p16基因对舌鳞癌细胞生物学特性影响的研究

ｐ16基因是一个多种肿瘤抑制基因 ,其编码蛋白为周期依赖性激酶 4(ＣＤＫ4)的抑制因子 ,能阻止ＣＤＫ4与细胞周期素Ｄ结合 ,从而使细胞周期阻滞在Ｇ1期[1] 。我们为了探讨引入野生型ｐ16基因后口腔鳞癌细胞生物学的变化 ,构建了ｐ16基因真核表达质粒 ,并于体外转染ｐ16基因产物缺乏的舌鳞癌细胞ＴＳＣＣａ中 ,探索ｐ16基因治疗口腔鳞癌的可行性。1 材料 :ｐｃＤＮＡ3真核表达质粒 ;人舌鳞癌细胞系ＴＳＣＣａ ;ｐ16的ＲＴ ＰＣＲ引物顺序 :正义链 :5′ ＧＣＧＣＧＧＡＴＣＣＡＴＧＧＡＧＣＣＴＴＣＧＧＣＴＧＡＣＴＧＧ 3′ ;反义链 :5′ ＧＣＧＣＧＡＡＴＴＣＴＣＡＡＴＣＧＧＧＧＡＴＧＴＣＴＧＡＧＧＧ 3′。2 .方法 :(1)ｐｃＤＮＡ ｐ16真核表达质粒的构建 :常规提取ｐｃＤＮＡ3质粒ＤＮＡ ,ＢａｍＨ1和ＥｃｏＲ1酶切 ;提取人正常口腔粘膜总ＲＮＡ ;ＲＴ ＰＣＲ扩增ｐ16全长ｃＤＮＡ ;ＢａｍＨ1和ＥｃｏＲ1酶切 ,纯化后和线性ｐｃＤＮＡ3进行连接反应 ,筛选阳性克隆 ,ＢａｍＨ1和ＥｃｏＲ1酶切鉴定定向克隆的重组质粒ｐｃＤＮＡ3 ｐ16。(2 )ｐｃＤＮＡ3和ｐｃＤＮＡ3 ｐ16转染ＴＳ...     

基质金属蛋白酶在口腔鳞癌转移中的作用

许多研究表明基质金属蛋白酶 (ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ,ＭＭＰｓ)和其天然抑制剂 (ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｏｆＭＭＰｓ,ＴＩＭＰｓ)的平衡破坏是基底膜降解的主要原因。我们研究的目的在于探讨口腔鳞癌中ＭＭＰ2、9及ＴＩＭＰ1、2的表达形式及其活性与颈淋巴结转移的关系。1 材料和方法 :(1) 30例口腔鳞癌标本来自武汉大学口腔医学院口腔颌面外科手术患者 ,口腔鳞癌转移癌细胞系ＧＮＭ及人舌鳞癌细胞系ＴＳＣＣａ均由武汉大学口腔医学院建立。(2 )ＭＭＰ2、9,ＴＩＭＰ1、2ｃＤＮＡ探针原位杂交 :标本…     

口腔鳞癌组织中nm23—H1基因的mRNA表达及临床意义

目的 研究口腔鳞癌中ｎｍ２３－Ｈ１基因的ｍＲＮＡ表达情况及其与口腔鳞癌颈淋巴结转移的关系。方法 采用斑点杂交的方法检测８例口腔鳞癌，２例正常口腔粘膜中ｎｍ２３－Ｈ１基因的ｍＲＮＡ表达情况。结果 ２例正常口腔粘膜中ｎｍ２３－Ｈ１基因的ｍＲＮＡ表达水平均较高；４例手术时无颈淋巴结转移的口腔鳞癌组织中３例ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ呈相对高表达，１例表达水平较低；而伴有颈淋巴结转移的４例口腔鳞癌组织中ｎｍ２３     

涎腺肿瘤C-erb B-2 mRNA表达的研究

以往有关ＣｅｒｂＢ2表达的研究缺乏癌基因表达产物的确切定位。我们用原位杂交技术研究各涎腺肿瘤及正常涎腺ＣｅｒｂＢ2ｍＲＮＡ的表达。一、材料和方法1探针:跨人类ＣｅｒｂＢ2癌基因外显子6、7的28个寡核苷酸,序列为5′ＣＣＣＡＡＧＴＣＣＴＣＡＴＴＣＴＡＣＣＴＧＧＡＴＧＡＣＣ3′,3′末端地高辛标记。2组织材料和原位杂交:35例涎腺肿瘤和9例正常涎腺均是白求恩医科大学口腔医学院口腔颌面外科新鲜手术标本,常规固定、石蜡包埋切片后,1ｇ/Ｌ蛋白酶Ｋ37℃消化15ｍｉｎ,02ｍｏｌ/Ｌ盐酸和含025%醋酸酐的三乙醇胺乙酰化。37℃杂交12ｈ,分…     

