组织工程化关节软骨细胞凋亡的研究

目的 观察离心管构建的组织工程骨细胞亡及细胞增殖情况。方法 对离心管构建3周的组织工程骨进行透射电镜，流式细胞仪检测和^3H-TdR掺入测定，与3周龄兔关节软骨对照。结果 透射电镜检查组织工程软骨在5％左右的细胞凋亡，正常关节软骨未见明显的细胞凋亡；流式细胞仪显示软骨细胞有8．5％左右的亚二倍体细胞，正常关节软骨在2．4％左右的亚二倍体细胞。^3H-TdR掺入测定显示细胞增殖能力较正常关节软骨明显增强。结论 培养3周的组织工程软骨细胞凋亡与细胞增殖均较正常软骨增强。     

兔脑出血灶周围脑组织细胞凋亡及bcl-2和bax的检测

目的 :探讨兔脑出血灶周围脑组织中bcl 2、bax蛋白表达和细胞凋亡的关系。方法 :家兔 40只 ,分为A、B、C、D 4组。B、C、D 3组采用兔自体血二次注射法制作脑出血模型 ,分别于模型制作完成后 12h ,2 4h ,72h断头处死 ,运用TUNEL法、免疫组化SP技术 ,检测出血灶周围脑组织中细胞凋亡及bcl 2、bax蛋白表达。结果 :出血灶周围脑组织中细胞凋亡、bcl 2和bax蛋白表达在各组间差异有显著性 (P <0 .0 5 )。bcl 2蛋白表达与凋亡阳性细胞数呈负相关 (r=- 0 .781,P <0 .0 5 ) ,bax蛋白表达与其呈正相关 (r=0 .72 3,P <0 .0 5 )。结论 :出血灶周围脑组织中存在细胞凋亡 ,细胞凋亡的变化在一定程度上反映了周围脑组织的损伤程度。bcl 2和bax蛋白对凋亡具有调控作用。     

离心管技术构建的组织工程软骨细胞生物学特性的研究

目的 观察离心管技术构建的组织工程化软骨的细胞生物学特点，探讨该技术构建组织工程化软骨的可行性。方法 取3周龄兔关节软骨的表层软骨，经酶消化获得大量的软骨细胞，用离心管技术构建软骨组织，对培养3周的组织工程软骨进行组织学，免疫组织化学，透射电镜，^3H-TdR掺入量等检查。结果 组织学显示软骨细胞位于陷窝，基质异染，Ⅱ型胶原免疫组化阳性，细胞内富含高尔基体，分泌囊泡和糖原颗粒，^3H-TdR掺入量显示软骨细胞DNA较正常软骨细胞明显增强。结论 离心管内软骨细胞的增殖较正常关节软骨增强，离心管技术可用于组织工程软骨的构建。     

基因bcl-2及bax在风湿性心脏病心肌组织中的表达及意义

目的 :研究凋亡基因bcl 2及bax在风湿性心脏患者心肌组织中的表达、定位及意义 .方法 :采用鼠抗人bcl 2mAb ,兔抗人bax多克隆抗体进行免疫组织化学SABC法 ,心肌胶原纤维染色及超声波检查评价患者心功能 .结果 :5 1例风湿性心脏病心肌组织中bcl 2 ,bax基因表达阳性率分别为 (6 8.6± 5 .3) %、(74 .5± 6 .5 ) % ,用于对照 10例正常心肌组织阳性率分别为 (10 .0± 1.2 ) %、(2 0 .0± 3.1) % ,两者差异显著 (P <0 .0 1) .风湿性心脏病心肌纤维化百分比平均为(2 4 .1± 2 .8) % ,与正常对照组心肌间质 (3.6± 0 .3) %比较差异显著 (P <0 .0 1) ,Bcl 2 ,Bax蛋白阳性程度和心肌纤维化程度 ,术后心功能改善程度比较有显著差异 (P <0 .0 1) .结论 :凋亡基因bcl 2 ,bax在风湿性心脏病心肌组织中过表达与心肌病变程度有关 ,随心肌病变程度加重 ,凋亡基因bcl 2表达减弱 ,而凋亡基因bax表达增强 .     

