输精管平滑肌中肌醇磷脂代谢与去甲肾上腺素作用间关系的研究

在大白鼠输精管中，去甲肾上腺素可促进肌醇磷脂代谢，而双丁酰ｃＡＭＰ和８－溴ｃＧＭＰ则对去甲肾上腺素所促进的肌醇磷脂代谢，有明显的抑制作用。这提示，很可能在输精管平滑肌中，由去甲肾上腺素所促进的肌张力，能被ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ所抑制。本文还观察到Ａ２３１８７亦能促进肌醇磷脂代谢，而酚苄明（一种肾上腺素能α受体阻断荆）和ＥＧＴＡ则对肌醇磷脂代谢起抑制作用。     

大白鼠输精管平滑肌中C-激酶的活化与去甲肾上腺素作用机制的研究Ⅰ

大白鼠输精管平滑肌中,富含一种蛋白质磷酸化酶(简称C-K)。该酶活化需要Ca~(++)、磷脂及甘油二脂存在。当去甲肾上腺素α_1作用到输精管平滑肌时,便引起肌醇磷脂代谢加速,此时产生的甘油二脂能使C-K活化。活化的C-K可使分子量40 000的蛋白质磷酸化。40000蛋白质的磷酸化过程,可被氯丙嗪、地卡因等C-K的抑制剂所抑制。     

大白鼠输精管平滑肌中C-激酶的活化与去甲肾上腺素作用机制的研究Ⅱ

在大白鼠输精管中,去甲肾上腺素不仅促使Ca~(++)、磷脂依存性蛋白激酶(C-K)活化,还可促进Ca~(++)的动员。去甲肾上腺素在促进肌醇磷脂代谢的同时,还能促使40K蛋白质磷酸化。40K蛋白质是C-K的底物。磷脂酶C、TPA及钙离子载体A_(23187)也都能促进40K蛋白质的磷酸化反应,说明去甲肾上腺素是借助于肌醇磷脂代谢及蛋白质的磷酸化来发挥它的生理作用。     

大白鼠输精管神经肽样神经元的分布

本文用免疫细胞化学PAP法,观察了大白鼠输精管神经肽(NPY)样免疫反应神经元。NPY样免疫反应神经元位于大白鼠输精管粘膜固有层内。免疫反应细胞体多为椭圆形,少数圆形。免疫反应产物呈颗粒状分布于细胞质中。讨论了NPY与去甲肾上腺素共存于大白鼠输精管组织中的去甲肾上腺素能神经元中及其相互生理作用。     

白叶藤素对大鼠离体输精管α-受体的阻断作用

白叶藤素是萝藦科自叶藤属植物Cryp-tolepis sanguinolenta(Lindl.schlecter)根中分离得到的3种生物碱之一。为了研究白叶藤素对血管及血管外平滑肌的作用,本文探讨了该生物碱的α-肾上腺素受体拮抗作用和在离体大鼠输精管中此种拮抗作用的可能机理。去甲肾上腺素(3.0×10~(-7)～10~(-6)M)对离体大鼠输精管的作用存在着浓度-效应之     

关于单离大白鼠输精管平滑肌细胞收缩机制的研究

在去甲肾上腺素的作用下,单离的大白鼠输精管平滑肌细胞可以发生收缩,细胞收缩的长度与时间成正比例。本研究还发现,在肌细胞收缩的同时,C-K使胞内的40K蛋白质磷酸化,肌细胞的收缩可能是通过蛋白质磷酸化而实现的。     

蛋白激酶C及其抑制剂在输精管平滑肌舒缩中的作用

对输精管平滑肌中分离的蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂的生理作用进行了研究。应用放射自显影方法证明，此抑制剂对输精管平滑肌中ＰＫＣ底物－４０ＫＤ蛋白的磷酸化有明显抑制作用；并用免疫印迹电泳法确定了输精管中ＰＫＣ亚型为ε亚型。以上结果表明，输精管平滑肌中ＰＫＣ抑制剂通过与ＰＫＣ－ε的相互作用，参与对平滑肌舒张与收缩的调控，还可能参与细胞分泌等细胞运动功能。     

棉酚对大鼠输精管收缩及精囊液中游离氨基酸含量的影响

大白鼠离体输精管试验表明,当浴管中有10~(-8)～3×10~(-7)mol/L的酚妥拉明时,去甲肾上腺素的量-效曲线平行右移,pA_2=6.98。加3×10~(-5)mol/L及10(-4)mol/L的棉酚预先处理后,量-效曲线右移,最大效应压低,pD_2=3.7。将棉酚每日以35mg/kg的剂量分别给予大鼠口服11天及24天。前者的离体输精管,去甲肾上腺素的量-效曲线与对照组接近;后者,曲线的最大效应压低。上述两组大鼠精囊液中游离氨基酸含量与对照组比较均无显著性差异。     

