白细胞介素4和白细胞介素13与M2型肺泡巨噬细胞在肺纤维化中的作用研究进展

2型辅助性T细胞(Th2)是CD4+T细胞经抗原刺激后分化的细胞群,其分泌的白细胞介素4(IL-4)/IL-13作用于巨噬细胞,使其经"替代激活"活化为M2型巨噬细胞,从而发挥特定作用;肺组织在受到抗原持续刺激后,存在于肺泡及间充质中的巨噬细胞在经Th2细胞分泌的IL-4和IL-13激活形成M2型肺泡巨噬细胞,从而参与肺纤维化(PF)的进程,可见M2肺泡巨噬细胞在PF中起着重要的作用。本综述以PF为背景,探讨Th2型细胞因子IL-4和IL-13在PF中的作用,M2型肺泡巨噬细胞的抗炎和促纤维化作用,IL-4和IL-13受体在治疗PF中的作用,IL-4和IL-13激活的M2型肺泡巨噬细胞对PF的双重作用,为抗PF药物研究提供思路。     

MSCs 通过调控巨噬细胞极化维持 TBI 后免疫稳态的研究进展

摘要： 间充质干细胞 （MSCs） 是当前细胞治疗的研究热点, 其不仅具有多向分化潜能, 还能够调节颅脑创伤 （TBI）后组织损伤引发的炎症反应。继发于单纯机械损伤的神经炎症是引起神经细胞坏死和凋亡的重要因素, 即使在颅内压恢复正常后, 炎症反应仍持续造成神经细胞坏死。创伤后的炎症环境严重影响 TBI 患者的长期预后及行为功能恢复。MSCs 通过释放可溶性细胞因子, 如前列腺素 E2 （PGE2）、 肿瘤坏死因子刺激基因 6 蛋白 （TSG-6）、 白细胞介素 （IL） -1 和转化生长因子 （TGF） -β 等, 调节巨噬细胞/小胶质细胞的极化特性, 使其向抗炎型 M2 细胞极化, 减少促炎因子释放, 限制其对下游效应细胞的激活, 维持颅内免疫环境稳定。同时, MSCs 在一定条件下促进巨噬细胞/小胶质细胞向 M1 细胞极化, 激活组织修复和再生。巨噬细胞/小胶质细胞形成的免疫微环境也影响 MSCs 的存活和功能发挥, 两者相互影响, 为临床治疗TBI 继发炎症反应提供了新的思路。     

芍药苷通过JAK2/STAT3信号通路抑制高糖诱导的RAW264.7巨噬细胞激活

目的探讨芍药苷(paeoniflorin,PF)抑制高糖(high glucose,HG)诱导的RAW264.7巨噬细胞激活是否通过JAK2/STAT3信号通路。方法体外HG激活巨噬细胞RAW264.7, PF及JAK2/STAT3干扰RNA(siRNA)进行干预,分别检测巨噬细胞的增殖、趋化、炎症因子表达分泌、JAK2和STAT3蛋白表达及其磷酸化水平。结果在HG刺激下,巨噬细胞趋化功能增强,诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)及单核细胞趋化因子1(MCP-1)的mRNA表达,以及细胞培养基中TNF-α、IL-1β、MCP-1分泌水平均增加(P<0.05,P<0.01),JAK2、STAT3蛋白磷酸化表达明显增加(P<0.05)。JAK2/STAT3基因沉默可抑制HG刺激下iNOS和炎症因子(TNF-α、IL-1β、MCP-1)mRNA水平和细胞培养液中炎症因子的分泌,抑制JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平(P<0.05,P<0.01)。PF能明显下调HG诱导的巨噬细胞趋化迁徙、炎症因子表达分泌及JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平(P<0.01)。结论 HG可通过诱导JAK2/STAT3信号通路刺激巨噬细胞激活,PF抑制巨噬细胞激活的机制主要与抑制JAK2/STAT3信号通路相关。     

巨噬细胞极化在动脉粥样硬化中的作用和药物靶标

动脉粥样硬化(atherosclerosis)是一个复杂的代谢性心血管疾病,在动脉内膜局部脂质入侵积聚、泡沫细胞增多、炎性病变加剧、粥样斑块坏死和崩解、溃疡出血和血栓形成、纤维组织增生和钙化等炎症现象为基本特征的病理变化。而在此过程中,巨噬细胞和T淋巴细胞起到重要作用。巨噬细胞不同亚型极化及其作用是近年来动脉粥样硬化病理研究的热点,巨噬细胞主要分为经典活化的巨噬细胞M1和替代性活化的巨噬细胞M2两个亚型。因此,该文将对动脉粥样硬化中巨噬细胞M1和M2型极化作用意义、调控途径和药物靶标的研究状况进行综述,为新的创新药物开发和疾病治疗提供新的思考方向。     

