流速1.0 mL·min-1,检测波长270 nm,柱温为室温,内标为麝香草酚,进样量20μL。结果:丙泊酚血药浓度在0.1～15μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 9),最低检测限为0.1μg·mL-1;平均提取回收率为88.07%～92.08%,平均方法回收率为99.07%～100.31%;日内、日间RSD分别为5.50%～6.60%、4.12%～10.90%。结论:本方法准确、灵敏、快速,可用于丙泊酚的血药浓度监测及临床药动学研究。     

RP-HPLC法同时测定大鼠血浆中的紫杉醇与汉防己甲素

目的:建立同时测定大鼠血浆中紫杉醇、汉防己甲素的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。取血浆200μL,以利血平为内标,利用乙醚提取,氮气吹干,残渣用流动相溶解,进样20μL。色谱柱为Platisisl ODS(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-0.01mo·lL-1K2HPO4(30∶40∶30,磷酸调节pH值至4.5),流速为1.0mL·min-1,检测波长为227nm。结果:紫杉醇、汉防己甲素检测浓度分别在0.02～20μg·mL-1和0.02～5μg·mL-1(r分别为0.9990、0.9993)范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系。紫杉醇和汉防己甲素低、中、高浓度的方法回收率分别为100.5%～104.0%和101.0%～104.8%,提取回收率分别为84.7%～93.8%和70.8%～86.0%;日内、日间精密度均<10%。结论:本方法专属性强、操作简单、结果准确,可用于紫杉醇和汉防己甲素在大鼠体内的药动学研究。     

RP-HPLC法测定人体血浆中吉西他滨的浓度

目的:建立一种测定人体血浆中吉西他滨血药浓度的高效液相色谱方法。方法:取血浆样品1 mL,加内标100μL(含氟脲苷0.8μg·mL-1),混匀,加甲醇-乙腈(1:9)3 mL混匀,放置5 min,离心(3500 r·min-1,10 min),取上清液于60℃水浴放置,氮气吹干,残渣用0.5 mL流动相溶解,离心(15000 r·min～1,10 min),取上清液,进样50μL。色谱柱:Lichrospher 5-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相:40 mmol·L-1醋酸铵缓冲液(用醋酸调节pH=5.5)-乙腈(97.5:2.5),流速:0.8 mL·min～1,检测波长:268 nm,柱温:25℃。结果:本方法线性范围0.20—10.0μg·mL～1,r=0.9999,方法检测限为0.10μg·mL-1(S/N>4),定量限为(0.21±0.02)μg·mL-1(S/N>10);方法回收率为100.1％-106.6％(n=21),日内RSD为2.3％-4.0％(n=21),日间RSD为3.2％-5.2％(n=21)。结论:本方法灵敏度高,操作简便、准确,可用于人体血浆中吉西他滨浓度的测定及药动学研究。     

RP-HPLC法测定人血浆中烟酸的浓度

目的:建立以反相高效液相色谱法测定人血浆中烟酸浓度的方法。方法:以咖啡因为内标,血浆样品用10%硫酸锌沉淀后进行分析,色谱柱为DiamonsilTM C18,流动相为乙腈-0.01mol·L-1磷酸二氢钾(内含0.01mol·L-1四丁基溴化铵,pH6.5)=15:85,流速为1.0mL·min-1,检测波长为262nm,柱温为40℃。结果:烟酸血药浓度在0.2～20.0μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999),最低检测浓度为0.1μg·mL-1;低、中、高浓度的回收率在93.27%～102.65%之间,日内、日间RSD均<8%。结论:本方法准确、灵敏、重复性好,且不受他汀类药物的干扰,能为烟酸,尤其临床上与他汀类药物联合应用时的血药浓度监测及人体药动学研究提供检测手段。     

