母乳人巨细胞病毒定量检测在婴儿巨细胞病毒肝炎中的应用

目的了解母乳人巨细胞病毒（HCMV）感染状况及HCMV通过母乳对婴儿的传播情况。方法应用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）方法分别检测156份母乳和与其配对确诊或疑诊HCMV肝炎患儿尿液中HC-MV-DNA含量。结果确诊或疑诊HCMV肝炎患儿母亲母乳HCMV-DNA阳性率为72.44%;尿HCMV-DNA阳性母乳喂养的婴儿HCMV-DNA阳性率为72.57%,明显高于HCMV-DNA阴性母乳喂养的婴儿（48.84%）（P〈0.01）。结论HCMV感染母乳是婴儿后天获得性HCMV感染的重要途径。     

荧光定量PCR法和巢式PCR法检测新生儿脐血人巨细胞病毒DNA的比较

目的 比较荧光定量PCR法和巢式PCR法在检测新生儿人巨细胞病毒(HCMV)先天性感染中的灵敏度,为HCMV先天性感染的快速特异性检测提供实验依据.方法 随机收集36例脐血标本,分离单核细胞,提取总DNA,进行巢式PCR和荧光定量PCR检测.结果 巢式PCR法检测HCMV糖蛋白(gB) DNA的阳性率为22.2%(7/...     

融冻与巴氏消毒法对母乳巨细胞病毒感染性的影响

目的 比较融冻与巴氏消毒法对母乳巨细胞病毒(HCMV)的灭活效果。方法 选取2021年3～6月期间在广东省妇幼保健院住院的20例早产儿母亲作为研究对象,收集其新鲜母乳。经过母乳初筛后,有4例母亲母乳HCMV-DNA阳性。4例母乳HCMV-DNA阳性母亲留取新鲜母乳后各分为3份,每份10 m L,然后各取1份新鲜母乳作为对照组,其余2份分别经融冻(融冻组)和巴氏水浴消毒(巴氏消毒组)。记录三组母乳HCMV-DNA载量情况、融冻组与巴氏消毒组母乳HCMV-DNA清除率、4例阳性母亲对应的三组早产儿(对照组、融冻组和巴氏消毒组)获得性HCMV感染情况。结果 三组母乳HCMV-DNA平均载量比较差异具有统计学意义(P<0.05),其中巴氏消毒组和融冻组HCMV-DNA平均载量分别为(3.21±0.57) m L、(3.74±0.68) m L,明显低于对照组的(4.12±0.79) m L,而巴氏消毒组的HCMV-DNA平均载量又明显低于融冻组,差异均有统计学意义(P<0.05);巴氏消毒组的HCMV-DNA清除率为100.0%,明显高于融冻组的25.0%,差异具有统计学意义(P&...     

新生儿黄疸与母乳中人巨细胞病毒定量关系的研究

目的 探讨新生儿黄疸的发生与喂养母乳中人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)的关系.方法 因高胆红素血症入院而找不到任何原因的新生儿100例,产生新生儿黄疸喂养的母乳为黄疸组,正常新生儿喂养的母乳为对照组,检测母乳中HCMV-DNA.结果 黄疸组母乳HCMV-DNA阳性率为45.0%,对照组母乳HCMV-DNA阳性率为13.0%(P<0.05),两组母乳HCMV-DNA的检测结果差异有统计学意义.结论 新生儿黄疸的发生与新生儿感染母乳中人巨细胞病毒有关系.     

母乳中人巨细胞病毒的检测及哺乳期妇女感染状况的研究

用人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）单克隆抗体，对２７９例哺乳期妇女的乳汁进行了检测。结果表明：长春市城区母乳中ＨＣＭＶ－ＩｇＧ抗体的阳性率为７７．１％，ＨＣＭＶ－ＩｇＭ抗体的阳性率为１４％，其中包括１３例ＨＣＭＶ－ＩｇＧ、ＨＣＭＶ－ＩｇＭ抗体均阳性，阳性率为４．７％。城区哺乳期妇女ＨＣＭＶ潜伏感染率为７４．９％，原发感染率为１１．５％，再发感染率为４．７％，后两者比较差异非常显著（χ２＝１３９．８，Ｐ＜０．００１）。提示，长春城区母乳ＨＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率比我国部分地区低，哺乳期的感染以原发感染为主。     

