Kiss-1在胃癌中的表达及意义

目的探讨胃癌中Kiss-1蛋白的表达及其在胃癌发生、发展及转移中的作用。方法应用流式细胞术检测130例胃癌标本和130例正常胃黏膜组织(对照组)中Kiss-1蛋白的表达,分析其在不同临床病理特征中的关系。结果 Kiss-1在胃癌组织中的表达量明显低于正常胃黏膜组织,Kiss-1在不同浸润深度、有无淋巴结转移的胃癌组织中的表达有显著性差异。结论 Kiss-1在胃癌发展中起重要作用,术后检测对判断胃癌预后可能有重要价值。     

基质金属蛋白酶-9在胃癌中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达在胃癌发生、发展及转移中的作用。方法应用流式细胞术检测54例胃癌标本中MMP-9的表达。结果 MMP-9在胃癌组织中的表达量明显高于正常胃黏膜组织,在不同分化程度、不同浸润深度、有无淋巴结转移的胃癌组织之间MMP-9表达均有显著性差异(P均<0.05)。结论胃癌组织中MMP-9高表达,MMP-9在胃癌发展中起重要作用。     

HSP70、ICAM-1在胃腺癌中的表达及意义研究

目的：研究HSP70、ICAM-1在胃腺癌中的表达及临床意义。方法：应用免疫组化S—P法检测60例胃腺癌手术切除标本,其中维吾尔族30例,汉族30例,所有患者术前未行放疗和化疗,高、中、低分化腺癌例数分别为11、28、21例。淋巴结有转移19例,未见淋巴结转移41例。另选切端正常黏膜组织10例作对照。所有标本均经10％福尔马林固定后常规石蜡包埋。以上病例均经病理检查,诊断明确无误。观察HSP70、ICAM-1在胃腺癌中的表达及其与临床的关系。结果：（1）60例胃腺癌组织中HSP70、ICAM-1的表达阳性检m率分别为：35．0％（21／60）、51．7％（31／60）。而在胃粘膜正常组织中,HSP70、ICAM-1的表达阳性检出率分别为：0（0／10）、10％（1／10）。（2）不同分化程度胃癌组织中HSP70高、中、低分化腺癌阳性表达率分别为18．23％、25．O％、57．1％,x。值是4．677,P〈0．05。ICAM-1在高、中、低分化腺癌不同分化中阳性表达率分别为45．5％、32．1％、81．O％,X2值是5．421,P〈0．05,统计学均有显著性差异。（3）胃腺癌淋巴结有癌转移及无癌转移的HSP70阳性表达率分别为47．4％、29．3％,x。值是1．956,P〉0．05。统计学无显著性差异。胃腺癌淋巴结有癌转移及无癌转移的ICAM-1阳性表达率分别为63．2％、46．3％,x。值是3．143,P〈0．05。统计学有显著性差异。（4）胃腺癌临床分期为艮。及T2-4 HSP70的表达阳性率分别为18．9％、60．9％,X2值是7．127,P〈0．05。胃腺癌临床分期为艮,及1乙的ICAM-1表达阳性率分别为35．1％、78．3％,X2值是6．442,P〈0．05。结论：不同分化程度的胃腺癌HSP70、ICAM-1在低分化腺癌高表达提示HSP70、ICAM-1与胃腺癌的恶性程度有相关性,淋巴结转移、无转移胃腺癌组织中,ICAM-1的表达提示其与淋巴结转移关系密切。     

葛根素对糖尿病大鼠肾功能及肾组织MMP-10与TIMP-1表达的影响

目的 探讨葛根素对糖尿病大鼠肾小球结构、功能及肾组织基质金属蛋白酶10(MMP—10)、基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP—1)表达的影响。方法 ip链脲佐菌素(65mg／kg)诱发糖尿病大鼠模型，每日ip葛根素注射液，共16周。给药结束后，收集尿液，测定尿蛋白(Upro)，尿肌酐(Ucr)含量；腹主动脉取血，测定血糖(Glu)，血肌酐(Scr)，尿素氮(BUN)含量；采用原位杂交法检测肾小球MMP—10，TIMP—1 mRNA表达，流式细胞术和免疫组化检测肾皮质MMP—10、TIMP—1及Ⅳ型胶原、层黏连蛋白(LN)表达。结果 糖尿病组较对照组肾小球MMP—10、TIMP—1 mRNA及蛋白表达增加，肾皮质MMP—10，TIMP—1及Ⅳ型胶原、LN表达亦增加；反映肾功能的各项生化指标水平升高。葛根素用药组较糖尿病组MMT—10、TIMP—1 mRNA、蛋白及Ⅳ型胶原、LN表达减少；肾功能有所改善。结论 葛根素对糖尿病大鼠肾结构功能具有保护作用，除降低血糖外，调节肾小球MMP—10，TIMP—1表达从而减轻肾小球细胞外基质沉积也可能是其作用途径之一。     