酚氯伪麻缓释片中对乙酰氨基酚血药浓度的HPLC测定

目的拟订高效液相色谱法测定酚氯伪麻缓释片中对乙酰氨基酚血药浓度的方法。方法血浆样品前处理方法:取血浆0.5mL,加20%高氯酸100μL,涡旋离心取上清液,供HPLC/UV分析。色谱柱:PhenomenexLunaC18(150mm×4.6mmID);流动相:甲醇∶水=14∶86;检测波长271nm。结果对乙酰氨基酚血药浓度在0.2~20.0μg·mL-1范围,色谱响应线性关系良好,r=0.9994。最低检测限为0.1μg·mL-1;低、中、高3种浓度的平均提取回收率在90.3%~93.4%,方法回收率在101.6%~101.9%范围内。     

RP-HPLC法测定人血浆中帕瑞昔布的浓度

目的:建立测定人血浆中帕瑞昔布的方法。方法:采用反相高效液相色谱法,血浆以无水乙醚提取后进样测定,色谱柱为KromasilC18,流动相为乙腈-水(92:8),内标为布洛芬,流速为1.0mL·min-1,检测波长为209nm,最小进样间隔为30min。结果:帕瑞昔布血药浓度在73.69～442.16μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9992);方法回收率为97.26%～99.24%,提取回收率为79.27%～80.51%,日内和日间RSD均≤2.10%。结论:本方法简便、快速、准确、重复性好,可以满足帕瑞昔布血药浓度的测定要求。     

HPLC法测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪浓度的方法。方法:采用外标法,以甲醇沉淀法处理血样后进样测定,色谱柱为Intersil ODS-3,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(30∶70),流速为1.0mL·min-1,检测波长为225nm,柱温为27℃。结果:拉莫三嗪血药浓度在0.8～40μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999),定量下限为0.5μg·mL-1;平均回收率为(99.35±3.93)%,日内、日间RSD均<5%。20例癫痫患儿拉莫三嗪血药浓度的范围为1.3～15.4μg·mL-1,中位数为4.7μg·mL-1。患儿血浆中拉莫三嗪的血药浓度随年龄的减小,波动范围明显增大。结论:该方法灵敏、准确、简便、快速,适用于拉莫三嗪的血药浓度监测及其药动学研究。年龄越小的患儿,越需要对拉莫三嗪进行血药浓度监测。     

HPLC法测定人血浆中帕罗西汀的浓度

目的:建立测定人血浆中帕罗西汀浓度的方法。方法:采用高效液相色谱法进行测定,色谱柱为Phenomenex Gemini C18,流动相为0.05mol·L-1磷酸二氢钾溶液(pH3.5)-乙腈(62.5:37.5),流速为1.0mL·min-1,检测波长为205nm,柱温为35℃。结果:帕罗西汀血药浓度在0.00781～0.5μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9994),最低定量限为0.2μg·mL-1;日内、日间RSD分别为3.2%～6.4%、4.5%～8.6%;萃取回收率>54%,方法回收率>97%。结论:本方法快速、简便、灵敏、准确,可用于帕罗西汀体内药动学研究。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中紫杉醇和多西他赛的质量浓度

目的建立一种简单、快速,可同时测定人血浆中紫杉醇和多西他赛药物质量浓度的LC-MS/MS方法。方法以罗红霉素为内标,血浆经乙腈沉淀蛋白、离心后进样分析;色谱柱为Hypersil GOLD aQ;流动相为1mL·L-1甲酸溶液-乙腈;梯度洗脱;流速为0.4mL·min-1;离子源为可加热电喷雾离子源(HESI);检测方式:正离子检测;扫描方式为多反应监测(MRM),紫杉醇、多西他赛和罗红霉素的检测离子对分别为m/z854.3→509.1,808.3→527.1和837.6→679.3。结果每份含紫杉醇和多西他赛的样品分析时间为6min,血浆中紫杉醇和多西他赛的药物质量浓度在0.005~1.000μg·mL-1范围内线性关系良好,最低定量限为0.005μg·mL-1,两药测定的日内和日间精密度RSD<15%,提取回收率分别为94.97%~101.95%和96.07%~112.86%,基质效应分别为101.14%~115.59%和82.40%~95.77%。紫杉醇和多西他赛血浆样品在反复冻融3次、4℃保存2h和-80℃保存1个月的条件下稳定。结论该研究建立的LC-MS/MS分析方法简便、快速、灵敏和准确,能同时测定人血浆中紫杉醇和多西他赛的质量浓度。     