代谢重编程调控巨噬细胞极化及其在类风湿关节炎中的作用

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一类以滑膜炎症和软骨破坏为特征的自身免疫性疾病。巨噬细胞极化失衡与RA的发生和发展密切相关,其中M1型巨噬细胞在RA细胞因子网络环境中发挥了促进炎症和骨破坏的中心作用。RA患者异常的免疫微环境促进巨噬细胞发生代谢重编程,进而影响巨噬细胞极化状态,破坏M1/M2动态平衡,导致组织炎症迁延不愈。采用药物干预M1型巨噬细胞极化或诱导M2型巨噬细胞极化治疗RA,有望成为药物研发的理想策略。基于此,本文对RA微环境下巨噬细胞的代谢重编程对其极化类型的影响以及相关信号通路进行综述,为研发以巨噬细胞代谢为靶点的RA治疗药物提供参考。     

MCP-1、VEGF与动脉粥样硬化的关系

动脉粥样硬化(arteriosclerosis AS)是慢性炎症性疾病,主要由于血管内皮损伤、继发炎症、免疫功能障碍三者相互作用形成。血管壁慢性炎症是AS的特征,动脉硬化灶中炎性细胞主要为单核/巨噬细胞。已知单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chermtach protein-1 MCP-1)是单核/巨噬细胞特异的趋化性因子,其主要功能是趋化和激活单核/巨噬细胞至炎症部位,参与炎症反应、调节免疫,并促进动脉粥样硬化的形成;血管内皮生长因子(Endogenous vascular endothelial growth factor VEGF)是特异血管内皮细胞促有丝分裂原,在血管内皮生成细胞增殖有关的病理过程中占首要地位,最近报道它在AS中起重要作用。     

PPARγ在自身免疫性疾病中的研究进展

自身免疫性疾病(autoimmune diseases, AID)是由于自身免疫系统攻击自身组织产生的疾病。研究表明,自身免疫耐受的失衡及长期炎症反应无疑是AID发生的核心事件。过氧化物酶体增殖物激活受体γ (peroxisome proliferator-activated receptor γ, PPARγ)属于核激素受体超家族,是配体激活转录因子。PPARγ与维甲酸X受体(retinoid X receptor, RXR)结合形成异源二聚体;当PPAR被激活后,该复合体通过与位于每个基因调控位点的特定的过氧化物酶体增殖物反应元件(PPAR response element, PPRE)结合,进而发挥调控基因表达的作用。PPARγ具有多种生物学功能,在调节新陈代谢、控制炎症、调节糖脂代谢、改善动脉粥样硬化、抑制肿瘤和调节免疫过程中发挥重要作用。近几年研究表明, PPARγ参与多种AID的发病机制,其可能涉及调节巨噬细胞的激活和极化,调控树突状细胞功能,介导T细胞的增殖和分化及调节相关基质细胞的功能。本文就PPARγ的生物学功能、信号转导途径和激动剂对AID的保护作用及相关机制进行总...     

巨噬细胞集落刺激因子受体激酶及其抑制剂的研究进展

巨噬细胞集落刺激因子受体（c-Fms）是原癌基因c-fms的编码产物,属于Ⅲ型受体酪氨酸激酶家族成员。巨噬细胞集落刺激因子与c-Fms结合,激活其酪氨酸激酶,在单核巨噬细胞系的存活、增殖、分化以及胚胎发育过程中发挥着重要的作用。c-Fms及其配体的过度表达,引起该受体介导的细胞信号通路异常激活,参与了肿瘤形成和炎症发生过程。因此,靶向c-Fms激酶的抑制剂能抑制受体的磷酸化,阻断受体介导的细胞信号通路,是治疗肿瘤、关节炎等疾病的潜在药物。     

