慢性阻塞性肺疾病中氧化应激与γ-谷氨酰半胱氨酸合酶

氧化／抗氧化失衡在慢性阻塞性肺疾病的发病中起重要作用,吸烟是引起氧化／抗氧化失衡的主要危险因素,一方面通过核转录因子κB(NF-κB)途径,引起具有伤害作用的促炎症介质基因表达增加,造成组织损伤;另一方面通过活化蛋白(AP-1)引起保护性抗氧化的γ-谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-GCS)活化,它可以上调谷胱甘肽(GSH)的生成,增加机体的抗氧化能力。γ-GCS是决定GSH合成的限速酶。对γ-GCS的研究,尤其足对γ-GCS表达的调控已成为抗氧化研究的执点。     

Nrf2调控γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶表达与慢性阻塞性肺疾病

Nrf2（NF-E2 related factor）在参与细胞抗氧化应激和外源性有毒物质诱导的主要防御机制中发挥重要的作用，是外源性有毒物质和氧化应激的感受器。细胞质Keap1蛋白是Nrf2的负调节因子。Nrf2能调控Ⅱ相解毒酶基因如γ谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）的表达。氧化／抗氧化失衡是慢性阻塞性肺疾病的主要发病机制。谷胱甘肽（GSH）是肺内主要的抗氧化剂，而γ-GCS是GSH的限速酶，因此通过Nrf2途径调控细胞内γ-GCS的表达具有重要作用。     

γ谷氨酰半胱氨酸合成酶在大鼠慢性阻塞性肺疾病中的表达

研究表明,氧化/抗氧化失衡是慢性阻塞性肺疾病(COPD)主要发病机制之一。肺组织中重要的抗氧化剂谷胱甘肽(GSH)对纠正氧化失衡,保护肺组织免受氧化损伤起关键作用。γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γGCS)是GSH合成的限速酶,调控GSH生成的速度和量。为此,我们的实验初步探讨γGCS在大鼠COPD中的作用。材料与方法　雄性Wistar大鼠14只,平均体重(2 0 0±2 0 )g ,随机分为COPD组和对照组,每组7只。每天熏香烟及2次气管内滴入2 0 0 μg脂多糖法制作COPD大鼠动物模型[1] 。按文献[2 ]方法测定γGCS活性。免疫组织化学法测定肺组织c fos、c j…     

γ-GCS和慢性阻塞性肺疾病

氧化 /抗氧化失衡是COPD主要发病机制之一 ,谷胱甘肽 (GSH)是细胞内重要的抗氧化剂 ,对维持肺上皮细胞完整和抗氧化损伤起关键作用。γ 谷氨酰半胱氨酸合成酶 (γ GCS )是GSH合成的限速酶 ,调节细胞内GSH水平。γ GCS活性及基因表达对COPD均有重要意义。     

转化生长因子β1在慢性阻塞性肺疾病γ谷氨酰半胱氨酸合成酶表达调控中的作用

谷胱甘肽（GSH）作为肺最主要的抗氧化剂在肺部抗氧化损伤中发挥着重要作用，γ谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）是GSH生物合成的限速酶。慢性阻塞性肺疾病以患者肺内GSH水平降低和转化生长因子（TGF）哏浓度升高为特征。TGF-β1是GSH合成强有力的抑制因子，这种抑制作用在一定程度上是通过对γ-GCSh编码基因转录过程的调控实现的。TGF—β1下调γ-GCSh表达的分子机制可能与活化蛋白（AP）-1有关。     

γ-GCS的信号传导与慢性阻塞性肺疾病

γ-谷氨酰半胱氨酸合酶（γ-Gcs)是谷胱甘肽(CSH)合成的限速酶,其活性与表达均对慢性阻塞性肺疾病(COPD)有重要意义。1-GCS在基因转录水平上受活化蛋白-1(AP—1)以及核因子kB(NF-KB)的调控。外界刺激因素通过不同信号通路影响1-GCS的表达,丝裂原活化蛋白激酶,G蛋白．P13K,NF—kB等可能在传导中发挥了不同作用,进一步了解γ-Gcs的信号传导可作为防治COPD的新靶点。     

丝裂原活化蛋白激酶、蛋白激酶B和γ谷氨酰半胱氨酸合成酶在慢性阻塞性肺疾病患者肺组织中的表达

我们前期研究表明，γ谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）是体内重要抗氧化剂谷胱甘肽（GSH）的限速酶，在慢性阻塞性肺疾病（COPD）发病中起重要作用。我们观察COPD患肺组织中γ-GCS与蛋白激酶的表达，探讨丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）蛋白激酶B（PKB）信号通路与γ-GCS在COPD发病中的作用。     

