三氧化二砷联用华蟾素对K562细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究三氧化二砷联用华蟾素对K562细胞增殖和凋亡的影响,为三氧化二砷和华蟾素联合应用于临床提供理论依据.方法 细胞增殖采用细胞生长及活力测定;细胞凋亡采用细胞形态、Annexin-V/PI双染实验、DNA的PI染色及DNA电泳等方法 测定.结果 在三氧化二砷和华蟾素作用下K562细胞生长受抑伴随活力下降,1.0 μmol/L As2O3、0.125μg/rnl华蟾素、0.25 μg/ml华蟾素、1.0 μmol/L As2O3＋0.125μg/ml华蟾素、1.0 μmol/L As2O3＋0.25μg/ml华蟾素作用K562细胞24 h和48 h后,增殖抑制率分别为（24±1.3）%、（21±1.5）%、（38±3.1）%、（57±2.7）%、（66±3.3）%及（49±2.9）%、（48±2.7）%、（61±2.1）%、（77±3.8）%、（82±4.2）%,细胞凋亡率分别为（4.8±0.5）%、（5.6±0.7）%、（9.8±0.6）%、（11.9±1.2）%、（15.2±1.5）%及（11.0±0.9）%、（12.9±1.1）%、（18.4±1.5）%、（21.0±2.0）%、（28.0±1.9）%,凋亡细胞百分率呈时间剂量依赖关系;基因组DNA电泳出现＂梯＂状条带.结论 三氧化二砷和华蟾素均有抑制K562细胞增殖和诱导该细胞凋亡的作用,两药联用效果更佳.     

Caveolin-1过表达抑制宫颈鳞癌Hela细胞的体外生长研究

目的 探讨转染caveolin-1基因对宫颈鳞状细胞癌Hela细胞株体外生长的影响.方法 用脂质体法把caveolin-1真核表达质粒导入Hela细胞内,筛选出稳定高表达caveolin-1的细胞克隆,并用RT-PCR、细胞免疫荧光和免疫印迹法鉴定.MMT法检测细胞的生长能力,流式细胞仪检测细胞周期分布和凋亡情况,免疫印迹法检测细胞外信号调节激酶（extracellular regulated protein kinases,Erk）1/2的磷酸化水平.结果 转染caveolin-1基因后,成功筛选得到稳定高表达caveolin-1的Hela细胞克隆,与未转染对照组相比,转染后的Hela细胞生长速度明显减慢（P〈0.05）,更多的细胞阻滞在G0/G1期[（68.04±2.57）%vs（53.41±1.01）%],凋亡细胞比例增高[（19.18±2.20）%vs（5.63±0.55）%,P〈0.05],Erk1/2相对磷酸化水平明显下降（0.28±0.05 vs 0.81±0.07,P〈0.05）.结论 caveolin-1基因能够抑制宫颈鳞癌Hela细胞株的生长、促进细胞凋亡;Erk1/2磷酸化水平下降可能在其抑癌机制中发挥重要作用.     

奈达铂对宫颈癌Hela及Siha细胞的作用

目的:比较奈达铂(NDP)体外对人宫颈腺癌细胞Hela细胞及鳞癌细胞Siha的抑制作用并探讨其作用机制。方法:以2.5～40μg/ml NDP分别作用于Hela及Siha细胞24 h,48 h,72 h,MTT法检测抑制率,计算半数抑制浓度(IC50);利用流式细胞术(FCM)观察细胞凋亡率及周期变化;半定量PCR法分析基因半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶3(Caspase 3,Caspase 9)及基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达变化。结果:NDP对宫颈癌Hela细胞及Siha细胞均有抑制作用,呈时间-剂量依赖性,NDP对Hela细胞的抑制率大于Siha细胞;FCM显示,随时间、浓度增加,Hela及Siha细胞凋亡率增加,相同浓度和作用时间下,Hela细胞的凋亡率大于Siha细胞(P<0.05),S期细胞的比例增加,G0/G1期比例减少,G2/M期比例变化不明显;与对照组相比,Caspase 3,Caspase 9表达增加,MMP-2表达减少。结论:NDP可抑制宫颈腺癌细胞Hela及鳞癌细胞Si-ha的增殖,NDP体外对Hela细胞的抑制作用更强。NDP的作用机制与诱导细胞凋亡、细胞周期阻滞、上调Caspase3和Caspase9的表达有关;下调MMP-2的表达可能有利于降低宫颈癌细胞的侵袭力。     