荧光定量PCR技术在白血病化疗后患者巨细胞病毒感染检测中的应用

目的探讨荧光定量PCR检测在白血病化疗后患者巨细胞病毒感染中的诊断价值。方法对50例白血病化疗后患者,取静脉血用FQ-PCR检测CMV-DNA,ELISA法检测CMV-IgM。结果50例标本中19例CMV-DNA阳性。阳性率为38%。阳性标本CMV-DNA在1.30×10^3～4.21×10^5拷贝/ml之间,平均6.43×10^4拷贝/ml。CMV-IgM阳性12例,阳性率为24%。2种方法阳性检出率差异有统计学意义（χ^2=8.01,P〈0.01）。结论在连续动态CMV检测多种指标时,结合DNA检测具有更高的临床应用价值,尤其是FQ-PCR方法可快速、灵敏、特异、定量地检测CMV,在CMV感染的诊断、治疗方案选择和疗效观察方面必将有广泛的应用前景。     

人巨细胞病毒的PCR检测

①目的 寻找早期快速检测人类巨细胞病毒（HCMV）感染的敏感方法。②方法 用HCMV即刻早期（IE）基因和晚期（LA）基因的7对待异性引物分别进行普通聚合酶链的反应（PCR），套式PCR（nPCR)和双重PCR，检测血清中的HCMV DNA，比较不同引物及不同PCR方法的灵敏度。③结果 同一基因的不同引物扩增HCMV DNA灵敏度差别无显著意义；LA基因的引物扩增灵敏度高于IE基因的引物；3种方法中以nPCR灵敏度最高，其次为双重PCR，普通PCR最低。④结论 用LA基因的特异性引物进行nPCR是早期快速检测HCMV感染的敏感方法。     

新生儿黄疸与母乳中人巨细胞病毒关系的研究

目的:探讨新生儿黄疸的发生与喂养母乳中人巨细胞病毒(human cytomegalovirus HCMV)的关系.方法:产生新生儿黄疸喂养的母乳为黄疸组,正常新生儿喂养的母乳为对照组,检测母乳中HCMV-DNA和HCMV-IgG,同时检测黄疸新生儿血液中HCMV-DNA.结果:黄疸组母乳HCMV-DNA阳性率为88.0%,HCMV-IgG阳性率为93.0%,血清HCMV-DNA阳性率为4.0%,对照组母乳HCMV-DNA阳性率为89.0%(P＞0.05),HCMV-IgG阳性率为98.0%(P＞0.05),两组母乳HCMV-DNA和HCMV-IgG的检测结果差异均无统计学意义.结论:新生儿黄疸的发生与母乳中人巨细胞病毒没有关系.     

定量PCR监测骨髓移植患者人巨细胞病毒感染

目的：用定量PCR方法监测骨髓移植患者中人巨细胞病毒（human cytomegalovirus HCMV)活动性感染。方法：用双标记探针水解的荧光定量PCR方法，检测4例骨髓移植患者移植前，后随访的血标本140份（其中血浆与外周血多形核细胞各50％）中HCMV，DNA拷贝数，并作动态分析，血浆标本中HCMV DNA的检出与HCMV IgG和IgM作平行比较。结果：4例患者除病例4外，均在术后30－50d间HCMV DNA拷贝数增加，同一时间外周血多形核细胞中HCMV DNA的拷贝数高于血浆，当给予适量更昔洛韦，则能抑制其继续升高，4例患者血清中HCMV IgM始终呈阴性，IgG始终呈阳性。结论：荧光定量PCR方法是用以监测髓移植患者中HCMV活动情况，指导临床适时用药的一种快速有效的方法。     

