腔肠素抗流感病毒研究

目的 对海洋来源的化合物腔肠素进行体外抗流感病毒活性研究。方法 细胞病变效应(CPE)抑制实验评价腔肠素对不同流感病毒株的抗病毒作用。CPE实验检测腔肠素细胞毒性和抗病毒作用方式并结合血凝抑制实验、神经氨酸酶(NA)活性实验及微基因组实验初步探究腔肠素的作用靶点。结果 腔肠素体外对不同流感病毒株均有良好抗病毒作用,其中对PR8的抑制作用最强,IC₅₀为5.0μmol·L^-1且细胞毒较小,CC₅₀为144.1μmol·L^-1。通过不同作用方式以及不同作用时间的实验显示,腔肠素预先处理流感病毒以及在病毒感染后加入均有良好抗病毒作用,并且在病毒吸附后0～3 h的抑制效果较好。用腔肠素预处理病毒后可以呈剂量依赖性地抑制血凝素(HA)的活力。故腔肠素可能是通过与病毒HA相互作用来阻断流感病毒的进入,其作用位点可能为HA蛋白HA2链的72、74位谷氨酸。结论 腔肠素具有良好的体外抗甲型流感病毒效果,为海洋来源的小分子化合物的开发与改造提供了借鉴,为寻找新型抗流感病毒药物提供新思路。     

黄芩苷体外对流感病毒、单纯疱疹病毒和柯萨奇病毒的抑制作用

目的探讨黄芩苷对流感病毒甲、乙型、单纯疱疹病毒Ⅰ、Ⅱ型和柯萨奇病毒B3型的抑制作用.方法流感病毒用狗肾细胞(MDCK)培养,单纯疱疹病毒和柯萨奇病毒用非洲绿猴肾细胞(VERO)培养.感染病毒同时及前后不同时间加入黄芩苷,观察其对病毒引起的细胞病理变化(CPE)的抑制作用.实验设阳性药物对照,流感病毒和柯萨奇病毒用利巴韦林,单纯疱疹病毒用伐昔洛韦.结果黄芩苷在细胞培养内对2株流感甲型病毒感染同时或感染后加药,均能明显抑制细胞病变,但对2株流感乙型病毒无抑制作用.黄芩苷与柯萨奇B3型病毒同时加入细胞培养,对10～100半数感染量(TCID50)感染均有效,但感染后加药则仅对10TCID50感染有效.黄芩苷2 000μg·mL-1无毒浓度对单纯疱疹Ⅰ、Ⅱ型病毒感染均无抑制作用,预先处理细胞培养对3种病毒感染均无预防作用.结论黄芩苷体外对流感甲型病毒和柯萨奇B3型病毒感染有抑制细胞病变的作用.     

1999～2000年南昌地区流感的流行研究

目的：分离流感病毒，获得优势病毒毒株。方法：采用鸡胚和MDCK细胞分离病毒，使用血凝抑制试验（HAI）和间接免疫酶试验（IIE）鉴定病毒，结果：分离到20株流感病毒，其中含甲3、甲1和乙型流感病毒。1994年4月出现的流行，由乙型流感病毒引起，2000年3月发生的流行， 由甲1型流感病毒所致，结论：流感病毒甲型和乙型均不害不断变异，产生新毒株，引起流行，监测流感仍仍然十分重要。     

苦杏仁苷对流感病毒FM1诱导的微血管内皮细胞通透性的影响

目的 研究苦杏仁苷对甲型流感病毒FM1诱导的微血管内皮细胞(PMVEC)通透性增加的影响及其作用机制。方法 将PMVEC随机分为对照组、模型组(100 TCID₅₀ FM1)、苦杏仁苷低剂量组(100 TCID₅₀ FM1+4.0 mg·mL^-1苦杏仁苷)、苦杏仁苷中剂量组(100 TCID₅₀ FM1+8.0 mg·mL^-1苦杏仁苷)、苦杏仁苷高剂量组(100 TCID₅₀ FM1+16.0 mg·mL^-1苦杏仁苷)及740Y-P组(100 TCID₅₀ FM1+16.0 mg·mL^-1苦杏仁苷+50μmol·L^-1的PI3K激活药740Y-P)。以噻唑蓝(MTT)法、Transwell法、酶联免疫吸附测定(ELISA)法、蛋白质印迹法分别检测各组细胞增殖、细胞通透性、炎性因子表达水平和蛋白表达水平。结果 对照组、模型组和苦杏仁苷低、中、高剂量组的白细胞介素-6(IL...     