平滑肌细胞双信使系统与钙火花相关性研究

在平滑肌细胞的肌醇脂质代谢中产生的肌醇三磷酸(IP3)和二酰甘油(DAG)是胞内重要的第二信使,由它们激动的IP3/Ca2+和DAG/蛋白激酶C(PKC)途径,即是调控胞内许多生理过程的重要信号途径。因此又把这一以肌醇磷脂代谢为基础的细胞信号系统称为“双信使系统”。大量研究表明,双信使系统与平滑肌细胞胞内Ca2+浓度的调节、胞内局部Ca2+释放事件、钙火花的产生和调控紧密相关。本文就此方面的研究进展进行综述。     

抗抑郁药物治疗抑郁症的研究概况

抑郁症是一种常见病、高发病,与遗传、生理、社会环境相关。本文结合文献资料,主要介绍临床常用治疗抑郁状态的抗抑郁药物,包括单胺氧化酶抑制剂(MAOI)、三环类抗抑郁药物(TCAs)、四环类抗抑郁药、五羟色胺再摄取抑制剂(SSRIs)、五羟色胺与去甲肾上腺素再摄取抑制剂(SNRIs)、去甲肾上腺素和特异性五羟色胺再摄取抑制剂(NASSAs)、5羟色胺平衡抗抑郁药物(SARIs)、去甲肾上腺素和相对较弱的DA再摄取抑制剂(NDRIs)、去甲肾上腺素再摄取抑制剂(NRI)、5羟色胺再摄取激动剂(SSRA)及其他抗抑郁药物,为临床提供参考。     

内毒素血症大鼠心肌和主动脉平滑肌蛋白激酶C活力的变化

大鼠注射内毒素后4及8h,心肌细胞细胞浆蛋白激酶C活力明显降低,其细胞膜蛋白激酶C活力显著增加;注射内毒素后0.5及4h,主动脉平滑肌细胞细胞浆蛋白激酶C活力明显低于对照组,而细胞膜蛋白激酶C活力显著增高。提示内毒素休克早期主动脉平滑肌细胞蛋白激酶C被激活,后期心肌细胞蛋白激酶C被激活。     

4种不同类型白血病细胞中磷脂的分析

通过对正常白细胞及４种不同类型白血病细胞中磷脂的分析表明，４种不同类型白血病细胞中磷脂含量均高于正常白细胞。其中，以磷脂酰肌醇和磷脂酰胆碱的增高尤为明显，很可能在白血病细胞中、这两种磷脂的增高参与了与蛋白激酶Ｃ相关的细胞癌变的某种反应。     

牛精子中蛋白激酶C抑制剂的纯化

在牛精子中发现了蛋白激酶C抑制剂。并用Sephadex G-200及等电聚焦柱将其纯化,这一蛋白激酶C的蛋白抑制剂的分子量约为63000,等电点为pH4.5左右。     

哺乳动物雷帕霉素受体选择性抑制剂用于非小细胞肺癌靶向治疗

哺乳动物雷帕霉素受体(mTOR)是一种调控翻译启动的重要分子,以雷帕霉素对mTOR进行抑制,会诱发其上游磷脂酰肌醇3激酶/丝苏氨酸蛋白激酶Akt、丝裂原激活蛋白激酶或胞外信号调节激酶激酶/胞外信号调节激酶等细胞存活信号传导路径的反馈激活而导致肿瘤细胞对雷帕霉素耐药.但同时肿瘤细胞有可能对这些生存信号传导路径更加依赖,即更加"成瘾".若将雷帕霉素与针对这些路径的靶向药物联用,可能进一步提高抗肿瘤的疗效.本文以非小细胞肺癌为侧重对象,介绍了mTOR抑制剂靶向治疗的临床进展.     

缺氧促使鼠气道平滑肌细胞丝裂原活化蛋白酶表达

目的 探讨缺氧情况下鼠气道平滑肌细胞丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase,MApK）的变化.方法 雄性Wistar大鼠采用缺氧方法,用随机数字表法随机分为正常对照组、缺氧4周组,每组6只.按实验要求完成缺氧时间,12 h内留取肺叶组织,行免疫组织化学.结果 免疫组织化学染色显示,对照组大鼠肺小动脉内膜有散在免疫阳性染色,低氧组大鼠肺气道内膜则可见明显的免疫阳性染色.经灰度扫描,低氧组大鼠肺气道壁MAPK免疫染色阳性强度较对照组明显增强（P＜0.01）.结论 MAPK在缺氧性肺病引起的气道平滑肌细胞增生中可能起着重要作用.     