川芎嗪对鼠骨关节炎关节软骨MMP-1、TIMP-1表达的影响

目的:观察关节内注射川芎嗪对鼠骨关节炎(Osteoarthritis,OA)模型关节软骨退变及软骨中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)表达的影响,探讨川芎嗪对OA的修复作用。方法:50只SD大鼠随机分为空白组、模型组、透明质酸钠组、丹参组和川芎嗪组5组:除空白对照组外,其余四组作左侧跟腱切除建立右膝OA模型。造模后第5周开始,川芎嗪组于右膝关节内注射盐酸川芎嗪注射液作为治疗,于第12周末处死动物,取股骨外髁软骨标本,进行HE染色,光镜下观察其病理改变,以免疫组织化学法检测关节软骨中的MMP-1、TIMP-1水平。结果:川芎嗪组关节软骨退变减缓,Mankin’s评分及软骨中MMP-1的水平非常显著低于模型组(P<0.01),TIMP-1水平较模型组显著上升(P<0.01)。结论:川芎嗪能明显降低OA软骨退变的程度,明显降低OA软骨中MMP-1的水平,增加TIMP-1的水平,具有保护和修复早期OA关节软骨的作用,可延缓OA的病理过程,有可能成为防治OA的良好药物。     

中药川贝母对哮喘模型小鼠MMP-2,MMP-9和TIMP-1的影响

观察中药川贝母对哮喘模型小鼠气道重塑及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的影响,探讨其治疗哮喘的作用机制。BALB/C小鼠,随机分为正常组、模型组、高剂量组、低剂量组、阳性对照组。除正常组外,其他各组用卵蛋白(OVA)建立哮喘小鼠模型。造模成功后高剂量组和低剂量组分别按18.0,9.0 mg·kg-1剂量给予中药川贝母灌胃;阳性对照组于腹腔注射0.5 mg·kg-1剂量地塞米松;正常组和模型组等量生理盐水灌胃,每天1次,连续28 d。观察各组小鼠气道反应性的变化,支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和白细胞分类的变化以及支气管管壁厚度和支气管平滑肌厚度的变化;ELISA法检测MMP-2,MMP-9,TIMP-1水平;RT-PCR检测MMP-2,MMP-9,TIMP-1 mRNA的表达。结果显示,模型组气道反应性、BALF中细胞总数以及中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞计数、支气管管壁厚度和支气管平滑肌厚度明显高于正常组(P0.01),高剂量组和低剂量组与阳性对照组则明显低于模型组(P0.05或P0.01);模型组MMP-2,MMP-9和TIMP-1水平和mRNA表达明显高于正常组(P0.01),高剂量组和低剂量组与阳性对照组则明显低于模型组,差异具有统计学意义(P0.01)。推断中药川贝母可改善哮喘模型小鼠气道重塑状态,其机制可能与其降低MMP-2,MMP-9和TIMP-1有关。     