抗流感病毒化学药物的临床应用

流行性感冒(简称流感),是由流感病毒引起的一种呼吸道传染病。流感病毒属正粘病毒科,系单链RNA病毒,分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型,根据表面糖蛋白抗原结构和基因编码的不同,已经发现甲型流感病毒存在15种血凝素(HA)亚型和9种神经氨酸酶(NA)亚型,常引起流感大暴发。乙型流感病毒HA和NA型均只有一种,因此它没有亚     

1997～1998年流感流行季节使用流感疫苗成分的建议

1996年10月至1997年2月,全球分离到的甲型流感病毒主要为甲型流感(H3N2)亚型,而亚洲则以乙型流感为主.对流感病毒分离株的抗原性分析表明,甲型流感(H3N2)病毒分离株的抗原性与类A/武汉/359/95相近;甲型流感(H1N1)病毒分离株的抗原性与类A/巴伐利亚/7/95相似;乙型流感病毒分离株的抗原性与类B/北京/184/93相近.     

2002～2003年流感流行季节使用流感疫苗成分的建议

20 0 1年 10月至 2 0 0 2年 2月 ,全球分离到的甲型流感病毒主要为甲型流感 (H3N2 )病毒 ,与乙型流感病毒共同传播。在一些国家也分离到甲型流感 (H1N1)和甲型流感 (H1N2 )病毒。对流感病毒分离株的抗原性分析表明 ,甲型流感 (H3N2 )病毒分离株的抗原性与 A/莫斯科 /10 /99/和 A/巴拿马 /2 0 0 7/99参考病毒密切相关 ;甲型流感 (H1N1)病毒和甲型流感 (H1N2 )病毒分离株的抗原性与 A/新喀里多尼亚 /2 0 /99密切相关 ;乙型流感病毒分离株的抗原性与 B/四川 /379/99和 B/香港 /330 /2 0 0 1参考病毒密切相关。     

热毒宁对流感病毒FM_1的抑制作用

目的:研究中草药热毒宁注射液对流感病毒FM_1的抑制作用。方法:以利巴韦林为阳性对照药,采用细胞培养技术及四氮唑蓝(MTT)比色法,观察在热毒宁干预下,受FM_1感染的犬肾传代细胞(MDCK细胞)的病变效应(CPE)及光密度值(D),计算各组细胞的病毒抑制率。比较不同药物剂量及3种不同给药方式(预防给药、直接灭活及治疗给药)下热毒宁对流感病毒FM_1的抑制作用。结果:热毒宁注射液半数中毒浓度(TC_(50))为10.11g·L~(-1)。预防给药、直接灭活及治疗给药方式下,CPE法测得其抗流感病毒FM_1的半数有效浓度(EC_(50))分别为0.625、0.725、0.629 g·L~(-1),治疗指数(TI)分别为16.17、13.94、16.07;MTT比色法测得其抗流感病毒FM_1的EC_(50)分别为1.135、0.770、0.661 g·L~(-1),TI分别为8.91、13.12和15.29。3种方式给药,MTT法测定时,热毒宁对流感病毒FM_1的抑制作用无差异;CPE法测定时,热毒宁浓度在0.812 51 g·L~(-1)及以上对流感病毒FM_1的抑制作用无差异。结论:热毒宁对流感病毒FM_1有直接灭活及抑制增殖作用,对其感染靶细胞有阻断作用,且呈明显量效关系。     