慢性阻塞性肺疾病患者γ谷氨酰半胱氨酸合成酶活性及表达的变化

目的　研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者体内氧化/抗氧化状态改变,探讨γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γGCS)及其mRNA在肺内分布及表达变化。方法　(1)收集急性期COPD患者(13例)和普通体检者(9名)血清标本,检测还原型谷胱苷肽(GSH)、活性氧(ROS)、总抗氧化力(TAOC)和γGCS活性;(2)收集肿瘤伴或不伴COPD肺叶切除患者临床标本(COPD组12例,对照组10例),用免疫组化和原位杂交方法检测肺组织中γGCS及γGCSmRNA表达;并进行相关分析。结果(1)急性期COPD患者血清中GSH[(2387±386)mg/ml]降低、ROS[(2463±199)U/ml]增高、TAOC[(534±022)U/ml]降低、γGCS活性[(1922±336)U/ml]增强,与对照组[分别为(3687±634)mg/ml、(1023±112)U/ml、(1136±107)U/ml和(1237±296)U/ml]比较差异均有统计学意义(P均<005);(2)急性期COPD患者血清中GSH、ROS、TAOC、γGCS活性和一秒钟用力呼气容积占预计值百分比(FEV1占预计值%)、一秒钟用力呼气容积/用力肺活量(FEV1/FVC)、动脉血氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)之间无相关性(P>005);(3)原位杂交发现,γGCSmRNA在COPD组肺泡、支气管和炎症细胞中呈高表达[吸光度(A)值半定量分析分别为029±005、031±005和028±006],与对照组(分别为014±003、017±004和020±005)比较差异均     

丝裂原活化蛋白激酶与γ谷氨酰半胱氨酸合成酶在大鼠慢性阻塞性肺疾病肺组织中的表达

我们前期的研究表明了γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GSC)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)和支气管哮喘(简称哮喘)中的重要作用。本组实验探讨细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p-p38与γ-GCS在大鼠COPD中的作用。     

Bach1/Nrf2竞争性调控与慢性阻塞性肺疾病

氧化应激是慢性阻塞性肺疾病（COPD）的主要发病机制之一。谷胱甘肽（GSH）是肺内主要的抗氧化剂，γ-谷氨酰半胱氨酸合酶（γ-GCS）是GSH合成的限速酶。细胞核内Bach1和Nrf2（NF-E2-related factor 2）的平衡能够上调或下调抗氧化酶的基因表达。Keap1、PERK（PKR-like ER kinase）和糖原合成酶激酶3B也可以通过对Nrf2的调控影响γ-GCS的表达。因此Bach1／Nrf2竞争性调控对慢性阻塞性肺疾病的发病和治疗有重要作用。     

慢性阻塞性肺疾病大鼠磷脂酰肌醇-3激酶、蛋白激酶B及γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶表达研究

目的通过观察COPD大鼠中磷脂酰肌醇-3激酶（phosphoinositide-3 kinases,P13K）、蛋白激酶B（protein kinaseB,PKB）与γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（gamma glutamylcysteine synthetase,γ-GCS）的表达,研究P13K、PKB通路和rGCS的关系及其在COPD中可能的参与机制。方法30只健康雄性Wistar大鼠随机分COPD组和对照组。采用每日熏香烟和两次气管内注入脂多糖法制作COPD大鼠模型。检测大鼠肺组织中7-GCS活性,原位杂交检测肺组织中rGCSmRNA的表达,免疫组织化学分析肺组织中P13K、PKB与γ-GCS蛋白水平。结果COPD组大鼠肺组织中γ-GCS差异（P〈0．01）。P13K、PKB与γ-GCS免疫组织化学在COPD组可见肺泡、支气管活性明显高于对照组,组间差异有统计学意义（P〈0．01）。原位杂交示COPD组大鼠支气管,肺泡上皮细胞与小动脉平滑肌细胞7-GCSmRNA广泛表达,与对照组有显著性壁细胞及小血管平滑肌细胞胞浆中皆有蛋白阳性信号表达;图象定量分析示大鼠COPD组P13K、PKB与γ-GCS蛋白表达显著高于对照组（P〈0．01）。直线相关分析得出P13K、p—PKB蛋白表达与γ-GCS活性、mRNA及蛋白表达呈正相关。结论COPD大鼠肺组织7-GCS蛋白和mRNA表达增高,P13K、p-PKB蛋白也有相应高表达,提示P13K、PKB和γ-GCS可能在COPD的发病机制中发挥作用,且可能参与了γ-GCS的信号转导通路。     