徐长卿丹皮酚对兔膝关节软骨细胞凋亡及相关基因的影响

目的观察徐长卿丹皮酚对兔膝关节软骨细胞凋亡及其调控基因P53、Bcl-2表达作用的影响。方法将40只大耳白兔随机分为正常组、模型组、生理盐水组、曲安奈德组、徐长卿丹皮酚组。采用内侧半月板前1/3切除制作骨关节炎模型,造模成功后,给药组关节腔注射相应药物,给药5周后取材。两步法免疫组化染色观察关节软骨形态变化,原位末端标记检测关节软骨细胞凋亡率,免疫荧光检测软骨组织P53、Bcl-2蛋白表达。结果模型组Mankin评分、软骨细胞凋亡率明显升高(P0.01)。而徐长卿丹皮酚组和曲安奈德组软骨组织Mankin评分、软骨细胞凋亡率相比模型组降低(P0.05),但仍高于正常组(P0.01)。模型组软骨组织中P53、Bcl-2表达率均升高(P0.05,P0.01)。徐长卿丹皮酚组和曲安奈德组软骨组织中Bcl-2表达升高,而P53表达率降低(P0.05),其中徐长卿丹皮酚组升高Bcl-2的效果更显著(P0.01)。结论徐长卿丹皮酚能在一定程度上抑制骨性关节炎软骨细胞的过度凋亡,其对损伤关节软骨的修复作用可能与调节P53和Bcl-2的表达有关。     

胃癌中医证型与p53、bcl-2、bax基因蛋白表达关系的研究

目的　探讨胃癌中医证型与p5 3、bcl 2、bax基因蛋白表达的相关性 ,提示病与证之间的内在联系以及证的物质基础。方法　选择进展期低分化胃癌 6 5例 ,辨证分为脾虚组与非脾虚组 ,对其主要症状进行半定量积分 ,并设正常对照组 2 0例。采用免疫组化S P法检测病理组织中p5 3、bcl 2、bax蛋白的表达。结果　脾虚组患者p5 3、bcl 2蛋白的阳性表达率及表达水平显著高于非脾虚组(P <0 0 5 ) ,bax蛋白阳性表达脾虚组低于非脾虚组 ,但组间比较差异无显著性 ;脾虚患者症状积分与p5 3、bcl 2蛋白表达水平呈正相关 (P <0 0 1) ,与bax蛋白表达水平无相关性 ;非脾虚患者症状积分与p5 3、bcl 2、bax蛋白表达水平均无相关性。结论　p5 3、bcl 2蛋白的差异表达与胃癌脾虚证的发病学机理有关 ;p5 3、bcl 2基因是脾虚证的物质基础之一。     

黄芪对缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的：探索黄芪对大鼠急性心肌炔血再灌注时心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响。方法：采用结扎大鼠左冠状动脉法制备心肌缺血再灌注(IR)模型，分别以地高辛随机引物法及免疫组化法检测心肌凋亡细胞、心肌细胞bax、bcl—2基因的蛋白表达情况。结果：缺血再灌注心肌细胞凋亡数量显著高于假手术组(P＜0．01)，黄芪治疗组心肌细胞凋亡(P＜0．05)明显受到抑制。IR组和黄芪组bax和bcl--2基因蛋白表达均明显增加(P均＜0．01)，黄芪明显抑制bax基因表达(P＜0．05)，但对bcl—2基因表达无明显影响。结论：急性心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡加剧，bax、bcl—2参与了缺血再灌注时心肌细胞凋亡凋控，黄芪可抑制凋亡加速基因bax的表达，因而在缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的保护方面有一定价值。     

