灵芝孢子粉对戊四氮活化海马神经细胞bad,bcl-xl和p53表达的研究

目的本研究探索灵芝孢子粉对癫痫大鼠海马神经细胞抗凋亡的保护作用及其作用机制,阐述癫痫与海马神经细胞凋亡调控基因之间的关系。方法通过制备癫痫模型和RT-PCR检测正常对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉用药组bad、bcl-xl、p53的m RNA表达。结果癫痫模型组和灵芝孢子粉用药组bad的表达较正常对照组均升高;其中癫痫模型组bad的表达水平与对照组比较明显升高(P0.01),灵芝孢子粉用药组bad的表达水平与癫痫模型组比较明显降低(P0.05),差异有统计学意义。癫痫模型组和灵芝孢子粉用药组bcl-xl的表达较正常对照组均降低;其中癫痫模型组bcl-xl的表达水平与正常对照组比较明显降低(P0.01),灵芝孢子粉用药组bcl-2的表达水平与癫痫模型组比较明显升高(P0.05),差异有统计学意义。癫痫模型组和灵芝孢子粉用药组p53的表达较正常对照组均升高;其中癫痫模型组p53的表达水平与对照组比较明显升高(P0.01),灵芝孢子粉用药组p53的表达水平与癫痫模型组比较明显降低(P0.05),差异有统计学意义。结论说明灵芝孢子粉可以通过对线粒体凋亡途径的调节,发挥抗凋亡的神经保护作用。     

戊四氮致痫大鼠脑神经型钙黏附素和神经营养因子-4表达的变化及灵芝孢子粉的干预作用

目的: 观察戊四氮致痫大鼠脑神经型钙黏附素(N-cadherin)和神经营养因子-4(NT-4)表达的变化及灵芝孢子粉的干预治疗作用,研究癫痫的发病机制及灵芝孢子粉的作用机制。方法: 健康雄性Wistar实验大鼠30只,随机分为正常对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉治疗组,每组10只。模型组和治疗组均用致痫亚惊厥剂量的戊四氮(PTZ)腹腔注射制作Wistar大鼠慢性点燃模型。在低温条件下迅速取脑,通过免疫组化和Western blotting检测皮质和海马区N-cadherin和NT-4的变化。结果: 实验性癫痫大鼠模型制作成功,灵芝孢子粉组和癫痫模型组实验动物均达到点燃标准,与癫痫模型组动物相比,灵芝孢子粉组大鼠潜伏期明显延长, 但持续时间无显著差异。免疫组化和Western blotting检测实验结果表明:癫痫模型组实验大鼠脑海马和皮质N-cadherin含量比正常对照组增高(P<0.01);灵芝孢子粉组N-cadherins含量比癫痫模型组下降(P<0.01)。同时癫痫模型组大脑海马和皮质NT-4含量比正常对照组增加(P<0.05);灵芝孢子粉组NT-4含量比癫痫模型组增加(P<0.01)。结论: 灵芝孢子粉能够降低N-cadherin的表达,调整病变神经元兴奋性,起到抗癫痫作用,还能增强NT-4的表达从而减轻癫痫发作对神经系统的损伤。     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑IGF-1、NF-κB表达及神经细胞凋亡的影响

目的： 观察和探讨灵芝孢子粉对戊四氮（PTZ）致痫大鼠脑胰岛素样生长因子-1（IGF-1）、核转录因子-κB（NF-κB）蛋白表达及神经细胞凋亡的影响。方法： 用亚惊厥剂量的PTZ复制大鼠慢性癫痫模型，用药组以灵芝孢子粉灌胃，记录癫痫发作的潜伏期及持续时间，采用免疫组织化学和TUNEL法分别检测脑IGF-1、NF-κB/P65的免疫反应性和神经细胞凋亡情况。结果： 大鼠海马和皮质区每高倍视野（×400）下平均凋亡细胞数模型组（18.80±2.13、16.87±2.00）明显多于对照组（0.97±0.52、0.58±0.25），IGF-1、 NF-κB/P65蛋白表达模型组明显高于对照组（均P<0.01）；在造模第17、21、25 d时用药组较模型组癫痫发作的潜伏期有所延长（分别为P<0.05，P<0.05，P<0.01），海马和皮质区凋亡细胞数用药组（12.30±2.46、10.48±1.33）明显少于模型组，NF-κB/P65蛋白表达用药组低于模型组，而IGF-1的免疫反应性用药组明显强于模型组。结论： IGF-1、NF-κB 及神经细胞凋亡均可能参与了PTZ致痫的发生发展过程,灵芝孢子粉能明显抑制NF-κB蛋白的表达，增强IGF-1的免疫反应性，可能是其对癫痫所致神经细胞凋亡有明显抑制，从而对神经细胞起保护作用的机制之一。     

