神经髓鞘及脱脂神经髓鞘诱导MS-TCL增殖反应比较

目的 比较神经髓鞘和脱脂神经髓鞘诱导多发性硬化(MS)T淋巴细胞系(TCL)对11种神经髓鞘成份的增殖反应。方法 以2种人神经髓鞘在体外二次致敏,诱导MS-TCL和正常人TCL,用MBP、PLP及其合成多肽等抗原检测PTL的增殖反应。结果 与非脱脂TCL相比,脱脂髓鞘使MS组的免疫反应性显著改变。尤其对PLP6种多肽反应性的改变有统计学差异,总平均阳性孔比较P<0.001(3.41±4.83 vs 5.49±5.31)。结论 髓鞘脱脂使MS组增殖反应显著增加,二组的差别更明显。提示在髓鞘脱脂方面MS和正常人反应的异质性,此点对理解MS的病理机制可能很重要。     

多发性硬化T淋巴细胞系增殖反应性的研究

目的 比较多发性硬化(MS)患者和正常人T淋巴细胞对碱性髓鞘蛋白(MBP)和蛋白脂质蛋白(PLP)及其合成多肽的增殖反应性。方法 选HLA-DRl5亚型MS患者和正常人外周血单个核细胞。以人神经髓鞘为致敏原，采用二次致敏诱导法。经短期体外培养产生外周血T淋巴细胞系(TCL)，用MBP、PLP及其合成多肽等11种抗原检测TCL的增殖反应。结果 MS和对照组对神经髓鞘成分反应均显示多态性。MS组对7种。对照组对5种抗原有反应；比较两组总的平均阳性孔无差别(P=0．177)；两组间对MBP、P30-49、P95-117、P178-191的增殖反应差异有统计学意义。结论 作为神经髓鞘主要成分的MBP和PLP免疫反应性高，可能在体内触发自身免疫反应过程发挥作用，而M87-106、P40-60、P95-117和P185-206等位点值得进一步研究。     

PLP不同肽段诱导EAE模型的对比研究

目的建立不仅与多发性硬化(multiple sclerosis，MS)临床表现、病理特征接近而且病程相似的较为理想的复发一缓解型实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE)模型。方法应用髓鞘蛋白脂质蛋白(proteolipid potein，PLP)多肽的两种免疫优势表位肽段PLP139-151和PLP178-191免疫雌性SJL／J小鼠，制作复发缓解型EAE(relapse remitting experimental autoimmune encephalomyelitis，RR—EAE)模型，观察其体重及神经功能评分的变化，应用HE、Luxol fas tblue髓鞘染色等方法观察模型的组织形态学改变。结果两种PLP肽段免疫的小鼠发病均具有缓解一复发的特点，出现明显的神经系统体征；小鼠发病时脑和脊髓组织显示明显的血管鞘形成、卫星现象和炎性细胞浸润以及脱髓鞘改变。结论PLP两种肽段均可诱发RR-EAE模型，这与临床MS的缓解一复发病程更相似，更能表现MS的临床特点，是研究MS的较为理想的动物模型。     

神经干细胞移植促进鼠脊髓损伤后髓鞘结构的修复

目的 观察神经干细胞移植治疗对鼠脊髓损伤后髓鞘结构修复的作用并探讨其作用机制。方法 制备鼠T10脊髓损伤模型,体外培养、诱导鼠神经干细胞,定量评价神经干细胞移植对脊髓损伤后髓鞘结构修复的影响。结果 与对照组相比,神经干细胞移植组明显地增强了蛋白前脂蛋白信使核糖核酸(PLP mRNA)的表达,促进了髓鞘碱性蛋白(MBP)性的髓鞘再生和髓鞘结构的修复。结论 神经干细胞移植通过增强髓鞘的再生而促进了脊髓损伤后髓鞘结构的修复,是急性脊髓损伤一种有效的治疗方案。     

髓鞘蛋白脂质蛋白多肽139—151诱发实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型

目的 用髓鞘蛋白脂质蛋白多肽（PLP）139-151诱发实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠模型。方法 应用PLP139－151抗原加完全福（氏）佐剂免疫SWXJ小鼠。结果 免疫14－20d后小鼠即发病,发病率为80％,而且多数呈缓解－复发型。病理学证实发病小鼠脑和脊髓内具有典型的脱髓鞘改变和炎性细胞浸润。结论 以PLP139－151为抗原免疫SWXJ小鼠诱发EAE,具有模型稳定、发病率高和缓解－复发的特点,是研究多发性硬化较理想的动物模型。     