卵巢癌化疗中bcl-2,bax与p53表达的意义

目的　研究卵巢癌细胞的相关凋亡调控基因bcl 2 ,bax ,p5 3的表达 ,及其与卵巢癌化疗和预后的关系。 方法　应用免疫组化法 (SP/SAP)检测 2 5例术前未经化疗及 2 0术前化疗的卵巢癌组织中bcl 2 ,bax ,p5 3的表达。 结果　 1、在免疫组化定性检测中 ,2 5例术前未经化疗组中卵巢癌细胞凋亡调节蛋白bcl 2 ,bax ,p5 3的表达阳性率分别为 6 8% (17/ 2 5 ) ,6 0 % (15 /2 5 ) ,6 0 % (15 / 2 5 ) ;2 0例术前化疗组分别为 2 5 % (5 / 2 0 ) ,70 % (14 / 2 0 ) ,2 5 % (5 / 2 0 )。其中bcl 2和 p5 3在前后比较均有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,而bax在化疗组虽有升高趋势 ,但未达到显著性水平 (P >0 .1)。 2、bcl 2和p5 3在卵巢癌化疗前后的共同表达符合率分别为 4 0 % ,10 % (P均 <0 .0 5 ) ;同时bcl 2与bax在化疗前后的非共同表达符合率呈升高趋势 ,即朝bcl 2 ( )降低 ,bax升高方向移动 ,(P <0 .0 1)。结论　凋亡调节蛋白bcl 2 ,bax ,p5 3三者可能参与了卵巢癌的发生发展 ,并可能调节了肿瘤细胞对抗肿瘤药物的敏感性和耐受性 ,在肿瘤的生物学行为和预后评估中有一定的参考意义。     

肺癌组织中bcl-2和Bax的表达及其与细胞凋亡和增殖的关系

目的 :探讨bcl 2基因和Bax基因在肺癌中表达及其与细胞凋亡和增殖的关系。方法 :对 38例肺癌组织及 2 1例肺部良性组织 ,应用原位杂交技术检测了bcl 2mRNA表达 ;用TUNEL技术对细胞凋亡进行了检测 ,用免疫组织化学法对Bax蛋白和PCNA进行检测。结果 :肺癌组织bcl 2基因、Bax蛋白及PCNA的表达明显高于肺部良性组织 ,P <0 .0 1;肺癌组织中凋亡指数和增殖指数均高于肺部良性组织 ,P <0 .0 1;肺癌组织中bcl 2阳性凋亡指数明显低于bcl 2阴性 ,P <0 .0 1;而Bax阳性凋亡指数明显高于Bax阴性 ,P <0 .0 1;它们之间的增殖指数均无差异。肺癌组织中bcl 2 (+) Bax(- )的凋亡指数明显低于bcl 2 (- ) Bax(+) ,P <0 .0 1;它们之间的增殖指数无差异。bcl 2(- ) Bax(- )肺癌组织中的凋亡指数明显高于肺部良性组织 ,P <0 .0 1。结论 :bcl 2、Bax蛋白在肺癌中的表达率较高 ,同时在肺癌中细胞凋亡和细胞增殖亦较活跃 ;bcl 2基因过度表达抑制细胞凋亡 ,Bax蛋白过度表达促进细胞凋亡 ,而它们表达与细胞增殖无明显关系。bcl 2基因、Bax蛋白、细胞凋亡和PCNA很可能在肺癌的发生、发展、诊断、预后和治疗方面起着重要的作用     

结肠癌及其癌前病变中bcl-2,bax蛋白的表达与细胞凋亡的关系

[目的 ]研究结肠癌及其癌前病变中bcl 2 ,bax蛋白的表达与细胞凋亡的关系 .[方法 ]用免疫组织化学S P法检测bcl 2及bax蛋白 ,TUNEL法检测细胞凋亡 .[结果 ]细胞凋亡指数在腺瘤中表达最高 ,与正常组织中的比较有非常显著性差异 ,而在腺癌中表达最低 ,与腺瘤中的比较有非常显著性差异 ;bcl 2蛋白在腺癌中的表达率最高 (34 / 40 ,85 % ) ,其次是腺瘤 (10 / 15 ,6 6 % ) ,两者与正常及息肉组织比较均有显著性差异 ;bcl 2阴性的腺瘤凋亡指数与bcl 2阳性的腺瘤凋亡指数比较有显著性差异 ;bax蛋白阳性的腺瘤及腺癌凋亡指数与bax阴性的腺瘤及腺癌比较均有显著性差异 .[结论 ]bcl 2蛋白的过表达在结肠癌发生发展过程中起重要作用 ;bcl 2蛋白对细胞凋亡起抑制作用 ,而bax蛋白对细胞凋亡起促进作用     