HPLC法测定艾司唑仑血药浓度的方法验证

目的:建立测定艾司唑仑血药浓度的方法,以确定较好的检测条件。方法:采用高效液相色谱法,以依利特Hypersil ODS2 C18为色谱柱,甲醇-乙腈-水(28∶28∶54)为流动相,1.0 mL·min-1为流速,35℃为柱温,230 nm为检测波长,地西泮为内标,考察服用艾司唑仑片患者血浆、碱化血浆、血清浓度并对选定的标本及提取方法进行验证。结果:艾司唑仑血浆浓度明显高于碱化血浆及血清浓度,经成对双侧t检验,艾司唑仑血浆浓度与碱化血浆及血清浓度比较(P分别为0.011 30、0.018 17),有显著性差异。艾司唑仑血药浓度在0.049 4～1.289 6μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.991 8),定量下限为0.049 4μg·mL-1;平均日内、日间RSD均<10%,平均回收率为99.95%～100.79%。结论:采用患者血浆作为标本进行艾司唑仑血药浓度监测和药物中毒的定量分析可行,本方法简便、准确。     

HPLC法测定人血浆中非诺贝特酸的浓度

目的:建立非诺贝特酸简便快速的血浆样品提取及准确灵敏的高效液相色谱分析方法。方法:血浆样品加地西泮和乙腈,涡旋振荡,高速离心后进样分析。其中,色谱柱为Eclipse XDB C18,流动相为乙腈∶甲醇∶0.04mmol·L-1乙酸钠(冰乙酸调pH值为3.50)=45∶15∶40,检测波长为296nm。结果:乙腈能够去除绝大部分的血浆杂质,不干扰色谱峰;非诺贝特酸、内标地西泮保留时间分别约为4.10、5.40min。非诺贝特酸检测浓度在0.2~20μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 7);其低、中、高(0.5、5.0、18.0μg·mL-1)浓度的提取回收率分别为100.53%、102.64%、91.81%,日内RSD均<8%,日间RSD均<7%。非诺贝特酸血浆样品预处理室温放置24h及于—20℃冰箱中贮存15d稳定。结论:本方法简便、快速、准确、重现性好,符合生物样品测定要求,适合非诺贝特临床药动学的研究。     

简单灵敏的高效液相色谱法测定人血浆中去甲万古霉素的浓度

目的建立血浆中去甲万古霉素含量的HPLC测定方法。方法采用高效液相色谱检测法,分析柱为Tskgel ODS-80TS（4．6mm×250mm,5μm）,流动相为10mmol·L^-1甲酸铵（0．1％甲酸）-甲醇（0．1％甲酸）=（82：18,v／v）,流速：1．0mL·min^-1,柱温：30℃,检测波长：236nm,进样量：20μL.血浆样品用三氟醋酸直接沉淀后,进样分析。结果去甲万古霉素在1～1000μg·mL^-1与峰面积线性关系良好（r=0．999）,最低检测浓度为1μg·mL^-1。平均回收率为96％;日间、日内RSD均〈15％。结论研究建立的HPLC法快速、简便、高效,精密度和准确度高,适合血样中去甲万古霉素浓度的检测。     