肿瘤抑制基因nm23—H1在口腔鳞癌组织中的蛋白表达及 …

目的 研究ｎｍ２３－Ｈ１蛋白在口腔鳞癌中的表达情况，并探讨它与口腔鳞癌患者预后的关系。方法 采用免疫组化ＳＡＢＣ法检测７５例口腔鳞癌、１９例癌旁粘膜、８例正常口腔粘膜及９例颈淋巴结转移灶中ｎｍ２３－Ｈ１蛋白染色，利用Ｘ＾２检验及单因素、多因素Ｃｏｘ比较风险模型进行统计分析。结果 Ｘ＾２检验发现，ｎｍ２３－Ｈ１蛋白表达水平在生存期小于３年组和大于７年组间差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。单因素Ｃｏｘ模型     

MHC分子在诱导口腔鳞癌CTL中的作用

目的 探讨肿瘤细胞上的主要组织相容性复合体（ｍａｊｏｒ ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｂｉｌｉｔｙ ｃｏｍｐｌｅｘ,ＭＨＣ）分子在诱导自体口腔鳞癌细胞毒Ｔ淋巴细胞（ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ,ＣＴＬ）中的作用。方法 对９例口腔鳞癌中的肿瘤细胞表面人类白细胞抗原（ｈｕｍａｎ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ａｎｔｉｇｅｎ,ＨＬＡ）－ＡＢＣ和ＨＬＡ－ＤＲ抗原进行检测,将其中５例ＨＬＡ－ＡＢＣ抗原表达〉５     

血管内皮生长因子C在颊癌中表达及其与淋巴结转移关系的研究

颊癌是较为常见的口腔恶性肿瘤 ,容易早期发生淋巴结转移 ,预后较差 ,但目前对癌细胞淋巴转移的原因不完全清楚 ,近期的研究表明血管内皮生长因子 Ｃ(ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ Ｃ ,ＶＥＧＦ Ｃ)可特异性促进淋巴管增生 ,我们对ＶＥＧＦ Ｃ在颊癌中的表达及其与淋巴结转移的联系进行了研究。1 材料和方法 :( 1)标本来源 :取 4 9例第四军医大学口腔颌面外科切除的颊癌标本 ,常规包埋切片 ,ＨＥ染色 ,光镜检查 ,并随访术后情况 ,分为转移组和无转移组。( 2 )免疫组化 :抗ＶＥＧＦ Ｃ及其受体Ｆｌｔ 4的…     

CD44v6在口腔鳞癌中的表达意义

我们应用流式细胞免疫学方法对36例口腔鳞癌中ＣＤ44ｖ6的表达进行了定量研究 ,以探讨口腔鳞癌中ＣＤ44ｖ6的表达与转移的关系。1.标本来源 :从山东省千佛山医院存档蜡块中选取口腔鳞癌 36例 ,以石蜡包埋的正常舌组织作为健康对照。2 .方法[1] :制备细胞膜完整的单细胞悬液 ,再加入ＣＤ44ｖ6 ＦＩＴＣ单抗溶液(奥地利生产 ) ,室温避光反应 2 0ｍｉｎ。用ＦＡＣＳｃａｎ型流式细胞分析仪测定。每份样品检测细胞 10 0 0 0个 ,采用ＣｅｌｌＱｕｅｓｔＰｌｏｔ软件程序在Ｍａｃｉｎｔｏｓｈ 6 5 0计算机上分析数据 ,以ＣＤ44ｖ6阳性细胞百分率…     

口腔鳞癌增殖活性和微血管密度与平阳霉素化疗的关系

我们在口腔鳞癌的活检标本上采用ＬＳＡＢ免疫组化方法 ,观察增殖细胞核抗原 (ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ ,ＰＣＮＡ)和肿瘤微血管密度 (ｔｕｍｏｒｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌｄｅｎｓｉｔｙ ,ＴＭＤ)与平阳霉素化疗敏感性的关系。1 材料与方法 :选择ＰＹＭ化疗前有活检标本的口腔鳞癌患者 35例 ,年龄 34～ 6 9岁 ,平均 5 0岁。采用ＨＥ染色和ＬＳＡＢ免疫组化染色 ,ＰＣＮＡ(ＰＣ10 )工作浓度为 1∶10 0 ,ＣＤ31为1∶30。ＰＣＮＡ指数 (ＰＩ)、有丝分裂指数 (ＭＩ)的定量是采用Ｈａａｐａｓａｌｏ的容积…     

一本值得推荐的口腔颌面外科专著——重建修复前口腔颌面外科学

一本值得推荐的口腔颌面外科专著——重建修复前口腔颌面外科学ＲＥＣＯＮＳＴＲＵＣＴＩＶＥＰＲＥＰＲＯＳＴＨＥＴＩＣＯＲＡＬＡＮＤＭＡＸＩＬＬＯＦＡＣＩＡＬＳＵＲＧＥＲＹＲａｙｍｏｎｄＪ．Ｆｏｎｓｅｃａ，Ｗ．ＨｏｗａｒｄＤａｖｉｓ，ＳｅｃｏｎｄＥｄｉｔｉ...     