生长抑素与大肠癌细胞凋亡及调控基因bcl-2、bax及p53关系的研究

目的　探讨生长抑素 (SS)与大肠癌细胞凋亡指数 (AI)和凋亡调控基因p5 3、bcl 2、bax的关系。方法　采用免疫组织化学SABC法和分子生物学细胞原位凋亡检测技术中的TUNEL法 ,检测 6 2例大肠癌组织中SS、p5 3、bcl 2、bax及细胞凋亡的表达情况。结果　在大肠癌组织SS高表达组、中表达组的AI明显高于SS低表达组 (P <0 .0 1) ;p5 3、bcl 2、bax阳性表达率在SS低表达组、中表达组、高表达组三组间相比较存在着明显差别 (P <0 .0 5 ) ,其中bax在SS高表达组、中表达组的阳性表达率明显高于低表达组 (P <0 .0 5 ) ;bcl 2与其相反。p5 3在SS高表达组的阳性表达率明显低于低表达组 (P <0 .0 5 ) ;而p5 3在SS中表达组表达的阳性表达率低于低表达组 ,但其统计无明显差别 (P >0 .0 5 )。结论　生长抑素对大肠癌细胞凋亡的调控可能与 p5 3、bcl 2、bax基因的异常表达有关     

兔关节软骨细胞的体外培养及凋亡相关基因在传代细胞中的表达

目的验证体外Ⅱ型胶原酶消化法培养兔软骨细胞的可行性,探讨凋亡及抗凋亡基因在软骨细胞传代中的变化,寻找关节软骨退变老化研究的最适宜靶细胞。方法在无菌条件下取6周龄新西兰大白兔双侧膝关节软骨,采用Ⅱ型胶原酶消化并机械吹打的方法分离关节软骨细胞并进行原代、传代培养;形态学观察时采用甲苯胺蓝染色法对关节软骨细胞进行鉴定;RT-PCR法检测P0~P4代软骨细胞烟酰胺磷酸核糖转移酶（NAMPT）、信息沉默因子1（Sirt1）、p53、Bax基因的mRNA相对表达量,四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测各代关节软骨细胞增殖情况。结果显微镜下观察兔原代软骨细胞大多呈透亮椭圆形、短梭形、多角形特征,72h全部贴壁生长。甲苯胺蓝染色显示培养的软骨细胞细胞质染成浅蓝色,细胞核染成深蓝色;前3代软骨细胞表型稳定,增殖力良好;连续培养至P4代后,绝大部分细胞变为长梭形和不规则形状。随着软骨细胞的传代,NAMPT的表达量逐渐下调。与P0代软骨细胞相比,Sirt1的表达量在P1代细胞中明显上调,在P2代细胞急剧下降至P0代以下,在P3~P4代细胞中Sirt1的表达量逐渐下调。凋亡基因p53和Bax的表达量随着软骨细胞的传代而上调。前3代软骨细胞增殖差异无统计学意义（均P＞0.05）;在培养到第4~7天时,P1~P3代与P4代软骨细胞增殖差异有统计学意义（P＜0.05）。结论采用体外Ⅱ型胶原酶消化法培养兔关节软骨细胞是切实可行的。随着软骨细胞的传代,抗凋亡基因NAMPT、Sirt1的表达逐渐下调,凋亡基因p53、Bax的表达逐渐上调。P1~P3代关节软骨细胞作为研究关节软骨凋亡的细胞体系是合适的。     