Effects of Selenium on DNA Binding Activity of Nuclear Factor-κB Induced by Arsenic in Mouse Skin JB6-CI41 Cells in vitro

目的 研究硒对砷诱导小鼠皮肤JB6-CI41细胞核因子κB(nuclear factor κB,NF-κB)的DNA结合活性和细胞凋亡的作用.方法 调整JB6-CI41细胞密度为1×105/孔,分别设立对照(生理盐水)组,不同浓度的亚砷酸(3.125、6.25、12.5 μmol/L)和亚硒酸钠(2.5 μmol/L)单独染毒组,亚硒酸钠(2.5μmol/L)+不同浓度的亚砷酸(3.125、6.25和12.5μmol/L)联合染毒组,NF-κB特异化学抑制剂二乙基二硫代氨基甲酸盐(diethyldithiocarbamate,DTYC,100 μmol/L,提前染毒2 h)+亚砷酸(6.25 μmol/L)联合染毒组.采用凝胶阻滞电泳法(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测NF-κB的DNA结合活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 2.5 μmol/L亚硒酸钠对小鼠皮肤JB6-CI41细胞NF-κB的DNA结合活性和细胞凋亡无显著影响(P＞0.05).6.25和12.5 μmol/L的亚砷酸能够增强小鼠皮肤JB6-CI41细胞NF-κB的DNA结合活性(P＜0.01),具有明显剂量-效应关系(r=0.942 6,P＜0.01).3.125、6.25和12.5 μmol/L亚砷酸诱导小鼠皮肤JB6-CI41细胞凋亡(P＜0.01),呈现显著剂量-反应关系(r=0.991 8,P＜0.01).NF-κB的DNA结合活性与细胞凋亡率呈显著正相关(r=0.977 5,P＜0.01).2.5 μmol/L亚硒酸钠能抑制6.25和12.5 μmol/L亚砷酸作用下的小鼠皮肤JB6-CI41细胞NF-κB的DNA结合活性(P＜0.01),对3.125、6.25和12.5 μmol/L的亚砷酸引起的小鼠皮肤JB6-CI41细胞凋亡率也表现出显著抑制作用(P＜0.01).100 μmol/L的DTYC对6.25μmol/L亚砷酸引起的小鼠皮肤JB6-CI41细胞NF-κB的DNA结合活性和细胞凋亡率具有显著抑制作用(P＜0.01).结论 在本实验中,一定剂量(6.25～12.5 μmol/L)的砷能够使小鼠皮肤JB6-CI41细胞NF-κB的DNA结合活性显著增高并诱导细胞凋亡,2.5 μmol/L的硒能抑制砷引起的NF-κB的活化和细胞凋亡.     

三羟基苯甲酸对淋巴瘤细胞凋亡及周期影响

目的 观察不同剂量3,4,5三羟基苯甲酸化合物(TAD)对小鼠淋巴瘤细胞株EL-4细胞的存活率、细胞凋亡及细胞周期进程的影响,探讨其对肿瘤生长抑制的机制.方法 应用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法和流式细胞仪检测经不同浓度(3.125～25 μg/ml)TAD处理的EL-4细胞存活率、细胞凋亡率及细胞周期的变化.结果 EL-4细胞经过3.125,6.25,12.5和25 μg/ml TAD处理后,各观察组细胞存活率依次为(80.60±6.01)%.(75.39±4.97)%,(71.42±3.73)%和(54.96±4.57)%;与对照组100%存活率相比明显降低(P<0.01,P<0.001).细胞凋亡率依次为(4.95±1.76)%,(19.58±7.91)%,(35.85±7.01)%.(11.67±2.96)%;明显高于对照组的(0.36±0.33)%(P<0.01,P<0.001).TAD引起细胞周期进程的改变,G1期细胞百分数明显高于对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.001),S期细胞百分数明显低于对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.001);G2期细胞无明显变化.结论 TAD能够降低EL-4细胞存活率,诱导EL-4细胞凋亡,阻止G1期细胞向S期进程,其抑制作用可能通过G0/G1期阻滞引起.     