血清TNF-α、MMP-9和骨组织MMP-1 mRNA在慢性阻塞性肺病西北寒燥证中的表达

目的 观察慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary diseases,COPD)西北寒燥证模型大鼠血清TNF-α、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase,MMP-9)含量和骨组织MMP-1 mRNA表达,为COPD西北寒燥证的整体治疗提供参考。方法 21只雄性Wistar大鼠随机分为3组,即正常对照组、COPD模型组和COPD西北寒燥证组,每组7只。利用气管滴注弹性蛋白酶结合熏烟的方法建立COPD模型,气管滴注弹性蛋白酶、熏烟结合寒燥环境应激的方法建立COPD西北寒燥证模型。采用ELISA法测定血清中TNF-α和MMP-9含量,荧光定量PCR法检测骨组织中MMP-1 mRNA表达。结果 与正常对照组比较,COPD西北寒燥证组血清MMP-9含量明显升高(P<0.05);COPD西北寒燥证组和COPD模型组骨组织中MMP-1 mRNA表达也明显升高(P<0.01,P<0.05),且COPD西北寒燥证组MMP-1 mRNA表达明显高于COPD模型组(P<0.01)。3组血清TNF-α含量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 西北寒燥证可以增加COPD模型大鼠血清MMP-9含量和骨组织MMP-1 mRNA表达,这可能是西北寒燥环境导致COPD增加骨吸收和骨降解的原因之一。     

银杏叶提取物对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织MMP-1及MMP-9表达的影响

目的:研究银杏叶提取物(GBE)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法:将清洁级同龄雄性Wistar大鼠36只称重后,随机分为正常对照组(A组)、COPD对照组(B组)、GBE早期干预组(C组)、GBE后期干预组(D组)、红霉素早期干预组(E组)、红霉素后期干预组(F),每组6只。B、C、D、E和F五组采用烟雾吸入、脂多糖气管内注入等因素对大鼠进行COPD造模,C和D组分别在1~14 d和29~42 d腹腔内注射GBE[0.40 m L/(kg·d)],E和F组分别在1~14 d和29~42 d腹腔内注射红霉素(10 mg/kg2),43 d后采集各组大鼠肺组织,采用免疫组织化学分析法检测各组大鼠肺组织MMP-1和MMP-9的表达及含量。结果:B、C、D、E和F组大鼠肺组织MMP-1及MMP-9阳性细胞表达率均高于A组,B组的MMP-9阳性细胞表达率高于其他组。结论:GBE可通过降低大鼠肺组织中MMP-9的表达,从而预防和减少COPD大鼠肺组织重塑及纤维化。在通过MMPs在COPD大鼠肺组织中的表达来判断肺组织重塑及肺纤维化上,MMP-9与MMP-1相比较具有更高的敏感性。红霉素在降低MMP-1及MMP-9在COPD大鼠肺组织中的表达作用不明显,因此红霉素抗肺组织纤维化的作用机制还有待进一步研究。     

心乐胶囊对病毒性心肌炎小鼠MMP-1、TIMP-1蛋白水平的影响

目的:通过观察心乐胶囊对病毒性心肌炎小鼠基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)蛋白水平的影响。方法:取60只BALB/c雄性小鼠随机分成六组:空白对照组、模型对照组、玉丹荣心丸组、心乐胶囊低、中、高剂量组。除空白组外,后5组造模。后药物组用药物干预15天,将小鼠处死后迅速留取心脏标本,采用免疫组化SP二步法检测小鼠心肌MMP-1、TIMP-1的表达。结果:心乐胶囊各剂量组及阳性药对照组均能降低柯萨奇病毒致病毒性心肌炎小鼠心肌组织MMP-1含量、同时增高心肌组织TIMP-1含量。心乐胶囊各剂量组与模型组相比有显著差异P0.01,其中以心乐胶囊高剂量组最为明显。结论:心乐胶囊具有抑制MMP-1,提高TIMP-1的活性的作用,可以减轻心肌炎小鼠的心肌损害,有效防止心肌纤维化。     

桃叶珊瑚苷对光老化皮肤成纤维细胞MMP-1和TIMP-1表达的影响

目的探讨桃叶珊瑚苷对光老化皮肤成纤维细胞(ESF-1)基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和MMP-1抑制剂(TIMP-1)表达的影响及其对光老化ESF-1细胞的保护作用。方法以不同浓度桃叶珊瑚苷处理用20 J/cm2的UVA照射建立的光老化ESF-1细胞。MTT法检测细胞活力,分别检测细胞中SOD活性、GSH-Px活性和MDA水平。RT-PCR法检测细胞中ERK1、ERK2、MMP-1及TIMP-1 mRNA的表达水平。酶联免疫法检测细胞上清液中MMP-1和TIMP-1的水平。结果 UVA照射ESF-1细胞后,其细胞活力、SOD和GSH-Px活性降低、MDA水平升高,ERK1、ERK2、MMP-1 mRNA的表达水平升高,TIMP-1 mRNA的表达水平降低、MMP-1水平升高、TIMP-1水平降低(P<0.01);1×10-5mol/L和1×10-6mol/L桃叶珊瑚苷能够显著改善ESF-1细胞的光损伤(P<0.05或P<0.01)。结论桃叶珊瑚苷能调节光老化ESF-1细胞MMP-1和TIMP-1的表达,减轻UVA对ESF-1细胞的损伤。     