缺血预处理对兔缺血再灌注心肌bcl-2,bax,p53基因表达的影响

目的 :探讨缺血预处理对兔在体心脏局部缺血再灌注过程中心肌细胞bcl 2 ,bax ,p5 3基因表达的影响。方法 :2 4只新西兰白兔随机分成 3组 (n =8) :假手术对照组 (P组 )、缺血再灌注对照组 (IR组 )、缺血预处理组(IP组 )。除P组外 ,其余两组均接受左冠脉前降支 3h阻断和 3h再灌注。IP组在 3h缺血前接受连续 3次每次缺血 5min ,再灌注 5min的预处理。取心肌缺血区边缘组织用流式细胞仪测凋亡指数 (AI)和bcl 2 ,bax ,p5 3基因的蛋白表达量。结果 :凋亡指数 ,IP组 ( 5 .85± 1.5 9) %较IR组 ( 13.83± 3.98) %显著减少 (P <0 .0 1)。bcl 2基因的蛋白表达量IP组高于IR组 ;bax ,p5 3基因的蛋白表达量IP组低于IR组。结论 :缺血预处理抑制缺血再灌注所致心肌细胞凋亡与上调bcl 2基因的蛋白表达 ,下调p5 3和bax基因的蛋白表达有关。     

自然流产病例的绒毛与蜕膜细胞增殖和细胞凋亡的研究

目的　从细胞增殖与细胞凋亡的角度探讨自然流产的发生机制。方法　对 30例正常早孕吸宫流产病例和 30例自然流产病例的绒毛与蜕膜组织进行研究。常规光镜观察细胞形态学变化 ;免疫组织化学S P法检测增殖细胞核抗原 (PCNA)在细胞中的表达 ;用DNA缺口原位未端标记技术 (TUNEL)检测细胞凋亡 ;免疫组化S P法检测bcl 2 bax基因蛋白表达率比值。结果　自然流产绒毛组织形态学结构均出现程度不同的退行性改变 ,绒毛的细胞滋养细胞及蜕膜中增殖指数 (PI)较正常早孕时明显减少 (P <0 0 1) ,而合体滋养细胞中从未发生过增殖 ,PI为 0 ;与此相反自然流产绒毛的细胞滋养细胞、合体滋养细胞及蜕膜中凋亡指数 (AI)较正常早孕时明显增多 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,同时 ,早孕流产的绒毛及蜕膜中促 /抑凋亡基因bcl 2 bax表达率的比值也较正常早孕时下降 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,结果与细胞凋亡的发生一致。结论　细胞增殖和凋亡可能在孕卵发育过程中起着重要作用 ,绒毛和蜕膜组织中大量的细胞凋亡是其形态学退变的根本 ,并进而阻碍了孕卵的发育。     

前列腺癌p53、bcl-2、bax基因表达与凋亡、增殖的关系

目的:研究前列腺癌组织中细胞增殖与细胞凋亡,及其相关蛋白表达意义。方法:采用原位细胞凋亡标记技术(TUNEL)及免疫组织化学ABC法对36例前列腺癌(Pca)和11例正常前列腺(NP)组织石蜡切片p53、bcl鄄2、bax、PCNA蛋白及细胞凋亡检测。结果:前列腺癌细胞的增殖指数和细胞凋亡指数较NP明显增高,且AI/PI比值较正常组织AI/PI低(P<0.01);随着肿瘤分级的增加,细胞增殖水平明显增加(P<0.01)。p53蛋白表达与前列腺癌细胞增殖水平相关;bcl鄄2蛋白表达与细胞凋亡水平相关(P<0.05);bax基因表达与凋亡无关,但发现它们的bcl鄄2/bax的比值与凋亡有关。表明高bcl鄄2/bax比值多见于低凋亡组,低bcl鄄2/bax比值多见于高凋亡组。结论:细胞增殖与细胞凋亡均参与了前列腺癌的发生、发展。p53基因与细胞增殖水平的调控有关。bcl鄄2和bax在细胞凋亡调节中起到重要作用,由于bcl鄄2蛋白过量表达引起bcl鄄2/bax失平衡,在前列腺癌发生、发展过程中起到重要作用。     