三氯乙烯诱导皮肤角质形成细胞凋亡的体外研究

目的 检测三氯乙烯（TCE）对人表皮角质形成细胞（NHEK）的凋亡诱导作用,探讨TCE皮肤毒性的作用靶.方法 采用中性红吸附试验测定TCE对体外无血清培养的NHEK的中性红吸附减少50%的浓度（NR50值）,确定TCE染毒剂量;测定丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活力反映细胞脂质过氧化作用和氧化状态;用透射电子显微镜（TEM）和流式细胞仪（FCM）观察细胞凋亡形态学改变和测定细胞DNA含量,计算凋亡发生率及增殖指数（PI）.结果 TCE对NHEK的NR50值为4.53（3.92～5.13）mmol/L;TCE处理NHEK 4 h后,MDA含量的增加和SOD活力的抑制均具有剂量-效应关系（r=0.98,r=0.93,P＜0.01）;TEM观察显示,与对照相比,TCE处理组细胞可见明显凋亡改变;FCM测定显示,DNA含量直方图中G1期前可见明显的凋亡峰,与对照组相比,TCE处理组细胞凋亡率明显增高（空白对照及TCE 0.125、0.500、2.000 mmol/L组分别为18.42%、31.83%、38.63%、44.35%）,而PI则明显降低（空白对照及TCE 0.125、0.500、2.000 mmoL/L组分别为4.99%、3.26%、2.48%、2.07%）.结论 在体外培养条件下,TCE可通过脂质过氧化和氧化应激作用诱导NHEK凋亡,抑制其增殖.     

灰树花多糖D组分对PM_(2.5)引起肺泡巨噬细胞损伤的拮抗作用

目的探讨灰树花多糖D组分(D-fraction)对大气细颗粒物PM_(2.5)染毒后的大鼠肺泡巨噬(NR8383)细胞损伤的拮抗作用。方法分别以不同浓度的SRM 2786悬液(31.25、62.5、125、250和500μg/ml)、不同浓度的D-fraction溶液(1.56、3.125、6.25、12.5、25、50、100、200及400μg/ml)及SRM 2786溶液(浓度为125μg/ml)与不同浓度的D-fraction溶液(3.125、6.25、12.5、25μg/ml)暴露NR8383细胞24 h,同时,设置空白对照(F-12K培养基)组,采用MTT法检测细胞存活率。将125μg/ml SRM 2786悬液分别与不同浓度(3.125、6.25、12.5、25μg/ml)的D-fraction溶液联合暴露NR8383细胞24 h后,采用酶联免疫法(Elisa)检测细胞上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)及白介素1β(IL-1β)三种炎性因子的释放。结果与空白对照组相比,各浓度SRM 2786暴露组NR8383细胞的存活率均较低,差异有统计学意义(P0.01);且随着SRM 2786暴露浓度的升高,NR8383细胞的存活率呈下降趋势。与空白对照组相比,1.56~25μg/ml D-fraction暴露组NR8383细胞的存活率均升高,差异有统计学意义(P0.05);而50~400μg/ml D-fraction暴露组NR8383细胞的存活率均无明显改变。与125μg/ml SRM 2786暴露组相比,125μg/ml SRM 2786+各浓度D-fraction暴露组NR8383细胞的存活率均明显增高;细胞上清液中的TNF-α、IL-6和IL-1β含量均较低,除125μg/ml SRM 2786+3.125μg/ml D-fraction暴露组外,差异有统计学意义(P0.01)。且随着D-fraction暴露浓度的升高,125μg/ml SRM 2786暴露NR8383细胞的存活率及细胞上清液中的TNF-α和IL-1β含量均呈逐渐下降趋势,IL-6含量呈波浪性下降的趋势。结论 PM_(2.5)可显著降低细胞存活率和促进炎性因子的释放,而D-fraction可改善由PM_(2.5)引发的NR8383细胞损伤。     