CD/5-FC系统治疗口腔鳞癌移植瘤的研究

胞嘧啶脱氨酶基因 (ＣＤ) / 5 氟胞嘧啶 (5 ＦＣ)自杀基因系统在多种恶性肿瘤治疗中具有强的杀伤作用 ,但在口腔鳞癌方面的研究仍较少 ,我们将ＣＤ/ 5 ＦＣ系统用于治疗口腔鳞癌移植瘤。1 .材料和方法 :于ＢＡＬＢ/ｃ裸小鼠右侧腋下接种Ｔｃａ81 1 3细胞 (何荣根教授惠赠 ) ,肿瘤形成直径约 5ｍｍ时开始治疗 (第 8天 ) ,随机分组如下 :空白对照组 8只 ,5 ＦＣ对照组 7只 ,ＡｄＣＭＶＣＤ对照组 7只 ,ＡｄＣＭＶＣＤ/ 5 ＦＣ组 8只。瘤内注射ＡｄＣＭＶＣＤ(许德华教授提供 ) :1× 1 0 9ＰＦＵ/次 (第 8、1 1天接种 ) ;腹腔注射 5 ＦＣ(Ｓｉ…     

口腔鳞癌患者免疫功能测定及其临床意义

本文从分子学水平和细胞学水平，对３０例口腔鳞癌患者，及相应的正常对照者，做血浆ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ含量及外周血Ｔ淋巴细胞亚群测定。血浆ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ含量测定发现，口腔鳞癌患者ｃＡＭＰ明显低于正常对照者（Ｐ＜０．０１），而ｃｏＭＰ和ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ无明显差异（Ｐ＞０．０５），提示口腔鳞癌患者ｃＡＭＰ抑制肿瘤细胞生长的能力低下，与全身其他部位癌症基本一致。Ｔ淋巴细胞亚群测定发现，口腔鳞癌患者与正常人存在明显差异，主要表现为口腔鳞癌患者ＣＤ３↓（Ｐ＜０．０５），ＣＤ８↑（Ｐ＜０．０１），ｃＤ４／ＣＤ８↓（ｐ＜０．０１），提示口腔鳞癌患者细胞免免疫功能紊乱，免疫平衡失调。     

口腔鳞癌中抑癌基因的失活

目的：探讨同一口腔鳞标本中３种抑癌基因失活情况。方法：２７例口腔鳞癌标本行ＡＢＣ免疫组织化学染色,一抗分别为鼠抗人ｎｍ２３,Ｐ５３单克隆抗体及Ｐ１６多克隆抗体。以癌细胞着色３０％为判断高低表达煌界值。结果：ｐ１６基因失活率最高,为６６．７％;２种以上基因同时失活为５１．９％,其中ｐ１６和ｎｍ２３占６４．２％（９／１４）。结论：ｐ１６基因失活是口腔鳞癌中发生频率最高的分子事件;口腔鳞癌中抑癌基因的失活为非单一基因失活,其意义值得探讨;同时提示,研究口腔鳞癌其基因表达及意义时,应注意抑癌基因的活的复杂性。     

变形链球菌gtf基因研究近况

变形链球菌ｇｔｆ基因研究近况杜民权综述樊明文审校武汉市湖北医科大学口腔医学院（４３００７０）变形链球菌已被公认为主要致龋菌［１］．其致龋的机制在于该细菌利用蔗糖产生葡糖基转移酶（Ｇｌｕｃｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ；ＧＴＦ），合成有粘性的非水溶性葡...     

口腔粘膜鳞状细胞癌及癌旁上皮中p53及C-erbB-2癌基因蛋白的表达

本文通过对ｐ5 3、Ｃ ｅｒｂＢ 2癌基因蛋白在口腔粘膜鳞状细胞癌 (ＯＭＳＣＣ)及癌旁形态学上正常的上皮、异常增生的上皮中表达的研究来探讨ｐ5 3、Ｃ ｅｒｂＢ 2在ＯＭＳＣＣ发生、发展中的意义。1　材料与方法1 1　标本2 9例ＯＭＳＣＣ标本均来自上海第二医科大学附属第九人民医院口腔病理科 1995 1997年的档案标本 ,其中 2 1例标本中存在癌旁正常上皮 ,19例存在癌旁异常增生上皮。男性2 2例 ,女性 7例 ;病理分级鳞癌Ⅰ级 17例、Ⅱ级 12例。1 2　方法经 4%甲醛固定 ,石蜡包埋的标本作 5 μｍ连续切片 ,ＨＥ及免疫组化染色 (ＡＢＣ法 )…     

多肽防龋疫苗研究进展

多肽防龋疫苗研究进展湖北医科大学口腔医学院中心实验室（４３００７０）刘建国（综述）樊明文凌均启（审校）龋病是最常见的口腔疾病。致龋变形链球菌（简称变链菌）表面蛋白抗原（ＳＡ）和葡糖基转移酶（ＧＴＦ）在其致病过程中起重要作用。目前防龋疫苗的研究主要集中...     