谷氨酰半胱氨酸连接酶调节基因多态性与慢性阻塞性肺疾病易感性的关系

目的探讨谷氨酰半胱氨酸连接酶调节(GCLM)基因多态性与血浆γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γGCS)活性及慢性阻塞性肺疾病(COPD)易感性的关系。方法应用聚合酶链反应(PCR)及限制性片段长度多态性分析(RFLP)方法检测106例稳定期吸烟的COPD患者(COPD组)、124名健康吸烟者(C组)及132名健康不吸烟者(H组)GCLM基因-588C/T和-23G/T多态性位点基因型,并用双酶法检测血浆γGCS活性。结果-588CC与-23GG、-588CT与-23GT、-588TT与-23TT基因型在个体间分布一致。COPD组-588位点CC基因型和C等位基因频率(62.3%、79.2%)显著低于C组(84.7%、91.9%)和H组(78.8%、89.0%,P均<0.01)。吸烟者-588T等位基因相对于C等位基因患COPD的比值比(OR值)为3.0,95%可信区间为1.7～5.3。C组[(282±58)U/mg·prot]和COPD组[(224±54)U/mg·prot]血浆γGCS活性显著高于H组[(157±26)U/mg·prot,P<0.01],其中C组高于COPD组(P<0.01)。H组-588CC与CT/TTγGCS活性比较差异无统计学意义[(158±27)、(153±25)U/mg·prot,P>0.05],而C组[(292±54)、(225±45)U/mg·prot]和COPD组[(245±52)、(188±36)U/mg·prot]中-588CCγGCS活性显著高于CT/TT(P<0.01)。结论GCLM-588C/T、-23G/T位点多态性与血浆γGCS活性及COPD易感性相关。     

N-乙酰半胱氨酸在慢性阻塞性肺疾病中的作用机制

慢性阻塞性肺疾病（COPD）是一种以进行性发展的不完全可逆的气流受限为特征的慢性疾病,是一种常见的呼吸系统疾病,近年来有初步的研究表明N-乙酰半胱氨酸（NAC）能预防气道的炎症,减轻COPD患者的症状,延缓病情的发展,本文对其作用机制作一探讨。     

γ-GCS和慢性阻塞性肺疾病

氧化／抗氧化失衡是COPD主要发病机制之一，谷胱甘肽(GSH)是细胞内重要的抗氧化剂。对维持肺上皮细胞完整和抗氧化损伤起关键作用。γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)是GSH合成的限速酶，调节细胞内GSH水平。γ-GCS活性及基因表达对COPD均有重要意义。     

γ-谷氨酰转肽酶与慢性阻塞性肺疾病的关系研究进展

COPD是一种慢性进行的具有气流受限特征的疾病,气流受限不完全可逆、呈进行性发展,其中氧化应激和慢性系统性炎症是COPD的主要特征.r谷氨酰转肽酶在正常范围内可作为反应氧化应激和/或各种环境化学物质而影响肺功能的生物指标,根据其生物学特性,探讨其与COPD的关系.     

慢性阻塞性肺疾病患者同型半胱氨酸水平变化及意义探讨

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者不同病期血浆同型半胱氨酸、血浆谷胱甘肽(GSH)水平的变化,以了解同型半胱氨酸在COPD患者发生、发展过程中的作用及其临床意义.方法 2006年1月至2008年6月收集46例COPD急性发作期患者(COPD急性发作期组)、45例COPD缓解期患者(COPD缓解期组)及38例健康受试者(健康对照组).测定各组的多项指标:吸烟指数、体质量指数、血浆同型半胱氨酸、血浆GSH、肺功能和动脉血气.结果 ①COPD急性发作期组血浆同型半胱氨酸高于健康对照组和COPD缓解期组,(31.93±26.19) μmol/L vs (10.79±2.32) μmol/L,(21.98±9.13) μmol/L,三组比较差异有统计学意义(F=13.08,P＜0.01).②COPD缓解期组血浆GSH明显低于健康对照组和COPD急性发作期组,(71.72±76.36) mg/L vs (166.38±63.51) mg/L,(145.18±80.41) mg/L,三组比较差异有统计学意义(F=19.11,P＜0.01).③COPD患者不论急性发作期,还是缓解期,血浆同型半胱氨酸与GSH均呈明显负相关(COPD急性发作期:r=0.579,P＜0.01;COPD缓解期:r=-0.721,P＜0.01);COPD急性发作期血浆GSH与第一秒用力呼气容积/用力肺活量呈正相关(r=0.488,P＜0.05).结论 COPD患者存在高同型半胱氨酸血症,血浆同型半胱氨酸参与COPD的氧化应激.     