RNA干扰技术沉默Livin基因联合顺铂对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响

目的:采用RNA干扰技术阻断Livin基因的表达,并加入不同浓度的顺铂,研究其抑制Hela细胞Livin基因的效果及增强顺铂诱导宫颈癌细胞凋亡的效应。方法:采用脂质体转染法将pGenesil-1-BIRC71、pGenesil-1-BIRC72、pGenesil-1-HK转染宫颈癌Hela细胞,采用荧光定量RT-PCR、Western-blot检测转染前后宫颈癌Hela细胞Livin基因mRNA和蛋白表达的变化,并加入不同浓度的顺铂(3μg/ml、6μg/ml、9.9μg/ml),采用流式细胞术检测不同时间(24 h、48 h)的细胞凋亡率。结果:转染pGenesil-1-BIRC71、pGenesil-1-BIRC72后Hela细胞中Livin mRNA拷贝数明显减少,蛋白质表达水平显著降低;流式细胞术检测24h、48h凋亡率,干扰组细胞显著高于对照组,并随时间延长凋亡率增加;加入顺铂(3μg/ml、6μg/ml、9.9μg/ml)后流式细胞术检测24 h、48 h凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05),呈时间及剂量依赖性。结论:以Livin基因为靶向的RNA干扰技术可有效地抑制宫颈癌Hela细胞的Livin基因表达,并可增强顺铂诱导凋亡的效应,且具有时间和剂量依赖性。     

硒对氟致L-02细胞DNA损伤和凋亡的影响

目的探讨硒对氟导致的L-02细胞DNA损伤和凋亡的影响。方法采用80μg/ml氟化钠和/或1.73μg/ml亚硒酸钠对培养的L-02细胞进行染毒,24 h后采用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测各组L-02细胞DNA损伤情况;用流式细胞术(FCM)检测各组L-02细胞凋亡率。结果氟组L-02细胞DNA损伤率和凋亡率明显高于对照组、硒组和氟硒组(P<0.01);而对照组L-02细胞DNA损伤率和凋亡率与硒组和氟硒组之间无显著性差异(P>0.05)。结论氟可导致L-02细胞DNA损伤,诱导细胞凋亡,适量硒可拮抗氟导致的L-02细胞DNA损伤和细胞凋亡作用。     

氟对人胚肝细胞DNA损伤及凋亡的影响

目的探讨氟对人胚肝细胞(L-02细胞)DNA损伤及诱导凋亡的作用.方法采用40,80,160μg/ml氟化钠对培养的人胚肝细胞进行染毒,24 h后用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)和流式细胞术(FCM)检测氟化物对人胚肝细胞DNA损伤和细胞凋亡情况.结果氟组人胚肝细胞DNA损伤率明显高于对照组,Ridit值分别为0.582,0.815,0.892;中、高剂量氟组人胚肝细胞凋亡百分率(9.293±1.171),(11.727±1.196)均明显高于对照组(5.343±1.620).同时,高剂量氟组与低剂量氟组之间细胞DNA损伤率和凋亡率的差异也存在显著性差异(P＜0.05).结论氟化物具有引起人胚肝细胞DNA损伤和细胞凋亡的作用,并呈现一定的剂量-效应关系.     