抗柯胶囊总皂苷对柯萨奇病毒B型诱导细胞凋亡的抑制作用

目的 观察抗柯胶囊总皂苷抑制柯萨奇病毒B型(CVB)诱导细胞凋亡的作用,探讨其可能的机制。方法 通过接种病毒液的方式建立体外细胞感染模型,采用细胞病变效应法(CPE)测定抗柯胶囊总皂苷对CVB₃、CVB₄、CVB₅株50%抑制浓度(IC₅₀)及治疗指数(TI);CCK-8试剂盒检测细胞存活情况;TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL法)测定心肌细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测大鼠原代心肌细胞中Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果 抗柯胶囊总皂苷可明显抑制CVB₃、CVB₄、CVB₅致细胞病变,对CVB3、CVB4、CVB5的IC50分别为223.34、315.48、306.53μg·mL^-1,治疗指数分别为4.68、3.24、3.24;390.63、195.32、97.66μg·mL^-1剂量组可明显提高3种病毒感染后心肌细胞的存活率,抑制心肌细胞凋亡。抗柯...     

流感病毒血凝素共价抑制剂的设计、合成及活性研究（英文）

近年来流感频发,针对传统靶点抗流感药物(如扎那米韦和奥司他韦)的耐药病毒大量出现,迫切需求开发新靶点、新作用机制的抗流感药物。本研究针对流感病毒血凝素(HA)底物结合位点附近的赖氨酸(Lys133和Lys222),设计了系列具有共价结合潜力的唾液酸类化合物(1a–1h)。活性研究表明该系列化合物对两种流感病毒HA蛋白的结合力较母体化合物唾液酸(SA)有明显提升,其中化合物1d与阳性化合物2,6-唾液酸乳糖胺(2,6-SLN)持平(K_D=38.2和39.6μM);该系列化合物安全无毒(对MDCK细胞CC₅₀>1 m M),其中化合物1d可有效抑制流感病毒在MDCK细胞中的复制。本研究提出了基于流感病毒HA的共价抑制新策略,深入发掘有望获得新型强效HA抑制剂。     

2001～2002年流感流行季节使用流感疫苗成分的建议

2000年10月至2001年2月,全球分离到的甲型流感病毒主要为甲型流感(H1N1)病毒,而在一些国家则与乙型流感病毒一起传播.对流感病毒分离株的抗原性分析表明,甲型流感(H1N1)病毒分离株的抗原性与A/新喀里多尼亚/20/99密切相关;甲型流感(H3N2)病毒分离株的抗原性与A/莫斯科/10/99和A/巴拿马/2007/99密切相关;乙型流感病毒分离株的抗原性与B/四川/379/99和B/山东/7/97密切相关.     

穿心莲内酯磺化物体外抗流感病毒药效学研究

目的探讨穿心莲内酯磺化物（andrographolide sulfonated,ADS）体外对甲型流感病毒H1N1、H3N2以及乙型流感病毒（B）的抑制作用及最佳浓度。方法采用细胞病变观察法（CPE）、四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法,观察药物对狗肾传代细胞（MDCK）的毒性作用,计算半数有毒浓度（TC50）和最大无毒浓度（TC0）;3种流感病毒分别接种于MDCK,观察不同浓度的药物对病毒致CPE的影响,测定药物对病毒的增殖抑制率,Probit回归法计算药物的半数有效浓度（EC50）和治疗指数（TI）;红细胞血凝素滴定法测定ADS对流感病毒血凝素抑制作用。结果 CPE、MTT法测得ADS对MDCK的TC0≤0.781 3 mg.mL-1,TC50为2.280 8 mg.mL-1。ADS对H1N1、H3N2、B流感病毒的EC50分别为0.072 6、0.152 7、0.158 5 mg.mL-1,TI分别为31.42、14.93、14.39,此外ADS对不同流感病毒血凝素抑制作用,最低抑制浓度分别为0.048 9、0.097 8、0.097 8 mg.mL-1,且呈现出量效关系。结论 ADS体外抗H1N1、H3N2以及B型流感病毒感染作用,可能是通过药物抑制流感病毒表面的血凝素的活性而实现的。     