不育妇女巨细胞病毒感染的研究

目的 :探讨妇女不育与巨细胞病毒 (HCMV)感染的关系。方法 :应用酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法 ,对 98例育龄妇女的血清进行了巨细胞病毒抗体IgM、IgG的检测 ,其中 48例为不育妇女 ,另 5 0例为正常对照组。结果 :不育组HCMV_IgG的阳性率为 6 2 .5 % ,对照组为 70 .0 % ,两者差异不明显 (P >0 .0 5 ) ,但不育组HCMV_IgM阳性率为 48.5 % ,明显高于对照组的 4.0 % (P <0 .0 5 )。对不育组中习惯流产的患者进行清宫 ,组织送病检发现 :IgM阳性的患者其绒毛滋养层细胞明显增生 ,而合体细胞层无增生 ,蜕膜呈不同程度变性坏死 ,腺体高度分泌。结论 :巨细胞病毒感染可能与不育有关 ,对原因不明的不育妇女进行巨细胞病毒感染的检测有一定的临床意义。     

荧光定量PCR法检测乙肝病毒的临床意义

目的 探讨荧光定量PCR法检测乙肝病毒的临床意义。方法 荧光定量PCR法检测154例患者的乙肝病毒量,研究其与乙肝病毒抗体,谷丙转氨酶（ALT）及反映肝纤维化指标的透明质酸酶（HA）与层粘蛋白（LN）的关系。结果 免疫荧光定量PCR方法直接测定病毒量,明确反映病毒感染程度,其测定值与ALT呈一定程度正相关,与肝炎轻、中、重程度及肝纤维化程度成反比。结论 定量检测病毒可估计肝脏炎症程度并适时进行抗病毒及抗纤维化治疗。     

人类巨细胞病毒活动性感染与母婴垂直传播

目的：探讨孕妇人类巨细胞病毒（HCMV）活动性感染与母婴垂直传播的关系。方法：应用ELISA、PCR和RT－PCR方法分别检测117份、122份、25份妊娠妇女及其新生儿或流产物的HCMV－IgM抗体、mRNA及DNA。HCMV－IgM抗体或HCMV－mRNA阳性的孕妇为HCMV活动性感染组，HCMV－DNA阳性的孕妇为HCMV非性感染组。新生儿脐血，生后1周内子尿、唾液HCMV阳性，或流产物阳性者为HCMV宫内感染。结果：活动性感染孕妇组垂直传播率为80.00%，非活动性感染孕妇组垂直传播率为17.40%，两者有显著性差异（P＜0.01）。活动性感染孕妇垂直传播的相对危险度RR＝19.00。结论：HCMV活动性感染与母婴垂直传播密切相关，将HCMV－DNA检测与mRNA及血清IgM检测 合是对妊娠HCMV感染与垂直传播进行评价的有效方法。     

孕妇血清人巨细胞病毒脱氧核糖核酸与先天感染的关系

目的：探讨孕妇血清人巨细胞病毒脱氧核糖核酸（ＨＣＭＶ－ＤＮＡ）与先天感染的关系。方法：应用套式聚合酶链反应检测９６例孕妇血清及３２例孕妇分娩时的脐血清ＨＣＭＶ－ＤＮＡ。结果：９６例孕妇血清ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性检出率为１０．４％;７全犯罪 清ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性孕妇脐血清ＨＭＶ－ＤＮＡ检出率为５７％（４／７）,２５例阴性孕妇脐血甭ＨＣＭＶ－ＤＮＡ检出率为１２％（３／２５）,血清ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性孕     

黄芩素抗人巨细胞病毒的体外实验研究

目的体外研究黄芩素抗人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）的效果和安全性。方法细胞病变法和噻唑蓝（MTT）法检测各浓度黄芩素对人胚肺成纤维细胞（HEL）存活率及HCMV抑制率的影响,并与更昔洛韦进行比较。数据输入SigmaPlot软件,经Hill方程曲线拟合计算药物的半数毒性浓度（TC50）和半数有效浓度（EC50）。结果更昔洛韦和黄芩素的TC50分别为353.1＂g/ml和151.4＂g/ml,EC50分别为62.98＂g/ml和14.47＂g/ml,治疗指数分别为6和10。结论黄芩素具有体外抗HCMV作用,值得进一步研究。     