参芪泄浊饮对腺嘌呤肾间质纤维化模型大鼠肾组织MMP-9、TIMP-1基因表达的影响

目的:观察参芪泄浊饮对慢性肾衰大鼠肾组织基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)基因表达的影响。方法:采用Yokozawa法复制慢性肾衰大鼠模型,随机分为参芪泄浊饮高剂量组、常规剂量组、氯沙坦组、模型组及空白组,高剂量组、常规剂量组、氯沙坦组分别予参芪泄浊饮水煎液20 m L/(kg·d)、参芪泄浊饮10 m L/(kg·d)、氯沙坦9 mg/(kg·d),模型组与空白组大鼠均予纯净水10 m L/(kg·d),连续给药8周,全部大鼠麻醉后腹腔采血,取左肾,ELLISA法测量血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、丙氨酸转氨酶(ALT)并采用荧光定量PCR检测肾脏MMP-9、TIMP-1 mRNA的表达。结果:1高剂量组Scr水平明显低于常规剂量组、氯沙坦组及模型组;常规剂量组与氯沙坦组无明显差别,且均低于模型组;2高剂量组MMP-9 mRNA表达水平明显高于常规剂量组、氯沙坦组及模型组;常规剂量组与氯沙坦组无明显差别,且均高于模型组;高剂量组TIMP-1 mRNA表达水平明显低于常规剂量组、氯沙坦组及模型组;常规剂量组与氯沙坦组无明显差别,且均低于模型组;3各组ALT水平较空白组比较均无显著差别。结论:参芪泄浊饮可通过调节MMP-9及TIMP-1表达来缓解慢性肾衰肾脏功能的恶化。     

生肌化瘀方对糖尿病大鼠皮肤溃疡组织中MMP-3及TIMP-1表达的影响

目的探讨生肌化瘀方对糖尿病大鼠皮肤溃疡创面组织中基质金属蛋白酶-3（MMP-3）和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）表达的影响效应。方法以糖尿病大鼠皮肤溃疡模型为研究对象,采用不同配伍比例的生肌化瘀方（生肌方与化瘀方分别按2：1、1：1和1：2比例组合）进行干预,采用West—ernblot法检测皮肤渍疡组织中MMP．3蛋白表达,免疫组化法检测TIMP．1蛋白表达。结果在成模各时间点,各组糖尿病大鼠血糖水平差异无统计学意义（P〉0．05）,而与正常创面组比较显著升高（P〈0．01）。创面面积处理前后差值方面,生肌化瘀3号方组、正常创面组均明显优于糖尿病溃疡模型组（P〈0．05）。Westernblot法检测结果显示：生肌化瘀2号方组MMP-3蛋白表达高于生肌化瘀3号方组（P〈0．05）。免疫组化法检测结果显示：生肌化瘀2号方组TlMP．1蛋白的表达低于糖尿病溃疡模型组和生肌化瘀1号方组（P〈0．05）,生肌化瘀3号方组的表达高于生肌化瘀2号方组（P〈0．01）。结论在创面修复早期,采用生肌化瘀3号方生肌方有利于促进创面愈合;在创面愈合晚期,采用生肌化瘀2号方可能有利于抑制病理性瘢痕的形成。     