全反式维甲酸对培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞增生及P21表达的影响

目的　探讨全反式维甲酸 (ATRA)对培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞增生及P2 1蛋白表达水平的影响。方法　血管平滑肌细胞 (VSMC)采用组织贴块法培养。ATRA(2 .5×10 -6mol·L-1)作用于经 2 0 %胎牛血清刺激后的血管平滑肌细胞 ,2 4h后分别行 3H TdR掺入实验测定和P2 1蛋白印迹检测P2 1蛋白表达。结果　ATRA明显抑制血管平滑肌细胞DNA合成和促进P2 1蛋白表达。结论　ATRA促进P2 1蛋白表达是抑制VSMC增生的原因之一     

TIMP-3-pcDNA3.0转染平滑肌细胞及其在大鼠心肌梗死瘢痕中的存活与表达

目的 探讨基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)基因转染平滑肌细胞的效果及移植的转染细胞能否在大鼠心梗瘢痕中存活并表达目的 蛋白.方法 植块法培养大鼠主动脉中层平滑肌细胞并鉴定;脂质体介导法以"TIMP-3基因质粒转染平滑肌细胞;RT-PCR和Western blot检测转染细胞的基因水平和蛋白表达;通过BrdU移植检测移植细胞的存活与增殖情况.实验大鼠随机分成单纯PBS注射、单纯平滑肌细胞移植和转染平滑肌细胞移植3组(每组7只实验大鼠),将移植物注射人(五点法)心梗大鼠的室壁内.1周后,提取其左心室组织mRNA和蛋白,分别进行RT-PCR和Western blot检测,鉴定其.TIMP-3基闪含量和表达情况.结论 植块法培养可以获得高纯度的平滑肌细胞;脂质体介导法可以使TIMP-3基因转染平滑肌细胞并获得TIMP-3蛋白的表达;移植的转染细胞能够在心梗缀痕中存活并增殖;转染细胞组大鼠左心室组织中TIMP-3 mRNA含量明显多于单纯平滑肌细胞移植组(P<0.01)及单纯PBS注射组(P<0.01);转染细胞移植组大鼠左心室组织中TIMP-3蛋白含量明显多于平滑肌细胞移植组(P<0.01)及单纯PBS注射组(P<0.01).结论TIMP-3基因可以通过脂质体介导法转染平滑肌细胞,且转染细胞可以在大鼠梗死心肌中存活、增殖并表达TIMP-3蛋白.     

蛋白激酶C在非心脏器官预处理中的作用

目的探讨蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）在心脏以外组织器官缺血或缺氧预处理（ＰＣ）保护中的作用及其机理。方法分别在原位灌流的大鼠小肠、肢体缺血再灌注模型和培养的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）缺氧复氧模型上观察ＰＫＣ对于器官缺血或细胞缺氧ＰＣ作用的影响。结果ＰＫＣ抑制剂Ｈ７和多粘菌素Ｂ完全消除缺血ＰＣ对小肠和肢体的保护作用;缺氧ＰＣ激活ＶＳＭＣ内ＰＫＣ,并使ＰＫＣ介导的蛋白磷酸化反应加强。结论ＰＫＣ激活是心脏以外组织器官ＰＣ保护的重要环节,其机制可能与底物蛋白的磷酸化有关。     

蛋白激酶C信号通道对牛肺动脉平滑肌细胞增生的调控作用

探讨蛋白激酶C（PKC）信号通道对体外培养的正常成年牛肺动脉平滑肌细胞（PA SMC）增生的调控作用。结果:PKC活化剂PMA（phorbol 12-myristate 13-acetate）可明显刺激PA SMC增生,PMA为10nmol/L时,3~H胸腺嘧啶掺入率由对照组的（44.9±10.6）min~（-1） /孔增加到（5904.7±607.6）min~（-1）/孔,p<0.01;预先应用PKC抑制剂可阻断PMA的刺激作用,3~H胸腺嘧啶掺入率由（5 117.1±756.2）min~(-1)/孔减少至（90.2±5.3）min~(-1)/孔;3种不同的PKC抑制方法均可部分阻断100ml/L小牛血清对PA SMC增生的刺激作用（均为 P<0.01）;在 PA SMC的全细胞溶解产物中可直接测到PKC酶活性,而经钝化处理后该酶活性消失（P<0.01 ）,与钝化处理可部分阻断血清的PA SMC增生刺激作用相吻合。提示PKC信号通道是PA SMC增生的调控机制之一。     

纳米二氧化硅通过PI3K/AKt信号通路影响肺泡巨噬细胞凋亡的研究

  目的  探讨磷脂酰肌醇激酶-3/蛋白激酶B（phosphatidyl inositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKt）信号通路对纳米二氧化硅（nano silica,NS）粉尘诱导肺泡巨噬细胞（alveolar macrophages,AM）凋亡发生的影响。  方法  通过不同质量浓度的NS粉尘染毒AM细胞后,CCK-8法检测细胞存活率;荧光显微镜观察细胞形态;流式细胞术检测PI3K抑制剂LY294002预处理前后细胞的凋亡率与线粒体膜电位;Western blot法检测PI3K抑制剂LY294002预处理前后细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2以及磷酸化（p）-PI3K、p-AKt的表达水平。  结果  NS可降低AM细胞的存活率,部分细胞出现凋亡形态学改变;LY294002预处理AM后,线粒体膜电位水平的下降程度增加,并下调Bcl-2、p-PI3K、p-AKt蛋白的表达,同时上调Bax蛋白的表达,增加细胞凋亡率。  结论  PI3K/AKt信号通路可能参与了NS诱导AM细胞的凋亡过程。