2003～2004年流感流行季节使用流感疫苗成分的建议

2002年9月至2003年2月,全球分离到甲型流感(H1N1)、甲型流感(H1N2)、甲型流感(H3N2)和乙型流感病毒.流感疫情为轻度至中度.对流感病毒分离株的抗原性分析表明,甲型流感(H1N1)和甲型流感(H1N2)病毒的抗原性与A/新喀里多尼亚/20/99密切相关;甲型流感(H3N2)病毒的抗原性与A/莫斯科/10/99和A/巴拿马/2007/99参考病毒密切相关;乙型流感病毒的抗原性与B/香港/330/2001和B/布里斯班/32/2002密切相关.     

2004～2005年流感流行季节使用流感疫苗成分的建议

2003年9月至2004年2月,全球分离到甲型流感(H1N1)、甲型流感(H1N2)、甲型流感(H3N2)和乙型流感病毒.也分离到甲型流感(H5N1)和甲型流感(H9N2).流感疫情北美和西欧比过去3年开始较早和较严重,东欧和亚洲开始略晚,疫情一般为中度.对流感病毒分离株的抗原性分析表明,甲型流感(H1N1)和甲型流感(H1N2)病毒的抗原性与A/新喀里多尼亚/20/99/密切相关;甲型流感(H3N2)病毒的抗原性与A/福建/411/2002病毒密切相关;乙型流感病毒的抗原性与原型疫苗株、B/香港/330/2001(B/维多利亚/2/87谱系)密切相关.     

清热祛湿法抗流感病毒的实验研究

目的 观察清热祛湿法对流感病毒所致小鼠病毒性肺炎的作用,通过探讨清热祛湿药物的抗流感病毒免疫调节机制,为指导临床辨证治疗流感提供实验依据.方法 （1）观察清热祛湿法体外抗病毒作用及对小鼠流感病毒性肺炎的影响.（2） 用FM1株甲1型流感病毒感染小鼠.制作病毒性肺炎模型,将小鼠随机分为正常组、模型组、蒿芩清胆汤组、病毒唑对照组,分别用单标法流式细胞仪及ELISA法测定四组小鼠外周血T淋巴细胞哑群（（CD3/CD4、CD8）百分比及比值及血清IL-4、IL-18、IFN-γ的含量.结果 清热祛湿法在体外对流感病毒FM1株无明显的抑制作用,但对小鼠流感病毒性肺炎均有抑制作用,与模型对照组比较,差异有显著性意义（P〈0.05）,与病毒唑组比较,差异无显著性意义（P〉005）蒿芩清胆汤对小鼠感染流感病毒FM1后血中的CD3＋CD4＋百分比和CD3＋CD4＋/CD3＋CD8＋比值下降有一定的抑制作用并且能够降低模型小鼠血清TIL-18及IFN-r的值.结论 清热祛湿药物对流感病毒具有抑制作用,但不是直接杀死流感病毒,而是一方面通过调整T细胞亚群的百分率或CD4＋CD4＋/CD4＋CD8＋比值,另一方面通过降低IFN-r、IL-18表达水平,对流感病毒感染引起的细胞免疫功能降低有一定的抑制作用,从而减少异常的细胞免疫反应,调节和加强体液免疫功能,有利于损伤组织的修复.     