痰热清注射液治疗社区获得性肺炎临床研究

目的观察痰热清注射液治疗社区获得性肺炎(community acquired pneumonia,CAP)的临床效果。方法选择2010年1月—2012年12月收治的90例符合诊断标准的CAP患者,随机分为治疗组与对照组各45例。两组均根据患者的病情给予吸氧,选择敏感抗生素抗感染治疗,同时给予祛痰、止咳、解痉、平喘等对症支持治疗,积极治疗原发病和并发症。治疗组在对照组基础上,给予痰热清注射液20 ml加入5%葡萄糖注射液250 ml静脉滴注,滴速60滴/min,1次/d。两组均治疗10 d,比较两组疗效及退热、咳嗽、咳痰消失时间、干湿性音消失时间、胸片片状阴影消散时间。计量资料采用t检验,计数资料采用χ2检验,P0.05为差异有统计学意义。结果总有效率治疗组95.5%,对照组80.0%,比较差异有统计学意义(χ2=5.07,P0.05)。治疗组退热时间、咳嗽、咳痰、干湿性音消失时间及胸片片状阴影消散时间[(2.9±0.4)、(5.0±0.6)、(4.5±0.5)、(7.5±0.6)d]均短于对照组[(3.4±0.6)、(5.4±0.7)、(4.8±0.6)、(8.3±0.8)d],比较差异均有统计学意义(t=4.651、2.911、2.577、5.366,均P0.05)。结论痰热清注射液治疗CAP能够加快患者康复速度,效果肯定,值得临床推广应用。     

VEGF-C诱导宫颈癌Hela细胞Bcl-2、cyclinD1的表达

目的研究VEGF-C对体外培养的宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的分子机制。方法应用重组人VEGF-C蛋白体外刺激宫颈癌Hela细胞,MTT法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞周期和凋亡、Western Blotting检测增殖凋亡相关基因Bcl-2、cyclin D1蛋白水平的变化。结果 10、20、50 ng/μl VEGF-C处理后,细胞增殖指数分别为(1.00±0.03)、(1.25±0.05)、(1.55±0.08)、(2.13±0.08),呈剂量依赖性升高(P0.05)。细胞周期S期比率呈剂量依赖性升高(P0.05),分别为(30.91±0.09)%、(37.95±0.27)%、(45.05±0.40)%、(64.26±0.20)%;细胞凋亡率呈剂量依赖性降低(P0.05),分别为(12.4±0.3)、(11.4±0.2)、(9.6±0.15)、(5.5±0.25)。Bcl-2、cyclin D1蛋白表达呈剂量依赖性升高。结论外源性VEGF-C通过细胞内信号的传递,诱导cyclin D1的表达,使肿瘤细胞S期加快,促进细胞周期的进程,来促进Hela细胞增殖;诱导Bcl-2的表达,抑制凋亡。     

rhEPO对新生鼠缺氧缺血性脑损伤的神经保护作用

目的探讨重组人促红细胞生成素（rhEP0）对新生鼠缺氧缺血性脑损伤的神经保护作用。方法57只7天龄新生鼠随机分为假手术对照（正常对照组）、缺氧缺血性脑损伤动物模型组（HIBD模型）、rhEP0治疗组。在建立HIBD模型后,rhEPO治疗组立即一次性腹腔注射3000IU／kg剂量的rhEPO;HIBD模型组注射等量生理盐水;于处置后24h电镜观察脑组织病理形态学变化,流式细胞计检测脑受损局部神经元细胞凋亡情况,实验7天进行短期感觉运动反射评价。结果与正常对照组相比,HIBD模型组光镜下左侧大脑病理损伤明显;HIBD模型组神经细胞凋亡与正常对照组相比增加（28．30±4．80VS47．14±6．97,P〈0．05）,存活细胞减少（72．42±7．93VS48．33±8．39,P〈0．05）;rhEPO治疗组细胞凋亡与HIBD模型组相比减轻（47．14±6．97VS36．88±9．43,P〈0．05）,存活细胞增多（48．33±8．39VS60．06±8．32,P〈0．05）;HIBD模型组悬吊测试、翻正反射、悬崖逃避反射、趋地反射这四项反射与正常对照组相比成绩均较差,提示神经功能受损;rhEPO治疗组翻正反射及悬崖逃避反射时间与HIBD模型组相比缩短,（4．59±0．11VS2．84±0．13,10．84±1．26VS8．49±1．03,均P〈0．05）,以上差异均有统计学意义。结论外源性给予rhEP0能够减轻HIBD大鼠脑组织病理损伤,稳定细胞结构,抑制细胞凋亡,改善短期行为学评价,从而发挥其神经保护作用。     