影响涎腺腺样囊性癌预后因素的探讨

目的：研究５０例涎腺腺样囊性癌（ｓａｌｉｖａｒｙａｄｅｎｏｉｄｃｙｓｔｉｃｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＳＡＣＣ）患者的肿瘤部位、临床分期、组织学分型及肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３、组织蛋白酶Ｄ（Ｃａｔｈｅｐｓｉｎ－Ｄ，Ｃａｔｈ－Ｄ）、金属硫因蛋白（ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ，ＭＴ）、增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）、肿瘤抑制基因ｐ５３的关系。方法：用免疫组织化学反应进行多因素分析，探讨它们与局部复发、远处转移和生存率的关系。结果：影响ＳＡＣＣ局部复发的因素太多，以上各指标均不能独立判断ＳＡＣＣ的局部复发情况；ｎｍ２３和Ｃａｔｈ－Ｄ与ＳＡＣＣ远处转移有明显相关性（Ｐ＜０．０５），表明ｎｍ２３和Ｃａｔｈ－Ｄ在ＳＡＣＣ远处转移中具有重要作用，是预测ＳＡＣＣ远处转移的两项独立指标；临床分期与ＳＡＣＣ患者的生存率有明显相关性（Ｐ＜０．０５）。结论：临床分期可作为一项独立作用的指标来评价ＳＡＣＣ患者的预后。     

口腔鳞状细胞癌Rb基因的检测

口腔鳞状细胞癌是最常见的口腔颌面部恶性肿瘤之一 ,其预后较差。抽烟、饮酒及咀嚼槟榔是重要的致癌因素。目前 ,口腔上皮细胞恶性转化的分子机制尚未完全阐明。为了更好地预防及治疗口腔鳞状细胞癌 ,我们应用地高辛标记的ＲｂｃＤＮＡ探针对 30例原发性口腔鳞状细胞癌中Ｒｂ抑癌基因的存在状态进行了研究。1.材料和方法 :(1)标本 :30例口腔鳞状细胞癌标本取自手术切除的新鲜肿瘤组织 ,男性 19例 ,女性 11例 ;年龄 34～ 6 8岁 ,平均5 6 9岁。高度分化鳞癌 10例 ,中度分化鳞癌 18例 ,低度分化鳞癌 2例。 3例对照组标本取自行正颌外科治疗患…     

《口腔医学》2002年第22卷分类目次索引

【口腔组织病理】成骨样细胞受张力作用后ＰＧＦ2 含量及ＩＧＦ - 1表达变化 ,邹淑娟 ,胡静 ,高占巍 ( 1) :1- 2Ｃ ｅｒｂＢ 2蛋白质ｎｍ2 3蛋白在口腔粘膜鳞癌组织中的表达研究 ,葛明华 ,张谷 ,王可敬 ( 1) :8～ 9二种镀银法在研究牙本质构造中的特点 ,钟滨 ,钟伟 ( 1) :10～ 11永生化髁突软骨细胞的血清依赖性生长实验 ,段小红 ,吴军正 ,李焰 ,等 ( 1) :15～ 16ＰＣＮＡ及ｃｙｃｌｉｎＤ1蛋白在羊下颌骨牵张成骨过程中的检测 ,冯雪 ,陈富林 ,林珠 ,等 ( 2 ) :57～ 59大鼠成釉细胞的原代培养和光、电镜观察 ,高洁 ,田立坤 ,刘冬娟 ,等 ( 2 …     

转化生长因子β亚型在口腔鳞癌中的表达和意义

目的:探讨TGF-B与口腔鳞癌发生和发展的关系。方法:采用SABC免疫组化法检测了40例口腔鳞癌术后标本和20例正常口腔粘膜中TGF-B的表达。结果:口腔鳞癌和正常口腔粘膜中均表达TGF-B1、TGF-B2、TGF-B3,但程度不同。TGF-B1、TGF-B2在口腔鳞癌中呈过表达。口腔鳞癌临床分期、有无颈淋巴结转移及病理分级与TGF-B1、 TGF-B2过表达有关,与TGF-B3的表达无关。结论:TGF-B1和TGF-B2可能参与了口腔鳞癌的发生发展及颈淋巴结转移过程,是口腔鳞癌发生发展及预后的一个指标。