G蛋白偶联受体56对小鼠脑胼胝体轴突髓鞘化的影响

目的探讨G蛋白偶联受体56(GPR56)对小鼠脑胼胝体轴突髓鞘化的影响。方法筛选出GPR56基因杂合型(GPR56+/-)小鼠(GPR56+/-组)和敲除型(GPR56-/-)小鼠(GPR56-/-组)各38只。每组选在小鼠出生后7 d、14 d、21 d、28 d(P7d、P14d、P21d、P28d)进行研究。应用免疫组化染色和Western Blot方法监测髓鞘碱性蛋白(MBP)和2、3-环核苷酸3-磷酸二酯酶(CNPase)在P7d、P14d、P21d、P28d两组小鼠脑胼胝体白质中的表达;用电镜观察P28d小鼠胼胝体白质内轴突髓鞘化,比较轴突髓鞘的厚度。用荧光免疫组化染色观察P7d两组小鼠胼胝体内PDGF-aR阳性(PDGF-aR+)细胞的数量。用原位杂交检测P28d两组小鼠胼胝体内髓鞘蛋白脂质蛋白(PLP)阳性(PLP+)细胞数。结果与GPR56+/-小鼠比较,MBP在P14d、P21d、P28d GPR56-/-小鼠脑胼胝体白质中的表达明显下降,CNPase在P7d、P14d、P21d、P28d GPR56-/-小鼠脑胼胝体白质中的表达明显下降(均P0.01)。电镜见P28d GPR56-/-小鼠脑胼胝体白质内髓鞘化轴突的数量明显减少,轴突髓鞘的g-ratio值升高(P0.05),髓鞘的厚度变薄。荧光免疫组化和原位杂交结果显示P7d GPR56+/-和GPR56-/-小鼠胼胝体内PDGF-aR+细胞数量无差异,但P28d GPR56+/-小鼠胼胝体内PLP+细胞数明显多于P28d GPR56-/-小鼠(P0.01)。结论 GPR56蛋白分子可能通过影响少突胶质前体细胞分化成熟参与了脑白质轴突髓鞘化。     

钾通道阻滞剂可以有效修复受伤轴突的冲动传导(英文)

在脊椎中枢神经系统中,少突胶质细胞能形成轴突的髓鞘。髓鞘对轴突具有保护作用,使轴突具有电绝缘的特性,其独特的节段状结构使髓鞘化的神经轴突能快速、跳跃式地传导神经冲动。髓鞘损伤常见于脊髓损伤和一些慢性神经退行性疾病,由其引起的轴突传导阻滞被认为是引起损伤相关的神经并发症的主要原因。钾离子通道在发生于脊髓损伤和多发性硬化征的轴突传导阻滞中扮演重要角色。髓鞘损伤后会暴露钾离子通道,引起钾离子泄漏,从而阻断神经传导。将钾离子通道阻滞后,离子泄漏得到抑制,进而能促进神经传导。本综述主要详细介绍了修复轴突神经传导功能技术的研究进展和脱髓鞘轴突的神经功能。最近的研究表明,4-氨基吡啶能有效治疗多发性硬化征。此外,转化型研究也筛选出了一些能有效修复轴突神经传导的新型的钾离子通道阻滞剂。     

短暂脑缺血后成年和老年大鼠大脑髓鞘相关蛋白基因表达变化

目的探讨短暂脑缺血后成年和老年大鼠大脑髓鞘相关蛋白基因表达变化及其意义。方法以线栓法制作成年和老年SD大鼠短暂脑缺血模型（阻塞60min再灌注1d、7d和14d）；采用5末端标记地高辛的寡核苷酸探针荧光原位核酸分子杂交检测短暂脑缺血大鼠大脑梗死中心区、梗死周边区和梗死对侧区PLP mRNA和MyT1 mRNA照射后表达变化，并计数阳性细胞数量。结果（1）短暂脑缺血后成年和老年大鼠大脑皮质梗死中心区PLP mRNA和MyT1 mRNA阳性细胞数明显减少，两组之间比较无显著差异。（2）短暂脑缺血后早期成年和老年大鼠梗死周边区PLP mRNA和MyT1 mRNA阳性细胞数无明显变化，之后（7d和14d）逐渐增加，成年大鼠PLP mRNA和MyT1 mRNA阳性细胞数增加更明显。结论成年大鼠短暂脑缺血后急性期梗死周边区髓鞘相关蛋白基因表达强于老年大鼠，提示年龄是影响少突胶质前体细胞参与脑缺血后损伤修复的因素之一。     