HPLC法同时测定Beagle犬血浆中茴三硫及其代谢物浓度的方法学研究

目的:考察高效液相色谱法同时测定Beagle犬血浆中茴三硫(AT)及其代谢物对羟基苯基三硫酮(ATX)浓度的方法学。方法:用乙腈直接沉淀犬血浆样品中的蛋白质,取上清液进样分析。色谱柱为Diamonsil ODS-C18,流动相为甲醇-水(80∶20),流速为1.0mL·min-1,紫外检测波长为346nm。结果:AT和ATX与犬血浆中的内源性物质完全分离且无其它干扰,保留时间分别为5.5、3.4 min。二者检测浓度线性范围分别为0.254～3.392、0.125～1.664μg·mL-1(r分别为0.999 9、0.999 8);平均回收率分别为(93.89±2.39)%、(96.28±2.83)%;日内RSD分别为0.83%～4.11%、0.55%～1.23%,日间RSD分别为0.71%～4.51%、1.74%～3.92%;最低定量浓度分别为0.254、0.125μg·mL-1。结论:方法学考察结果表明,所建立方法简便、准确、重复性好,可用于犬血浆中AT及ATX的浓度测定。     

高效液相色谱法测定人血浆中比阿培南的浓度

目的建立人血浆中比阿培南的高效液相检测方法。方法色谱柱为Waters ACQUITY○RBEH C18柱（250×4.6mm,5μm）,流动相为乙腈∶水（15∶85,v/v）;流速1.0 mL·min^-1;检测波长为300nm,血浆样品处理选用亚胺培南为内标,采用乙腈沉淀蛋白。结果比阿培南在0.05-25.0μg.mL-1范围内线性良好（r=0.9988,加权系数为1/C2）,HPLC测定定量限为0.05μg.mL-1,比阿培南浓度分别为0.1,5.0 and 20.0μg·mL^-1血浆样本绝对回收率分别为94.28%,95.07%,93.96%,相对回收率分别为99.87%,102.55%,98.64%,精密度试验日内和日间RSD均小于15%,稳定性试验结果表明血浆样品在样品处理过程中较稳定（RSD〈15%）。结论本方法灵敏度高,操作简便、快速,重复性好,适用于比阿培南血浆浓度测定。     

HPLC法测定祛风息痛膏中瑞香素的含量

目的;建立以高效液相色谱法测定祛风息痛膏中瑞香素含量的方法。方法:色谱柱为Sinochrom ODS-BP(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸(14∶86),流速为1.0mL·min-1,检测波长为327nm,进样量为20μL。结果:瑞香素的检测浓度在20～120μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9996);平均回收率为99.36%,RSD=0.70%(n=6)。结论:本方法简便、快速、准确,回收率好,可用于祛风息痛膏的质量控制。     

HPLC法测定血浆中头孢丙烯浓度及其人体药动学研究

目的:建立测定人血浆中头孢丙烯(CFPZ)浓度的高效液相色谱法,并应用于人体药动学研究。方法:10名男性健康受试者单次空腹口服CFPZ片500mg,采用高效液相色谱法测定CFPZ的血药浓度,色谱柱为KromasilKR100-5C18,流动相为0·01mol·L-1KH2PO4水溶液-乙腈(100:9·5),检测波长为254nm,柱温为室温,流速为1·0mL·min-1,进样量为20μL。结果:CFPZ血药浓度在0·25～15μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0·9999),最低检测浓度为0·25μg·mL-1;低、中、高(0·25、0·5、2·5μg·mL-1)3种浓度(n=5)的日内RSD分别为4·8%、3·5%、1·3%,日间RSD分别为12·6%、6·7%、1·6%,相对回收率分别为97·7%、102·5%、103·6%,绝对回收率分别为88·5%、87·8%、85·3%。受试者单次空腹口服CFPZ片500mg后的Cmax为(8·66±1·57)mg·L-1,tmax为(1·85±0·8)h,t1/2为(1·4±0·18)h,AUC0～10为(28·28±3·28)mg·h·L-1,AUC0～∞为(29·43±3·54)mg·h·L-1。结论:CFPZ片体内过程符合血管外二室模型,口服后吸收迅速。本方法准确、灵敏、简便、特异性强、重现性好,适合于临床药动学研究。     