精子细胞凋亡率与胚胎停育相关分析

目的:研究精子凋亡率与胚胎停止发育的相关性。方法:胎停育患者丈夫55例(胎停育组),年龄31.69±4.16岁;23名正常生育男性(对照组),年龄32.28±5.56岁。所有对象均留取精液标本并进行精液常规分析,采用抗活性半胱氨酸蛋白酶3标记精子,使用流式细胞仪检测精子细胞凋亡率,以无抗体标记的精子作为空白对照。对测得的所有数据进行统计学分析。结果:胎停育组与对照组的精子细胞凋亡率分别为0.85±0.33%,0.19±0.12%。两组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析,精子细胞凋亡率预测胎停育发生灵敏度为67%,特异度为70%。胎停育组与对照组精子浓度、活动率、活动力、正常形态率均有统计学差异(P<0.05)。结论:精子细胞凋亡率增加、精子质量下降可能与配偶胚胎停止发育有关。     

复方清金化痰汤联合阿奇霉素治疗老年社区获得性肺炎效果评价

目的探讨老年社区获得性肺炎(community acquired pneumonia,CAP)的临床治疗方案,评价复方清金化痰汤联合阿奇霉素治疗老年CAP的临床效果。方法选择2011年1月—2013年12月收治的282例符合CAP诊断标准且在3 d内未使用任何抗生素的老年CAP患者,随机分为治疗组与对照组各141例。所有患者入院后依照病情给予吸氧、监测生命体征及止咳、祛痰、解痉、平喘等对症支持治疗,并保持呼吸道通畅,给予吸痰、雾化等基础治疗。首先选择阿奇霉素注射液抗感染治疗,同时连续3次送检痰细菌培养,如患者体温38.5℃以上,留取血细菌培养。依据细菌培养药敏试验结果再及时调整敏感的抗生素治疗。比较两组疗效、临床表现改善时间、痰培养细菌学结果、呼吸衰竭纠正情况、平均住院时间及日均住院费用。计量资料采用t检验,计数资料采用x~2检验,小样本比较采取直接计算概率法,P0.05为差异有统计学意义。结果总有效率治疗组91.5%,对照组83.7%,比较差异有统计学意义x~2=3.95,P0.05)。治疗组退热时间,咳嗽、咳痰症状消失时间,肺部湿啰音消失时间及胸片片状阴影消散时间[(3.1±0.5)、(4.2±0.6)、(6.4±0.7)、(10.2±0.8)d]均短于对照组[(4.2±0.7)、(5.6±0.8)、(7.2±0.8)、(12.6±0.9)d],比较差异均有统计学意义(t=15.18、16.62、8.94、23.67,均P0.05)。治疗组细菌金黄色葡萄球菌、肺炎球菌、大肠杆菌转阴率(88.89%、89.66%、100.00%)明显高于对照组(67.74%、68.00%、75.00%),比较差异均有统计学意义(x~2=4.51、3.88、4.09,均P0.05)。治疗组呼吸衰竭纠正时间[(6.82±0.81)d]明显短于对照组[(8.15±0.98)d](t=12.42,P0.05)。治疗后治疗组PaO_2及PaCO_2[(93.12±9.35)、(38.36±4.46)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)]与对照组[(88.65±8.76)、(45.19±5.98)mm Hg]比较差异均有统计学意义(t=4.14、10.87,均P0.05)。治疗组平均住院时间及日均住院费用[(13.8±5.6)d、(356.3±28.4)元]均少于对照组[(15.3±6.5)d、(436.8±42.6)元],比较差异均有统计学意义(t=2.08、18.67均P0.05)。结论复方清金化痰汤联合阿奇霉素治疗老年CAP效果确切,在临床症状改善程度、呼吸衰竭纠正方面有明显优势,能够加快患者恢复,降低医疗费用且缩短住院时间,值得临床推广应用。     