连翘提取物对实验性自身免疫性脑脊髓炎抗原特异性T细胞增殖和细胞因子分泌的影响

目的探索连翘提取物对髓鞘蛋白脂质蛋白(PLP)139-151特异性T细胞增殖及细胞因子分泌的影响。方法应用PLP139-151免疫SJL/J小鼠,免疫后10d取淋巴结细胞进行体外培养,按处理条件将淋巴细胞分为对照组、PLP抗原刺激组、大剂量连翘组、中剂量连翘组、小剂量连翘组。采用MTT法测定吸光度〔D(λ)〕值,以观察连翘提取物对淋巴细胞增殖的影响;ELISA法测定IFN-γ、IL-10的水平。结果对照组、PLP抗原刺激组、小剂量连翘组、中剂量连翘组、大剂量连翘组D(λ)值分别为0.20±0.017、0.47±0.022、0.60±0.041、0.74±0.027、0.80±0.073,PLP抗原刺激组与对照组比较差异具有统计学意义(t=-30.710,P<0.01);后四组比较差异具有统计学意义(F=416.06,P<0.001)。与对照组相比,PLP抗原刺激组IFN-γ水平增高(455.7±25.4vs.2507.0±79.8),IL-10水平降低(1702.2±87.4 vs.1167.4±58.7)(t=-69.602,t=16.063,均P<0.01)。与PLP抗原刺激组相比,小剂量、中剂量、大剂量连翘提取物组IFN-γ水平降低(2507.0±79.8 vs.360.6±43.1、349.0±38.2、288.3±23.2)(F=4628.61,P<0.001);IL-10水平增加(1167.4±58.7vs.1189.1±75.4、1208.2±78.1、1515.5±92.7)(F=454.230,P>0.05)。结论连翘提取物促进抗原特异性淋巴结细胞增殖,降低PLP139-151特异性淋巴细胞增殖分泌IFN,但对IL-10的分泌无影响。     

自身抗原冲击的树突状细胞抑制实验性自身免疫性脑脊髓炎具有抗原特异性(简报)

树突状细胞(dendritic cells，DC)不仅有免疫刺激作用．而且能通过诱导中枢和外周耐受而调节免疫反应。近年发现，在诱发自身免疫性疾病动物模型如实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)之前，皮下注射致病抗原碱性髓鞘蛋白68-86(MBP68-86)体外冲击的DC，对该抗原诱导的EAE模型有明显抑制作用。此研究采用皮下注射3种不同的致脑炎肽MBP68-86、蛋白脂质蛋白139-151(PLP139-151)和髓鞘少突胶质细胞糖蛋白肽(MOG35-55)体外冲击DC，对EAE进行研究。     

钾通道阻滞剂可以有效修复受伤轴突的冲动传导

在脊椎中枢神经系统中,少突胶质细胞能形成轴突的髓鞘.髓鞘对轴突具有保护作用,使轴突具有电绝缘的特性,其独特的节段状结构使髓鞘化的神经轴突能快速、跳跃式地传导神经冲动.髓鞘损伤常见于脊髓损伤和一些慢性神经退行性疾病,由其引起的轴突传导阻滞被认为是引起损伤相关的神经并发症的主要原因.钾离子通道在发生于脊髓损伤和多发性硬化征...     

黄芩甙治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎的实验研究

目的研究黄芩甙治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的可能性及有效性。方法应用髓鞘脂质蛋白(PLP)139-151免疫SJL/J小鼠诱发慢性复发-缓解型EAE模型,研究黄芩甙对PLP139-151诱导的小鼠淋巴结细胞增殖反应及干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)分泌的作用,使用流式细胞技术检测黄芩甙对EAE小鼠淋巴结细胞CCR5表达的影响;通过神经功能评分观察黄芩甙治疗EAE的有效性。结果黄芩甙可抑制PLP139-151诱导的淋巴结细胞增殖反应及IFN-γ的分泌,提高IL-4的分泌(P<0.001),有效降低EAE小鼠淋巴结细胞CCR5的表达;显著改善EAE小鼠神经功能评分(P<0.01),使发病时间延迟(P<0.01)。EAE小鼠发病数和死亡数较对照组减少,但差异并无统计学意义(P>0.05)。结论黄芩甙可有效治疗EAE,为黄芩甙用于临床多发性硬化的治疗提供了实验依据。     