巨噬细胞与代谢综合征

巨噬细胞,包括中性粒细胞和树突状细胞,因为其特有的吞噬能力被认为是体内主要的固有免疫效应细胞。近年研究表明巨噬细胞在维持机体代谢平衡的过程中也起着重要作用,它们广泛存在于各种组织,对代谢信号做出应答、产生抗炎因子及其前体因子,从而对代谢过程进行调节。这些充分表明,由于营养过剩引起的代谢应激会使巨噬细胞和免疫系统调节失衡,并且恶性循环,最终导致炎症不可控制,产生代谢紊乱,比如胰岛素抵抗、脂肪肝、动脉粥样硬化与高脂血症等。     

二甲双胍增强LPS激活的腹腔巨噬细胞在ATP刺激下的炎症小体活化

目的以脂多糖(LPS)激活的腹腔巨噬细胞为炎症细胞模型,探讨糖尿病常用药物二甲双胍对胞外ATP诱导炎症小体活化并释放白细胞介素-1β(IL~(-1)β)的影响。方法C57BL/6小鼠腹腔注射30 g·L~(-1)巯基乙酸盐(thioglycollate,TG)诱导腹腔巨噬细胞大量产生;利用LPS+ATP处理激活炎症小体,采用碘化丙锭(PI)染色法检测二甲双胍对LPS+ATP诱导的腹腔巨噬细胞焦亡的影响,免疫印迹法检测该细胞胞内及上清中IL~(-1)β和caspase-1的表达水平;免疫荧光技术检测巨噬细胞P_2X_7嘌呤能ATP受体7(P_2X_7R)的亚细胞分布及荧光强度。结果单独二甲双胍不会导致LPS激活细胞发生焦亡,但二甲双胍呈剂量依赖性促进LPS+ATP诱导的细胞焦亡;免疫印迹法显示,在蛋白水平上,单独LPS(或LPS+二甲双胍)刺激不能诱导细胞释放成熟IL~(-1)β(17 ku)到细胞外;当加入ATP刺激后,成熟IL~(-1)β和活化caspase-1(10 ku)释放到胞外;而二甲双胍可以剂量依赖性地促进LPS激活、ATP刺激下腹腔巨噬细胞释放成熟IL~(-1)β和活化caspase-1的水平。结论二甲双胍增强LPS激活的腹腔巨噬细胞在ATP刺激下的炎症小体活化,提高caspase-1活化和成熟IL~(-1)β释放,促进炎症反应。     

α-苦瓜素对巨噬细胞炎性细胞因子风暴的选择性抑制作用北大核心CSCD

目的α-苦瓜素(α-momorcharin,α-MMC)能受体依赖性靶向作用于单核细胞,调节其细胞因子表达而发挥免疫调节作用,但对巨噬细胞是否具有选择性调节作用尚不清楚。本实验通过细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的M1型炎性巨噬细胞模型,观察α-MMC对其炎性细胞因子风暴的抑制作用,并探讨其可能的靶向作用机制。方法Western blot法检测WIL2-S B淋巴细胞、H9 T淋巴细胞、THP-1单核细胞和M0巨噬细胞LRP1受体蛋白表达;CCK-8法检测4种细胞的生存率;ELISA检测M1巨噬细胞炎性细胞因子的表达水平;Western blot法检测M1巨噬细胞TLR4信号通路相关蛋白的表达。结果巨噬细胞具有与单核细胞一致的高密度LRP1受体;α-MMC在4个细胞上的存活率与该受体的密度呈正相关;α-MMC以剂量和时间依赖性抑制M1巨噬细胞的炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、MIP-1α和MCP-1表达;α-MMC对TLR4信号通路的TAK1/p-TAK1、p-JNK、p-AP1和p-p65信号蛋白有明显的抑制作用,这种抑制作用能被LRP1受体阻断剂阻断。结论α-MMC通过LRP1受体介导,抑制TLR4信号通路的TAK1,进而抑制下游NF-κB和MAPK通路,从而选择性抑制巨噬细胞炎性细胞因子表达。α-MMC对巨噬细胞的选择性免疫抑制作用可能使其成为治疗急性感染巨噬细胞激活综合征(macrophage activation syndrome,MAS)的非常有前途的药物。     

外源性过氧化氢对大鼠肺泡巨噬细胞丙二醛生成的影响

近年来,氧化损伤日益引起人们的注意,越来越多的实验表明:炎症、衰老、肿瘤发生等过程均与氧化损伤有关。肺泡巨噬细胞(AM)是机体的重要免疫活性细胞之一,它在清除异物,消灭微生物以及肿瘤免疫中起着重要的作用。由于     

