外周血造血干细胞采集效果及影响因素分析

目的观察外周血造血干细胞采集效果, 并探讨其影响因素。方法采用费森尤斯血细胞分离机、迈瑞血细胞分析仪及BD流式细胞仪, 对采集过程的参数、血常规指标及产品的单个核细胞(MNC)和CD34+计数进行检测。回顾性分析陆军军医大学西南医院2013年1月至2021年1月共72例行自体外周血造血干细胞移植患者的性别、年龄、血常规指标、采集循环量与采集物MNC和CD34+计数相关性以及各因素对外周血干细胞采集效果的影响。结果不同年龄、性别和疾病类型的患者外周血干细胞采集效果差异无统计学意义(P>0.05)。所有患者采集物的MNC与采集循环量(r = 0.33, P<0.001)、动员后白细胞计数(r = 0.41, P<0.001)呈正相关, CD34+计数与动员后MNC计数(r = 0.38, P<0.001)和收集白膜量(r = 0.48, P<0.001)呈正相关。多元回归分析结果显示, 动员后MNC计数[P<0.001, 95%CI 0.07(0.05 ～ 0.09)]、采集循环量[(P<0.001, 95%CI 0.00(0.00 ～ 0.00)...     

影响采集异基因供者外周血干细胞的因素探讨

目的　探讨采集异基因供者外周血干细胞相关因素对干细胞得率的影响。方法　采用COBE -spectra血细胞分离机采集异基因外周血干细胞供者 2 1例 ,分析供者每次采集前后外周血WBC、有核细胞数 (NC)、单个核细胞比例 (MNC)等参数对干细胞采集得率的影响。选用不同剂量的G -CSF动员供者所采出CD3 4 + 细胞数量进行比较。结果　 2 1例供者的外周血均值变化为WBC( 4 1± 7 7)× 10 9/L ,MNC( 12± 2 9) % ,此时采集到的有核细胞数为 ( 2 7± 0 8)× 10 8/L ,而且得率较高。通过相关多元统计分析2 1例供者后得出NC对采集的单个核细胞得率之间存在直线正相关关系 (r =0 87,P <0 0 0 0 1)。结论　应用COBE -spectra血细胞分离机采集异基因供者外周血干细胞得率高 ,供者痛苦小 ,红细胞混杂率少、移植后成活率高。该方法目前仍是一种较为安全、快捷采集外周血干细胞的方法。     

应用G-CSF对不同人群外周血CD+34细胞和T细胞亚群影响的动态变化

目的探讨重组人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对健康人及处于完全缓解的恶性血液病患者的外周血CD+34细胞和T细胞亚群的影响.方法对12例健康人和16例自体外周血干细胞移植患者,以G-CSF 150 μg/12 h,皮下注射,连用6 d.应用流式细胞仪测定外周血CD+34和T细胞亚群.结果 (1)应用G-CSF前,两者的外周血CD+34细胞分别为(0.39±0.27)%和(0.47±0.25)%,两者之间无明显差异(P>0.05).应用72 h后,CD+34细胞分别达(1.29±0.64)%和(1.47±0.95)%,较前均有明显增加(P<0.01),两者之间无明显差异(P>0.05).应用96 h后,CD+34细胞达高峰,分别为(1.41±0.73)%和(1.58±0.83)%,两者之间无明显差异(P>0.05),但较应用G-CSF前差异显著(P<0.01).(2)无论是否应用G-CSF,恶性血液病患者的T细胞亚群比例均处于倒置状态,而健康人T细胞亚群则比例正常.随两者应用G-CSF后CD+34细胞逐渐增加,T细胞亚群变化不明显.结论健康人及处于完全缓解的恶性血液病患者,在应用G-CSF后,外周血CD+34细胞比例逐渐增加并于96 h后达到高峰,T细胞亚群无明显变化.     

非清髓性CD34+细胞自身移植治疗难治性系统性红斑狼疮

目的观察非清髓性化疗结合CD34+细胞分选的自体外周血干细胞移植(APBSCT)在难治性系统性红斑狼疮(RSLE)的治疗效果及安全性.方法难治性系统性红斑狼疮患者2例,采用异环磷酰胺加重组人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员、百特CS-3000血细胞分离机采集外周血,获取单个核细胞,通过CD34+细胞分选仪分别得到了2.6×106/kg、2.1×106/kg CD34+细胞;预处理回输前6 d每日应用氟达拉滨50 mg/d(共5 d)+回输前3 d始每日应用抗胸腺细胞球蛋白(ATG)80 mg/(kg·d),共5 d.结果2例患者的临床症状完全缓解,异常免疫学指标基本恢复正常,抗体全部阴转,肾功能、尿常规恢复正常.结论非清髓性化疗结合CD34+细胞分选的APBSCT治疗难治性系统性红斑狼疮近期疗效满意.     

IL-3对脐血体外扩增及裸鼠体内重建造血的影响

[目的]通过观察脐血单个核细胞(cord blood mononuclear cells,MNC)体外扩增及裸鼠体内重建造血情况,探讨IL-3在细胞因子组合中促进脐血扩增的作用.[方法]对同一份脐血采用两种细胞因子组合(TPO+FL+IL-6、TPO+FL+IL-6+IL-3)体外短期扩增9 d,采用流武细胞技术检测MNC及CD34+细胞数量变化.将扩增后MNC经尾静脉注入亚致死量照射的BABL/c裸鼠体内,观察裸鼠外周血象恢复情况,并采用多聚酶链式反应(PCR)及免疫组化技术检测植入指标.[结果]含IL-3的细胞因子组合对脐血MNC及CD34+细胞的扩增效果(8.96±0.52倍)优于不含IL-3的细胞因子组合(6.28±0.16倍)(P＜0.01),扩增后的MNC在裸鼠体内可以重建造血并且形成植入,两组比较差异无显著性(P＞0.05).[结论]IL-3加入细胞因子组合可促进MNC体外增殖,且在裸鼠体内形成植入,重建造血.     