实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型早期轴索损伤

目的 研究实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)动物模型发病早期的轴索损伤.方法 采用髓鞘蛋白脂蛋白(PLP139-151)多肽作为抗原诱发EAE小鼠模型.小鼠经免疫后每天进行神经功能评分及称体质量,于发病后剥离脑及脊髓组织进行病理学研究.结果 7只(23.3%)小鼠于免疫后15～22 d内发病,平均免疫后发病时间为(19.00±2.58)d,平均神经功能评分为(2.14±0.69)分.免疫前小鼠平均体质量[(21.85±0.94)g]与发病后体质量[(23.24±1.55)g]比较差异无统计学意义.HE染色可见发病小鼠软脊膜下脊髓组织炎性细胞浸润明显,以小血管周围为主的血管袖套形成.病变累及脊髓多见,且较大脑病变重.LFB染色可见炎细胞浸润处髓鞘有不同程度脱失,同时Bodian银染可见轴索肿胀、横断.免疫组织化学染色可见髓鞘碱性蛋白着色的相同区域淀粉样前体蛋白浓染,而星形胶质细胞GFAP染色增生不明显.结论 PLP多肽诱发SJL/J小鼠的EAE模型临床症状较轻,病变主要累及脊髓,而在大脑未发现与MS类似的典型病灶.在EAE发病早期,髓鞘还未明显脱失时即可见轴索损伤,且早期轴索损伤与临床症状并不平行.     

Y-39983在实验性自身免疫性脑脊髓炎中的作用研究

目的 探讨Rho-ROCK信号途径与实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的关系及Y-39983在EAE中的作用.方法 动物被分为对照组(健康Lewis鼠)、EAE模型组及干预组,每组各30只.EAE模型组及干预组建立EAE动物模型.干预组于Lewis鼠发病第1天起连续3d给予腹腔注射Y-39983(20 μg/d),模型组同样于Lewis鼠发病第1天起连续3d给予腹腔注射生理盐水(20 μg/d).比较各组平均临床评分、发病高峰期持续时间及复发率;采用电镜观察法、HE染色、搔洛花青髓鞘染色、APC免疫荧光染色法观察各组脑组织病理变化;采用蛋白免疫印迹法检测各组蛋白脂蛋白(PLP)、髓磷脂碱性蛋白(MBP)及3-环腺苷酸-3-磷酸二酯酶(CNPase)等髓鞘蛋白分子及肌球蛋白轻链磷酸酶(p-MLC)、脑衰反应调节蛋白(CRMP-2)及LIM激酶2(LIMK2)等Rho激酶(ROCK)底物蛋白含量的变化.结果 干预组平均临床评分(1.076±0.682)、发病高峰期持续时间[(3.7±1.35)d]、疾病复发率(37.5％)均低于EAE模型组[分别为4.229±1.017、(5.3±1.46)d、46.67％](P＜0.05).干预组中脑组织中炎性反应及髓鞘脱失现象均较EAE模型组改善;脑组织中ROCK底物蛋白p-MLC、CRMP-2及LIMK2含量干预组较EAE模型组降低,髓鞘相关蛋白PLP、MBP及CNPase含量干预组较EAE模型组升高(均P＜0.05).结论 Y-39983可改善EAE临床症状,其可能作用机制为抑制ROCK激活,减少破坏轴突生长的底物蛋白生成,促进髓鞘蛋白形成及轴突再生.     

多发性硬化病人的白介素-2分泌细胞和激活前T细胞

报导38例多发性硬化,20例无菌性脑膜炎和20例头痛病者周围血淋巴细胞对重组白介素-2(LI-2)的增殖反应,自发性及各种髓鞘成分(MBP,MAP,PLP,MOG)致敏的IL-2分泌细胞数检测。结果提示多发性硬化和无菌性脑膜炎的周围血淋巴细胞均有较多的已激活T-细胞,前者还有较多激活前T-细胞。文章对IL-2的意义进行了讨论,认为T-细胞功能异常在多发性硬化的发病,复发中有重要意义;IL-2分泌细胞检测有重要参考意义。     

实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的磁共振研究

目的研究动物模型实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小 鼠中枢神经系统的MR表现。方法使用PLP139-151免疫接种雌性SJL／J小鼠诱导EAE。分别取复发期和缓解期 的EAE小鼠行脑和脊髓常规MR及Gd—DTPA增强MR扫描,并做组织病理学检查。结果PLP139-151能较好的诱 导出慢性复发-缓解型EAE模型,Gd-DTPA增强MR检查能充分显示血脑屏障的破坏,反映脑和脊髓的病灶,而且 显示的病灶相对信号强度复发期明显高于缓解期,在病灶处均可见炎症细胞浸润,髓鞘脱失,病灶周围或远离病灶 处炎症反应轻微。结论Gd—DTPA增强MR检查能准确反映血脑屏障的破坏,病变累及部位及病变程度,为今后使 用药物干预EAE判断疗效、指导进行较准确的病变部位取材时提供了一种更为客观的手段。     