人参皂苷Rgl对兔膝骨性关节炎关节软骨细胞凋亡的影响

目的:观察人参皂苷Rgl对兔膝骨性关节炎关节软骨细胞凋亡的影响,并分析作用机制。方法:50只健康普通级新西兰雄性大白兔,分成正常组,模型组,人参皂苷Rg1低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组10只。除正常组外,其余4组兔采用左后肢管型石膏伸直位固定法制备兔膝骨性关节炎模型。从造模第2天开始进行药物干预。人参皂苷Rg1低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予人参皂苷Rg1 5 mg·kg~(-1)、10 mg·kg~(-1)、20 mg·kg~(-1)灌胃给药,正常组及模型组予以等剂量生理盐水(5 m L·kg~(-1))灌胃,每周3次,共6周。干预结束后在麻醉下用空气栓塞法处死所有实验兔,取负重面关节软骨,采用RT-PCR技术检测细胞凋亡关键调控因子Caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA表达情况; Western-blot技术检测Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达情况;原位末端标记(Tunel)法观察软骨细胞凋亡率。结果:模型组Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白表达明显高于正常组(P 0. 01);人参皂苷Rg1低剂量组、中剂量组、高剂量组显著低于模型组(P 0. 05或P 0. 01)。模型组Bcl-2 mRNA及蛋白表达明显低于正常组(P 0. 01);人参皂苷Rg1低剂量组、中剂量组、高剂量组显著低于模型组(P 0. 05或P 0. 01)。Tunel法检测显示,人参皂苷Rg1低剂量组、中剂量组、高剂量组凋亡率显著低于模型组(P 0. 01);人参皂苷Rg1中剂量组、高剂量组凋亡率低于低剂量组(P 0. 05或P 0. 01)。结论:伸直位管型石膏固定法造模6周,可成功建立类似临床所见的人类骨关节炎模型。一定剂量人参皂苷Rg1对软骨组织有着积极的保护作用,可通过调控软骨细胞凋亡关键因子Bax/Bcl-2表达比例、下调Caspase-3的表达有效抑制软骨细胞过度凋亡,避免软骨组织进行性破坏。     

褪黑素对大鼠心肌缺血/再灌注后细胞凋亡的影响

目的　研究褪黑素 (MT)对大鼠心肌缺血 /再灌注后细胞凋亡及其相关基因bcl 2、bax蛋白表达的影响 ,以探讨其抗心肌缺血 /再灌注损伤的机制。方法　采用左冠状动脉前降支穿线结扎法制备心肌缺血 /再灌注模型 ,分别以缺口末端标记法 (TUNEL法 )及免疫组化法检测心肌细胞凋亡指数 (AI)及bcl 2、bax的蛋白表达的变化。结果　模型组心肌细胞凋亡指数 (AI)、bcl 2及bax蛋白阳性表达指数 (PEI)与假手术组比较均明显增加 ;MT干预后AI与bax蛋白阳性表达指数均下降 (2 1 96± 7 6 8下降至 12 17± 6 4 5 ,18 5 9± 5 6 8下降至 9 71± 2 82 ) ,而bcl 2蛋白阳性表达指数增高 (7 33± 2 0 5增高至 13 4 5± 2 76 )。结论　褪黑素可抑制缺血 /再灌注后心肌细胞凋亡、下调bax基因的蛋白表达与上调bcl 2基因的蛋白表达 ,从而抵抗缺血 /再灌注心肌损伤。     