活血化瘀法对急性心肌梗死大鼠骨髓干细胞动员入血及定向归巢影响实验研究

目的 探讨活血化瘀法对急性心肌梗死(AMI)大鼠骨髓干细胞(CD34阳性细胞)动员入血及定向归巢于梗死心肌的影响。方法 实验用SD大鼠48只,急性心肌梗死模型造模成功32只,随机分为4组,分别为中药+G-CSF组、G-CSF组、模型组、假手术组,每组8只。各组均于造模3 h后给于对应药物,1次/d,连续6 d给药。7 d后,检测外周血CD34阳性细胞数,观察苏木素-伊红(HE)染色病理情况,免疫组化检测心肌CD34阳性细胞校正吸光度(IOD)值、及Ki-67阳性细胞数。采用SPSS 17.0软件进行统计处理,计量资料以(x±s)表示,多组间均数比较采用完全随机设计的单因素方差分析,两两比较采用LSD检验,P<0.05为差异有统计学意义。方差不齐时采用非参数检验,P<0.05为差异有统计学意义。相关性分析采用Spearman相关分析。结果 药物组较模型组CD34阳性细胞校正光密度明显增高,中药+G-CSF组G-CSF组CD34阳性细胞校正光密度明显增高,中药+G-CSF组比西药组Ki-67阳性细胞数的表达高(P<0.05)。结论 活血化瘀法能促进骨髓干细胞细胞动员入血,并定向归巢于梗死心肌,并能影响心肌组织细胞的新生,是一种良好的骨髓干细胞动员剂。     

恶性淋巴瘤患者采用MAG方案进行干细胞动员的疗效观察

目的　观察恶性淋巴瘤患者进行自体外周血造血干细胞移植(APBSCT)前采用MAG方案动员干细胞的疗效.方法对进行APBSCT的12例恶性淋巴瘤患者,移植前动员均采用MAG方案,具体为阿糖胞苷(Ara-C)2g/m2每12h　1次,第1、2天；米托蒽醌(MTZ)　10　mg/m2,第2、3天.白细胞(WBC)计数＜1.0×109/L时开始使用重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)　150μg/d,WBC　计数＜0.5×109/L时采用rhG-CSF　300μg/d,WBC计数开始回升时,每日检测血常规和观察外周血涂片,当外周血涂片中出现原始或幼稚细胞时给予rhG-CSF　300μg,每12h　1次,使用CS-3000血细胞分离机连续2d采集外周血干细胞并冻存备用.结果12例患者经MAG方案动员后,并发症主要为轻度感染.经两次采集,共采集到单个核细胞(MNC)(5.24±0.81)×108/kg,CD34+细胞(8.16±2.25)×　106/kg,均达到采集要求.结论恶性淋巴瘤患者采用MAG方案进行干细胞动员、采集,结果稳定可靠,安全性好.     

自体外周血造血干细胞采集技术的应用评价

目的评价自体外周血造血干细胞（APBSC）采集的影响因素。方法2007～2008年，浙江省血液中心74例自体PBSC供者，应用COBE Spectra与CS-3000PLUS血液成分分离机105次采集自体PBSC，评价产品得率与采集速度、采集前WBC／MNC之间的相关性。结果成品中CD34^＋平均得率与采集速度之间无相关（R=0．137，P〉0．05）；与采集前WBC（R=0．594，P〈0．05）和MNC（R=0．704，P〈0．05）之间呈正相关性。结论为避免枸橼酸盐输入过快引起的中毒反应、预防低钙血症、获得高浓度产品，建议最佳采集速度是40～50ml／min，最好将采集前白细胞浓度控制在40×10^9／L以下。     

大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及鉴定

[目的]建立分离纯化、培养、扩增骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cell,MSCs)鉴定的方法.[方法]采用密度梯度离心及贴壁培养相结合的方法分离、培养、扩增MSCs,并用流式细胞仪检测其表面标志CD34、CD44、CD105. [结果]培养48 h后即可见呈集落生长的细胞,72 h后可见少量贴壁MSCs细胞,7 d后贴壁细胞明显增多,梭形栅栏样分布,融合度达70%以上.第3代原代培养细胞表面标志CD44+、CD105+在95%左右,CD34的表达率甚低.[结论]联合应用密度梯度离心法及贴壁筛选法,可以获得纯度较高的骨髓MSCs     

心理护理干预对首次干细胞捐献者不良反应预防作用的效果分析

目的 探讨心理护理干预对首次干细胞捐献者不良反应的预防作用。方法 选择2015年1月至2020年12月于昆明医科大学第一附属医院捐献干细胞的供者104例作为研究对象,均为首次捐献,采用随机数字表法分为试验组（n=52）与对照组（n=52）,对照组供者接受常规护理,试验组供者在常规护理基础上予以心理护理干预,比较两组供者的心理状态及不良反应发生情况。结果试验组供者干预后的症状自评量表（symptom checklist-90,SCL-90）9个测评因子得分及总均分均显著低于对照组（P<0.05）;试验组供者干预后的心理适应量表4个测评因子得分显著高于对照组（P <0.05）;试验组供者的不良反应发生率显著低于对照组（P <0.05）;试验组供者的干细胞采集次数显著少于对照组,单个核细胞数目、CD34+细胞数目均显著多于对照组（P <0.05）。结论 心理护理干预可有效减轻首次捐献干细胞的供者心理障碍,改善供者的心理状况,提高供者的心理适应性,有效预防干细胞采集过程中的不良反应发生,提高干细胞采集质量,有利于保障干细胞的顺利移植。