灵芝孢子粉对戊四氮致痫大鼠脑组织GDNF与NT-3表达的影响

目的:观察和探讨灵芝孢子粉干预后戊四氮(PTZ)致痫大鼠皮质和海马区胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和神经营养因子-3(NT-3)的变化,进一步研究癫痫的发病机制及灵芝孢子粉的作用机制。方法:Wistar大鼠30只,随机分为正常对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉治疗组,每组10只。模型组和治疗组采用PTZ腹腔注射制作Wistar大鼠慢性点燃模型。实验后断头迅速取脑,采用免疫组化方法检测皮质和海马区GDNF和NT-3表达的变化;同时用Westernblotting检测海马各指标蛋白的变化。结果:灵芝孢子粉干预后,免疫组化显示:皮质和海马区GDNF和NT-3较癫痫模型组明显增加;Western blotting检测显示:海马中GDNF和NT-3表达较癫痫组显著增加。结论:灵芝孢子粉能够增强GDNF和NT-3的表达从而减轻癫痫发作给神经系统带来的损伤,所以灵芝孢子粉可能具有减轻痫性发作、保护神经元的作用。     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑组织细胞色素C、线粒体钙、HSP70和BDNF的影响

目的: 研究灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)、细胞色素C、热休克蛋白70(HSP70)、线粒体Ca²⁺和脑源性神经营养因子(BDNF)的影响,探讨灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑细胞的保护作用机制。方法: 用亚惊厥剂量的戊四氮(PTZ)复制癫痫慢性模型,采用火焰原子吸收法测定脑组织线粒体Ca²⁺的含量,分光光度计比色法测定SOD的活性、MDA和细胞色素C含量,免疫组织化学方法检测HSP70和BDNF的表达情况。结果: 与癫痫模型组相比,灵芝孢子粉组线粒体内细胞色素C、线粒体Ca²⁺的含量和HSP70的表达显著增高,而胞浆内细胞色素C含量则明显降低;脑组织SOD和T-AOC的活性明显增加,而MDA含量明显降低。大脑皮质和海马区BDNF阳性细胞数癫痫模型组明显高于正常对照组 (P<0.05); 灵芝孢子粉组皮质和海马区BDNF阳性神经元数目进一步增多,与癫痫模型组相比,差异显著(P<0.05)。结论: 灵芝孢子粉能明显降低癫痫发作对脑细胞线粒体造成的损伤,其作用机制可能是通过清除自由基、增强脑组织的抗氧化能力,从而减轻自由基对线粒体膜的损伤作用,恢复线粒体的能量代谢,减轻脑细胞的损伤与凋亡。     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠学习记忆、caspase-3和livin的影响

目的： 观察灵芝孢子粉对戊四氮（PTZ）致痫大鼠学习记忆变化、caspase-3和livin的影响,探讨癫痫发病机制及灵芝孢子粉的干预作用。方法: 将Wistar大鼠分为对照组、模型组和灵芝孢子粉干预组。用Y迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,用免疫组化染色观察caspase-3和livin的表达,用BI-2000医学图像分析系统比较各蛋白的阳性单位（PU）。结果: 戊四氮点燃后的大鼠学习记忆能力显著下降（P<0.05）。癫痫组海马及皮层caspase-3表达水平增加（P<0.05）,且与livin呈负相关。灵芝孢子粉治疗后学习记忆能力增强,神经元的变性、坏死和凋亡减轻。结论: Caspase-3、livin参与了癫痫后脑组织神经元的凋亡过程,灵芝孢子粉能够提高癫痫大鼠学习记忆能力,这可能与其降低caspase-3表达而保护神经元有关。     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑组织IL-1β与c-Fos的影响

目的： 观察和探讨灵芝孢子粉对癫痫(EP)大鼠脑组织白细胞介素-1β（IL-1β）和c-Fos含量变化的影响。方法: 用放射免疫学方法检测IL-1β水平，用免疫组织化学方法检测c-Fos的表达。结果: 灵芝孢子粉组脑皮质和海马区c-Fos阳性细胞数明显少于癫痫模型组动物，脑组织中IL-1β明显低于癫痫模型组动物。结论: 灵芝孢子粉能够有效降低癫痫大鼠脑组织IL-1β水平，纠正免疫失调而起到抗癫痫作用；灵芝孢子粉能够抑制癫痫大鼠脑组织c-Fos的表达，阻断迟反应基因（LRG）以达到抗癫痫作用。     