小胶质细胞在PLP_(139-151)诱导SJL小鼠EAE模型中的作用研究

目的观察髓鞘蛋白脂质蛋白139-151(proteolipid protein,PLP_(139-151))诱导SJL小鼠构建的复发缓解型的实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)模型复发期脑内小胶质细胞的病理改变。方法应用100μg、150μg PLP_(139-151)多肽片段免疫SJL小鼠构建复发缓解型EAE模型(分别简称为100μg PLP组、150μg PLP组),另设健康对照组(对照组;采用与实验组等体积溶媒处理),观察35 d。观察两组EAE小鼠的发病情况及神经功能残疾进展评分差异,选择发病快、神经功能残疾进展评分高者(计为EAE组)观察复发期小胶质细胞活化情况。EAE组于复发期疾病高峰时,对照组于相同时间点,取小鼠大脑皮层组织,应用免疫组织化学(immunohistochemical,IHC)染色及免疫荧光(immunofluorescence,IF)染色比较两组小胶质细胞的活化情况。结果 150μg PLP组小鼠在两个发病高峰(分别为免疫第13、28天)均早于100μg PLP组(分别为免疫第15天、31天),神经功能评分第2次发病高峰高于100μg PLP组(3.00±0.79 vs. 1.75±0.90,t=2.33,P0.05),第1次发病高峰与100μg PLP组差异无统计学意义(P0.05),故选择150μg PLP组(计作EAE组)观察复发期(免疫后第28天)小胶质细胞活性。与对照组相比,EAE组小鼠复发期大脑皮层中小胶质细胞的活化明显增多,组织染色上表现为Iba-1表达增高,细胞体积增大,细胞突起增多。结论 150μg PLP_(139-151)多肽片段免疫SJL小鼠构建的复发缓解型EAE模型复发期小鼠大脑皮层小胶质细胞明显活化。     

Pelizaeus—Merzbachers病:一种罕见原因的X—连锁隐性遗传的髓鞘形成障碍

Pelizaeus—Merzbachers病(PMS)是一种罕见的X—连锁陷性遗传病,是由于蛋白脂质蛋白(Proteolipid Protein,PLP)基因突变所致。它以婴儿期发病,存在眼球震颤及慢性进行性的锥体束征、肌张力障碍和小脑征候为特征。尽管PLP基因已克隆并且对全部基因序列已有较为精确的了解,已研究的家系中仅约25％在基因的7号外码子处显示可检测到的突变。这种情况可能是由于特异性突变机制如捻接部位(Splice site)突变引起的,且曾被证实。对于曾经研究过的家系来说,仅一个家系的PLP基因呈现全缺失,而大多数家系则有不同的突变,这也是     

日本血吸虫虫卵抗原对实验性脑脊髓炎的干预研究

目的利用日本血吸虫虫卵抗原(SEA)来干预实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型,试图探讨寄生虫感染与EAE的关系。方法利用血吸虫虫卵抗原干预EAE小鼠,观察行为学和病理改变。同时取不同抗原刺激的淋巴结细胞培养,ELISA法测定上清IL-4、IFN-γ的含量。结果用SEA不同时间段干预EAE,发现可以减轻EAE的发病程度,但在延缓和阻止发病方面作用不明显,并在行为学和病理学上得到证实。而用SEA和PLP178-191体外刺激联合免疫后小鼠的淋巴结细胞,发现SEA刺激后可以升高IL-4,降低IFN-γ,而PLP178-191刺激则相反。在单用PLP178-191免疫和联合免疫相比较中,发现PLP178-191体外再刺激后联合免疫组细胞分泌IFN-γ降低,IL-4升高。结论SEA可以减轻EAE的发病程度。细胞因子在寄生虫感染影响EAE的发病中起了重要的作用,调节Th1/Th2平衡,纠正体内Th1偏移是寄生虫抗原能够调节EAE发病的原因之一。     

孕酮在神经系统的作用及机制

孕酮可以在神经胶质细胞分泌合成,孕酮和其代谢产物具有降低神经元兴奋性,抑制炎症反应,减轻离子失衡,调节神经元和神经胶质细胞的基因表达,促进神经髓鞘形成等多种作用,直接和间接的发挥神经保护作用。