UPLC-MS/MS方法测定健康人体氟氯西林血浆药物浓度及其药动学研究

目的：应用超高效液相串联质谱联用方法（UPLC-MS/MS）测定健康人体氟氯西林血浆药物浓度,并对其药动学特征进行分析。方法：采用开放、随机设计试验方案,选择24位健康志愿者,男女各半,随机分成3组,分别静脉给予1.0 g、2.0 g、4.0 g三个剂量试验药物,采用UPLC-MS/MS方法测定血浆中氟氯西林药物浓度。流动相由乙腈：10 mmol·L^-1甲酸铵水溶液=35∶65（v/v）组成。色谱柱为BEHTM C18（Waters）,1.7μm,柱长100 mm×2.1 mm I.D,流速为0.2 mL·min-1,柱温40℃,自动进样器温度4℃,进样量2.5μL。质谱条件：离子源温度120℃;去溶剂气温度：350℃;氟氯西林（m/z 454.1〉160.3）,内标氯唑西林钠（m/z 436.1〉277.3）。结果：氟氯西林标准曲线线性范围为0.2μg·mL^-1~1000μg·mL^-1,线性关系良好（r〉0.99）,最低定量限：0.2μg·mL^-1,高、中、低3种浓度的批内和批间变异（RSD%）均小于15.0%,血浆提取回收率为89.7%~114.7%。结论：本方法处理过程简单可靠,可快捷、准确地应用于氟氯西林的血浆药物浓度测定。     

HPLC测定吉米沙星血药浓度

目的建立高效液相色谱法快速测定人血浆中吉米沙星药物浓度。方法色谱柱为KromasilC18（250min×4．6mm,5μm）;流动相为乙腈-10mmol·L-1醋酸铵缓冲液（pH2．2,含10mmol·L-1高氯酸）（22：78）;柱温40℃;流速1．5mL·min^-1;检测波长为338nm。血浆样品经5％硫酸锌甲醇溶液沉淀蛋白后进样测定。结果本测定方法的线性范围：0．05-5μg·mL-1,r=0．9999。方法回收率93．2％-104．8％,批内RSD为1．8％-5．1％,批间RSD为7．7％-8．5％。吉米沙星的最低检测浓度为0．02μg·mL^-1。结论本方法简单、快速、灵敏、重复性好,适用于吉米沙星生物利用度及人体药动学研究。     

更昔洛韦在犬体内血药浓度的测定及其分散片的相对生物利用度研究

目的:建立犬血清中更昔洛韦浓度测定的高效液相色谱法,并对更昔洛韦分散片进行药动学及相对生物利用度研究。方法:色谱柱为Dikma DiamonsilTM C18,流动相为0.015mol·mL-1磷酸二氢钾缓冲液(pH2.50,含乙腈0.25%),流速为1.75mL·min-1,检测波长为254nm,柱温为40℃。采用随机自身交叉对照试验设计,6只家犬分别单剂量口服更昔洛韦分散片与更昔洛韦胶囊后,采用高效液相色谱法测定血药浓度,DASver1.0软件处理药动学数据。结果:血清样品中更昔洛韦检测浓度在0.05025～100.5μg·mL-1范围内线性关系良好,方法回收率>90%,RSD<4%;分散片和胶囊的Cmax分别为(50.91±13.36)、(42.27±14.69)μg·mL-1,tmax分别为(2.70±0.67)、(3.20±0.57)h,AUC0～24分别为(361.50±72.76)、(280.60±101.87)μg·h·mL-1。分散片的相对生物利用度为128.83%。结论:所建立的更昔洛韦血药浓度测定方法灵敏度高,专一性强,能够满足药动学研究的要求。分散片与胶囊之间吸收速度等效,吸收程度不等效。