灵芝多糖对戊四氮活化海马神经细胞NF-κB变化的影响

目的：本文以新生大鼠的海马神经细胞为研究对象，通过体外培养新生大鼠海马神经细胞, 观察神经细胞生长状况,制备细胞癫痫模型,检测灵芝多糖对癫痫大鼠海马神经细胞的NF-κB变化的影响,进一步探讨癫痫的发病机制及灵芝多糖的作用。方法:将体外培养海马神经细胞随机分为模型组、灵芝多糖处理组、对照组,用免疫荧光化学分析方法检测NF-κB表达的变化。结果:体外培养新生大鼠的海马神经细胞成功，在培养的第7 d，制备细胞癫痫模型，通过免疫细胞荧光化学反应证明戊四氮（PTZ）的作用使NF-κB核表达较灵芝多糖处理组和对照组明显增多，提示海马神经细胞被活化，灵芝多糖处理组较模型组NF-κB核表达少。结论:应用无血清培养基及联合阿糖胞苷培养方法，神经细胞生长良好，获得神经细胞的纯度达90%以上，为神经细胞相关的实验研究提供了良好的模型。灵芝多糖可能通过减少神经细胞内钙离子内流，从而间接抑制PTZ诱导的NF-κB活化，降低神经细胞的兴奋性，达到抗癫痫作用。     

菩人丹超微粉对糖尿病大鼠视网膜神经细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的: 探讨菩人丹超微粉(PRD)对糖尿病大鼠视网膜神经细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法: 36只Wistar大鼠随机分为3组,正常对照组、糖尿病模型组和PRD治疗组,每组12只。糖尿病模型组和PRD治疗组大鼠均采用链脲佐菌素连续腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型。模型成功建立后,PRD治疗组大鼠给予PRD灌胃3个月。采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测大鼠视网膜神经细胞的凋亡;SP免疫组织化学染色法检测视网膜B细胞白血病/淋巴瘤相关抗原2(Bcl-2)、B细胞白血病/淋巴瘤相关抗原相关X蛋白(bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白的表达;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测bcl-2、bax和caspase-3 mRNA的表达。结果: 糖尿病模型组与正常对照组比较,大鼠视网膜神经细胞凋亡指数、Bax、 caspase-3蛋白及mRNA的表达均明显升高(P＜0.01),Bcl-2蛋白及mRNA的表达、Bcl-2/Bax比值显著降低(P＜0.01);PRD治疗组与模型组比较,大鼠视网膜神经细胞凋亡指数、bax、caspase-3蛋白及mRNA的表达均明显降低,Bcl-2 蛋白及mRNA的表达、Bcl-2/Bax比值显著升高(P＜0.01)。结论: PRD可通过上调Bcl-2的表达及下调Bax及caspase-3的表达,抑制糖尿病大鼠视网膜神经细胞的凋亡,发挥对糖尿病视网膜的保护作用。     

雷公藤内酯醇对AD细胞模型海马神经元凋亡的影响

目的:研究雷公藤内酯醇对阿尔茨海默病(AD)细胞模型海马神经元凋亡的影响,探讨雷公藤内酯醇治疗AD的可能机制。方法:用凝聚态Aβ1-40(20μg/ml)刺激的小胶质细胞条件培养液(MCM)作用于培养的大鼠海马神经元,建立AD细胞模型,应用MTT法和TUNEL染色,观察不同剂量的雷公藤内酯醇(5μg/ml和25μg/ml)在不同时程(2 h和24 h)内对AD细胞模型海马神经元凋亡的影响。结果:加药后2 h除模型MCM组海马神经元凋亡数高于正常对照组和正常MCM组(P<0.05)外,其余各组之间海马神经元凋亡数无明显差异。加药后24 h,模型MCM组海马神经元凋亡数较正常对照组和正常MCM组显著增多(P<0.01);低剂量用药MCM组和高剂量用药MCM组海马神经元凋亡数与模型MCM组比较显著降低(P<0.05,P<0.01);高剂量用药MCM组海马神经元凋亡数较低剂量用药MCM组明显降低(P<0.01)。结论:雷公藤内酯醇对AD细胞模型海马神经元的凋亡具有抑制作用。     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

Modes of Inheritance of Errors of Refraction

Eighteen families in which both parents had refractions within the range of +4·0 D to −4·0 D and axial lengths seen in emmetropia (22·3-26·0 mm) showed coefficients of correlation of the order 0·5 indicative of polygenic inheritance. Such coefficients were seen for axial length (0·407) and for the cornea (0·487), but not for the lens (which is known to be yoked to the axial length). No such coefficients were seen in 19 families in which one of the parents had axial length outside the emmetropic range (nine families with long axes and 10 with short axes).

The pattern of polygenic inheritance for emmetropia (completely correlated optical components) and errors of refraction up to 4·0 D (inadequately correlated components: correlation ametropia) follows that seen in stature and other measurable characters. In contrast the high refractive errors with their abnormal axial lengths (component ametropia) are—like the extremes in stature—pathological anomalies with monofactorial inheritance.