一氧化氮合酶在吸烟导致慢性阻塞性肺疾病中作用机制的初步观察

目的 建立吸烟引起慢性阻塞性肺疾病（COPD）的地鼠模型,观察一氧化氮合酶（NOS）在肺内的表达情况,以探讨NOS在吸烟导致COPD中的作用机制。方法 雄性叙利亚金黄地鼠15只,每天吸烟2次,每次10支香烟。每周5d,连续3个月。同时设不吸烟正常对照组10只。分别于吸烟1个月、2个月和3个月后处死动物,行肺组织病理学检查并应用显微－微机图象处理系统进行形态定量。应用免疫组化方法观察肺内诱生型NOS（iNOS)和内皮型NOS（eNOS)的表达情况。结果 吸烟组于3个月时出现慢性支气管炎和肺气肿的病理改变,免疫组化结果表明支气管上皮及肺泡巨噬细胞iNOS呈强阳性表达,eNOS则呈弱阳性表达。结论 吸烟可引起iNOS的过量表达,引起肺部损伤,导致COPD的发生,同时大量吸烟可导致肺内小动脉内皮细胞eNOS的表达减弱,有能引起肺动脉压的升高。     

核因子相关因子2及其蛋白激酶与γ谷氨酰半胱氨酸合成酶在慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织的表达

本室前期研究结果显示，γ谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）作为体内重要抗氧化剂谷胱甘肽的限速酶，在慢性阻塞性肺疾病（COPD）的抗氧化机制中发挥了重要的作用。红系衍生的核因子相关因子2（NRF2）是新近发现的氧化应激反应重要的转录激活因子，在氧化应激反应中处于核心地位。国外报道蛋白激酶B（PKB）、非典型蛋白激酶c（aPKC）信号通路可能在不同的角度对NRF2的生物学功能进行调节。目前对NRF2的信号转导通路的研究很少涉及到整体的模型，不同实验室在不同的组织细胞中所得结果不同。我们通过检测COPD大鼠肺组织中PKB、aPKCλ/l、NRF2和γ-GCS的表达及相关作用，以探讨其在COPD抗氧化机制中的作用。     

γ-谷氨酰转肽酶在慢性阻塞性肺疾病患者血清中的表达变化及诊断价值

目的研究血清γ-谷氨酰转肽酶(GGT)的变化与慢性阻塞性肺疾病(COPD)之间的关系,探讨其诊断价值。方法收集行肺功能检查的COPD患者及健康体检者,排除相关剔除标准后分为两组:COPD患者113例、健康体检者119例。检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素及GGT水平。采用肺功能仪对受试者进行第1秒用力呼气容积(FEV1)占预计值的百分比(FEV1%)、FEV1/用力肺活量(FVC)等的检测。对两组间相关资料进行比较并研究各因素与血清GGT水平的相关性。绘制受试者工作特征曲线(ROC),并计算曲线下面积(AUC)及诊断界限值(cutoff)。结果 COPD组的GGT水平明显高于对照组,其水平与FEV1/FVC呈负相关,而肝功能的其他指标未发生明显变化。GGT的AUC值高于0.7,其在cut off为21.5时有较好的敏感度及特异度。结论血清GGT与COPD发病相关,它可作为预测及筛查COPD的新的参考指标。     

N-乙酰半胱氨酸的抗氧化特性及对慢性阻塞性肺疾病的治疗作用

氧化应激是慢性阻塞性肺疾病(COPD)的主要发病机制之一,它引起肺内氧化/抗氧化失衡、肺部炎症和结构的改变、局部免疫反应等。N-乙酰半胱氨酸(NAC)是最常用的抗氧化剂,它有抗氧化、抑制肺部炎症、抑制蛋白酶活性、防止气道重构、祛痰、抑菌、免疫保护等多种作用。本文就COPD时氧化应激引起的改变及NAC的作用等方面的研究作一综述。