综合护理干预对甲状腺肿瘤患者术后影响分析

目的：总结分析综合护理干预在甲状腺肿瘤患者术后中的积极影响。方法：选择2012年1-12月本院收治的60例甲状腺肿瘤手术治疗患者为研究对象,随机分为观察组和对照组各30例,对照组给予甲状腺肿瘤围手术期常规护理,观察组在常规护理基础上给予综合护理措施,比较两组患者术后1、24、48 h疼痛评分,住院时间以及SAS和HAMA评分的差异。结果：观察组患者术后1、24、48 h VAS评分分别为（3.6±0.8）分、（2.2±0.7）分、（1.9±0.5）分;均明显低于对照组的（4.7±1.0）分、（4.9±1.3）分、（5.3±0.6）分,差异具有统计学意义（P〈0.01）;观察组患者术后住院时间为（6.5±1.2）d,明显短于对照组的（8.6±1.7）d,差异有统计学意义（P〈0.01）。护理后,观察组SAS和HAMA评分分别为（45.18±3.06）分、（14.12±2.03）分,均显著低于对照组的（51.34±3.24）分、（17.45±2.82）分,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：在常规护理基础上采取综合护理干预能有效缓解甲状腺肿瘤患者术后疼痛和焦虑情绪,促进康复,缩短住院时间,值得推广使用。     

多烯磷脂酰胆碱联合生活方式干预治疗非酒精性脂肪肝的临床价值

目的 探讨多烯磷脂酰胆碱联合生活方式干预治疗非酒精性脂肪肝的临床价值.方法 将120例非酒精性脂肪肝患者按随机数字表法分为两组,每组60例,对照组给予保肝降脂药、改善生活方式等常规治疗,观察组在此基础上给予多烯磷脂酰胆碱治疗,疗程为3个月,比较两组患者疗效.结果 与治疗前比较,两组患者治疗后三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、谷氨酰转移酶（GGT）均得到显著改善[对照组：（2.4±0.6） mmol/L比（3.3±1.3） mmol/L、（4.4±1.4） mmol/L比（2.2±1.0） mmol/L、（3.0±0.5） mmol/L比（3.5±0.8） mmol/L、（1.3±0.6） mmol/L比（0.9±0.5） mmol/L、（42.3±11.5） U/L比（109.7±36.8） U/L、（40.8±7.4） U/L比（49.8±9.8）U/L、（54.2±12.3） U/L比（63.4±15.7） U/L;观察组：（1.1±0.4） mmol/L比（3.3±1.1） mmol/L、（6.1±1.5） mmol/比（2.3±1.1） mmol/L、（2.6±0.4） mmol/L比（3.6±0.9） mmol/L、（1.7±0.7） mmol/L比（0.9±0.6） mmol/L、（78.6±19.8） U/L比（112.1±41.1） U/L、（30.2±7.8） U/L比（51.2±11.3） U/L、（42.7±9.8） U/L比（66.8±14.6） U/L],差异有统计学意义（P＜ 0.05）,且观察组的疗效优于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.对照组总有效率为76.7％（46/60）,观察组为93.3％（56/60）,两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.与治疗前比较,两组患者治疗后在生理健康、心理健康、社会健康方面均得到显著改善[对照组：（135.6±21.2）分比（127.8±18.9）分、（121.9±16.9）分比（110.2±13.6）分、（85.8±12.1）分比（78.9±11.1）分;观察组：（149.4±20.2）分比（128.1±21.9）分、（142.3±23.1）分比（108.9±12.8）分、（94.1±15.3）分比（80.2±13.5）分],差异有统计学意义（P＜0.05）,且观察组的疗效优于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 多烯磷脂酰胆碱联合生活方式干预治疗非酒精性脂肪肝疗效显著,可显著改善肝功能,提高患者的生活质量,是治疗非酒精性脂肪肝患者安全有效的方案,值得临床推广使用.     