IL-6在巨噬细胞向M2型极化过程中的诱导作用

目的 将小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞和骨髓瘤细胞系KM3细胞共培养,探讨IL-6在巨噬细胞向M2型极化的过程的作用.方法 取对数生长期细胞,分为3组:A组(KM3细胞组),B组(RAW264.7细胞组),C组(RAW264.7细胞+KM3细胞组).分别予以ACTA(IL-6特异性抑制剂激活素A)或rIL-6(重组人IL-6)处理后,检测肿瘤相关M2型巨噬细胞表达标志F4/80+ CD206+的比例.RT-PCR和Westernblot方法检测各组细胞因子CCL22、IL-10、IL-12、TNF-αmRNA和蛋白表达量.ELISA法检测各组细胞培养上清中IL-6的含量.结果 RAW264.7和KM3细胞共培养24 h后,与对照组相比,M2 型巨噬细胞比例显著增加(P<0.05);予以ACTA处理后M2型巨噬细胞表达明显下降(P<0.05);而予以rIL-6处理后M2型巨噬细胞表达明显上调(P<0.05).与B组(RAW264.7细胞组)相比,C组(RAW264.7细胞+KM3细胞)M2型巨噬细胞相关细胞因子CCL22,IL-10的mRNA和蛋白表达水平明显上调(P<0.05),而M1型巨噬细胞相关因子IL-12,TNF-α的mRNA和蛋白表达水平明显下调(P<0.05).与A组、B组相比,C组细胞上清液中IL-6含量在24 h、48 h、72 h时间点均明显上调(P<0.05).通过浓度梯度改变RAW264.7细胞或KM3细胞的数量,发现RAW264.7细胞数量的改变显著影响了IL-6的表达水平.结论 将RAW264.7细胞和KM3细胞共培养后,后者能诱导RAW264.7细胞向肿瘤相关M2型巨噬细胞转化, IL-6在上述转化过程中发挥重要作用.     

免疫学参数HLA与腹腔子宫内膜异位症病因学关系

目的:将子宫内膜异位症女性的腹水(PF)巨噬细胞和患有其他妇科疾病的女性的PF巨噬细胞表面抗原的表达进行比较,通过这一方法来研究宿主免疫应答对子宫内膜异位症病因学的影响.方法:对象为患有子宫内膜异位症的女性和患有其他妇科疾病的女性并且均需要通过手术治疗.在术中收集PF制成PFMC后,用流式细胞仪进行分析.结果:实验组中巨噬细胞表达的人类白细胞抗原(HIA)—ABC和-DR的表达明显降低,这提示我们子宫内膜异位症患者腹腔内腹水中的巨噬细胞免疫活性减弱.结论:本实验可以推断PF巨噬细胞免疫功能的紊乱可能为子宫内膜异位症发生的危险因素.     

减毒沙门氏菌VNP20009的抗肿瘤机制研究

减毒沙门氏菌VNP20009是一种应用范围较广的天然来源溶瘤细菌,基于其已证实的临床安全性、可特异性趋化靶向肿瘤和明确已知的基因组序列等优点而被广泛用于抗肿瘤研究。本研究建立黑色素瘤小鼠模型(所有动物实验均遵循中国药科大学动物伦理委员会的规定),通过腹腔注射VNP20009对其抗肿瘤活性进行验证,与对照组相比,VNP20009治疗可显著抑制肿瘤生长;体外共培养实验证明VNP20009能够诱导巨噬细胞向M1表型极化并表达相关炎症因子;通过流式细胞实验分析肿瘤和肿瘤引流淋巴结(tumor-draining lymph node,TDLN)内免疫变化,证明VNP20009治疗诱导肿瘤组织免疫细胞增加,进一步分析发现肿瘤引流淋巴结内T细胞浸润增加,而VNP20009治疗能够诱导肿瘤内部的CD4⁺T和CD8⁺T细胞活化。本研究结果证明,VNP20009可通过诱导巨噬细胞向M1表型极化,招募并激活细胞毒性T细胞,协同其自身组分,共同抑制小鼠体内黑色素瘤的生长。     