肺炎衣原体荧光PCR检测方法的建立和应用

目的采用Taqman探针技术,组建肺炎支原体荧光PCR基因检测方法。方法对GenBank登录的肺炎衣原体的基因序列进行生物信息学分析,针对保守区域设计引物和探针,组建实时荧光PCR检测方法。对来自本院的560份临床咽拭子样本和肺泡冲洗液样本进行检测。采用流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒和腺病毒进行特异性评价。结果本实时荧光PCR方法对甲型流感病毒(甲型、乙型)、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、呼吸道腺病毒无特异性反应。本院的临床样本检出26份,其中咽拭子9份,肺泡冲洗液17份。结论肺炎支原体荧光PCR检测方法可用于肺炎衣原体感染的辅助诊断。     

婴幼儿巨细胞病毒肝炎相关因素的调查分析

目的了解婴幼儿巨细胞病毒肝炎的相关因素。方法对215例巨细胞病毒肝炎患儿及其父母亲采用自行设计的调查表进行问卷调查。其内容包括:年龄(1~3个月4、~12个月)、性别(男、女)、居住地(城市、农村)及父母亲的文化程度(初中及以下、高中及以上)、有无母亲人巨细胞病毒感染情况等。采用荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测215例患儿及其母乳人巨细胞病毒-DNA水平。Logistic回归分析婴幼儿巨细胞病毒肝炎的相关因素。结果母乳人巨细胞病毒-DNA检测阳性161例(74.9%),其中患儿尿人巨细胞病毒-DNA检测阳性118例(73.3%);母乳人巨细胞病毒-DNA检测阴性54例(25.1%),其中患儿尿人巨细胞病毒-DNA检测阳性25例(46.3%),二者患儿尿人巨细胞病毒-DNA检测阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,患儿年龄及居住地、父母亲的文化程度、母亲人巨细胞病毒感染情况均为巨细胞病毒肝炎的相关因素。结论改善生活条件,提高父母素质,尽早做孕前巨细胞病毒感染诊断与治疗,是降低巨细胞病毒肝炎发生率的有效的防治措施。     

应用荧光PCR技术检测单细胞β地中海贫血基因

[目的]应用荧光PCR技术检测单细胞β地中海贫血(β地贫)基因,并与巢式PCR相比较,探讨荧光PCR应用于β地贫植入前诊断中的可行性.[方法]获取β地贫41-42突变杂合子单个淋巴细胞,用巢式PCR及荧光PCR技术检测β珠蛋白基因.[结果]160个淋巴细胞进行荧光PCR扩增,β地贫基因的平均扩增效率为92.5%,等位基因脱扣(ADO)率为8.8%;240个淋巴细胞进行巢式PCR扩增,β地贫基因的扩增效率为91.7%,ADO率为15.8%.两种方法的扩增效率没有统计学差异,但荧光PCR的ADO发生率显著低于巢式PCR的ADO发生率(P＜0.05).[结论]本研究建立的单细胞荧光PCR技术具有较高的扩增效率,可显著降低ADO发生率,可望用于β地贫的临床植入前诊断.     

半套式荧光定量聚合酶链反应检测肾移植前后人巨细胞病毒感染状态

目的：研究肾移植受者手术前后人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）的感染率及ＨＣＭＶＤＮＡ含量变化。方法：采用半套式荧光定量聚合酶链反应（ＡｍｐｌｉＳｅｎｓｏｒＰＣＲ）方法定量检测术前肾移植受者６１例，术后３２例，用四格表比较手术前、后的感染率，用ｔ检验比较病毒含量。结果：手术前、后肾移植受者ＨＣＭＶ的感染率分别为７７％和８７５％；ＨＣＭＶＤＮＡ平均含量（拷贝数每升）分别是１０７×１０７Ｌ－１和７４１×１０７Ｌ－１，两者之间感染率无显著差异（χ２＝１６５Ｐ＞００５），但病毒平均含量存在极显著差异（ｔ＝６４６Ｐ＜００１）。结论：研究结果显示：①免疫抑制治疗激活了潜伏性ＨＣＭＶ感染，导致术后ＨＣＭＶ含量显著增加；②决定肾移植受者ＨＣＭＶ感染状态的主要是机体本身的免疫力，减少ＨＣＭＶ感染，术后合理使用免疫抑制剂，避免过度抑制可能更重要