神经生长因子诱导肝星状细胞凋亡及其相关机制的研究

目的观察神经生长因子（nerve growthfactor,NGF）对大鼠肝星状细胞（hepatic stellatecell,HSC）凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞株HSC—T6,将HSC—T6与100ng／mlNGF孵育24h后,流式细胞术检测细胞凋亡;细胞免疫化学法检测HSC中凋亡相关基因P^53、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的情况;免疫荧光法检测NGF、神经生长因子低亲和力受体p75NTR表达的情况。结果NGF作用HSC后凋亡率较对照组明显增高[（22．364±9．51）％VS（5．88±1．36）％,P〈0．05]。凋亡相关蛋白P^53、Caspase-3的阳性细胞百分率与对照组比较明显增高[（78．41±4．00）％、（39．26±1．57）％VS（34．96±3．84）％、（9．27±1．01）％,P〈0．05],而Bcl-2表达实验组阳性细胞百分率较对照组降低[（18．12±1．38）％vs（91．53±2．98）％,P〈0．05]。NGF作用HSC后NGF表达增多（6．53±1．40vs1．77±0．17,P〈0．05）,而p75NTR表达无明显变化（3．52±0．36VS4．24±0．38,P〉0．05）。结论NGF可能通过使凋亡相关基因p、Caspase-3表达上调、Bcl-2表达下调,而诱导HSC凋亡。NGF作用HSC后可作为始动因子和效应因子增加NGF的表达,而对p75NTR表达无影响。     

氧自由基和细胞凋亡在大鼠应激性溃疡中的作用

目的探讨氧化应激与细胞凋亡在应激性溃疡发病中的作用及相关性。方法改良Allen法制造颅脑损伤并发应激性溃疡模型，40只大鼠随机分为正常对照组和应激后3、6、12、24小时组。测定溃疡指数（UI）、胃黏膜超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）；透射电镜及流式细胞仪检测早期细胞凋亡。结果颅脑损伤6小时后各应激组UI增加（P〈0．05）；胃黏膜SOD下降，MDA升高（P〈0．05），与对照组相比应激后3小时差异即有显著性，6—12小时达高峰（P〈0．05）；早期细胞凋亡率于应激后6小时开始显著增多，12小时达高峰（P〈0．05）；应激后6小时透射电镜可见凋亡细胞，12小时显著增多达高峰。应激后MDA与早期细胞凋亡率呈显著正相关（r=0．684，P〈0．05），SOD活性与早期细胞凋亡率呈显著负相关（r=-0．713，P〈0．05）。结论细胞凋亡参与急性胃黏膜损伤；氧化应激是应激性胃黏膜损害的重要因素，可能参与细胞凋亡。     

研究环孢菌素A对再障病患骨髓细胞Fas表达及凋亡率的影响

目的：研究环孢菌素A（CsA）对再生障碍病患骨髓细胞Fas表达及凋亡率的影响。方法：从2010年2月-2013年2月,本院共计48例病患被确诊为再障。以数字法随机分成观察组24例和对照组24例,对照组以注射用丹参治疗,观察组在此基础上另以CsA治疗。对比两组疗效,分析CsA对于再障病患骨髓Fas表达情况和对MNC有关凋亡率影响。结果：观察组总有效率为83.33%（20/24）,显著高于对照组的37.50%（9/24）,比较差异有统计学意义（P〈0.05）。两组在治疗前后CD34＋Fas＋的细胞百分率相比,差异无统计学意义。观察组病患骨髓CD34-细胞的Fas表达和对照组相比,差异无统计学意义。观察组治疗后MNC有关凋亡率为（2.27±0.74）%,显著低于治疗前的（6.58±2.33）%,以及对照组治疗后的（2.92±1.20）%,比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：细胞Fas异常表达和再障发病情况有一定联系,以CsA治疗再障病患,可明显降低其骨髓MNC凋亡率,疗效显著,值得临床推荐。