浅蓝菌素对人结肠癌裸鼠移植瘤bcl-2及bax基因表达水平的影响

目的 :通过观察人结肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤bcl 2及bax基因表达水平 ,探讨脂肪酸合酶抑制剂浅蓝菌素选择性的抑瘤途径和机制。方法 :建立人结肠癌裸鼠移植瘤模型 ,浅蓝菌素每公斤体重 160mg腹腔注射 ,1次·d-1,连续10d ,第 17天处死并解剖动物 ,瘤组织作免疫组织化学检测bcl 2及bax基因表达水平。结果 :浅蓝菌素处理组结肠癌LoVo细胞移植瘤bcl 2基因蛋白表达率为 68.5 % ;对照组bcl 2蛋白阳性表达率为 87.8% ,阳性细胞弥漫分布。两组间有显著性差异 (P <0 .0 1)。bax基因蛋白在浅蓝菌素组移植瘤组织阳性表达率为 75 .4% ,主要呈强阳性表达 ;对照组阳性表达率为 9.5 %。两组间比较有统计学差异 (P <0 .0 1)。结论 :浅蓝菌素可使结肠癌LoVo细胞移植瘤的bcl 2基因表达下调 ,bax基因表达增强 ,提示bcl 2及bax基因在浅蓝菌素诱导的人结肠癌LoVo细胞凋亡中可能起着重要的调控作用。     

鼻咽癌中p53、bcl-2、bax、Fas的表达及其相互关系的研究

目的　了解凋亡相关基因p53、bcl2、bax、Fas在鼻咽癌(NPC)中的表达及相互关系。方法　在67例NPC、15例癌旁组织中用免疫组化技术标记bcl2、p53、bax、Fas;用免疫双标记技术同时标记p53与bcl2;从中选取15例NPC用DNA原位杂交技术检测bcl2基因扩增情况。结果　①67例NPC中p53蛋白阳性38例(567%),bcl2蛋白阳性48例(716%),bax蛋白阳性28例(418%),Fas蛋白阳性29例(433%);②NPC中,p53蛋白与bcl2蛋白的阳性率显著高于癌旁组织,而bax蛋白与Fas蛋白的阳性率却显著低于癌旁组织;③p53蛋白与bcl2蛋白阳性表达间呈正相关。④bcl2/bcl2同二聚体在NPC中占优势;p53蛋白表达在bcl2/bcl2同二聚体占优势的肿瘤中显著高于在bax/bax同二聚体占优势的肿瘤中。结论　①p53、bcl2、bax、Fas在NPC中有较高的阳性表达率,与NPC的发生、发展关系密切;②NPC中p53与bcl2蛋白表达呈正相关,提示NPC中p53蛋白主要不是突变型,有异于其它肿瘤。③抑制细胞凋亡的bcl2/bcl2同二聚体在NPC中占优势,尤其是在泡状核细胞癌中,提示其与NPC的发生及分化有关。     

外膝眼透刺内膝眼温针灸对膝骨性关节炎兔软骨组织Bax、Bcl-2表达的影响*

目的观察外膝眼透刺内膝眼温针灸对膝骨性关节炎兔软骨组织Bax mRNA、Bcl-2 mRNA及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。方法按随机数字表法将18只新西兰兔随机分为正常对照组（正常组）、膝骨性关节炎组（模型组）和温针内、外膝眼穴组（温针组）。4%木瓜蛋白酶关节腔注射法制作膝骨性关节炎模型。温针组在造模后行内外膝眼穴温针灸治疗20 min，隔天1次，每2 周为1个疗程，中间休息2 d，共治疗4个疗程。模型组和正常组不予任何治疗。RT-qPCR法和Western Blotting法检测软骨组织Bax mRNA、Bcl-2 mRNA和Bax、Bcl-2蛋白表达。结果①温针灸干预后，新西兰兔的精神、食欲、膝关节活动能力等均明显改善。②模型组与正常组比较，膝关节软骨组织Bax mRNA和蛋白表达均显著升高（P<0.001，P<0.01），Bcl-2 mRNA和蛋白表达均明显降低（P<0.001，P<0.001）；温针组与模型组比较，温针组Bax mRNA表达显著降低（P<0.05），Bcl-2 mRNA和蛋白表达均明显升高（P<0.05，P<0.05）。结论温针内、外膝眼穴能下调软骨细胞促凋亡基因Bax 、上调抗凋亡基因Bcl-2 的表达，抑制软骨细胞凋亡通路的信号转导。