膈下逐瘀汤逆转猪血清诱导大鼠肝纤维化的作用及机制研究

目的:通过观察膈下逐瘀汤对实验性肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)及金属蛋白酶组织抑制因子1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)的影响,探讨其抗肝纤维化的可能机制。方法:大鼠随机分为空白对照组、膈下逐瘀汤组、猪血清组、猪血清+膈下逐瘀汤组。猪血清2.0 mL.kg-1腹腔注射,每周2次共12周诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,同时膈下逐瘀汤每天按7.37 g.kg-1灌胃给药12周。Masson染色法观察肝组织病理学改变,ELISA检测肝组织MMP-13和TIMP-1含量,实时定量Rt-PCR检测肝组织MMP-13和TIMP-1 mRNA表达。结果:猪血清组肝组织胶原面积为(10.38±2.01)%;MMP-13蛋白(14.05±2.64)ng.g-1;MMP-13 mRNA(1.91±0.73)倍;TIMP-1蛋白(14.91±1.07)ng.g-1;TIMP1 mRNA(18.40±2.84)倍。与猪血清组比较,膈下逐瘀汤给药可显著降低肝组织胶原面积(6.66±1.04)%(P<0.05),增加肝组织MMP-13蛋白(20.03±2.14)ng.g-1和MMP-13mRNA(4.12±0.59)倍(P<0.05),降低肝组织TIMP-1蛋白(13.47±1.22)ng.g-1和TIMP-1mRNA(4.89±0.74)倍(P<0.05)。结论:膈下逐瘀汤可有效地逆转实验性肝纤维化大鼠肝组织胶原纤维含量,其机制可能与调节MMP-13和TIMP-1的表达有关。     

妇科止血消痛颗粒对产后子宫复旧不全大鼠模型子宫MMP-9、TIMP-1mRNA表达的影响

目的观察妇科止血消痛颗粒对产后子宫复旧不全大鼠子宫组织基质金属蛋白-9（MMP-9）、组织金属蛋白酶抑制物-1（TIMP-1）表达的影响,探讨妇科止血消痛颗粒治疗产后子宫复旧不全的机制。方法建立大鼠产后子宫复旧不全病理模型,随机分为模型组、产妇康组及妇科止血消痛颗粒高、中、低剂量组。造模第1日开始各给药组分别灌胃相应药物,空白组、模型组予蒸馏水灌胃。均每日1次,连续7d。采用原位杂交法检测各组大鼠子宫组织中MMP-9、TIMP-1基因的表达水平。结果各组大鼠子宫内膜中均可检测到MMP-9和TIMP-1的杂交信号。模型组MMP-9表达强度明显超过空白组,TIMP-1表达弱于空白组。妇科止血消痛颗粒高、中、低剂量组及产妇康组,MMP-9 mRNA的表达明显降低（P〈0．05,P〈0．01）;妇科止血消痛颗粒中、低剂量组与产妇康组MMP-9 mRNA的表达强度相似,但均低于妇科止血消痛颗粒高剂量组的表达强度（P〈0．01）。妇科止血消痛颗粒高剂量组及产妇康组TIMP-1 mRNA的表达明显升高（P〈0．05）,且表达相似。结论妇科止血消痛颗粒通过抑制MMP-9的高表达,升高TIMP-1的低表达,从而发挥治疗产后子宫复旧不全的作用。     

毒热平注射液对流感病毒性肺炎小鼠肺组织MMP-9及TIMP-1含量的影响

目的 观察毒热平注射液对流感病毒性肺炎小鼠肺组织中基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制物1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1)的影响.方法 66只ICR小鼠随机分为正常组、模型组、毒热平低剂量组(0.435 mg/d)、中剂量组(0.870 mg/d)、高剂量组(1.740 mg/d)和利巴韦林对照组(对照组,2.500 mg/d),每组11只.以经鼻吸入流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株(FM1)复制小鼠流感病毒性肺炎模型.感染后当日开始腹腔注射给药,0.3 mL/次,1次/天.5天后处死小鼠,计算肺指数;制作切片,光镜观察肺组织病理形态变化;采用ELISA双抗体夹心法测定肺组织匀浆液中MMP-9及TIMP-1含量.结果 与正常组比较,模型组小鼠肺组织出现明显炎性病变,其肺指数、肺组织MMP-9及MMP-9/TIMP-1显著升高(P＜0.01),而TIMP-1含量变化不明显(P＞0.05);与模型组比较,毒热平低、中剂量组和对照组MMP-9降低(P＜0.01),各剂量组和对照组TIMP-1升高(P＜0.01),MMP-9/TIMP-1降低(P＜0.01).结论 毒热平注射液可通过降低流感病毒性肺炎小鼠肺组织中MMP-9含量,提高TIMP-1含量,调节两者比值,从而减轻肺组织炎性损伤.