2000～2001年流感流行季节使用流感疫苗成分的建议

1999年 10月至 2 0 0 0年 2月 ,大多数国家以甲型流感 ( H3N2 )病毒为主。对流感病毒分离株的抗原性分析表明 ,甲型流感 ( H3N2 )病毒分离株的抗原性与 A/莫斯科 / 10 / 99和 A/巴拿马 /2 0 0 7/ 99密切相关 ;甲型流感 ( H1N1)病毒分离株的抗原性与 A/新喀里多尼亚 / 2 0 / 99或 A/巴伐利亚 / 7/ 95相关 ;乙型流感病毒分离株的抗原性与 B/北京 / 184 / 93和广泛使用的疫苗株 B/山梨 / 166/98相关     

1999～2000年流感流行季节使用流感疫苗成分的建议

1998年10月至1999年2月,全球分离到的甲型流感病毒主要为甲型流感（H3N2）病毒,而欧洲则以乙型流感为主。对流感病毒分离株的抗原性分析表明,甲型流感（H3N2）病毒分离株的抗原性与A/悉尼/5/97/密切相关;甲型流感（H1N1）病毒分离株的抗原性与A/北京/262/95或A/巴伐利亚/7/95相关;乙型流感病毒分离株的抗原性与B/北京/184/93或B/山东/7/97相关。     

2005～2006年流感流行季节使用流感疫苗成分的建议

2004年10月至2005年1月,全球分离到甲型流感(H1N1)、甲型流感(H1)、甲型流感(H1N2)、甲型流感(H3N2)、甲型流感(H5N1)和乙型流感病毒.全球流感疫情比去年同期轻,北美洲在10月开始有疫情,北半球国家的疫情逐渐加剧.对流感病毒分离株的抗原性分析表明,甲型流感(H1)病毒的抗原性与A/新喀里多尼亚/20/99密切相关;甲型流感(H3N2)病毒的抗原性与A/福建/411/2002病毒和A/怀俄明/3/2003参考病毒密切相关,但越来越多的新近分离株与A/怀俄明/3/2003和A/惠灵顿/1/2004有区别,而与A/加利福尼亚/7/2004较密切相关;乙型流感病毒的抗原性与原型疫苗株B/上海/361/2002(B/山形/16/88谱系)密切相关;其余与B/香港/330/2001(B/维多利亚/2/87谱系)相关.     

鼠尾草酸对甲型流感病毒的体外抑制作用研究

鼠尾草酸(carnosic acid, CA)是迷迭香与鼠尾草等植物中主要的酚二萜类活性成分,具有抗氧化、抗炎等作用,但目前未见CA抗流感病毒的相关报道。本研究通过病毒滴度测定方法评价了迷迭香中主要活性成分迷迭香酸、CA和熊果酸的抗流感病毒活性,发现CA在A549细胞中显著抑制流感病毒H5N1增殖,进一步通过间接免疫荧光、Western blot和实时荧光定量PCR等方法对CA的体外抗流感病毒作用进行了系统评价并初步探讨其作用机制。结果表明, CA在A549和MDCK细胞中可显著抑制流感病毒H5N1复制,半数有效浓度(EC₅₀)分别为4.30和3.64μmol·L^-1。同时, CA也抑制流感病毒2009panH1N1(EC₅₀:10.1μmol·L^-1)和H3N2(EC₅₀:12.8μmol·L^-1)在A549细胞中的复制。机制研究发现, CA对H5N1复制的抑制作用与其诱导A549细胞血红素加氧酶-1(HO-1)的表达并减少H5N1感染细胞中活性氧的水平...     

1992～1993年流感流行季节使用流感疫苗成份的建议

1991年10月～1992年2月流感疫情1990～1991年流感流行季节,以乙型流感病毒为主。在一些国家,检出甲型流感病毒H3N2和H1N1亚型,美洲和大洋洲,甲型流感(H3N2)较多,欧洲则以甲型流感(H1N1)为主。1991～1992年流感流行季节,甲型流感病毒H3N2和H1N1亚型以及乙型流感病毒继续传播。在北美和欧洲部分地区,甲型流感(H3N2)病毒是流感的主要病因,并引起流行。虽然在日本和美国东部有甲型流感(H1-N1)爆发,但在欧洲,该病毒主要与散在病例有关。乙型流感病毒报道较少。甲型流感(H3N2) 1991年10月中旬,美国首次分离到甲