炎症小体与中枢神经系统疾病

炎症小体是一蛋白复合物,能够识别不同刺激信号,活化后能诱导免疫和炎症应答。NLRP3炎症小体是中枢神经系统中研究最广泛的炎症小体。小胶质细胞、血管周围的巨噬细胞和脑膜巨噬细胞均能表达炎症小体,而炎症小体与急性脑部感染、急性无菌性脑损伤、帕金森病和阿尔茨海默病等的发生发展有密切关系。基于炎症小体与中枢神经系统疾病相关的机制探索和靶向药物开发是目前的研究热点。     

巨噬细胞移动抑制因子及其与危重症相关性的研究进展

<正>巨噬细胞移动抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)系由T细胞产生的在体外能抑制巨噬细胞移动,并能在迟发型变态反应中促进巨噬细胞聚集的一种多功能细胞因子。近年来,在免疫和炎症反应过程中发现MIF作为一种关键性介质,作用广泛,特别是在全身性炎症反应综合征(Systemic inflammatory response syndrome,SIRS)中起到某种关键作用,MIF并在多种危重病中表达明显升高,可促进多种危重疾病的发生、发展。现将MIF与部分危重病的相关性研究综述如下。     

贝伐单抗激活M2巨噬细胞促进肿瘤转移

目的：研究贝伐单抗与肿瘤微环境中的巨噬细胞间相互关系,初步探讨临床贝伐单抗治疗肝癌无效的机制。方法采用免疫组化检测肝癌微环境中巨噬细胞表型。巨噬细胞与肿瘤细胞共培养体系中加入贝伐单抗,采用酶联免疫吸附测定（ELISA）方法检测培养体系中炎症因子及血管生长因子的分泌。采用划痕实验检测共培养体系上清对肿瘤细胞迁移的影响。结果临床标本检测肿瘤微环境中的巨噬细胞为 M2型,贝伐单抗显著增加 M2型巨噬细胞与肿瘤细胞共培养体系中炎症因子转化生长因子-β（TGF-β）、白细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素-12（IL-10）及血管内皮生长因子（VEGF）的水平,肿瘤细胞迁移显著增加。结论贝伐单抗激活 M2型巨噬细胞,促进炎症因子及血管生长因子分泌,促进肿瘤细胞迁移。     

自噬调节策略在炎症性肠病临床前研究中的进展

炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)是一种难治性肠道炎症性疾病,包括溃疡性结肠炎和克罗恩病,具有进行性且不可预测的病程特点。肠道炎症和免疫反应异常与IBD发病机制密切相关。自噬是细胞中重要的分解代谢过程,已被证明与包括IBD在内的多种炎症性疾病存在联系。本文从自噬功能障碍与IBD的关系出发,重点阐述了炎症小体抑制剂、肠道微生物群调节剂及其他信号调节剂等作用于肠上皮细胞和巨噬细胞的自噬调节剂在IBD中的研究进展。     

卵巢癌SKOV3细胞系培养上清液处理巨噬细胞不同时间后对巨噬细胞分化的影响

目的 探讨卵巢癌SKOV3细胞系培养上清液处理巨噬细胞不同时间后,巨噬细胞分化亚型的改变.方法 Ficoll密度梯度法分离健康成人外周血单个核细胞,GM-CSF诱导为巨噬细胞(M0)后,用对数生长期的SKOV3细胞培养上清液处理为实验组,用1640培养基处理为对照组,分别于培养第7天和第14天光学显微镜下观察巨噬细胞形态变化;流式细胞术检测实验组和对照组在不同时间后巨噬细胞表面细胞因子(CD64、CD163)表达情况.结果 培养第7天时,实验组巨噬细胞形态改变明显,细胞突起增加,细胞变细长,对照组细胞形态无明显变化,实验组CD64-M1型巨噬细胞所占比例高于对照组,CD163-M2型巨噬细胞所占比例低于对照组(P＜0.05);培养第14天时,实验组巨噬细胞形态逐渐恢复,对照组细胞形态仍无明显变化,实验组CD64-M1型巨噬细胞所占比例低于对照组,CD163-M2型巨噬细胞所占比例高于对照组(P＜0.05).实验组CD64-M1型巨噬细胞在第7天时M1/M0水平高于第14天,CD163-M2型巨噬细胞在第7天时M2/M0低于在第14天,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 SKOV3细胞培养上清液可改变巨噬细胞形态,激活巨噬细胞免疫反应,随着时间的推移,细胞形态恢复,发生免疫抑制;同时,也可促进巨噬细胞分化,随着时间的推移,亚型也有不同,主要由CD64-M1型巨噬细胞向CD163-M2型巨噬细胞转变.